CC BY
0Актуальность
Опухоль-инфильтрирующие лимфоциты (ОИЛ) — важный компонент микроокружения опухоли. Их состав, локализация, активационный фенотип и функциональная активность используются как прогностический фактор прогрессии заболевания и во многом определяют успешность иммунотерапии [1]. Поиск способов модуляции опухолевого микроокружения, конверсии иммунологически холодных опухолей в горячие остается актуальной проблемой клинической онкологии. Секреторный циклофилин А (ЦфА) является провос-палительным фактором и хемоаттрактантом для эффекторов врожденного и адаптивного иммунитета [2, 3]. Мы показали, что рекомбинантный ЦфА человека (рчЦфА) подавляет рост опухоли на ранних этапах в том числе посредством изменения ее микроокружения [4].
Цель
Изучить влияние рчЦфА на состав ОИЛ в модели меланомы В16 мыши. Материалы и методы
Меланому В16 (3х10(5) кл/мышь) прививали подкожно (п/к) мышам C57BL/6. РчЦфА (100 мкг на 1 мышь) вводили п/к 5 дней. На 14-й день после прививки выделяли ОИЛ из гомогената первичной опухоли на градиенте фиколла с последующим анализом методом проточной цитометрии.
Результаты
Кусовое введение рчЦфА индуцировало накопление Т-клеток в первичной меланоме В16: их доля в составе ОИЛ увеличилась в 2,5 раза (р&к;0,01) по сравнению с контрольными образцами. Под действием рчЦфА возросла доля CD4+ Т-клеток в составе ОИЛ в 1,7 раза (р&И;0,05) по сравнению с контролем, при этом отмечено снижение в 2 раза (р&к;0,01) относительного количества CD4+PD-L1+ Т-клеток. Введение рчЦфА также стимулировало накопление NK-клеток в опухоли, доля которых в образцах опытной группы в 1,6 раза (p&1t;0,05) превышала контроль.
Выводы
РчЦфА стимулирует инфильтрацию меланомы В16 важными эффекторами противоопухолевого иммунитета — NK-клетками и CD4+ Т-лимфоцитами. CD4+ Т-клетки наряду с NK-клетками проявляют прямую цитотоксичность в отношении клеток меланомы В16, а также секретируют цитокины ИФНу и ФНОа, создавая провоспалительное микроокружение, неблагоприятное для роста опухоли [5, 6]. CD4+ Т-клетки также опосредуют развитие цитоток-сического (CD8+) и антительного противоопухолевого ответа [6]. Снижение доли CD4+ клеток, несущих молекулу PD-1, в составе ОИЛ позволяет предположить, что рчЦфА индуцирует накопление Т-лимфоцитов с меньшей чувствительностью к супрессорному микроокружению опухоли и, следовательно, способных дольше сохранять свою функциональную активность. Работа выполнена при поддержке РНФ (грант № 22-75-00004).
Список литературы
1. Webb E . S . et al . Immune checkpoint inhibitors in cancer therapy // J Biomed Res . 2018, 32(5): 317-326 .
2 . Xu Q . et al . Leukocyte chemotactic activity of cyclophilin // J Biol . Chem . 1992, 267(17): 11968-11971.
3 . Dawar F. U . et al . Potential role of cyclophilin A in regulating cytokine secretion // J . Leukoc Biol . 2017, 102 (4): 989-992 .
4 . A . Kalinina et al . Cyclophilin A is a factor of antitumor defense in the early stages of tumor development // International
Immunopharmacology, 2021, 94:107470.
5 . Ben-Shmuel A . et al . Unleashing Natural Killer Cells in the Tumor Microenvironment-The Next Generation of Immunotherapy?
Front Immunol . 2020; 11:275 .
6 . Tay R . E . et al . Revisiting the role of CD4+ T cells in cancer immunotherapy — new insights into old paradigms . Cancer Gene
The r 28, 5-17 (2021) .
Сильные иммунные привилегии индивидуальных мезенхимных стволовых клеток и других прогениторных Nestin-GFP+ клеток в окружении костного мозга, не демонстрирующем общую иммунную привилегированность
Авторы:
(1) Карпенко Дмитрий Владимирович, D_@list.ru, ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Москва
(2) Капранов Николай Михайлович, kapranov.n@blood.ru, ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Москва
(3) Богданов Алексей Михайлович, noobissat@gmail.com, ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва
(4) Лазуткин Александр Алексеевич, lazutkin.a.a@gmail.com, ФГБУН Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, Москва
(5) Бигильдеев Алексей Евгеньевич, bigildeev.ae@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Москва
Ключевые слова
нестин, мезенхимные стволовые клетки, иммунные привилегии, стволовые клетки, Nestin-GFP, эктопический очаг кроветворения
Актуальность
Иммунные привилегии (ИП) — это способность клеток и тканей организма систематически уклоняться от иммунного надзора при различных обстоятельствах. ИП и, в частности, ИП раковых стволовых клеток представляют собой серьезную проблему в терапии рака. Во множестве работ, посвященных исследованию подходов преодоления различных механизмов ИП при онкологии, подчеркивается актуальность данного вопроса. Имеются также работы, демонстрирующие ИП различной силы для непатологических стволовых клеток.
Цель
Исследовать силу иммунных привилегий мезенхимных стволовых клеток (МСК) и других прогениторных Nestin-GFP+ клеток костного мозга (КМ).
Материалы и методы
Мы использовали ранее разработанную нами модель на базе очагов эктопического кроветворения 1. В модели КМ трансгенной Nestin-GFP мыши (n=8) трансплантировали под капсулу почки иммунизированного GFP нетрансгенного реципиента с полноценной иммунной системой. Через 6 нед изучали сформировавшиеся очаги на предмет наличия GFP+ клеток с помощью проточной цитофлуориметрии. Полученные первичные очаги ретрансплантировали неиммунизированным нетрансгенным реципиентам. МСК в использованной трансгенной линии мышей отличаются от своих потомков экспрессией GFP (под управляющими элементами гена нестина), как и широкий спектр стволовых клеток других тканей и органов.
Результаты
Эффективность иммунизации мышей-реципиентов GFP подтверждена с помощью ИФА. Показано формирование первичных и вторичных очагов эктопического кроветворения. В полученных очагах показано наличие GFP+ клеток. Доля GFP+СD45-клеток в первичных и вторичных очагах составила 0,8 х^1,8 х 10е(-5) и 0,8 х^ 1,9 х 10е(-5) соответственно. Доля GFP+CD45+ клеток в первичных и вторичных очагах составила 24,1 х^з,8 х 10е(-5) и 4,6 х^з,8 х 10е(-5) соответственно. Интересно отметить, что иммунные привилегии в данной модели были выявлены и для клеток с фенотипом, отличающимся от МСК.
Выводы
ИП МСК и других Nestin-GFP+ клеток-предшественников трансгенного КМ достаточно сильны, чтобы обеспечить защиту в условиях эксперимента в течение более 6 нед от нескомпрометированной иммунной системы иммунизированного GFP нетрансгенного реципиента. Результаты говорят в пользу сохранения функциональности МСК, демонстрируя способность формировать и поддерживать первичную и вторичную гемопоэтическую территорию после ретрансплантации. Мы предполагаем, что нестин может быть маркером для большего набора покоящихся стволовых клеток с сильными ИП, включая раковые стволовые клетки.
Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 22-25-00459, https://rscf.ru/ project/22-25-00459/
Использованная литература
1. Karpenko, D ., Kapranov, N . & Bigildeev, A . Nestin-GFP transgene labels immunoprivileged bone marrow mesenchymal stem cells in the model of ectopic foci formation . Front . cell Dev. Biol . 10, (2022) .
