CC BY
49JOURNAL OF MICROBIOLOGY, EPIDEMIOLOGY AND IMMUNOBIOLOGY. 2020; 97(2)
DOI: https://doi.org/10.36233/0372-9311-2020-97-2-119-124
ORIGINAL RESEARCHES
© Христова Д., Кандова Я., Николов Г., Петрунов Б., 2020
Ц) Check for updates (cc) ©
Сенсибилизация к аллергенам плесневых грибов у пациентов с респираторной аллергией. Оптимизация диагностического процесса
Христова Д., Кандова Я., Николов Г.и, Петрунов Б.
Национальный центр инфекционных и паразитарных болезней, 1504, София, Болгария
Актуальность. В Болгарии часто встречается аллергия на плесневые грибы, сенсибилизация к различным аллергенам грибов обнаруживается у многих пациентов с атопией.
Цель данного исследования — установить чувствительность к наиболее распространенным видам плесневых грибов в Болгарии и определить с помощью компонентной диагностики наличие сенсибилизации к Alt al — одному из главных аллергенов Alternaría alternata.
Материалы и методы. В обследование включен 21 пациент с респираторной аллергией в возрасте 540 лет. Сенсибилизация к микстам грибковых аллергенов, содержащих Alternaria alternata, Aspergillus sp., Cladosporium herbarum, Penicillium notatum, у всех пациентов доказана посредством диагностики in vivo и in vitro. Кроме того, все пациенты тестированы с помощью «ImmunoCAP» на наличие аллергенспеци-фических IgE к отдельным грибковым аллергенам: ml Penicillium notatum, m2 Cladosporium herbarum, m3 Aspergillus fumigatus и m6 Alternaria alternata. У 10 из обследованных пациентов с повышенным sIgE к m6 Alternaria alternata проведена компонентная диагностика с помощью Alt al.
Результаты. Все обследованные пациенты имели повышенный уровень sIgE к Alternaria alternata. Из них 10 (48%) пациентов проявили чувствительность только к Alternaria alternata. У 8 (38%) пациентов выявлена сенсибилизация к Penicillium notatum, у 11 (52%) — к Cladosporium herbarum и у 10 (48%) — к Aspergillus fumigatus; 9 (90%) пациентов с сенсибилизацией к Alternaria alternata имели повышенный уровень IgE к Alt a1.
Выводы. Alternaria alternata чаще других видов плесневых грибов вызывает сенсибилизацию у пациентов с респираторной аллергией в Болгарии. Компонентная аллергодиагностика с использованием Alt a1 — главного аллергена плесени — дает полное доказательство видоспецифической сенсибилизации к Alternaria alternata.
Ключевые слова: аллергия на плесневые грибы; аллергия на Alternaria alternata; компонентная диагностика с помощью Alt a1.
Источник финансирования. Авторы заявляют об отсутствии финансирования при проведении исследования.
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Для цитирования: Христова Д., Кандова Я., Николов Г., Петрунов Б. Сенсибилизация к аллергенам плесневых грибов у пациентов с респираторной аллергией. Оптимизация диагностического процесса. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2020; 97(2): 119-124. DOI: https://doi.org/10.36233/0372-9311-2020-97-2-119-124
Поступила 02.03.2020 Принята в печать 20.03.2020
Sensitization to Fungal Allergens in Patients with Respiratory Allergy — Accuracy in Diagnostic Process
Diana Hristova, Yana Kandova, Georgi NikolovH, Bogdan Petrunov
National Centre of Infectious and Parasitic Diseases, Sofia, 1504, Bulgaria
Introduction. In Bulgaria, mold allergies are common, and sensitization to different fungal species is found in many patients with atopy.
The objective of this study is to explore sensitization to the most widespread mold species in Bulgaria, and to determine the extent of sensitization to Alt a1, a major allergen of Alternaria alternata, by using component-resolved diagnosis.
Materials and Methods. 21 patients (14 males and 7 females, age range 5-40 years), with respiratory allergy participated in the study. All patients are sensitized to mix of fungal allergens containing: Alternaria alternata, Aspergillus sp., Cladosporium herbarum, Penicillium notatum, proved by in vivo and in vitro methods. All patients
ЖУРНАЛ МИКРОБИОЛОГИИ, ЭПИДЕМИОЛОГИИ И ИММУНОБИОЛОГИИ. 2020; 97(2)
DOI: https://doi.org/10.36233/0372-9311-2020-97-2-119-124
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
underwent the ImmunoCAP test and were assessed for sIgE to individual fungal allergens: ml Pénicillium notatum, m2 Cladosporium herbarum, m3 Aspergillus fumigatus and m6 Alternaria alternata. The component-resolved diagnosis to Alt a1 was performed for 10 patients with increased sIgE to m6 Alternaria alternata. Results. All studied patients (100%) had elevated sIgE to Alternaria alternata. Eight (38%) patients were sensitized to Penicillium notatum. 11 (52%) and 10 (48%) patients were sensitized to Cladosporium herbarum and to Aspergillus fumigatus, respectively. Ten patients (48%) were monosensitized to Alternaria alternata. Nine (90%) patients with sensitization to Alternaria alternata demonstrated elevated levels of IgE to Alt a1. Conclusion. Alternaria alternata most often causes sensitization in patients with respiratory allergy. The component-resolved diagnosis using Alt a1 is a precision marker to prove species-specific sensitization to Alternaria alternata.
Keywords: mold allergy; allergy to Alternaria alternata; Alt a1 component-resolved diagnosis. Acknowledgments. The study had no sponsorship.
Conflict of interest. The authors declare no apparent or potential conflicts of interest related to the publication of this article.
For citation: Hristova D., Kandova Ya., Nikolov G., Petrunov B. Sensitization to fungal allergens in patients with respiratory allergy — accuracy in diagnostic process. Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology = Zhurnal mikrobiologii, èpidemiologii i immunobiologii. 2020; 97(2): 119-124. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.36233/0372-9311-2020-97-2-119-124
Received 2 March 2020 Accepted 20 March 2020
Введение
Плесневые грибы являются существенным компонентом биоаэрозолей окружающей среды, и многие их аллергены связывают с аллергическими заболеваниями человека, в том числе с аллергическим ринитом, конъюнктивитом, бронхиальной астмой и аллергическим бронхолегочным микозом. В этом плане плесени оказывают более значимое воздействие на иммунную систему пациента, чем пыльца или другие бытовые аллергены [1]. Из-за благоприятных климатических условий аллергия на плесень часто встречается в Болгарии, и сенсибилизация к плесневым грибам обнаруживается у многих пациентов с атопией. Основные виды плесневых грибов, которые чаще всего вызывают сенсибилизацию в стране, — это Cladosporium, Alternaría, Penicillium и Aspergillus. Ранее мы показали, что 6% взрослых и детей, тестированных за последние 5 лет в отделе аллергологии, были моно-сенсибилизированы к плесневым аллергенам [2, 3]. Аллергия на плесень может быть диагностирована при помощи кожно-аллергических проб (прик-тест или интрадермальный тест) с аллергенными экстрактами из плесени или in vitro тестами определения в сыворотке крови специфических IgE к плесневым аллергенам. К сожалению, среди плесневых экстрактов аллергенов часто встречается перекрестная реактивность. Это явление уменьшает точность анализа, в связи с чем необходимы ясные алгоритмы прецизионной диагностики аллергии на плесени [4, 5]. Для преодоления ограничений в диагностике на основе натуральных аллергенных экстрактов в последнее время в Европе применяют новый in vitro метод молекулярной, или компонентной, диагностики аллергии (CRD), который использует индивидуальные рекомбинантные или натив-ные аллергенные молекулы. Тесты осуществляются
посредством флюоресцентного иммуноанализа автоматической системой («ImmunoCAP») или на основе мультиплексных микрочиповых методик [6].
Целью данного исследования является изучение сенсибилизации к наиболее распространенным видам плесневых грибов в Болгарии, а также определение посредством CRD степени сенсибилизации к Alt a1 — главному аллергену Alternaria alternata.
Материалы и методы
В исследование включен 21 пациент (14 человек мужского пола и 7 — женского, в возрасте 5-40 лет), у которых выявлены симптомы респираторной аллергии. У 7 из них был аллергический ринит, у 9 — бронхиальная астма, а у 5 — бронхиальная астма в сочетании с аллергическим ринитом. У всех пациентов обнаружен положительный кожный тест к групповому фунгальному аллергену Д1 («Bul Bio NCIPD», Болгария), содержащему Alternaria alternata, Aspergillus sp., Cladosporium herbarum, Penicillium notatum. В сыворотке крови у всех пациентов выявлен повышенный уровень аллергенспе-цифических IgE (sIgE) к миксту плесневых аллергенов Мх1 (класс 2-4), содержащему Penicillium notatum, Cladosporium herbarum, Alternaria alternata и Aspergillus fumigatus («Phadia»).
У пациентов, включенных в исследование, определяли с помощью «ImmunoCAP» наличие sIgE к следующим индивидуальным натуральным плесневым аллергенам: ml Penicillium notatum, m2 Cladosporium herbarum, m3 Aspergillus fumigatus и m6 Alternaria alternata («Phadia»). Исследование проводили согласно инструкции производителя, при этом количество специфического sIgE выражали в KUA/L, где уровень выше 0,35 KUA/L считался повышенным.
JOURNAL OF MICROBIOLOGY, EPIDEMIOLOGY AND IMMUNOBIOLOGY. 2020; 97(2)
DOI: https://doi.org/10.36233/0372-9311-2020-97-2-119-124
ORIGINAL RESEARCHES
90
80
40
30
^ 20 <
ZD ^
Ш i? 10
(Л
JH
J
il
л
J
_п
<$ & & & & & & # 4 é3 é3 é ^ Л^
<Ъ <Ъ
<Ъ~ <Ь' <Ь' <Ь' <Ь' <Ь' <Ъ' <Ъ~ <Ъ~ <Ъ~ <Ъ~ <Ъ~ <Ъ* <э" <Ъ~ <Ъ'
im1 Pen. not. am2 Clad. herb. nm3 Asp. fum. mm6 Alt. alt.
Рис. 1. Определение sIgE к индивидуальным алергенным экстрактам плесневых грибов. Fig. 1. Determination of sIgE to individual allergenic mold extracts
В сыворотках 10 пациентов с повышенным sIgE к m6 Alternaria alternata (5 — с моносенсибилизацией и 5 — с полисенсибилизацией к другим плес -невым аллергенам) посредством «ImmunoCAP» определяли sIgE к m229 Alt al («Phadia»).
Результаты обработаны при помощи пакета статистических программ «GraphPad Prism 6.0» («GraphPad Software, Inc.»). Подсчитана средняя величина (M) и стандартная ошибка среднего (SEM). Тест ранговой корреляции Спирмена использован для выявления связи между двумя количественными показателями — количеством sIgE к m6 Alternaria alternata и sIgE к m229 Alt al. Статистически значимыми приняты значения при р< 0,05.
Результаты
Полученные обобщенные уровни sIgE к индивидуальным аллергенным экстрактам исследованных видов плесени представлены на рис. 1.
У всех обследованных пациентов выявлен повышенный уровень sIgE к Alternaria alternata — в среднем 15,84 ± 8,52 KUA/L. Восемь (38%) пациентов оказались сенсибилизированы к Penicillium notatum со средним уровнем sIgE 1,46 ± 0,73 KUA/L. У 11 (52%) пациентов выявлены также sIgE к Cladosporium herb arum и у 10 (48%) — к Aspergillusfumigatus в количестве 2,79 ± и 3,08 ± 2,31 KUA/L соответственно.
При анализе данных каждого пациента получены следующие профили сенсибилизации (таблица),
0
Профили сенсибилизации к исследова нным плесневым аллергенам у пациентов с респираторной аллергией Sensitization profiles to the studied fungal allergens in patients with respiratory allergy
№ Профили сенсибилизации Sensitization profile Число пациентов Number of patients
Pen. not. Clad. herb. Asp. fum. Alt. alt. абс. / abs. %
1 - - - + 10 48
2 + + + + 8 38
3 - + + + 2 9,5
4 - + - + 1 4,5
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
позволившие разделить пациентов на 2 основные группы:
• l0 (48%) пациентов оказались моносенсиби-лизированными к Alternaría alternata;
• ll (52%) пациентов были чувствительны к более чем од70ному виду плесени, при этом 8 (38%) из них имели sIgE к 4 тестированным плесневым аллергенам.
У l0 пациентов с сенсибилизацией к Alternaría alternata была проведена монокомпонентная молекулярная диагностика аллергии на Alternaría alternata с использованием рекомбинантного Alt al аллергена (rAlt al). Результаты исследования представлены на рис. 2.
Полученные данные показали, что 9 (90%) пациентов с сенсибилизацией к Alternaría alternata имеют повышенный уровень sIgE к rAlt al. Тест ранговой корреляции Спирмена показал высокую (rS = 0,9l52) положительную и статистически значимую корреляцию (p = 0,0003) между сывороточным уровнем IgE к m6 Alternaría alternata и к rAlt al у обследованных пациентов.
Обсуждение
Исследования, проведенные в разных частях мира, показали, что сверхчувствительность к плесени встречается чаосто, особенно среди индивидов с респираторной аллергией. Точная величина распространения сенсибилизации к плесени неизвестна, цифры варьируют от 3 до l0% общей популяции [7]. Наиболее часто с развитием аллергии связаны 4 рода плесневых грибов: Alternaría, Cladosporíum, Penícíllíum и Aspergíllus [8]. В результате многих исследований установлено, что Alternaría alternata является одним из наиболее важных плесневых грибов, вызывающих аллергию в Европе, и до 70% пациентов показывают положительный кожный тест
sIGE, KUA/L
12G и
100 -
80
6G -
40 -
20
на Alternaria alternata. Кроме того, доказано, что он является фактором риска развития астмы [7-9]. Наше исследование также показало, что большинство пациентов с аллергией к плесени сенсибилизированы преимущественно к Alternaría alternata, и у 48% из них выявлена моносенсибилизация. Остальные 52% пациентов были сенсибилизированы более чем к одному виду плесени, а 38% из них имели sIgE ко всем 4 исследованным плесневым аллергенам. Это еще раз подтверждает наблюдение многих исследователей, что пациенты, чувствительные к плесени, скорее всего, сенсибилизированы к нескольким ее видам [3, 4, 8].
Современная постановка диагноза аллергии на плесневые грибы является поэтапным процессом, который включает сбор анамнеза, кожно-аллерги-ческое тестирование, определение общих и аллер-генспецифических IgE в сыворотке крови и, если необходимо, проведение провокационных тестов [10]. Для повышения точности диагноза аллергии на плесень все чаще используют метод молекулярной, или компонентной, аллергодиагностики с отдельными рекомбинантными или естественными аллергенными молекулами. Alt al — это аллергенная молекула Alternaria alternata, которую распознают антитела к IgE у 80-90% пациентов с аллергией на Alternaria [11]. Это и определяет Alt a1 как мажорный аллерген, к которому в основном сенсибилизированы пациенты. Поскольку молекула Alt a1 уникальна для данного вида плесневого гриба, сенсибилизация к этому аллергену определяется как видоспецифическая для Alternaria alternata [12, 13]. Таким образом, наличие сенсибилизации к Alt al можно использовать как маркер точности доказательства аллергии на данный вид плесени [14, 15].
Наши результаты монокомпонентной молекулярной диагностики при помощи rAlt a1 показыва-
■ m6 Alt. alt. □ m229 Alt a1
Л ■
S 454 S 457
S 597
S 603
S 734
S 737
S 772
S 819
S 943
S 1163
Рис. 2. Сравнение уровней sIgE к натуральному экстракту Alternaria alternata (m6) и sIgE к rAlt al, полученных методом молекулярной диагностики пациентов с респираторной аллергией. Fig. 2. Comparison of the amounts of sIgE to crude extract of Alternaria alternata (m6) and results of CRD with rAlt a 1
in patients with respiratory allergy.
о
JOURNAL OF MICROBIOLOGY, EPIDEMIOLOGY AND IMMUNOBIOLOGY. 2020; 97(2)
DOI: https://doi.org/10.36233/0372-9311-2020-97-2-119-124
ORIGINAL RESEARCHES
ют, что 90% обследованных пациентов с сенсибилизацией к Alternaría имеют повышенный уровень IgE к rAlt al с высокой положительной (rS = 0,9152; p = 0,0003) корреляцией с сывороточным уровнем IgE к Alternaria.
Одно из последних исследований, включающее 80 европейских пациентов, показало, что rAlt al может быть использован для диагностики 98% пациентов с аллергией на Alternaria alternata и что почти все специфические IgE у этих пациентов направлены против Alt al [16]. Такое заключение предполагает, что Alt a1 можно использовать в качестве надежного диагностического маркера видо-специфической сенсибилизации к Alternaria и он может быть альтернативой натуральному экстракту Alternaria в диагностических in vitro панелях.
Естественный аллергенный экстракт Alternaria alternata содержит и другие аллергенные молекулы, некоторые из которых тоже могут быть идентифицированы как мажорные аллергены [17]. Например, Alt a2 (альдегиддегидрогеназа) — видоспецифи-ческий аллерген и Alt a5 (энолаза) — паналлерген, который находится в некоторых фунгальных аллергенных экстрактах [18]. Перекрестная реактивность Alternaria alternata с другими видами плесневых грибов, которые распространяются воздушным путем, подробно описана и может быть обусловлена другими аллергенными молекулами [19]. Есть доказательства, что значительная доля пациентов, чувствительных к Alternaria alternata, полисенси-билизирована к более чем одному виду плесневых грибов и может также быть сенсибилизирована к другим источникам аэроаллергенов в окружающей среде: пыльце, клещам или даже пищевым аллергенам [8]. По-видимому, наличие такого высокого процента полисенсибилизации к различным видам плесневых грибов у пациентов, включенных в настоящее исследование, может быть вызвано перекрестной реактивностью.
Заключение
Alternaria alternata чаще всего приводит к сенсибилизации у пациентов с респираторной аллергией. Уровень аллергенспецифических IgE к данному виду плесневого гриба наиболее высокий и наблюдается в большом проценте случаев у пациентов с моносенсибилизацией. Молекулярную компонентную диагностику с помощью rAlt a1 можно использовать как маркер для доказательства видовой сенсибилизации к Alternaria alternata. Более того, этот рекомбинантный аллерген может быть альтернативой использованию натурального экстракта Alternaria в диагностических in vitro панелях. Идентификация и характеристика полного спектра аллергенов Alternaria и разработка новых методов, основанных на аллергенных рекомбинантных белках, позволит получать более качественные тесто-
вые решения для улучшения диагностики аллергии на Alternaría alternata и другие плесневые грибы.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Crameri R., Weichel M., Flückiger S., Glaser A.G., Rhyner C. Fungal allergies: yet unsolved problem. Chem Immunol. Allergy. 2006; 91: 121-33.
DOI: http://doi.org/10.1159/000090276
2. Nikolov G., Kandova Y., Hristova R., Nedyalkov M., Petru-nov B. The role of fungal allergens in respiratory diseases in Bulgaria. In: Allergy, Asthma & Immunology: From Basic Science to Clinical Application. Proceedings of the V World Asthma and COPD Forum. New York; 2012: 47-54.
3. Horner W.E., Helbling A., Salvaggio J.E., Lehrer S.B. Fungal Allergens. Clin. Microbiol. Rev. 1995; 8(2): 161-79.
4. Bush R.K., Portnoy J.M. The role and abatement of fungal allergens in allergic diseases. J. Allergy Clin. Immunol. 2001; 107(3 Suppl.): S430-40.
DOI: http://doi.org/10.1067/mai.2001.113669
5. Achatz G., Oberkofler H., Lechenauer E., Simon B., Unger A., Kandler D., et al. Molecular characterization of Alternaria alternata and Cladosporium herbarum allergens. Adv. Exp. Med. Biol. 1996; 409: 157-61.
DOI: http://doi.org/10.1007/978-1-4615-5855-2_21
6. Shreffler W.G. Microarrayed recombinant allergens for diagnostic testing. J. Allergy Clin. Immunol. 2011; 127(4): 843-9.
DOI: http://doi.org/10.1016/jjaci.2011.02.011
7. Twaroch T.E., Curin M., Valenta R., Swoboda I. Mold allergens in respiratory allergy: from structure to therapy allergy. Allergy Asthma Immunol. Res. 2015; 7(3): 205-20.
DOI: http://doi.org/10.4168/aair.2015.7.3.205
8. Mari A., Schneider P., Wally V., Breitenbach M., Simon-Nob-be B. Sensitization to fungi: epidemiology, comparative skin tests, and IgE reactivity of fungal extracts. Clin. Exp. Allergy. 2003; 33(10): 1429-38.
DOI: http://doi.org/10.1046/j.1365-2222.2003.01783.x
9. Asturias J.A., Ibarrola I., Ferrer A., Andreu C., Lopez-Pas-cual E., Quiralte J., et al. Diagnosis of Alternaria alternata sensitization with natural and recombinant Alt a 1 allergens. J. Allergy Clin. Immunol. 2005; 115(6): 1210-7.
DOI: http://doi.org/10.1016/jjaci.2005.02.012
10. Malling H.J., Dreborg S., Weeke B. Diagnosis and immunothe-rapy of mould allergy. III. Diagnosis of Cladosporium allergy by means of symptom score, bronchial provocation test, skin prick test, RAST, CRIE and histamine release. Allergy. 1986; 41(1): 57-67.
DOI: http://doi.org/10.1111/j.1398-9995.1986.tb00276.x
11. Yunginger J.W., Jones R.T., Nesheim M.E., Geller M. Studies on Alternaria allergen, III. Isolation of a major allergenic fraction (ALT-I). J. Allergy Clin. Immunol. 1980; 66(2): 138-47. DOI: http://doi.org/10.1016/0091-6749(80)90061-5
12. Chruszcz M., Chapman M.D., Osinski T., Solberg R., Demas M., Porebski P. J., et al. Alternaria alternata allergen Alt a 1: A unique P-barrel protein dimer found exclusively in fungi. J. Allergy Clin. Immunol. 2012; 130(1): 241-7.
DOI: http://doi.org/10.1016/jjaci.2012.03.047
13. Duffort O., Barber D., Polo F. Quantification assay for the major allergen in Alternaria alternata, Alt a1. Alergol. Inmunol. Clin. 2002; 17(3): 162-172.
14. Kustrzeba-Wójcicka I., Siwak E., Terlecki G., Wolañczyk-M^drala A., M^drala W. Alternaria alternata and its allergens: a comprehensive review. Clin. Rev. Allergy Immunol. 2014; 47(3): 354-65.
DOI: http://doi.org/10.1007/s12016-014-8447-6
15. Gabriel M.F., Postigo I., Tomaz C.T., Martínez J. Alternaria al-ternata allergens: Markers of exposure, phylogeny and risk of
fungi-induced respiratory allergy. Environ. Int. 2016; 89-90: 71-80.
DOI: http://doi.org/10.1016/j.envint.2016.01.003
16. Twaroch T.E., Focke M., Fleischmann K., Balic N., Lupinek C., Blatt K., et al. Carrier-bound Alt a 1 peptides without allergenic activity for vaccination against Alternaria alternata allergy. Clin. Exp. Allergy. 2012; 42(6): 966-75.
DOI: http://doi.org/10.1111/j.1365-2222.2012.03996.x
17. Sanchez H., Bush R.K. A review of Alternaria alternata sensitivity. Rev. Iberoam Micol. 2001; 18(2): 56-9.
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
18. Simon-Nobbe B., Probst G., Kajava A.V., Oberkofler H., Su-sani M., Crameri R., et al. IgE-binding epitopes of enolases, a class of highly conserved fungal allergens. J. Allergy Clin. Immunol. 2000; 106(5): 887-95.
DOI: http://doi.org/10.1067/mai.2000.110799
19. Gupta R., Singh B.P., Sridhara S., Gaur S.N., Kumar R., Chaud-hary V.K., et al. Allergenic cross-reactivity of Curvularia lunata with other airborne fungal species. Allergy. 2002; 57(7): 636-40. DOI: http://doi.org/10.1034/j.1398-9995.2002.03331.x
Информация об авторах:
Христова Диана — Национальный центр инфекционных
и паразитарных болезней, 1504, София, Болгария.
ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-9710-iei2
Кандова Яна — доц., Национальный центр инфекционных
и паразитарных болезней, 1504, София, Болгария.
ORCID ID: https://orcid.org/0000-000e-2765-7558
Николов Георгий — доц., отдел иммунологии, Национальный
центр инфекционных и паразитарных болезней, 1504, София,
Болгария.
ORCID ID: https://orcid.org/0000-000e-2949-7834. E-mail: [email protected]
Петрунов Богдан — Национальный центр инфекционных и паразитарных болезней, 1504, София, Болгария. ORCID ID: https://orcid.org/0000-0001-84e5-6175 Участие авторов: все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации.
Information about the authors:
Diana Hristova — National Centre of Infectious and Parasitic
Diseases, 1504, Sofia, Bulgaria.
ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-9710-1312
Yana Kandova — Assoc. prof., National Centre of Infectious
and Parasitic Diseases, 1504, Sofia, Bulgaria.
ORCID ID: https://orcid.org/0000-0003-2765-7558
Georgi Nikolo^ — Assoc. Prof., Department of immunology,
National Centre of Infectious and Parasitic Diseases, 1504, Sofia,
Bulgaria.
ORCID ID: https://orcid.org/0000-0003-2949-7834. E-mail: [email protected]
Bogdan Petrunov — National Centre of Infectious and Parasitic Diseases, 1504, Sofia, Bulgaria. ORCID ID: https://orcid.org/0000-0001-8435-6175 Contribution: the authors contributed equally to this article.
