CC BY
507
УДК: 618.19-006.6-092-037: 547.96
роль трансформирующего ростового ФАКТОРА tgf-bi в патогенезе рака молочной железы
Н.Н.Бабышкина, Е.А.Малиновская, М.Н.Стахеева, В.В.Волкоморов, А.А.Уфандеев, Е.М.Слонимская
НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск 634050, г. Томск, пер. Кооперативный, 5, e-mail: [email protected]
Систематизированы современные представления о строении и сигнальных путях TGF-P1, его функциональной роли в процессе канцерогенеза молочной железы. Представлены данные о значимости TGF-P1 как прогностического и предсказательного фактора при раке молочной железы.
Ключевые слова: TGF-P1, патогенез рака молочной железы, факторы прогноза.
ROLE OF TRANSFORMING GROWTH FACTOR TGF-P1 IN PATHOGENESIS OF BREAST CANCER N.N. Babyshkina, E.A. Malinovskaya, M.N. Stakheyeva, V.V. Volkomorov,
A.A. Ufandiev, E.M. Slonimskaya Cancer Research Institute, SB RAMS, Tomsk 5, Kooperativny Street, Tomsk-634009, Russia, e-mail: [email protected]
The review systematizes data concerning structure and signaling pathways of TGF-P1, its functional role in breast cancer pathogenesis. The data on TGF-P1 as prognostic and predictive factors in breast cancer have been presented.
Key words: TGF-P1, breast cancer pathogenesis, prognostic factors.
В последнее десятилетие был достигнут значительный прогресс как в идентификации генов, нарушения функции которых ведут к развитию рака молочной железы, так и в выяснении роли кодируемых ими белковых продуктов. Выяснилось, что гены, вовлеченные в регуляцию процессов клеточного цикла, диф-ференцировки, морфогенетических реакций и апоптоза, могут быть объединены в несколько сигнальных каскадов, изменения в которых, в конечном итоге, приводят к возникновению злокачественных новообразований. К числу таких относится фактор роста семейства TGF-P1 (трансформирующий фактор роста Р1), который является полифункциональным цитокином с разнонаправленными эффектами фактически на все типы клеток и играет ключевую роль в процессах эмбрио- и канцерогенеза.
Строение и сигнальные пути TGF-в
Семейство TGF-P включает группу гомологичных гетеродимерных белков TGFp-1, -2, -3, -4. Основной изоформой, секретируемой клетками иммунной системы, является TGF-P1. Белки семейства TGF-P синтезируются в виде препро-пептида, из которого в результате процессинга отщепляется сигнальный пептид и продомен с
образованием зрелого белка. Пропептид, или LAP (latency associated peptide), остается связанным со зрелой молекулой нековалентными взаимодействиями. Благодаря этому зрелая молекула белка представляет собой биологически неактивную, латентную форму, в виде которой TGF-P хранится в экстрацеллюлярном матриксе. Активация TGF-P происходит путем отщепления пропептида LAP с участием таких факторов, как протеазы, интегрины, изменения рН, активные формы кислорода [28]. Зрелые белки TGF-P состоят из 112 а.о. и содержат от шести до девяти остатков цистеина, которые образуют как внутри-, так и межмолекулярные дисульфидные связи.
Выделяют три основных типа рецепторов TGF-P - рецепторы I, II и III типа. Рецепторы I и II типа являются мембранными гликопротеинами с молекулярной массой 55 и 70 кД. Благодаря своей димерной структуре TGF-P способен одновременно взаимодействовать с обоими I и
II типами специфических рецепторов, тогда как рецептор III типа стерически способствует этому процессу. Связывание гетеро- или гомодимеров лиганда с внеклеточным доменом рецептора II типа приводит к взаимодействию его с рецепто-
ром I типа и фосфорилированию SG-субдомена (содержащего SGSGSG последовательность) его внутриклеточного домена. Рецептор I типа обладает серин/треонинкиназной активностью и фосфорилирует ряд Smad (Sma and Mad related proteins) белков. В настоящее время известно несколько различных Smad белков, которые подразделяются на три типа: активируемые рецептором R-Smad (Smadl, Smad2, Smad3, Smad5 и Smad8), которые образуют комплексы с так называемым общим Smad белком (Smad4) и проникают внутрь ядра, а также ингибиторные I-Smad (Smad6 и Smad7). Классический сигнальный каскад включает фосфорилирование рецептором I типа и активирование Smad2 и Smad3, их гетеромеризацию с участием Smad4 и проникновение гетеромерного комплекса внутрь ядра, где они выполняют функцию факторов транскрипции [53]. В эпителиальных клетках, в том числе и молочной железы, передача сигнала может осуществляться путем активации Smadl и Smad5 с последующей ассоциацией с Smad4 и ядерной транслокацией. Все R-Smad содержат на N-конце МН1 домен, способный связываться с ДНК, а на С-конце МН2 домен, участвующий в белок-белковых взаимодействиях. Smad белки участвуют в процессе транскрипции двумя способами: либо непосредственно связываясь с SBE элементами (Smad binding element) про-мотерных участков генов-мишеней с участием своего МН1 домена, либо взаимодействуя с другими факторами транскрипции через свой МН2 домен [73].
Интенсивные исследования последних лет показали, что TGF-P могут активировать не только канонический каскад Smad белков, но и другие сигнальные пути. В экспериментах на различных клеточных линиях описана TGF-P -зависимая активация Erkl/2, JNK и p38, PI3K, а также Ras и Rho-подобных малых ГТФаз [40]. Благодаря этому осуществляется перекрестное взаимодействие между различными путями [61]. Показано участие компонентов МАР (митоген-активируемых протеинкиназ) -сигнального пути в нормальных эпителиальных клетках рака молочной железы, опухолевых клетках NIH 3T3, клетках гепатоцеллюлярной карциномы HepG2 и фибросаркомы HT1080 [34, 37, 66]. Взаимодействие нескольких сиг-
нальных каскадов может осуществляться путем модуляции активности Smad белков с участием Wnt-, IFN-g/STAT - сигнальных путей [18]. Перекрестные связи с другими путями передачи сигнала могут реализовываться посредством активации рецепторов TGF-P EGF-белками [68]. Таким образом, возможность интеграции нескольких сигнальных путей непосредственно и опосредованно активируемых TGF-P рассматривается в настоящее время в качестве одного из возможных механизмов его неоднозначного функционирования в процессах злокачественной трансформации и опухолевой прогрессии.
TGF-p1 как опухолевый супрессор
Функциональная роль TGF-P1 в процессе канцерогенеза молочной железы сложна и затрагивает диаметрально противоположные процессы - супрессию и промоцию опухолевого роста [8, 43, 60, 67]. Способность TGF-P1 ингибировать пролиферацию эпителиальных клеток, а также индуцировать апоптоз и снижать активность теломеразы лежит в основе механизмов супрессии опухолей.
Ингибирование пролиферации клеток. Антипролиферативное действие TGF-P1 основано на активации ингибиторов циклинзависимых киназ семейств Ink4 и Cip/Kip, приводящей к остановке клеточного цикла. Связывание TGF-P со своим рецептором вызывает образование транскрипционных комплексов Smad4 -Smad2,3, которые транслоцируются из цитоплазмы в ядро. Это приводит к активации генов ингибиторов циклинзависимых киназ p21WAF1/ CIP1, pl5INK4b, p27KIP1a и репрессии гена MYC, что вызывает подавление активности Cdk4,6 и Cdk2, ответственных за продвижение по G1 и вход в S-фазу [16, 25, 53].
Индукция апоптоза. Апоптоз является одним из наиболее важных механизмов, посредством которого TGF-P1 препятствует опухолевому росту. Показано, что TGF-P1 индуцирует апоптоз эпителиальных, эндотелиальных, гема-топоэтических клеток как через р53-зависимые, так и р53-независимые механизмы, посредством регуляции про- (Bax) и антиапоптотических факторов (Bcl-2, Bcl-x1) [26, 36, 59]. В эпителиальных клетках молочной железы рецептор TGF-P1 типа I фосфорилирует и активирует р38/MAP и JNK и опосредует индукцию апопто-
за независимо от Smad белков [37]. Реализация апоптоза возможна при интеграции TGF-P1 с другими сигнальными путями, например Fas-зависимым, приводящей к активации каспаз [32].
Снижение активности теломеразы. Прогрессивное укорочение теломер является ограничительным механизмом митотических циклов в соматических клетках, отсчитывающих число делений клетки и продолжительность их жизни. Для опухолевых клеток характерна иммортализация - отсутствие репликативного старения, которое достигается благодаря активации теломеразы, фермента, достраивающего концы хромосом с РНК-матрицы. Активность теломеразы в значительной степени определяется уровнем транскрипции гена hTERT. TGF-P1 способен ингибировать экспрессию гена hTERT при участии трех сигнальных путей Mad1, Menin, and SIP1/ZEB-28, что в конечном итоге приводит к снижению активности теломе-разы [50]. Предполагается вовлечение Smad3 в негативную регуляцию транскрипции hTERT [49]. Показано, что экспрессия гена hTERT индуцирует резистентность к рост-ингибирущим сигналам в HME p16INK4(-) клетках молочной железы [72].
TGF-p1 как опухолевый промотор
По мере развития опухоли TGF-P1 способствует конверсии ранних эпителиальных опухолей в инвазивные, метастазирующие, участвуя в опухолевой прогрессии. Доминирование проонкогенной активности TGF-P1 реализуется посредством его участия в процессах эпителиально-мезенхимального перехода, ангиогенеза, а также в процессе формирования иммунной супрессии.
Эпителиально-мезенхимальный переход (EMT-epithelial-mesenchymal transition). В основе механизма промоторного действия TGF-P1 лежит его способность стимулировать морфогенетические изменения, которые осуществляются за счет миграции клеток и эпителиально-мезенхимального перехода, или трансдифференциации [22, 56, 58]. Ключевыми моментами во время EMT являются: подавление экспрессии гена Е-кадхерина, участвующего в образовании плотных контактов между эпи-телиоцитами; увеличение экспрессии генов,
ответственных за мезенхимальный фенотип эпителиальных клеток, таких как N-кадхерин, ви-ментин, фибробласт-специфический протеин-1 (FSP-1) и гладко-мышечный актин альфа (SMA); усиление клеточной подвижности вследствие активации сигнальных путей, приводящих к реорганизации цитоскелета; повышение экспрессии генов, кодирующих матриксные ме-таллопротеиназы (MMP), которые участвуют в деградации внеклеточного матрикса и базальной мембраны [76]. EMT индуцируется сигналами, поступающими извне клетки (растворимые ростовые факторы и компоненты матрикса), которые интегрируются на мембране за счет взаимодействия со специфическими рецепторами и определяют активацию малых GTP-связывающих белков Ras, Rho и Rac [62].
Показано, что в клеточной культуре нормальные эпителиальные клетки молочной железы (NmuMG) мышей экспрессируют Е-кадхерин и демонстрируют рост в виде эпителиоподоб-ных пластов. При стимуляции TGF-ß1 клетки претерпевают полный EMT - обретают мезенхимальный миграционный фенотип путем утраты экспрессии эпителиальных и появления экспрессии мезенхимальных генов, включая «кадхериновое переключение» [23]. TGF-ß1 регулирует адгезивные свойства клеток, посредством снижения экспрессии E-кадхерина и увеличения экспрессии anIßj интегринов и фибулина-5 [69]. Е-кадхерин является трансмембранным гликопротеином, внутриклеточный домен которого связывается с рядом белков, прежде всего с ß-катенином, который, в свою очередь, взаимодействует с актиновы-ми микрофиламентами [77]. Снижение уровня Е-кадхерина может приводить к освобождению ß-катенина из зоны контакта и индукции его транскрипционной активности. Однако гиперэкспрессия ß-катенина сама по себе не приводит к EMT, по-видимому, ключевым событием в этом случае является снижение уровня Е-кадхерина [74]. В некоторых случаях нарушение нормального уровня экспрессии гена Е-кадхерина может быть связано с репрессорным действием родственных транскрипционных факторов Snai1 и Slug [6, 10].
В нормальных нетрансформированных клетках TGF-ß1 стимулирует продукцию бел-
ков экстрацеллюлярного матрикса - коллагена и фибронектина, а также снижает уровень секреции ферментов деградации внеклеточного матрикса - коллагеназы, гепариназы и стромелизина либо стимулирует продукцию белков, ингибирующих их активность - ингибитора тканевого активатора плазминогена-1 и тканевого ингибитора металлопротеиназ [9]. Однако TGF-ß1 способен стимулировать про-теолитическую активность опухолевых клеток, увеличивая экспрессию ферментов деградации экстрацеллюлярного матрикса, что наряду с изменением морфологических свойств и повышением миграционной способности трансформированных клеток предопределяет инвазивный характер роста, а впоследствии и метастазиро-вание [75]. Трансдифференциация под воздействием факторов роста TGF-ß1 опосредуется не только Smad белками путем связывания и активации рецепторов TGF-ß-RI и TGF-ß-RII, но и с участием Smad-независимых путей передачи сигнала через митоген-активируемые протеин-киназы р38, ERK (extracellular signal-regulated kinase) и JNK (Jun N-terminal kinase), а также фосфатидилинозитол-3-киназу PI3 [3, 4, 7]. Результатом активации комлекса Smad-белков или МАР-киназ является индукция факторов транскрипции, включая белки семейства 5EF1/ZEB1 и SIP1/ZEB2, Snail, Slug, Twist, которые связываются с промоторами генов, ответственных за EMT [41, 71]. Промоторы генов, кодирующих мембранные белки - Е-кадхерин, окклудин, клаудин-1, транскрипционно ингибируются этими факторами, а соответственно, промоторы генов компонентов цитоскелета, например виментина, а также генов белков внеклеточного матрикса - фибронектина, в свою очередь, наоборот, активируются. Однако наряду с TGF-ß1 в регуляцию экспрессии генов при EMT вовлечены и другие сигнальные каскады - Notch, Wnt, TNF-a, и EGF [44, 62]. Взаимодействие TGF и Ras/Raf/MAP сигнальных путей в инициации эпителиально-мезенхемального перехода является в настоящее время наиболее изученным. Janda et al. (2002) показали, что гиперактивация Raf-MAP киназного каскада в кооперации с TGF-ß1 сигналингом индуцирует EMT и ускоряет процесс метастазирования в EpH4 эпителиальных клетках молочной желе-
зы [39]. По данным Vogelmann et al. (2005), Ras-белок и PI3 киназа выступают в качестве активатора генов семейства Src-протоонкогенных тирозиновых киназ, что приводит к фофори-лированию а- и ß-катенина, дестабилизации комплекса Е-кадхерин/катенин и разрушению адгезионных контактов [78]. Потеря плотных соединений между эпителиальными клетками во время TGF-ßl-индуцированного EMT частично достигается за счет интерференции белков полярности и передачи сигналов RhoA. Рецепторный комплекс TGF-ß-TGF-ß-R ассоциирует и фосфорилирует белки полярности PAR6 (partitioning defective 6 homolog alpha), которые соединяются с E3 лигазой SMURF1, что ведет в конечном итоге к протеосомной деградации RhoA и последующему распаду плотных соединений [5, 35, 63]. Имеются многочисленные доказательства, что разрегулирование передачи сигналов полярности вносит вклад в развитие и прогрессирование рака, в том числе молочной железы. В подтверждение этого гены, кодирующие белки полярности Scribble (Scrib), lethal giant larvae (Lgl), discs large (Dlg), рассматриваются в настоящее время в качестве опухолевых супрессоров, а их мутации и деле-ции ведут к неопластическому росту [82].
Индукция ангиогенеза. Увеличение агрессивности опухоли происходит также за счет стимуляции ангиогенеза под воздействием TGF-ß 1. TGF-ß1 способен индуцировать экспрессию сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF), являющегося основным ангиогенным фактором, регулирующим рост новых кровеносных и лимфатических сосудов [81]. Кроме того, ангиогенезу может способствовать ß-катенин-зависимая активация металлопротеиназ, разрушающих внеклеточный матрикс, из которого освобождается значительный запас ростовых факторов [33]. TGF-ß1 сигнальная трансдукция в эндотелиальных клетках является уникальной, поскольку затрагивает пути передачи сигнала, имеющие противоположный эффект на пролиферацию и миграцию эндотелиальных клеток: классический Smad-зависимый путь через TGF-ß-RII и TGF-ß-RI (ALK-5) с последующей активацией Smad2 и Smad3 и TGF-ß-RII и ALK-1- опосредованный. Баланс между этими сигнальными путями реализуется через эндо-
глин (CD105), являющийся одним из рецепторов
III типа TGF-ß, который блокирует передачу сигнала, инициированного ALK-5, тогда как активирует ALK-1 -опосредованный путь [11, 29, 46]. Показано, что при раке молочной железы белок эндоглин специфически экспрессирован на эндотелиальных клетках пери- и интратумо-ральныых кровеносных сосудов и стромальных компонентах опухоли [52, 57]. Эндотелиальные клетки, подобно эпителиальным, способны трансформироваться в мезенхимальные в процессе эндотелиально-мезенхимального перехода (EndMT), в регуляции которого, помимо TGF-ß1-пути, принимают участие Wnt, Noth сигнальные каскады [58].
Иммуносупрессия. Опухолевой прогрессии также способствуют паракринные механизмы, обеспечивающие проопухолевую регуляцию опухолевого микроокружения цитокинами, в том числе TGF-ß1, продуцируемыми клетками опухоли и иммуноцитами воспалительного инфильтрата стромы. В основе иммуносупрес-сорного действия TGF-ß1 лежит способность блокировать продукцию ИЛ-2, ингибируя ИЛ-2-зависимую пролиферацию Т-клеток [54]. Супрессия Т-лимфоцитов посредством TGF-ß1 осуществляется через регуляцию активности циклинзависимых киназ и, соответственно, регуляцию клеточного цикла [80]. Показано, что TGF-ß1, продуцируемый как стромальными элементами, так и клетками опухоли, является необходимым звеном в регуляции функционирования T-эффекторных клеток, ингибируя экзоцитоз литических гранул и экспрессию IFN-y и перфорина [1, 55]. TGF-ß1 снижает продукцию IFN-y NK (natural killer cells) клетками, которая существенна для стимуляции ^^противоопухолевого иммунного ответа, возможно, блокируя экспрессию рецепторов NKG2D, активирующих цитотоксические функции NK-клеток [12]. Еще одной важной точкой приложения TGF-ß1-индуцированной иммуносупрессии являются дендритные клетки. TGF-ß 1 ингибирует экспрессию молекул MHC II класса, костимулирующих молекул CD80, CD86, CD40 и продукцию IL-12, TNF-а, CCL5/RANTES, что в результате нарушает процессы активации и дифференцировки T-лимфоцитов [45]. Наконец, TGF-ß1 может оказывать иммуносупрессивный
эффект посредством субпопуляции регуляторных CD4+CD25+FOXP3+-клеток (Т^, ТЪ3-клон), которые способны продуцировать этот цитокин. При таком дистантном механизме TGF-P1, выделяемый клетками, связывается со своими рецепторами на поверхности Т-эффекторных клеток и ингибирует их активацию, тем самым супрессируя иммунный ответ [51, 65]. Наряду с этим и TGF-pl вносят вклад в реализацию программы супрессии через прямое взаимодействие с NK-клетками и ТЪ17-лимфоцитами [19, 79]. Выявлено, что присутствие CD4+CD25+FOXP3+клеток сочетается с усилением ангиогенеза, высокой плотностью сосудов в опухолевом микроокружении, а также плохим прогнозом у больных злокачественными новообразованиями [13, 27].
TGF-p1 как прогностический и предсказательный фактор
Поиск эффективных подходов к прогнозированию течения рака молочной железы с использованием информативных молекулярных параметров является на сегодняшний день актуальной задачей современной онкологии. TGFpl относится к числу наиболее перспективных молекулярных маркеров, поскольку он вовлечен как в регуляцию процессов клеточной пролиферации, дифференцировки, апоптоза, так и во внутриклеточные процессы и внеклеточное окружение, т.е. те процессы, которые обеспечивают опухолевую прогрессию.
Проведенные в последние годы клинические и экспериментальные исследования показали как прогностическую значимость, так и предсказательную роль определения белка TGF-P в сыворотке крови или уровня экспрессии его рецептора/белка в ткани больных раком молочной железы. В частности, высокий уровень продукции TGF-pl в сыворотке крови и снижение уровня экспрессии его рецептора TGF-P-RIII ассоциированы с неблагоприятным прогнозом у больных раком молочной железы [14, 21, 38, 64]. Кроме того, прогностически значимым является и уровень экспрессии эндоглина на эндотелиальных клетках при раке молочной железы [15]. Высокие сывороточные концентрации белка TGF-P коррелируют с развитием фиброза у пациенток после лучевой терапии [17, 48], а уровень TGF-p2 в сыворотке крови
после 4-недельного курса лечения тамоксифе-ном может являться ранним предсказательным маркером ответа на проводимую терапию [42]. Найдены ассоциации между высокой концентрацией белка TGF-P1 в опухолевой ткани и снижением показателей общей и безрецидив-ной выживаемости у больных раком молочной железы [20]. Исследование уровня экспрессии гена FOXP3 в опухоли у больных раком молочной железы выявило его ассоциативные взаимосвязи с инвазивным ростом и размером опухолевого узла, что позволяет оценивать этот транскрипционный фактор как возможный маркер опухолевой прогрессии [31]. Наконец, в качестве потенциальных молекулярных маркеров рассматриваются и полиморфные варианты гена TGF-P1. В настоящее время выделены 8 полиморфных форм гена, две из которых -SNP (single nucleotide polymorphism) в 1 экзоне T+29C (rs1982073, замена тимина (T) на цитозин (C) в 29 позиции) и SNP в промоторной области C-509T (rs1800469, замена цитозина на тимин в 509 позиции) связаны с высокими сывороточными уровнями циркулирующего TGF-P1 [30]. У носителей Т-варианта генотипа (полиморфизм C-509T) и С-варианта (полиморфизм T +29°C) выявлена ассоциация с риском развития РМЖ [2, 24, 47, 70].
Однако следует отметить, что в большинстве исследований изучены и сопоставлены с клиническими данными характеристики, отражающие лишь один из параметров функциональной активности TGFP1, например, только полиморфные варианты гена или его экспрес-сионный профиль или анализ экспрессии белка в опухолевой ткани. Нет комплексного подхода к оценке его роли в процессах опухолевой прогрессии во взаимосвязи с другими молекулами, обеспечивающими процессы метастазирования. Учитывая многоплановую роль TGF-P1 в патогенезе рака молочной железы, представляется перспективным его исследование как на уровне генетически детерминированных особенностей организма, так и на уровне функционирования гена TGFP1 и его взаимодействий с белками межклеточной адгезии, с целью выявления маркеров, отражающих закономерности развития прогрессии рака молочной железы, которые могли бы быть использованы наряду с
клиническими параметрами при планировании комплексного лечения заболевания.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ahmadzadeh M., Rosenberg S.A. TGF-h1 attenuates the acquisition and expression of effector function by tumor antigen-specific human memory CD8 T cells // J. Immunol. 2005. Vol. 174. P. 5215-5223.
2. Andreassen C.N., Alsner J., Overgaard J. et al. TGFB1 polymorphisms are associated with risk of late normal tissue complications in the breast after radiotherapy for early breast cancer // Radiother. Oncol. 2005. Vol. 5 (1). P. 18-21.
3. BakinA.V., TomlinsonA.K., BhowmickN.A. et al. Phosphati-dylinositol 3-kinase function is required for transforming growth factormediated epithelial to mes-enchymal transition, and cell migration // J. Biol. Chem. 2000. Vol. 275. P. 36803-36810.
4. Barcellos-Hoff M.H.,AkhurstRJ. Transforming growth factor-p in breast cancer: too much, too late // Breast Cancer Research. 2009. Vol. 11. P. 1186-2224.
5. Barrios-Rodiles M., Brown K.R, Ozdamar B. et al. High-throughput mapping of a dynamic signaling network in mammalian cells // Science. 2005. Vol. 307. P. 1621-1625.
6. Batlle E., Sancho E., Franci C. et al. The transcription factor snail is a repressor of E-cadherin gene expression in epithelial tumour cells // Nat. Cell Biol. 2000. Vol. 2. P. 84-89.
7. Biswas S., GuixM., Rinehart C. et al. Inhibition of TGF-p with neutralizing antibodies prevents radiation-induced acceleration of metastatic cancer progression // J. Clin. Invest. 2007. Vol. 117. P. 1305-1313.
8. Biswas S., Criswell T., Wang C. et al. Inhibition of transforming growth factor-B signaling in human cancer: targeting a tumor suppressor network as a therapeutic strategy // Clin. Cancer Res. 2006. Vol. 12 (14). P. 4142-4146.
9. Blobe G.C., Schiemann W.P., LodishH.F. Role of transforming growth factor beta in human disease // N. Engl. J. Med. 2000. Vol. 342. P. 1350-1358.
10. Cano A., Pérez-Moreno M. A., Rodrigo I. et al. The transcription factor Snail controls epithelial-mesenchymal transitions by repressing Ecadherin expression // Nat. Cell Biol. 2000. Vol. 2. P. 76-83.
11. Castañares C., Redondo-Horcajo M., Magán-Marchal N. et al. Signaling by ALK5 mediates TGFp1-induced ET-1 expression in endothelial cells: a role for migration and proliferation // J. Cell Science. 2007. Vol. 120. P. 1256-1266.
12. Castriconi R., Cantoni C., Della I. et al. Transforming growth factor h1 inhibits expression of NKp30 and NKG2D receptors: consequences for the NK-mediated killing of dendritic cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. Vol. 100. P. 4120-4125.
13. Chen X., Subleski J.J., Kopf H. et al. Cutting edge: expression of TNFR2 defines a maximally suppressive subset of mouse CD4+CD25+FoxP3+ T regulatory cells: applicability to tumor-infiltrating T regulatory cells // J. Immunol. 2008. Vol. 180 (10). P. 6467-6471.
14. Chod J., ZavadovaE., HalaskaM.J. et al. Preoperative transforming growth factor-beta 1 (TGF-beta 1) plasma levels in operable breast cancer patients // Eur. J. Gynaecol. Oncol. 2008. Vol. 29 (6). P. 613-616.
15. Dales J.P., Garcia S., Bonnier P. et al. CD105 expression is a marker of high metastatic risk and poor outcome in breast carcinomas: Correlations between immunohistochemical analysis and long-term follow-up in a series of 929 patients // Am. J. Clin. Pathol. 2003. Vol. 119. P. 374-380.
16. DattoM.B., Hu P.P., Kowalik T.F. et al. The viral oncoprotein E1A blocks transforming growth factor beta-mediated induction of p21/ WAF1/Cip1 and p15/INK4B // Mol. Cell. Biol. 1997. Vol. 17. P. 2030-2037.
17. Decensi A., Torrisi R., Fontana V et al. Correlation between
plasma transforming growth factor-beta 1 and second primary breast cancer in a chemoprevention trial // Eur. J. Cancer. 1998. Vol. 34.
P. 999-1003.
18. Derynck R., Akhurst R.J., Balmain A. TGF-h signaling in tumor suppression and cancer progression // Nat. Genet. 2001. Vol. 29. P. 117-129.
19. DeshpandeP.L., KingI.L., SegalBM. Cutting edge: CNS CD11c+ cells from mice with encephalomyelitis polarize Th17 cells and support CD25+CD4+ T cell-mediated immunosuppression, suggesting dual roles in the disease process // J. Immunol. 2007. Vol. 178. P. 6695-6699.
20. Desruisseau S., Palmari J., Giusti C. et al. Determination of TGFb1 protein level in human primary breast cancers and its relationship with survival // Br. J. Cancer. 2006. Vol. 94. P. 239-246.
21. Dong M., How T., Kirkbride K. et al. The type III TGF-p receptor suppresses breast cancer progression // J. Clin. Invest. 2007. Vol. 117 (1). P. 206-217.
22. Dumont N., Arteaga C.L. Targeting the TGF beta signaling network in human neoplasia // Cancer Cell. 2003. Vol. 3. P. 531-536.
23. Dumont N., Bakin A.V., Arteaga C.L. Autocrine transforming growth factor-beta signaling mediates Smad-independent motility in human cancer cells // J. Biol. Chem. 2003. Vol. 278. P. 3275-3285.
24. Dunning A.M., Ellis P.D., McBride S. A transforming growth factorbeta1 signal peptide variant increases secretion in vitro and is associated with increased incidence of invasive breast cancer // Cancer Res. 2003. Vol. 63. P. 2610-2615.
25. Fink S.P., Swinler S.E., Lutterbaugh J.D. et al. Transforming growth factor-beta-induced growth inhibition in a Smad4 mutant colon adenoma cell line // Cancer Res. 2001. Vol. 61. P. 256-260.
26. Francis J.M., Heyworth CM., Spooncer E. et al. Transforming growth factor-beta 1 induces apoptosis independently of p53 and selectively reduces expression of Bcl-2 in multipotent hematopoietic cells // J. Biol. Chem. 2000. Vol. 275. P. 39137-39145.
27. Giatromanolaki A., Bates GJ., Koukourakis M.I. et al. The presence of tumor-infiltrating FOXP3+ lymphocytes correlates with in-tratumoral angiogenesis in endometrial cancer // Gynecol. Oncol. 2008. Vol. 110 (2). P. 216-221.
28. Gleizes P.E., Munger J.S., Nunes I. et al. TGF-beta latency: biological significance and mechanisms of activation // Stem. Cells. 1997. Vol. 15 (3). P. 190-197.
29. Goumans M.J., Valdimarsdottir G., Itoh S. et al. Activin receptorlike kinase (ALK)1 is an antagonistic mediator of lateral TGFbeta/ALK5 signaling // Mol. Cell. 2003. Vol. 12. P. 817-828.
30. Grainger D.J., Heathcote K., Chiano M. et al. Genetic control of the circulating concentration of transforming growth factor type b1// Hum. Mol. Genet. 1999. Vol. 8. P. 93-97.
31. Gupta S., Joshi K, Wig J.D., Arora S.K. Intratumoral FOXP3 expression in infiltrating breast carcinoma: Its association with clinicopathologic parameters and angiogenesis // Acta Oncol. 2007. Vol. 46 (6). P. 792-797.
32. Hagimoto N., Kuwano K., Inoshima I. et al. TGF-beta 1 as an enhancer of Fas-mediated apoptosis of lung epithelial cells // J. Immunol. 2002. Vol. 168. P. 6470-6478.
33. Hatsell S., Rowlands T.R., Hiremath M., Cowin P. The role of P-catenin and Tcfs in mammary development and neoplasia // J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 2003. Vol. 8. P. 145-158.
34. HocevarB.A., Brown T.L., HoweP.H. TGF-beta induces fibronec-tin synthesis through a c-Jun N-terminal kinase-dependent, Smad4-inde-pendent pathway // EMBO J. 1999. Vol. 18 (5). P. 1345-1356.
35. Iden S., Collard J.G. Crosstalk between small GTPases and polarity proteins in cell polarization // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2008. Vol. 9. P. 846-859.
36. Inman G.J., Allday M.J. Apoptosis induced by TGF-beta 1 in Burkitt’s lymphoma cells is caspase 8 dependent but is death receptor independent // J. Immunol. 2000. Vol. 165. P. 2500-2510.
37. Itoh S., Thorikay M., Kowanetz M. et al. Elucidation of Smad requirement in transforming growth factor-beta type I receptor-induced responses// J. Biol. Chem. 2003. Vol. 278. P. 3751-3761.
38. Ivanovic V., Todorovic-RakovicN., DemajoM. et al. Elevated
plasma levels of transforming growth factor-beta 1 (TGF-beta 1) in patients with advanced breast cancer: association with disease progression // Eur. J. Cancer. 2003. Vol. 39 (4). P. 454-461.
39. Janda E., Lehmann K., Killisch I. et al. Ras and TGFb cooperatively regulate epithelial cell plasticity and metastasis: dissection of Ras signaling pathways // J. Cell Biol. 2002. Vol. 156. P. 299-313.
40. Javelaud D., Mauviel A. Crosstalk mechanisms between the mitogen-activated protein kinase pathways and Smad signaling downstream of TGF-beta: implications for carcinogenesis // Oncogene. 2005. Vol. 24. P. 5742-5750.
41. Kondo M., Cubillo E., Tobiume K. et al. A role for Id in the regulation of TGF-b-induced epithelialmesenchymal transdifferentiation // Cell Death Differ. 2004. Vol. 11. P. 1092-1101.
42. Kopp A., Jonat W., Schmah M. et al. Transforming growth factor beta 2 (TGF-beta 2) levels in plasma of patients with metastatic breast cancer treated with tamoxifen // Cancer Res. 1995. Vol. 55. P. 4512-4515.
43. Kretzschmar M. Transforming growth factor-b and breast cancer. Transforming growth factor-b/SMAD signaling effects and cancer // Breast Cancer Res. 2000. Vol. 2. P. 107-115.
44. Kudo-Saito C., Shirako H., Takeuchi T., Kawakami Y. Cancer metastasis is accelerated through immunosuppression during Snail-induced EMT of cancer cells // Cancer Cell. 2009. Vol. 15. P. 195-206.
45. Larmonier N., Marron M., Zeng Y et al. Tumor-derived CD4(+)CD25(+) regulatory Tcell suppression of dendritic cell function involves TGF-h and IL-10 // Cancer Immunol. Immunother. 2007. Vol. 56. P. 48-59.
46. LebrinF., GoumansM.-J., Jonker L. et al. Endoglin promotes endothelial cell proliferation and TGF-b/ALK1 signal transduction // EMBO J. 2004. Vol. 23. P. 4018-4028.
47. Lee KM., Choi J.Y., Kang C. et al. Genetic polymorphisms of selected DNA repair genes, estrogen and progesterone receptor status, and breast cancer risk // Clin. Cancer Res. 2005. Vol. 11 (12). P. 4620-4626.
48. Li C., Wilson P.B., Levine E. et al. TGF beta1 levels in pretreatment plasma identify breast cancer patients at risk of developing postradiotherapy fibrosis // Int. J. Cancer. 1999. Vol. 84. P. 155-159.
49. Li H., Xu D., Toh B.-H., Liu G.-P. TGF-p and cancer: Is Smad3 a repressor of hTERT gene? // Cell Research. 2006. Vol. 16. P. 169-173.
50. Lin S.Y., Elledge SJ. Multiple tumor suppressor pathways negatively regulate telomerase // Cell. 2003. Vol. 113. P. 881-889.
51. LopezM., AguileraR., Perez C. et al. The role of regulatory T lymphocytes in the induced immune response mediated by biological vaccines // Immunobiology. 2006. Vol. 211. P 127-136.
52. Lopes N., Sousa B., Vieira D. el. al. Vessel density assessed by endoglin expression in breast carcinomas with different expression profiles// Histopathology. 2009. Vol. 55. P. 594-599.
53. Massague J., Seoane J., Wotton D. Smad transcription factors // Genes Dev. 2005. Vol. 19 (23). P. 2783-2810.
54. McKarns S.C., Schwartz R.H., Kaminski N.E. Smad3 is essential forTGF-h1to suppress IL-2 production and TCR-induced proliferation, but not IL-2-induced proliferation // J. Immunol. 2004. Vol. 172. P. 4275-4284.
55. Mempel T.R., PittetM.J., Khazaie K. et al. Regulatory Tcells reversibly suppress cytotoxicTcell function independent of effector differentiation // Immunity. 2006. Vol. 25. P. 129-141.
56. Miettinen P.J., Ebner R., Lopez A.R. et al. TGF-h induced transdifferentiation of mammary epithelial cells to mesenchymal cells: involvement of type I receptors // J. Cell Biol. 1994. Vol. 127. P. 2021-2036.
57. Minhajat R., Mori D., Yamasaki F. et al. Organ-specific en-doglin (CD105) expression in the angiogenesis of human cancers // Pathol. Int. 2006. Vol. 56. P. 717-723.
58. Miyazono K. Transforming growth factor-b signaling in epithelial-mesenchymal transition and progression of cancer // Proc. Jpn. Acad. Ser. 2009. Vol. 85. P. 314-323.
59. Motyl T., Grzelkowska K., Zimowska W. et al. Expression of bcl-2 and bax in TGF-beta 1-induced apoptosis of L1210 leukemic cells // Eur. J. Cell Biol. 1998. Vol. 75. P. 367-374.
60. Muraoka-CookR., Dumont N., Arteaga A. Dual role of transforming growth factor B in mammary tumorigenesis and metastatic progression // Clin. Cancer Res. 2005. Vol. 11. Suppl. P. 937-943.
61. Moustakas A., Heldin C.-H. Non-Smad TGF-beta signals // J. Cell Sci. 2005. Vol. 118. P. 3573-3584.
62. Moustakas A., Heldin C.-H. Signaling networks guiding epithelial-mesenchymal transitions during embryogenesis and cancer progression // Cancer Sci. 2007. Vol. 98. P. 1512-1520.
63. Ozdamar B., Bose R., Barrios-Rodiles M. et al. Regulation of the polarity protein Par6 by TGFbeta receptors controls epithelial cell plasticity // Science. 2005. Vol. 307. P. 1603-1609.
64. Papadopoulou E., Anagnostopoulos K., Tripsianis G. et al. Evaluation of predictive and prognostic significance of serum TGF-beta1 levels in breast cancer according to HER-2 codon 655 polymorphism // Neoplasma. 2008. Vol. 55 (3). P. 229-238.
65. ParkH.B. Acquisition of anergic and suppressive activities in transforming growth factor-beta-costimulated CD4+CD25- T cells// Int. Immunol. 2004. Vol. 16. P. 1203-1213.
66. Perlman R., Schiemann W.P., Brooks M.W. et al. TGF-beta-induced apoptosis is mediated by the adapter protein Daxx that facilitates JNK activation // Nature Cell Biol. 2001. Vol. 3. P. 708-714.
67. Reiss M., Barcellos-HoftM.H. Transforming growth factor-b in breast cancer: a working hypothesis // Breast Cancer Res. Treat. 1997. Vol. 45. P. 81-95.
68. Roberts R.A., James N.H., Cosulich S.C. The role of protein kinase B and mitogen-activated protein kinase in epidermal growth factor and tumor necrosis factor a-mediated rat hepatocyte survival and apoptosis // Hepatology. 2000. Vol. 31. P. 420-427.
69. Schiemann WP, Blobe G.C., Kalume D.E. et al. Context-specific effects of fibulin-5(DANCE/EVEC) on cell proliferation, motility, and invasion. Fibulin-5 is induced by transforming growth factor-beta and affects protein kinase cascades // J. Biol. Chem. 2002. Vol. 277. P. 27367-27377.
70. Shin A., Shu X.O., Cai Q. et al. Genetic polymorphisms of the transforming growth factor-beta1 gene and breast cancer risk: a possible dual role at different cancer stages // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2005. Vol. 14 (6). P. 1567-1570.
71. Shirakihara T., SaitohM.,MiyazonoK. Differential regulation of epithelial and mesenchymal markers by 5EF1 proteins in epithelial mesenchymal transition induced by TGF-b // Mol. Biol. Cell. 2007. Vol. 18. P. 3533-3544.
72. Stampfer M.R., Garbe J., Levine G. et al. Expression of the telomerase catalytic subunit, hTERT, induces resistance to transforming growth factor beta growth inhibition in p16 INK4A(-) human mammary epithelial cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. Vol. 98. P. 4498-4503.
73. ten Dijke P., Hill C.S. New insights into TGF-beta-Smad signalling // Trends Biochem. Sci. 2004. Vol. 29. P. 265-273.
74. Thiery J.P. Epithelial-mesenchymal transitions in tumour progression // Nat. Rev. Cancer. 2002. Vol. 2. P. 442^54.
75. Tobin S.W., Douville K., Benbow U. et al. Consequences of altered TGF-beta expression and responsiveness in breast cancer: Evidence for autocrine and paracrine effects // Oncogene. 2002. Vol. 21. P. 108-118.
76. Valcourt U., Kowanetz M., Niimi H. et al. TGF-b and the Smad signaling pathway support transcriptomic reprogramming during epithelial-mesenchymal cell transition // Mol. Biol. Cell. 2005. Vol.16. P. 1987-2002.
77. Van Aken E., De Wever O., Correia da Rocha A.S., Mareel M. Defective E-cadherin/catenin complexes in human cancer // Virchows Arch. 2001. Vol. 439. P. 725-751.
78. Vogelmann R., Nguyen-TatM.D., Gieh K. et al. TGFb induced downregulation of E-cadherin-based cellcell adhesion depends on PI3-kinase and PTEN // J. Cell Sci. 2005. Vol. 118. P. 4901-4912.
79. Wahl S.M., Wen J.,MoutsopoulosN. TGF-h: a mobile purveyor of immune privilege // Immunol. Rev. 2006. Vol. 213. P. 213-227.
80. Wolfraim L.A., Walz T.M., James Z. et al. p21Cip1and p27Kip1act in synergy to alter the sensitivity of naive T cells to TGF-h-mediated G1 arrest through modulation of IL-2 responsiveness // J. Immunol. 2004. Vol. 173 P. 3093-3102.
81. Yamamoto T., Kozawa O., Tanabe K. et al. Involvement of p38 MAP kinase in TGF-betastimulated VEGF synthesis in aortic smooth muscle cells // J. Cell Biochem. 2001. Vol. 82. P591-598.
82. Zhan L., Rosenberg A., Kenneth C. et al. Deregulation of scribble promotes mammary tumorigenesis and reveals a role for cell polarity in carcinoma // Cell. 2008. Vol. 135. P. 865-878.
Поступила 6.09.10
