CC BY
3
118
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
дальнейшие исследования для изучения влияния трега-лозы на функциональную активность ДН. Мы благодарим Центр высокоточного редактирования и генетических технологий для биомедицины ФНКЦ ФХМ ФМБА за предоставление ресурсов для этого проекта.
Литература:
1. Plowey E.D. et al. J. of Neunochemistny. 2008. V. 105. № 3. P. 1048.
2. Wang X. et al. Human Molecular Genetics. 2012. V. 21. № 9. P. 1931.
3. Singh F. et al. Elife. 2021. V. 10. P. e67604.
4. Yue M. et al. Neurobiology of Disease. 2015. V. 78. P. 172.
5. Wang Y. et al. Neurotoxicity Research. 2018. V. 34. № 1. P. 109.
РОЛЬ РЕЦЕПТОРА ЭПИДЕРМАЛЬНОГО РОСТА И ЕГО ЛИГАНДОВ В РЕГУЛЯЦИИ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ ЭНДОМЕТРИАЛЬНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА
Е.С. Корнилова1, 2, М.В. Харченко1, Р.С. Каменцева1
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: эндометриальные мезенхимные стро-мальные клетки, рецептор эпидермального фактора роста, лиганды, эндоцитоз, пролиферация, дифференцировка.
В последние годы существенный прогресс был достигнут в выявлении специфических механизмов регуляции жизнедеятельности меземхимных стволовых клеток, однако участие в функционировании МСК сигнальных систем, традиционно считающихся типичными для нестволовых клеток организма, практически не изучены. К таким системам относится тирозинкиназный рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) и его лиганды. Интересно, что трансформированный статус линий, полученных из карцином, связывают с оверэк-спрессией EGFR, тогда как по нашим данным уровень EGFR в стромальных клетках эндометрия человека (энМСК), также как и в МСК другого тканевого происхождения, сравним с таковым в клетках линий HeLa и А549, при сохранении «нормальности» энМСК. Очевидно, сравнительный анализ функционирования EGFR-зависимой системы в МСК и опухолевых клетках представляется весьма актуальным.
Сигнальная функция EGFR определяется активацией тирозинкиназы рецептора при формировании комплексов с его лигандами. К настоящему времени известно 7 лигандов, различающихся по аффинности к рецептору и сигнальным ответам, что позволяет осуществлять тонкую настройку системы в зависимости от контекста. Считается, что связывание лиганда с рецептором на плазматической мембране приводит к активации сигнальных каскадов и интернализации лиганд-рецептора в эндосо-мы. Мы обнаружили существенные отличия в организации эндоцитозного аппарата, динамики эндоцитоза и продукции перекиси водорода в энМСК по сравнению с HeLa под действием высокоаффинных лигандов EGF и TGF-a. Существенно, что в энМСК, в отличие от HeLa, уровень рецептора после его деградации в лизосомах не восстанавливается после удаления лигандов из среды. Показано, что EGF и TGF-a стимулируют пролиферацию энМСК, но не HeLa, в то время как низкоафинный лиганд AREG
не интернализуется в клетках обоих типов, оказывая ми-тогенный эффект только на Не1_а. Анализ влияния лигандов БЭРП на децидуальную дифференцировку энМСК показал, что БЭР и ТЭР-а, но не АПБЭ, подавляют этот процесс БЭРП-зависимым образом. Мы предполагаем, что сигнальная система рецептора БЭР и его лигандов может быть вовлечена в координацию фаз цикла, в частности, за счет контроля уровня и рецептора, и его лигандов как с помощью эндоцитоза, так и синтеза этих белков. Обсуждаются возможные механизмы «диалога» лигандов к рецептору и причины различий в ответах энМСК и трансформированных клеток. Работа частично финансировалась за счет средств гранта РФФИ № 20-04-00927.
МАЛАЯ СУБПОПУЛЯЦИЯ КЛЕТОК, НЕСУЩИХ НА ПОВЕРХНОСТИ ИНСУЛИНОВЫЙ РЕЦЕПТОР, РЕГУЛИРУЮТ АДИПОГЕННУЮ ДИФФЕРЕНЦИРОВКУ
Е.Р. Корчагина, Н.С. Волошин, К.Ю. Кулебякин
Кафедра биохимии и молекулярной медицины, Факультет фундаментальной медицины, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: МСК, адипогенез, инсулиновый рецептор, инсулинорезистентность.
В последнее время появляется все больше данных об особых функциональных популяциях жировой ткани, которые обнаруживаются как среди предшественников адипоцитов — в мезенхимных стволовых клетках (МСК) [1], так и среди зрелых клеток жировой ткани, в которой существует минимум 3 различных функциональных популяции клеток [2]. В ходе наших работ было показано наличие в первичной культуре МСК жировой ткани малой субпопуляции клеток, несущих на поверхности ин-сулиновый рецептор, и их возможное регуляторное влияние на адипогенную дифференцировку культуры. Для изучения данного явления была выбрана модель нарушения функции — первичная культура МСК жировой ткани доноров с подтверждённой инсулинорезистентностью.
Первичные культуры подвергали иммунохимическо-му окрашиванию антителами к внеклеточному домену инсулинового рецептора и выделяли малую субпопуляцию методом проточной цитометрии. Далее проводили адипогенную дифференцировку в присутствии инсулина в условиях неконтактного сокультивирования малой субпопуляции с обеднённой данными клетками. Оценка диф-ференцировки проводилась при помощи определения транскриптов PPARy и AdipoQ (RealTime PCR) и флуоресцентной микроскопии с окрашиванием NileRed и DAPI.
При выделении малой субпопуляции обнаружилось, что содержание данных клеток у здоровых и инсулинре-зистентных доноров различается (5-12% и 0-3,5% соответственно). Малая субпопуляция не отвечает на ади-погенную дифференцировку, в то время как обеднённая популяция дифференцируется менее интенсивно, чем интактная. При неконтактном сокультивировании обнаруживается усиление дифференцировки обеднённой субпопуляции, полученной из здоровой ткани. Усиление дифференцировки происходит как в случае сокульти-вирования с малой субпопуляцией того же происхождения, так и с выделенной из инсулинорезистентной ткани. Одновременно с этим, инсулинрезистентная обеднённая субпопуляция не показывает усиления дифференцировки
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
