CC BY
15
3. В качестве одного из методов глубокой доочистки стоков может быть рекомендовано их озонирование. Озонированием можно добиться полной ликвидации некоторых веществ (метанол, ацетон, фенол) в сбрасываемом стоке,.а других (бромирующиеся, эфирораствори-мые) значительного снижения.
4. Эффективность деканцерогенизации сточных вод при озонировании колеблется от 95,2 до 100%. Она зависит от времени озонирования, исходной концентрации озона в озо-но-воздушной смеси и рН озонируемых стоков.
ЛИТЕРАТУРА. Кандзас П. Ф., Мокина А. А. Водоснабж. и сан. техника, 1973, № 3, с. 7.— Ливко В. А., Велущак С. И., Плысюк А. А. Хим. пром., 1972, № 3, с. 168.— Ш к о д и ч П. Е., Грачева М. П., Тихомиров Ю. П. и др. Гиг. и сан., 1972, № 4, с. 107.
Поступила 24/1V 1974 г.
УДК 616.931.553-022.39:598.2
К. И. Матвеев, Н. Д. Константинова
РОЛЬ ПЕРЕЛЕТНЫХ ПТИЦ В РАСПРОСТРАНЕНИИ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ БОТУЛИЗМА
Институт эпидемиологии и микробиологии им, Н. Ф. Гамалеи АМН СССР,_ Москва
Эпизоотии среди диких птиц в США, Канаде, Уругвае и других районах Америки в 1920—1936 гг. принимали большие размеры. При изучении массовой гибели перелетных птиц во время этих эпизоотий установлено, что возбудителем их является CI. botulinum типа С. Этот микроб выделен из организма здоровых, больных и павших птиц. CI. botulinum типа С и его токсин обнаружены также в воде, в остатках водорослей, на опавших семенах растений, в грязи, личинках мух, найденных на трупах птиц в болотах Большого Соленого озера в Калифорнии (Wetmore, 1915, 1918, 1919; Gliltner и Couch; Shaw и Simpson, 1936).
Описано около 36 видов птиц, чувствительных к ботулизму. В природе наблюдалась гибель от него различных пород уток, белого пеликана, черно-коронной цапли, канадских гусей, зеленокрылого чижика, синекрылого и коричневого чирка, чайки и др. С декабря 1960 г. по март 1971 г. в одном из районов на западе Австралии в озерах и реках зарегистрирована массовая эпизоотия среди многочисленных видов диких птиц. Бактериологически обследовано 592 трупа, принадлежащих к различным видам птиц, в них обнаружен CI. botulinum типа С и его токсин (Grubb). Результаты исследований Т. И. Булатовой и К- И. Матвеева указывают на довольно высокий процент обсемененности CI. botulinum типа С прибрежной почвы озера Балхаш, где в зарослях тростника водится много диких уток.
Для изучения роли перелетных птиц в распространении возбудителя ботулизма нами было проведено исследование 171 образца почвы с пометом с птичьих базаров островов Баренцева моря. Пробы взяты с 22 по 24 нюня 1970 г. на птичьих базарах в следующих точках: пробы с 1-й по 74-ю — широта 69°44'2", долгота 32°08'8", с 75-й по ¡27-ю — широта 69°22'6", долгота 32°21', со 128-й по 171-ю —широта 69°16', долгота 32°20'.
В это время года в указанных районах проживают кайры, гагары, тупики, кулики, плавунчики, чайки-маевки, гаги, чистики и др. Эти птицы зимуют у побережий Северной Америки в районе Ньюфаундленда и Гренландии (А. В. Михеев). Кроме того, некоторые из них летят вдоль берегов Ботнического, Финского и Рижского заливов Балтийского моря для зимовки у побережий Франции и Африки.
Для посева почву с пометом в количестве 15—20 г высыпали в фарфоровую ступку и растирали с 20 мл физиологического раствора. Суспензию почвы в количестве 7—8 мл засевали во флаконы, содержащие 70 мл среды Хоттингера с кусочками печени под вазелином; pH 7,4—7,6. Перед посевом среду регенерировали и добавляли 0,5% раствор глюкозы. При исследовании на CI. botulinum типов А, В и С суспензию почвы с пометом предварительно прогревали при 80° в течение 30 мин, а затем засевали во флаконы с питательной средой. При исследовании на CI. botulinum типов Е и F суспензию не прогревали, так как споры типа Е и F при прогревании при 80° могли погибнуть. Посевы инкубировали при 35°, проводя исследования на CI. botulinum А, В и С, и при 28°, проводя исследование на CI. botulinum Е и F, в течение 4—6 дней. Кроме того, для выявления CI. botulinum типов Е и F посевы активировали 0,1% трипсином, который добавляли в среду после регенерации.
Культуральную жидкость посевов исследовали на наличие токсина с помощью реакции нейтрализации на белых мышах с диагностическими противоботулиническими сыворотками типов А, В, С, Е и F. В случае положительной реакции с поливалентной противо-ботулинической сывороткой ставили реакцию нейтрализации токсина моновалентнон сывороткой.
После установления в исследуемых посевах типа CI. botulinum методом реакции нейтрализации на белых мышах и обнаружения типичных палочек возбудителей ботулизма при
э;
Характеристика культур CI. botulinum, выделенных из почвы с пометом с птичьих базаров
Тип CI. botulinum Количество токсигенных культур Активность токсина (в ß/m/мл) в исходных культурах Число культур, в которых сохранился токсин через год Число культур, выделенных через год из ранее нетоксигенных
абс. %
A В С A+C D E F 7 3 8 3 1 33 3 12 5,2 13.8 5.2 1.7 56.9 5.2 4—100 000 40—2 000 10—20 4—20 20 4—400 4—10 1 (20 01 т/мл) 1 (2 000 01т/мл) 2 (4 01т/мл) 2 (4 01т/мл) 3 (10—40 01т/мл) 3 (4—10 Dlm/мл) 2 (40 Dlm/мл) 1 (20 Dlm/мл) 2 (4—10 Dlm/мл) 4 (4—10 Dlm/мл)
Всего 58 100 9 12
микроскопии проводили выделение чистой культуры. Для этого брали 2 капли первичной суточной культуры и засевали на чашку Петри с 1,5% агаром на бульоне Хоттингера. Культуру тщательно втирали шпателем в среду, затем шпатель переносили поочередно на 2, 3 и 4-ю чашки с агаром, где культуру также тщательно втирали в среду. Выращивание проводили в микроанаэростате при 35° для типов С1. botulinum А, В, С и при- 28° для типов Е и F в течение 2—3 сут с удалением воздуха и адсорбированием остатка кислорода после создания вакуума с помощью смеси 10 г пирогаллола с 10% раствором NaOH.
Из 171 образца почвы с пометом, взятого с птичьих базаров островов Баренцева моря, выделено 58 токсигенных культур возбудителей ботулизма всех типов (процент обсеменен-ности 33,9). Обнаружено 7 культур типа А (12%), по 3 культуры типов В и Е (по 5,2%), 8 культур типа С (13,8%), 1 культура типа D (1,7%) и 33 культуры типа Е (56,9%). Активность токсина исходных культур для белых мышей была: тип А — от 8 до 80 Dlm/мл, тип В — 80 Dim/мл, тип С — от 10 до 40 Dlm/мл, тип D — 20 Dlm/мл и тип Е — от 4 до 100 Dlm/мл.
Через год из 58 исходных культур сохранили токсин только 10: тип А — 1, тип В — 1, тип С — 2 и тип Е — 4.
При повторном посеве почвы с пометом на среду Хоттингера обнаружен токсин через год в ранее нетоксигенных культурах: тип А — 3 (от 4 до 10 Dlm/мл), тип В — 2 (по 40 Dlm/мл), тип С — 1 (20 Dlm/мл), тип Е — 2 (4 и 20 Dlm/мл) и тип F — 4 (от 4 до 10 Dlm/мл). Чистые культуры выделены через год: тип А — 1 штамм (№ 26 А) с активностью токсина 5000 Dlm/мл, тип В — 2 (№ 60 В — 500 Dlm/мл и № 4 В — 15 Dlm/мл), тип С — 2 (№ 107 С — 15 Dlm/мл и № 167 С — 500 Dlm/мл), тип Е — 4 (№ 153 Е — 15 Dlm/мл и № 93 Е — 500 Dlm/мл, 2 остальных — по 4 Dlm/мл), тип F — 2 штамма (№ 139—100 Dlm/кл, № 110—1Q0 Dlm/мл).
Выделенные чистые культуры проверены на сахаролитические свойства, для чего взяты следующие сахара: галактоза, глицерин, глюкоза, дульцит, инулин, мальтоза, маннит, лактоза, рамноза, сахароза и сорбит. С1. botulinum типов А, В, С и Е разлагали с образованием кислоты и газа глицерин, глюкозу, маг.ьтозу, и ряд других Сахаров, С1. botulinum типа F в отличие от них не разлагал глицерина, мальтозы, лактозы, рамнозы, сахарозы, и сорбита.
На поверхности среды, приготовленной на бульоне Хоттингера с 1,5% агара, вырастали различные по форме колонии, которые рассматривались в стереоскопическом микроскопе МБС-2.
Таким образом, в исследованных нами пробах почвы с пометом с птичьих базаров обнаружено присутствие всех типов возбудителей ботулизма (см. таблицу). Это может служить доказательством того, что перелетные птицы содержат бактерии ботулизма в своем кишечнике. Из природных очагов птицы во время перелета могут переносить в кишечнике возбудителей ботулизма по пути следования, обсеменяя воду и почву рек и болот в местах остановок для отдыха и кормления, и способствовать распространению возбудителей ботулизма на Земном шаре.
Токсигенность выделенных нами штаммов была невысокая и весьма лабильная. Одни штаммы Gl. botulinum при культивировании на обычных питательных средах теряли токсигенность через 6—12 мес, другие сохраняли значительную токсигенность (100—■ 10 000 Dlm/мл) в течение года.
ЛИТЕРАТУРА. Булатова Т. И., Матвеев К. И., Каздо-бина И. С. Гиг. и сан., 1969, № 11, с. 114.— G ¡1 tner L. Т., Couch J. Т., Science, 1930, v. 72, p. 660,—G г ubi W. В., Aust. J. exp. Biol. med. Sei., 1964, v. 42, p. 17,—Sham R., Simpson G., J. Bact., 1936, v. 32, p. 79.
Поступила 4/1 1974 r.
