CC BY
24
чали содержание адреналина, норадреналина, дофамина и серотонина в крови крыс иммунофер-ментным методом. Профилактически-лечебное введение соединения Э-38 в дозе 12 мг/кг внутрь повышало содержание норадреналина и серотонина в крови. Такие изменения моноаминов достоверно отражают их количество в ЦНС, поэтому можно утверждать, что соединение уменьшает проявления нейромедиаторного дисбаланса при депрессивноподобном состоянии.
Summary
INFLUENCE OF ETHYL ESTER 4-[2- HYDROXY-2-(2-OXO-1,2-DIHYDRO-3-ILIDEN)-ACETAMINO]-BUTIRIC ACID ON THE LEVEL OF SERUM MONOAMINES IN CHRONIC MODERATE STRESS
Lutsenko R.V., Bobyrev V.N., Vesnina L.E., Sydorenko A.G., Devyatkina T.A. Mykytyuk M.V. Key words: a 2-oxoindolin, chronic moderate stress, monoamines.
Versatility of the mechanisms of depressive disorders determined the necessity of the development of new effective anti-depressants that are able to correct the numerous links in the pathogenesis of depression. Objective: to investigate the effect of ethyl 4-[2-hydroxy-2-(2-oxo-1,2-dihydro-3-iliden)-acetamino]-butiric acid (compound E-38) on monoamines levels in rat blood after the simulation of chronic moderate stress on 32 white sexually mature Wistar rats weighing 180-230 g. Under the conditions of chronic moderate stress we studied the contents of adrenaline, noradrenaline, dopamine and serotonin in the rats' blood by ELISA. Preventive and therapeutic administration of compound E-38 at a dose of 12 mg / kg increased the content of serotonin and norepinephrine in the blood. Such changes of monoamines faithfully reflect their number in the central nervous system, therefore it can be argued the compound reduces the manifestation of neurotransmitter imbalance in depressions.
УДК 616.316-001-092.9:547.271 Нагорняк 1.В., Костенко В.О.
РОЛЬ NO-СИНТАЗ ТА ÏX СУБСТРАТУ У МЕХАН1ЗМАХ ПОРУШЕНЬ В1ЛЬНОРАДИКАЛЬНИХ ПРОЦЕС1В ТА ФУНКЦ1Й СЛИННИХ ЗАЛОЗ ЩУР1В ЗА УМОВ ДП МЕТИЛОВОГО ЕФ1РУ МЕТАКРИЛОВОÏ КИСЛОТИ
ВДНЗУ «Укра'шська медична стоматолопчна акаде1^я», м. Полтава
У експеримент1 на 50 блих щурах досл'джено вплив ¡Hai6imopie та субстрату NO-синтаз (NOS) на стан вльнорадикальних процес'т i блоксинтезуючу функцю пднижньощелепних слинних залоз (СЗ) за умов 30-денноУ апл'кацИ 1 % розчину метилового еф'ру метакриловоУ кислоти на слизову оболо-нку порожнини рота. Показано, що введення за умов експерименту селективного ¡нг1б1тора нейро-нально'У NOS 7-н1тро1ндазолу супроводжуеться порушенням б'токсинтезуючо'У функцИ СЗ, г1перпро-дукц1ею у тканинах супероксидного анон-радикала НАДН-залежним (м1тохондр1альним) електро-нно-транспортним ланцюгом, активац1ею пероксидного окиснення лШд'т (ПОЛ) без ¡стотного впливу на активностi антиоксидантних фермент1в - супероксиддисмутази та каталази. Призна-чення селективного ¡нг1б1тора ¡ндуцибельно'У NOS ам'ногуан'дину збльшуе активнсть ферменту неокисного (аргназного) шляху метабол'зму L-аргiнiну - орнтиндекарбоксилази у СЗ, покращуе Ух-ню блоксинтезуючу функцю, обмежуе продукц1ю у них супероксидного анон-радикала (НадФн- i НАДН-залежними електронно-транспортними ланцюгами) та ПОЛ, пдвищуе антиоксидантний потенц1ал. Введення тваринам L-аргiнiну за умов експеримента суттево не впливае на активнсть NOS, орнтиндекарбоксилази та блоксинтезуючу функцю СЗ, обмежуе у них вироблення супероксидного анон-радикала (НАДФН-залежними електронно-транспортними ланцюгами) та пОл, пд-вищуе антиоксидантний потенц1ал без ¡стотного впливу на активнсть супероксиддисмутази та каталази.
Ключов1 слова/ метиловий эф1р метакриловоУ кислоти, оксид азоту, NO-синтази, L-apriHiH, супероксидний анюн-радикал, пероксидне окиснення лт^в, слинн залози.
Робота е фрагментом НДР «Роль активних форм кисню, системи оксиду азоту та транскрипцЮних фактор1в у механ1змах патолог1чного системогенезу» (№ держреестрацп 0114U004941).
Для виготовлення зшмних конструкцш зубних npoTe3iB використовують метиловий еф1р мета-крилово''' кислоти, ктькють якого у пластмаа у втьному стан становить 5-8 % [6]. Вплив ^eï сполуки на функцш слинних залоз (СЗ) e бага-тофакторним та, в першу чергу, призводить до рiзкого зниження рiвня 'хньо''' секрецп [1,6,8].
Вщомо, що у патогенезi уражень Сз за умов мехаычного пошкодження та штоксикацш важ-ливу роль в^грае цитотоксична дiя надлишково''' кшькосп оксиду азоту (NO). Структури СЗ ви-
явилися досить чутливими до дефщиту або надлишку NO, що утворюеться за участю рiзних iзоформ NO-синтаз (NOS), штритредуктаз, не-ферментативних реакцш вщновлення штрит-йошв [3].
У той же час ендогенний NO бере участь у забезпеченн процесу секрецп слини, регуляцп кровопостачання Сз, нейротрансмiсiï, утворенн пстогематичного бар'еру, впливае на пролiфе-рацш та диференцшвання гландулоцтчв [11,18].
Актуальш проблеми сучасно'1 медицини
Проте роль iзоформ NO-синтаз у MexaHi3Max порушень окиснювальних процесiв i функцiй великих СЗ при вивтьненш метилового ефiру ме-такрилово1 кислоти i3 ортопедичних конструкцiй залишаеться нез'ясованою.
Метою роботи було вивчення впливу шпбп"о-рiв та субстрату NOS на стан втьнорадикальних процесiв i бтоксинтезуючу функцiю пщнижньо-щелепних СЗ щурiв за умов тривалоГ аплкацп 1 % розчину метилового ефiру метакрилово'Г кислоти на слизову оболонку порожнини рота.
Матерiали та методи дослщження
Дослiдження були проведенi на 50 бiлих щу-рах-самцях лжи Вютар масою 180-220 г у 5-ти серiях дослiдiв: у першш необхiднi показники ви-вчали у штактних тварин (контрольна серiя), у другш - пiсля 30-денно1 аплкацп 1% розчину метилового ефiру метакрилово'Г кислоти на слизову оболонку порожнини рота, у третш, четвер-тiй i п'ятiй - поряд з аплка^ею 1% розчину метилового ефiру метакрилово1 кислоти на слизову оболонку порожнини рота (протягом 30 дiб) тваринам вводили вщповщно селективний шпбн тор нейронально'Г NO-синтази (nNOS) - 7-штрошдазол (7-NI), селективний iнгiбiтор шдуци-бельно'Г NO-синтази (iNOS) - амiногуанiдин та субстрат NO-синтазноï реакцп - L-арпнш.
Зазначенi вище сполуки вводили 2 рази на тиждень протягом часу вщтворення дисфункцiï СЗ: 7-NI - 30 мг/кг [13], амшогуанщин - 20 мг/кг [17], L-арпнш - 500 мг/кг [2]. Для дослщження пщ ефiрним наркозом вилучали пщнижньощелепш СЗ у комплексi з великими пщ'язиковими. Останнi вiдсепаровували, пiсля чого не, виводя-чи тварин з наркозу, проводили евтаназш тварин методом дислокацп шийних хребцiв.
Активнють ферменту окисного шляху мета-болiзму L-аргiнiну - NOS - визначали за рiзни-
цею концентрацiï ытрит-йошв (NO2 ) до та пюля
iнкубацiï гомогенату пiднижньощелепних СЗ у середовищ^ що мiстить L-арпнш та НАДФН [12]. Активнiсть ферменту неокисного (аргшазного) шляху метаболiзму L-аргшшу - орытиндекарбо-ксилази (ОДК) - визначали за зниженням вмюту орштину в iнкубацiйному середовищi [9].
Утворення супероксидного анюн-радикала
(О2 ) у тканинах пщнижньощелепних СЗ оцшю-вали при проведеннi тесту з ытросишм тетразо-лiем з такими шдукторами: НАДН - для оцшки
продукцiï О2 мiтохондрiальним електронно-транспортним ланцюгом (ЕТЛ); НАДФН - для
оцшки продукци О2 мiкросомальним ЕТЛ та NOS [10]. Рiвень пероксидного окиснення лiпiдiв (ПОЛ) у тканинах оцшювали за утворенням у реакцп тiобарбiтуровоï кислоти (ТБК) з ТБК-активними продуктами забарвленого триметшо-вого комплексу [4]. Стан антиоксидантно!' (АО) системи оцiнювали за приростом концентрацп ТБК-активних продуктiв за час шкубаци, а також за активнютю АО ферментiв - супероксиддисму-тази (СОД) та каталази [4]. Активнють а-амтази визначали за методикою Каравея за допомогою набору реактивiв фiрми «Ф^ат^агностика». Отриманi данi обробляли варiацiйно-статистичним методом з використанням крите-рiю Ст'юдента.
Результати дослщження та ïx обговорення
При внесеннi селективного iнгiбiтора nNOS 7-NI за умов тривало1 аплiкацiï 1% розчину метилового ефiру метакрилово1 кислоти на слизову оболонку порожнини рота активнють NOS i кон-
центра^я NО2 у тканинах СЗ зменшуються -вiдповiдно на 15,9% (p<0,05) та 23,7% (p<0,01) у порiвняннi з даними друго1 серiï (табл. 1).
Таблиця 1
Вплив ÎHai6imopie та субстрату NOS на показники системи NO та бтоксинтезуючоГ функцп СЗ за умов 30-денноГ аплкаци 1% розчину метилового еф'ру метакриловоТ кислоти на слизову оболонку порожнини рота (M+m, n=25)
Показники 1нтактш тварини Аплiкацiя 1% розчину метилового ефiру метакриловоТ кислоти
Контроль + 7-NI + амшогуанщин + L-арпнш
NOS, мкмоль NÛ 2 /гхв. 4,25±0,24 9,02±0,42 * 7,59±0,32 */** 3,78±0,40 ** 8,57±0,53 *
Вмют NÛ 2 , мкмоль/г 0,119±0,011 0,160±0,006 * 0,122±0,007 ** 0,082±0,005 */** 0,110±0,007 **
ОДК, нмоль/гхв. 264,9±14,5 200,0±12,8 * 259,6±28,6 277,2±19,1 ** 226,3±23,0
а-Амтаза, мг/ч х г 75,8±1,8 58,6±1,5 * 47,3±2,0 */** 66,5±1,0 */** 61,4±2,6 *
Примiтка (у табл. 1-2): * - р<0,05 у порiвняннi з даними Штаi
Нейрональна NOS в^фграе важливу роль у секрецп СЗ бтш i, зокрема, а-амтази через NO/цГМФ-залежний сигнальний шлях [16].
Дшсно, за нашими даними, при застосуванн за умов експерименту 7-NI активнють а-амтази знижуеться - на 19,3% (p<0,01) у порiвняннi з даними друго1 серп. У той же час, введення 7-NI за умов експерименту вiрогiдно не впливае на активнють ОДК у порiвняннi з даними друго1 серп.
<■ щурв, ** - р<0,05 у порiвняннi з даними друаоТ серИ
Застосування селективного шпбтора iNOS амшогуанщину за умов аплкаци 1% розчину метилового ефiру метакрилово1 кислоти на слизову оболонку порожнини рота зменшуе активнють
NOS i концентрацш NО2 у тканинах СЗ - вщповщно на 58,1% (p<0,001) та 48,7% (p<0,001) у порiвняннi з даними друго1 серп. Активнють ОДК за цих умов, навпаки, збтьшуеться - на 38,6% (p<0,01).
ОДК е ферментом конкурентного щодо NOS неокисного (аргшазного) шляху метаболiзму L-аргшшу, мае ключове значення у механiзмi синтезу полiамiнiв, якi регулюють процеси реплiкацiï та транскрипцп ДНК, бiосинтезу бiлкiв i пролiфе-рацiï клiтин [14]. За даними л^ератури, неокис-ний (аргшазний) шлях конкуруе з nOs за субстрат, тобто може обмежувати продукцш No [19].
Примiтно, що при введены амшогуанщину за умов експерименту пщвищуеться активнiсть а-амтази - на 13,5% (p<0,01) у порiвняннi з даними другоТ серiï, що свiдчить про покращення 6i-локсинтезуючоТ' функцiï СЗ.
Введення L-аргшшу достовiрно не впливае на
Таблиця 2
Вплив ÎHai6imopie та субстрату NOS на показники ПОЛ та антиоксидантного захисту за умов 30-денноГ аплкаци 1% розчи-
ну метилового ефiру метакриловоТ кислоти на слизову оболонку порожнини рота (M+m, n=25)
активносп NOS, ОДК та а-амтази, проте на 31,2% (p<0,01) зменшуе вмют штрит-йошв, що, вочевидь, свщчить про ефективну авторегуляцш рiвня NO в органiзмi при функцюнуванш "циклу оксиду азоту" [7].
Введення щурам 7-NI за умов аплкаци 1% розчину метилового ефiру метакриловоТ кислоти на слизову оболонку порожнини рота ютотно не
впливае на генерацш О 2 НАДФН-залежними ЕТЛ (табл. 2), але пщвищуе його вироблення НАДН-залежним (мiтохондрiальним) ЕТЛ - на 15,8% (p<0,01) у порiвняннi з даними другоТ серп.
Показники 1нтактш тварини Аплка^я 1% розчину метилового ефiру метакриловоТ кислоти
Контроль + 7-NI + амiногуанiдин + L-арпнш
Продукф О 2 , нмоль/г с НАДФН-залежними ЕТЛ НАДН-залежними ЕТЛ 14,8±0,44 16,13±0,39 23,07±1,26 * 28,8±0,68 * 24,4±0,62 * 33,34±0,60*/** 16,67±0,73 ** 19,2±0,49 */** 19,87±0,44 */** 28,27±1,05 *
Концентрацiя ТБК-реактантiв, мкмоль/кг 25,96±0,90 40,38±0,90 * 46,63±1,23 */** 34,62±1,23 */** 36,06±0,76 */**
Прирют концентрацп' ТБК-реактантiв , мкмоль/кг 9,62±1,52 19,23±2,01 * 18,27±1,44 * 9,62±1,07 ** 10,58±1,44 **
СОД, од. акт. 0,29±0,03 0,14±0,02 * 0,17±0,04 * 0,27±0,03 ** 0,24±0,04
Каталаза, мккатал/кг 2,79±0,18 1,8±0,16 * 1,67±0,24 * 2,55±0,15 ** 2,07±0,21 *
Застосування амiногуанiдину за умов експерименту знижуе продукцiю О 2 НАДФН i НАДН-залежними ЕТЛ - вщповщно на 27,7% (p<0,01) та 33,3% (p<0,001) у порiвняннi з даними другоТ серiï.
Обмеження продукцп цieï активно!' форми ки-сню НАДФН-залежними (мiкросомальним та NOS) i НАДН-залежним (мiтохондрiальним) ЕТЛ при дм амiногуанiдину вiдображуe здатнiсть ци-тотоксичноТ' кiлькостi NO, що виробляеться iNOS, порушувати у клiтинах функцюнування цих ланцюгiв (iнактивувати НАДН- та НАДФН-залежнi оксидоредуктази, руйнувати FeS-кластери) [15]. У той же час з функцюнуванням nNOS, очевидно, пов'язано вироблення NO, що виявляе сигнальн властивост [3].
Введення L-арпншу за умов експерименту ю-
тотно не впливае на генерацш О2 НАДН-залежним (мiтохондрiальним) ЕТЛ, але знижуе його вироблення НАДФН-залежними ЕТЛ - на 13,9% (p<0,05) у порiвняннi з даними другоТ серп.
Застосування 7-NI за умов аплкаци 1% розчину метилового ефiру метакриловоТ кислоти на слизову оболонку порожнини рота пщвищуе концентрацш ТБК-активних продук^в - на 15,5% (p<0,01), що вказуе на активацш ПОЛ у тканинах СЗ. Проте прирют концентрацiï цих сполук за час 1,5-годинноТ' iнкубацiï у залiзоаскорбатному буферному розчинi та величини активност СОД i каталази суттево не змшюються.
Введення щурам амшогуанщину за умов експерименту зменшуе концентрацш ТБК-активних продук^в - на 14,3% (p<0,01). Величина приросту концентрацп цих сполук за час 1,5-годинноТ шкубацп у залiзоаскорбатному буферному роз-чинi - знижуеться на 50,0% (p<0,0l) у порiвняннi з даними другоТ серiТ. Це вказуе на здатнють селективного шпбтора iNOS обмежувати знижен-ня АО потен^алу, що пiдтверджуеться пщви-щенням у тканинах активност АО фермен^в. Так, активнiсть СОД i каталази збтьшуеться -вiдповiдно на 92,9% (p<0,01) та 41,7% (p<0,01) у порiвняннi з даними другоТ сери.
Вщомо, що NO здатний взаемодiяти з йонами мiдi активного центру СОД та блокувати йони залiза в активному центрi каталази [15].
Введення L-аргiнiну за умов експерименту також зменшуе концентрацш ТБК-активних про-дуктiв та Тх прирiст за час шкубацп - вiдповiдно на 10,7% (p<0,01) та 45,0% (p<0,01) у порiвняннi з даними другоТ серп.
У модельних системах L-аргшш пригшчуе за умов гiпоксiТ утворення активних форм кисню, зменшуе вмют продук^в ПОЛ in vitro i in vivo [5]. Показана роль nNOS у продукцп NO з сигналь-ними властивостями, спрямованими на обмеження ПОЛ та пщсилення антиоксидантного потен^алу тканин за умов мехашчного та токсичного ураження СЗ [3].
Висновки
1. Селективне пригшчення nNOS за умов тривалоТ аплкаци 1% розчину метилового ефiру
Актуальш проблеми сучасноТ медицини
метакриловоТ кислоти на слизову оболонку порожнини рота супроводжуеться порушенням 6i-локсинтезуючоТ функцп пiднижньощелепних слинних залоз, пперпродук^ею у тканинах супероксидного анюн-радикала НАДН-залежним (мн тохондрiальним) електронно-транспортним лан-цюгом, активацiею пероксидного окиснення лть дiв без iстотного впливу на активнють антиокси-дантних ферментiв - супероксиддисмутази та каталази.
2. Селективне пригшчення iNOS за умов експерименту збтьшуе активнють ферменту неоки-сного (аргшазного) шляху метаболiзму L-аргшшу - орнiтиндекарбоксилази у пiднижньощелепних слинних залозах, покращуе Тх бiлоксинтезуючу функцш, обмежуе продукцiю у них супероксидного анюн-радикала НАДФН i НАДН-залежними електронно-транспортними ланцюгами та перо-ксидне окиснення лт^в, пiдвищуе антиоксидан-тний потенцiал та активнiсть антиоксидантних ферменлв - супероксиддисмутази та каталази.
3. Введення тваринам L-арпншу за умов екс-перимента суттево не впливае на активнють nOs, орытиндекарбоксилази та бiлоксинтезуючу функцiю пiднижньощелепних слинних залоз, обмежуе у них вироблення супероксидного анюн-радикала НАДФН-залежними електронно-транспортними ланцюгами та пероксидне окиснення лт^в, пщвищуе антиоксидантний потен-цiал без iстотного впливу на активнють супероксиддисмутази та каталази.
Лтература
1. Дорошенко О.М. Цитотоксична дiя метилового е(^ру метакриловоТ кислоти si зшивагентом / О.М. Дорошенко // Фармаколопя та лкарська токсикологiя. - 2009. - № 1. - С. 13-14.
2. Дробшська О. Вплив L-арпншу на ураження в слизовш оболонц шлунка, спричиненi серотонiном / О. Дробшська, Л. Остапченко, О. Цирюк [та ш.] // Вiсн. Львiв. ун-ту. Сер. бiол. - 2004. - Вип. 38. - С. 201-204.
3. Костенко В.О. Роль слинних залоз у мехашзмах ауторегуляцп рiвня оксиду азоту в органiзмi ссав^в та Тх порушень / В.О. Костенко, А.М. блшська, Л.1. Ляшенко [та iн.] // Актуальш проблеми сучасноТ медицини: Вюн. УкраТнськоТ мед. стоматол. академп. -2013. - Т. 13, № 2. - C. 10-14.
4. Методи кшшчних та експериментальних дослщжень в медицин / [Л.В. Беркало, О.В. Бобович, Н.О. Боброва та ш.] ; За ред. 1.П. Кайдашева. - Полтава, 2003. - 320 с.
5. Милютина Н.П. Антирадикальный и антиоксидантный эффект аргинина и его влияние на активность перекисного окисления липидов при гипоксии / Н.П. Милютина, А.А. Ананян, В.С. Шуга-лей // Бюл. эксп. биол. и мед. - 1990. - Т. 60, № 3.- С. 263-265.
6. Палков Т.А. Вивчення вмюту залишкового мономеру при полн меризацп трьох видiв пластмас хiмiчноТ ш^ацп, як використо-вуються для виготовлення тимчасових коронок та мостоподiб-них протезiв / Т.А. Палков, Ю.В. Вовк, О.В. Суберляк [та ш.] // Галиц. лiкар. вiсн . - 2003. - Т. 10, № 1, [ч. 2]. - С. 126-128.
7. Реутов В.П. Цикл оксида азота как механизм стабилизации содержания NO и продуктов его превращения в организме млекопитающих / В.П. Реутов, Е.Г. Сорокина, А.И. Гоженко [и др.] // Актуал. пробл. трансп. мед. - 2008. - № 1. - С. 22-28.
8. Сенчакович Ю.В. Вплив метакрилату на функцто слинних залоз / Ю.В. Сенчакович, Г.А. брошенко, К.С. Казакова [та ш.] // Свп" мед. та бюл. - 2014. - № 1. - С. 181-185.
9. Храмов В.А. Простой метод определения активности орнитин-декарбоксилазы в смешанной слюне человека / В.А. Храмов. // Клин. лаб. диагностика. - 1997. - № 4. - С. 14-15.
10. Цебржинский О.И. Дифференцированное спектрофотометриче-ское определение продукции супероксида в тканях НСТ-тестом / О.И. Цебржинский // Актуальш проблеми сучасноТ медицини: Вюн. УкраТнськоТ мед. стоматол. академп. - 2002. - Т. 2, № 1. -C. 96-97.
11. Cal C. Decrease in salivary secretion by radiation mediated by nitric oxide and prostaglandins / C. de la Cal, A. Lomniczi, C.E. Mohn [et all.] // Neuroimmunomodulation. - 2006. - V. 13, № 1. - P. 19-27.
12. Hevel J.M. Purification of the inducible murene macrophage nitric oxide synthase / J.M. Hevel // J. Biol. Chem. - 1991. - V. 266, № 34. - P. 22789-22791.
13. Laude K. NO produced by endothelial NO synthase is a mediator of delayed preconditioning-induced endothelial protection / K. Laude, J. Favre, C. Thuillez [et all.] // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. -2003. - V. 284, № 6. - P. H2053-H2060.
14. Moinard C. Polyamines: metabolism and implications in human diseases / C. Moinard, L. Cynober, J.P. de Bandt // Clin. Nutr. -2005. - V. 24, № 2. - P. 184-197.
15. Nitric Oxide, Second Edition: Biology and Pathobiology / L.J. Ignarro ed. - [2nd ed.]. - N.Y. : Science Press, 2009. - 845 p.
16. Sayardoust S. Nitric oxide-dependent in vitro secretion of amylase from innervated or chronically denervated parotid glands of the rat in response to isoprenaline and vasoactive intestinal peptide / S. Sayardoust, J. Ekström // Exp. Physiol. - 2003. - V. 88, № 3. - P. 381-387.
17. Takeuchi K. Role of endogenous nitric oxide (NO) and NO syn-thases in healing of indomethacin-induced intestinal ulcers in rats / K. Takeuchi, R. Hatazawa, M. Tanigami [et all.] // Life Sci. - 2007. -Vol. 80, № 4. - P. 329-336.
18. Ugar-Cankal D. A multifaceted molecule, nitric oxide in oral and periodontal diseases / D. Ugar-Cankal, N. Ozmeric // Clin. Chim. Acta. - 2006. - V. 366, № 1-2. - P. 90-100.
19. Wu G. Arginine metabolism and nutrition in growth, health and disease / G. Wu, F.W. Bazer, T.A. Davis [et all.] // Amino Acids. - 2009. - V. 37, № 1. - P. 153-168.
References
1. Doroshenko O.M. Tsytotoksychna diya metylovoho efiru metakrylovoyi kysloty zi zshyvahentom / O.M.Doroshenko // Farmakolohiya ta likars'ka toksykolohiya. - 2009. - № 1. - S. 13-14.
2. Drobins'ka O. Vplyv L-arhininu na urazhennya v slyzoviy obolontsi shlunka, sprychyneni serotoninom / O. Drobins'ka, L. Ostapchenko,
0. Tsyryuk [ta in.] // Visn. L'viv. un-tu. Ser. biol. - 2004. - Vyp. 38. -S . 201-204.
3. Kostenko V.O. Rol' slynnykh zaloz u mekhanizmakh autorehulyatsiyi rivnya oksydu azotu v orhanizmi ssavtsiv ta yikh porushen' / V.O. Kostenko, A.M. Yelins'ka, L.I. Lyashenko [ta in.] // Aktual'ni problemy suchasnoyi medytsyny: Visn. Ukrayins'koyi med. stomatol. akademiyi. - 2013. - T. 13, № 2. - C. 10-14.
4. Metody klinichnykh ta eksperymental'nykh doslidzhen' v medytsyni / [L.V. Berkalo, O.V. Bobovych, N.O. Bobrova ta in.] ; Za red.
1.P.Kaydasheva. - Poltava, 2003. - 320 s.
5. Milyutina N.P. Antiradikal'nyy i antioksidantnyy effekt arginina i yego vliyaniye na aktivnost' perekisnogo okisleniya lipidov pri gipoksii / N.P. Milyutina, A.A. Ananyan, V.S. Shugaley // Byul. eksp. biol. i med. - 1990. - T. 60, № 3. - S. 263-265.
6. Palkov T.A. Vyvchennya vmistu zalyshkovoho monomeru pry polimeryzatsiyi tr'okh vydiv plastmas khimichnoyi initsiatsiyi, yaki vykorystovuyut'sya dlya vyhotovlennya tymchasovykh koronok ta mostopodibnykh proteziv / T.A. Palkov, Yu.V. Vovk, O.V. Suberlyak [ta in.] // Halyts. likar. visn. - 2003. - T. 10, № 1, [ch. 2]. - S. 126128.
7. Reutov V.P. Tsykl oksyda azota kak mekhanyzm stabylyzatsyy soderzhanyya NO y produktov eho prevrashchenyya v orhanyzme mlekopytayushchykh / V.P. Reutov, E.H. Sorokyna, A.Y. Hozhenko [y dr.] // Aktual. probl. transp. med. - 2008. - № 1. - S. 22-28.
8. Senchakovych Yu.V. Vplyv metakrylatu na funktsiyu slynnykh zaloz / Yu.V. Senchakovych, H.A. Yeroshenko, K.S. Kazakova [ta in.] // Svit med. ta biol. - 2014. - № 1. - S. 181-185.
9. Khramov V.A. Prostoy metod opredelenyya aktyvnosty ornytyndekarboksylazy v smeshannoy slyune cheloveka / V.A. Khramov. // Klyn. lab. dyahnostyka. - 1997. - № 4. - S. 14-15.
10. Tsebrzhinskiy O.I. Differentsirovannoye spektrofotometricheskoye opredeleniye produktsii superoksida v tkanyakh NST-testom / O.I. Tsebrzhinskiy // Aktual'ni problemy suchasnoyi medytsyny: Visn. Ukrayins'koyi med. stomatol. akademiyi. - 2002. - T. 2, № 1. - C. 96-97.
11. Cal C. Decrease in salivary secretion by radiation mediated by nitric oxide and prostaglandins / C. de la Cal, A. Lomniczi, C.E. Mohn [et all.] // Neuroimmunomodulation. - 2006. - V. 13, № 1. - P. 19-27.
12. Hevel J.M. Purification of the inducible murene macrophage nitric oxide synthase / J.M. Hevel // J. Biol. Chem. - 1991. - V. 266, № 34. - P. 22789-22791.
13. Laude K. NO produced by endothelial NO synthase is a mediator of delayed preconditioning-induced endothelial protection / K. Laude, J. Favre, C. Thuillez [et all.] // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. -2003. - V. 284, № 6. - P. H2053-H2060.
14. Moinard C. Polyamines: metabolism and implications in human diseases / C. Moinard, L. Cynober, J.P. de Bandt // Clin. Nutr. -2005. - V. 24, № 2. - P. 184-197.
15. Nitric Oxide, Second Edition: Biology and Pathobiology / L.J. Ignarro ed. - [2nd ed.]. - N.Y. : Science Press, 2009. - 845 p.
16. Sayardoust S. Nitric oxide-dependent in vitro secretion of amylase from innervated or chronically denervated parotid glands of the rat in response to isoprenaline and vasoactive intestinal peptide / S.
Sayardoust, J. Ekstrom // Exp. Physiol. - 2003. - V. 88, № 3. - P. 18. Ugar-Cankal D. A multifaceted molecule, nitric oxide in oral and
381-387. periodontal diseases / D. Ugar-Cankal, N. Ozmeric // Clin. Chim.
17. Takeuchi K. Role of endogenous nitric oxide (NO) and NO Acta. - 2006. - V. 366, № 1-2. - P. 90-100.
synthases in healing of indomethacin-induced intestinal ulcers in 19. Wu G. Arginine metabolism and nutrition in growth, health and
rats / K. Takeuchi, R. Hatazawa, M. Tanigami [et all.] // Life Sci. - disease / G. Wu, F.W. Bazer, T.A. Davis [et all.] // Amino Acids. -
2007. - Vol. 80, № 4. - P. 329-336. 2009. - V. 37, № 1. - P. 153-168.
Реферат
РОЛЬ NO-СИНТАЗ И ИХ СУБСТРАТА В МЕХАНИЗМЕ НАРУШЕНИЙ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ И ФУНКЦИЙ СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ КРЫС ПРИ ДЕЙСТВИИ МЕТИЛОВОГО ЭФИРА МЕТАКРИЛОВОЙ КИСЛОТЫ Нагорняк И.В., Костенко В.А.
Ключевые слова: метиловый эфир метакриловой кислоты, оксид азота, NO-синтазы, L-аргинин, супероксидный анион-радикал, пероксидное окисление липидов, слюнные железы.
В эксперименте на 50 белых крысах исследовано влияние ингибиторов и субстрата NO-синтаз (NOS) на состояние свободнорадикальных процессов и белоксинтезирующей функции поднижнече-люстных слюнных желез (СЖ) при 30-дневной аппликации 1% раствора метилового эфира метакриловой кислоты на слизистую оболочку полости рта. Показано, что введение в условиях эксперимента селективного ингибитора нейрональной NOS 7-нитроиндазола сопровождается нарушением бело-ксинтетической функции СЖ, гиперпродукцией в тканях супероксидного анион-радикала НАДН-зависимой (митохондриальной) электронно-транспортной цепью, активацией пероксидного окисления липидов (ПОЛ) без существенного влияния на активность антиоксидантных ферментов - супероксид-дисмутазы и каталазы. Назначение селективного ингибитора индуцибельной NOS аминогуанидина увеличивает активность фермента неокислительного (аргиназного) пути метаболизма L-аргинина -орнитиндекарбоксилазы в СЖ, улучшает их белоксинтезирующую функцию, ограничивает продукцию в них супероксидного анион-радикала НАДФН- и НАДН-зависимыми электронно-транспортными цепями и ПОЛ, повышает антиоксидантный потенциал. Введение животным L-аргинина существенно не влияет на активность NOS, орнитиндекарбоксилазы и белоксинтезирующую функцию СЖ, ограничивает в них выработку супероксидного анион-радикала (НАДФН-зависимыми электронно-транспортными цепями) и ПОЛ, повышает антиоксидантный потенциал без существенного влияния на активность супероксиддисмутазы и каталазы.
Summary
ROLE OF NO-SYNTHASES AND THEIR SUBSTRATE IN THE MECHANISMS OF DISTURBANCES OF FREE RADICAL PROCESSES AND SALIVARY GLAND FUNCTIONING IN RATS UNDER METHACRYLIC ACID METHYL ESTER APPLICATION Nahornjak I.V., Kostenko V.A.
Key words: methacrylic acid methyl ester, nitric oxide, NO-synthases, L-arginine, superoxide anion radical, lipid peroxidation, salivary glands.
This research was aimed to study the effect of NO-synthase (NOS) inhibitors and substrate on the state of free radical processes and protein- synthesizing function of submandibular salivary glands (SG) in 50 white rats under 30-days applications of 1% solution of methacrylic acid methyl ester onto the oral mucosa. It has been found out the administration of selective inhibitor of neuronal NOS 7-nitroindazole during the experiment is accompanied by the impairment of SG protein synthesis, by overproduction of superoxide anion radical by NADH-dependent (mitochondrial) electron transport chain in the tissues, and by activation of lipid peroxidation (LP) with no significant effect on the activity of antioxidant enzymes as superoxide dismutase and catalase. Administration of selective inhibitor inducible NOS aminoguanidine increases the activity of ornithine decarboxylase, an enzyme of non-oxidative (arginase) pathway of L-arginine metabolism, improves SG protein-synthesizing function, limits the production of superoxide anion radical (NADPH- and NADH-dependent electron transport chain) and lipid peroxidation, enhances antioxidant capacity. Introduction of L-arginine does not significantly affect the activity of NOS, ornithine decarboxylase, SG protein-synthesizing function, limits the production of superoxide anion radical (NADPH-dependent electron transport chain) and lipid peroxidation, increases antioxidant capacity producing no significant effect on the activity of superoxide dismutase and catalase.
