CC BY
23
DOI 10.31588/2413-4201-1883-246-2-54-59
УДК 619:636.4:636.087.8
РЕЗУЛЬТАТЫ ИСПЫТАНИЙ МИКРОКАПСУЛИРОВАННОГО ПРОБИОТИКА «ЭНЗИМСПОРИН» С ФЕРМЕНТОМ НА СВИНЬЯХ СЕЛЕКЦИИ GENESUS
Горобец А.Ю. - аспирант, Трубников Д.В. - доцент
ФБГОУ ВО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени И.И. Иванова»
Ключевые слова: Энзимспорин, трипсин кристаллический, свиньи Genesus, продуктивность, показатели крови
Keywords: Enzymesporine, trypsin crystalic, Genesus pigs, productivity, blood parameters
В свиноводстве проводятся мероприятия по поиску селективных пород, имеющих высокие показатели для промышленного свиноводства. Так, канадская фирма Genesus представила гибрид, обладающий высоким потенциалом продуктивности от родительских гибридных свинок F1 (двухпородный гибрид, полученный при скрещивании канадского йоркшира и ландраса) и хрячков терминальных линий - канадский дюрок [4].
Основным фактором продуктивности свиней является генетический потенциал, реализация которого в свою очередь обеспечивается сбалансированным кормлением, правильно организованным содержанием животных, профилактическими ветеринарными мероприятиями.
Одним из эффективных способов коррекции физиологического статуса, повышения обмена веществ и метаболизма, следовательно, и повышения продуктивности, является применение пробиотиков. Пробиотики - это живые микроорганизмы, приносящие пользу хозяину при введении в оптимальных количествах [7]. К пробио-тикам предъявляются следующие основные требования: они должны быть фено- и генотипически классифицируемыми, сохраняться живыми, кислотоустойчивыми или заключены в кислоустойчивую капсулу, способны к адгезии к кишечному эпителию и колонизации кишечника, не должны быть патогенными, [2, 5]. Чаще всего в свиноводстве, используются про-биотические препараты в сухой, порошкообразной форме в качестве основного компонента, а в отдельных случаях и в качестве дополнительного компонента вместе с
минеральными веществами [6]. В медицине, для коррекции дизбактериозов применяют сорбированные препараты или в виде суспензии.
Для эффективности пробиотики должны быть в такой форме и дозировке, чтобы достигнуть кишечника и сохранить свою активность, пройдя через кислую среду желудка и попав в щелочную среду двенадцатиперстной кишки, создаваемую желчью [3]. Поэтому в последнее время стали появляться микрокапсулированные формы пробиотиков, обладающие заданными физическими параметрами и биологическими свойствами, способными пройти без разрушения кислую среду желудка и активировать свою деятельность в кишечнике.
Целью и задачами нашей работы являлось следующее: 1) определить влияние микрокапсулированного пробиотиче-ского препарата «Энзимспорин» с ферментом на живую массу и среднесуточные приросты свиней при откорме; 2) исследовать влияние препарата на гематологические и биохимические показатели крови свиней.
Материал и методы исследований. Исходный пробиотический препарат «Энзимспорин» включал штаммы бактерий: Bacillus subtilis ВКПМ В-314, Bacillus licheniformis ВКПМ В-8054, Bacillus subtilis (Bacillus natto) ВКПМ В-12079. В исходный препарат был включен фермент трипсин кристаллический в количестве 5 % с целью усиления переваривающей способности в кишечнике. После чего препарат был микрокапсулирован по методике, описанной в патенте РФ №2736377 от
16 ноября 2020 года [1].
Выход готовых микрокапсул составил 85-90 %. Микрокапсулы представляли собой овальные частицы серо-желтого цвета размером 80-150 мкм. Ранее проведенные микробиологические исследования показали, что число жизнеспособных про-биотических бактерий в изготовленном микрокапсулированном препарате составляло 5,5x109 клеток в 1 г, а сами микрокапсулы в опытах in vitro, моделирующих желудочное пищеварение, показали высокую кислотоустойчивость к воздействию соляной кислоты [8].
Научно-хозяйственный опыт по испытанию микрокапсулированного препарата «Энзимспорин» c ферментом на свиньях селекции Genesus проводились в сравнении с исходным не капсулирован-ным препаратом «Энзимспорин» на свиноводческом комплексе ООО «Открытие» Кореневского района Курской области. Животные были отобраны по принципу аналогов по живой массе и полу.
Экспериментальные животные были разделены на следующие группы:
1) опытная группа (введение в корм микрокапсулированного препарата «Энзимспорин» с ферментом в дозе 3,0 г в день на 1 голову, n=20);
2) контрольная группа № 1 (введение в корм препарата «Энзимспорин» в дозе 5,0 г в день на 1 голову, n =20);
3) контрольная группа № 2 (без введения в корм пробиотических препаратов, n=20 / интактные).
Рационы полностью покрывали по-
требность животных в питательных веществах, витаминах и микроэлементах по зоотехническим нормам. Общая продолжительность эксперимента составляла 100 дней в период с 48 по 148 день. В период эксперимента проводили наблюдения за подопытными животными, учитывали общее состояние, аппетит, определяли абсолютную массу, среднесуточные приросты, сохранность. Контрольными точками измерений были 48, 98 и 148 сутки.
Для изучения гематологических показателей у животных всех групп брали по 10 мл крови для лабораторного анализа. В крови определяли СОЭ, гематокрит, эритроциты, лейкоциты, гемоглобин. Биохимический анализ крови включал определение общего белка, альбуминов, общих иммуноглобулинов, мочевины, креатинина, билирубина, АЛТ, АСТ, холестерина, глюкозы, общего кальция, неорганического фосфора, общего магния и железа.
Гематологические показатели были определены с помощью анализатора гематологического Micro CC Vet 20, а биоио-химические показатели - на автоматическом биохимическом анализаторе Bio Chem-200. При статистической обработке данных рассчитывалось среднее значение, величина стандартного отклонения. Различия считались достоверными при р<0,05.
Результат исследований. Общее состояние свиней в период эксперимента соответствовало физиологической норме. Динамика живой массы свиней показана на рисунках 1 и 2.
Рисунок 1 - Живая масса свиней, кг
48-98 сутки 98-148 сутки
Интактные = "Энзимспорин" «г Микрокапсулированный "Энзимспорин" с ферментом
Рисунок 2 - Среднесуточные приросты живой массы свиней, г Таблица 1 - Средние значения гематологических показателей свиней (п=20)
День анализа
Показатель 48 98 148
опыт контроль № 1 контроль № 2 опыт контроль № 1 контроль № 2 опыт контроль № 1 контроль № 2
СОЭ, 3,0± 3,1± 2,8± 2,5± 2,9± 2,7± 2,8± 3,1± 3,0±
мм/час 0,09 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,07 0,09 0,08
Гематок- 39,8± 40,2± 40,0± 41,0± 40,0± 40,0± 41,9± 41,0± 40,4±
рит, % 2,0 3,7 3,1 3,1 2,6 3,0 2,5 2,7 2,8
Эритроци- 6,8± 7,0± 6,9± 6,9± 6,9± 7,0± 7,4± 7,3± 6,9±
ты, х1012/л 0,34 0,26 0,30 0,24 0,30 0,20 0,10a 0,12a 0,11
Лейкоци- 9,4± 9,5± 9,7± 9,8± 9,5± 9,3± 9,9± 9,6± 9,8±
ты, х109/л 0,21 0,21 0,30 0,18 0,24 0,20 0,20 0,17 0,24
Гемогло- 98,8± 98,8± 97,9± 99,5± 98,4± 99,0± 108,5± 104,5± 99,4±
бин, г/л 3,0 2,7 3,8 3,8 4,2 3,6 3,0a 3,2 2,7
Условное обозначение: a - при р<0,05 по сравнению с контрольной группой № 2
Для оценки влияния микрокапсули-рованного пробиотического препарата «Энзимспорин» с ферментом на внутреннюю среду организма нами были определены гематологические и биохимические показатели крови у свиней экспериментальной группы в сравнении с двумя контрольными группами. Полученные результаты представлены в таблицах 1 и 2.
В ходе проведённых исследований было установлено, что у свиней всех групп гематологические показатели находились в пределах физиологической нормы. Скорость оседания эритроцитов составляла 2,5±0,08 - 3,1±0,09 мм/час. Гематокритная величина колебалась в пределах 39,8±2,0 -41,9±2,5. При этом с увеличением возраста животных она увеличивалась.
Содержание эритроцитов и гемоглобина у свиней всех групп во время постановки на эксперимент находилось на
минимальном уровне. Однако у животных, получавших энзимспорин, к окончанию эксперимента их содержание повысилось. При этом у свиней, получавших микрокап-сулированный пробиотик с ферментом (опыт), данное увеличение было достоверным (p<0,05). У свиней контрольной группы № 1 и № 2 изменения содержания эритроцитов и гемоглобина были статистически недостоверными.
В содержании лейкоцитов достоверных различий выявлено не было.
При исследовании биохимических показателей крови, отражающих уровень обменных процессов, протекающих в организме животных опытных групп, нами было установлено, что некоторые показатели имели общую тенденцию к увеличению, другие - уменьшались, а часть показателей изменялась в недостоверных границах.
Таблица 2 - Биохимические показатели крови свиней (n=20)
Показатель День анализа
48 98 148
опыт контроль № 1 контроль № 2 опыт контроль № 1 контроль № 2 опыт контроль № 1 контроль № 2
Общий белок, г/л 67,5± 2,3 67,8± 2,1 68,0± 2,1 68,9± 2,0 68,4± 2,3 68,1± 3,4 78,7± 2,0b 69,8± 2,1 68,7± 1,5
Альбумины, % 38,5± 2,0 38,7± 2,1 38,5± 2,1 39,4± 2,3 39,0± 2,7 38,8± 2,3 44,5± 2,0b 43,0± 1,9 39,1± 1,8
Иммуноглобулины, мг/мл 11,7± 0,47 12,1± 0,44 11,9± 0,21 12,0± 0,37 12,3± 0,38 11,7± 0,44 19,9± 0,26b 15,5± 0,20c 12,4± 0,23
Мочевина, ммоль/л 3,6±0,23 3,8± 0,20 3,5± 0,11 3,8± 0,20 3,7± 0,24 3,7± 0,24 3,7± 0,17 3,9± 0,26 4,1± 0,27
Креатинин, мкмоль/л 0,11± 0,03 0,10± 0,04 0,11± 0,04 0,10± 0,02 0,12± 0,05 0,13± 0,02 0,11± 0,03 0,10± 0,03 0,10± 0,03
Билирубин, мкмоль/л 1,12± 0,12 1,09± 0,16 1,10± 0,17 1,23± 0,17 1,18± 0,19 1,15± 0,18 1,27± 0,10 1,10± 0,22 1,20± 0,15
АЛТ, ед/л 12,0± 0,73 11,7± 0,80 11,7± 0,69 12,9± 0,67 12,5± 0,91 11,6± 0,73 14,7± 0,79 15,4± 0,53c 12,0± 0,68
АСТ, ед/л 26,7± 0,93 27,1± 0,73 26,3± 0,74 27,4± 0,88 28,8± 0,50 27,5± 0,83 28,8± 0,81 29,9± 0,46c 26,5± 0,60
ЩФ, ед/л 51,5± 3,8 50,7± 4,4 50,9± 4,3 50,3± 4,7 51,8± 3,3 51,7± 3,7 52,2± 4,9 52,0± 3,0 51,8± 3,5
Холестерин, ммоль/л 1,67± 0,20 1,70± 0,27 1,71± 0,20 1,71± 0,24 1,69± 0,20 1,66± 0,17 1,86± 0,24 1,80± 0,30 1,68± 0,31
Глюкоза, ммоль/л 2,47± 0,11 2,51± 0,12 2,50± 0,10 2,68± 0,15 2,61± 0,15 2,53± 0,09 3,11± 0,17b 3,04± 0,19c 2,60± 0,11
Общий кальций, ммоль/л 2,44± 0,10 2,50± 0,10 2,49± 0,11 2,71± 0,12 2,58± 0,12 2,47± 0,17 3,14± 0,11b 2,89± 0,16c 2,54± 0,10
Неорганический фосфор, ммоль/л 1,70± 0,09 1,68± 0,12 1,62± 0,14 1,72± 0,14 1,68± 0,14 1,71± 0,10 1,50± 0,09b 1,48± 0,14c 1,88± 0,12
Магний, ммоль/л 1,34± 0,08 1,19± 0,11 1,22± 0,15 1,30± 0,10 1,28± 0,15 1,30± 0,16 1,11± 0,10b 1,27± 0,12 1,39± 0,09
Железо, мкмоль/л 28,9± 0,93 28,4± 0,80 28,8± 0,90 29,7± 0,88 28,9± 0,74 29,3± 0,76 28,8± 0,90 31,8± 0,91 32,0± 0,77
Условные обозначения: ь - при р<0,05 по сравнению с контрольной группой №2; c - при р<0,05 по сравнению с контрольной группой №2
К группе показателей,
демонстрирующих заметное увеличение значений, в нашем эксперименте относился общий белок, а также альбумины. Содержание этих компонентов в крови у свиней, получавших микрокапсулированный «Энзимспорин» с ферментом, с возрастом животных постепенно повышалось, достигая максимального значения в 148-дневном возрасте. У свиней 2 контрольной группы
эти показатели крови также к окончанию эксперимента увеличились, однако данное увеличение имело недостоверный характер ф>0,05). У свиней 1 контрольной группы содержание общего белка и альбуминов, относительно животных опытных групп, изменялось незначительно.
У свиней, получавших
микрокапсулированный пробиотик с ферментом, в крови было достоверно выше ф<0,05) содержание общих
иммуноглобулинов по сравнению с животными второй контрольной и первой контрольной групп. Это указывает на то, что микрокапсулированный пробиотик в сочетании с ферментом повышает защитный статус организма.
В крови свиней опытной группы отмечалось увеличение уровня глюкозы. Повышение глюкозы в крови свиней, получавших микрокапсулированный
«Энзимспорин» с ферментом, указывает на интенсивность обменных процессов в организме. Вместе с этим, значение этого показателя было несколько снижено по сравнению с данными второй экспериментальной группы. У свиней второй контрольной группы в содержании глюкозы существенных изменений выявлено не было.
Анализ количественного
содержания минеральных элементов в крови различных групп животных выявил значительные изменения в количественном содержании общего кальция,
неорганического фосфора и магния. Если уровень кальция достоверно повышался у свиней, получавших
микрокапсулированный пробиотик с ферментом, то содержание фосфора и магния, наоборот, достоверно
уменьшалось.
Определение АЛТ и АСТ показало, что у свиней, получавших
микрокапсулированный энзимспорин, их ферментативная активность к концу эксперимента повышалась и на 148 день была достоверно выше, чем у контрольных животных, однако этот показатель не выходил за пределы физиологической нормы. У свиней опытной группы, которым скармливали
микрокапсулированный «Энзимспорин» с ферментом, достоверных различий с контрольными животными не отмечалось.
У животных, входивших в группу контроля № 2 (не получавших пробиотик), в содержании биохимических показателей крови существенных изменений не было. Так, уровень мочевины, креатинина, билирубина, холестерина, щелочной фосфатазы у свиней опытной группы и группы второго контроля находился в
пределах физиологических границ и достоверных отличий от животных контрольной группы не имел.
Заключение. Таким образом, при определении гематологических и биохимических показателей крови, у животных, получавших
микрокапсулированный пробиотический препарат «Энзимспорин» с ферментом, установлено высокое содержание (на уровне верхнего физиологического предела) эритроцитов, гемоглобина, общего белка, альбуминов, глюкозы, общего кальция, что свидетельствует об интенсивности обменных процессов. Повышенный уровень иммуноглобулинов, очевидно, свидетельствует о высоком уровне иммунитета и более высокой резистентности организма животных. При этом препарат оказывал положительное влияние на среднесуточные приросты и абсолютную живой массы массу свиней в период откорма.
На основании этого можно сделать вывод, что микрокапсулированный пробиотический препарат «Энзимспорин» с ферментом эффективен для улучшения пищеварительной функции кишечника, оказывает опосредованное действие на рост и развитие животных, и рекомендуется для применения в условиях крупных свиноводческих комплексов, использующих селекцию Genesus.
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 19-316-90011
ЛИТЕРАТУРА:
1. Белоус, А.С. Способ повышения эффективности препарата «Энзимспорин» в процессе микрокапсуляции / А.С. Белоус, Д.В. Трубников, Е.В. Трубникова, А.Ю. Горобец, М.И. Карташов // Патент №2736377 С2 Российская Федерация, МПК A61K9/50 (2020.08); A61K35/742; A61K47/36; B82B3/00 - № 2020117491; заявл. 27.05.2020; опубл. 16.11.2020. Бюл. № 32.
2. Корниенко, Е.А. Современные принципы выбора пробиотика / Е.А. Корниенко // Детские инфекции. -2007. - Т. 6. - № 3. - С. 63-68.
3. Эффективность пробиотиков в
терапии воспалительных заболеваний кишечника / И.Л. Халиф [и др.] // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2013. - № 3. - С. 310.
4. Чистяков, В.Т. Современное развитие селекции и генетики в отечественном свиноводстве/ В.Т. Чистяков // Вестник Воронежского государственного аграрного университета. - 2018. - № 4 (59). -С 71-78.
5. Шевелева, М.А. Современные представления при применении различных групп пробиотических средств при антибиотикотерапии / М.А. Шевелева, Г.А. Равенская // Антибиотики и химоитерапия. - 2009. - Т. 54. - № 3-4. -С. 61-68.
6. Шакиров, Ш.К. Кормовая добавка для свиней / Ш.К. Шакиров,
Л.П. Зарипова, Р.Г. Гареев, С.Б. Федоров, М.К. Гайнуллина, Р.С. Сунгатов// Патент на изобретение RU 2147200 С1, МПК A23K1/16; заявка № 98121914/13 от 07.12.1998; опубл. 10.04.2000.
7. Hill, C. Expert consensus document. The International Scientific Association for Probiotics and Prebiotics consensus statement on the scope and appropriate use of the term probiotic / C. Hill, F. Guarner, G. Reid [et al.] // Nat Rev Gastroenterol Hepatol. - 2014. -№ 11(8). - P. 506-14.
8. Evaluating the efficiency of Enzyme-enriched Enzymesporine probiotic feed additive and its impact on the productive properties of pigs in the fattening process / D.V. Trubnikov [et al.] // IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. -2020. - V. 548. - 082089 - P. 1-6.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИСПЫТАНИЙ МИКРОКАПСУЛИРОВАННОГО ПРОБИОТИКА «ЭНЗИМСПОРИН» С ФЕРМЕНТОМ НА СВИНЬЯХ СЕЛЕКЦИИ GENESUS
Горобец А.Ю., Трубников Д.В.
Резюме
В статье приведены данные, полученные при проведении научно-хозяйственного опыта по испытанию микрокапсулированного пробиотического препарата «Энзимспорин» с ферментом на свиньях селекции Genesus в условиях современного животноводческого комплекса.
Результаты исследований показали положительное влияние изученного препарата на приросты живой массы, содержание в крови эритроцитов, гемоглобина, общего белка, альбуминов, глюкозы, общего кальция, иммуноглобулинов, что свидетельствует об активизации обменных процессов и повышении иммунологического статуса у подопытных свиней.
THE RESULTS OF THE TRIALS OF MICROENCAPSULATED "ENZYMESPORINE" WITH AN ENZYME ON THE PIGS OF SELECTION OF GENESUS
Gorobets A.Y., Trubnikov D.V.
Summary
In the article there are presented data that are obtained during the scientific and economic experiment on testing of the microencapsulated probiotic preparation "Enzymesporine" with an enzyme on pigs of selection of Genesus in conditions of modern livestock complex.
The results of the researches showed positive influence of discovered preparation on life weight gains, containing in the blood of erythrocytes, hemoglobin, total protein, albumins, glucose, total calcium, immunoglogulins, that is reveal the intensity of metabolic processes and increasing of immunological status of tested pigs.
