CC BY
0внутрибрюшинно в объеме 10 мл/кг (n=10); 2-я группа — хлонизол, 15 мг/кг внутрибрюшинно в 0,9% растворе NaCl в объеме 10 мл/кг однократно через 24 ч после трансплантации опухоли (n=8). Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета GraphPad Prism, 8.0. Для сравнения количественных данных использовали критерий Манна-Уитни, различия считались статистическими значимыми при p <0,05. Отношение рисков (Hazard Ratio, HR) и границы его 95% доверительного интервала (95%CI) рассчитывали с помощью регрессионной модели Кокса.
Результаты
К 8-му дню опыта опухоли развились у всех 10 мышей в контроле, но отсутствовали у всех 8 мышей, которым был введен хлонизол (p<0,0001); в группе хлонизола первые опухоли начали определяться лишь с 16-го дня. Торможение роста опухоли под влиянием хлонизола в различные временные точки со статистической достоверностью достигало 92-100%. Введение хлонизола обусловило также значимое увеличение продолжительности жизни мышей по сравнению с контролем. Под влиянием хлонизола риск смерти от опухоли снизился на 81% (HR 0,1874; 95%ДИ=0,05931-0,5922; р&к;0,0001). Медиана общей выживаемости в контроле и у мышей, получивших хлонизол, составила соответственно 21,0 и 35,5 дня (p<0,0001).
Выводы
Хлонизол обладает выраженным противоопухолевым эффектом у мышей линии C57BL/6 c трансплантированной в нижнее веко меланомой В16.
Список литературы
1. Бровкина А . Ф . , Панова И . Е ., Саакян С . В . Офтальмоонкология: новое за последние два десятилетия // Вестник
офтальмологии . 2014 . С . 13-19 . 2 . Shinder R. What's New in Eyelid Tumors // Asia-Pacific Journal of Ophthalmology. — 2017; 6 (2): 143-152. 3. Стуков
А . Н . , Есиков К . А ., Усманова Л . М . и др . Способ синтеза 2-[3-(2-хлорэтил)-3-нитрозоуреидо]-1,3-пропандиола,
обладающего противоопухолевой активностью // Патент РФ № 2678846 от 12 .11. 2018 .
Репрограммирование CD8 Т-клеток — новый подход терапии при экспериментальном раке легкого
Авторы:
(1) Першина Ольга Викторовна, ovpershina@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский и институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга» ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
(2) Пахомова Ангелина Владимировна, angelinapakhomova2011@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский и институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга» ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
(3) Ермакова Наталия Николаевна, nejela@mail.ru, ФГБНУ «Научно-исследовательский и институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга» ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
(4) Пан Эдгар Сергеевич, artifexpan@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский и институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга» ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
(5) Жукова Мария Андреевна, mashazyk@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский и институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга» ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
(6) Морозов Сергей Георгиевич, smorozov.biopharm@mail.ru, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
(7) Кубатиев Аслан Амирханович, akubatiev.niiop@mail.ru, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
(8) Дыгай Александр Михайлович, amdygay@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский и институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга» ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
(9) Скурихин Евгений Германович, eskurihin@inbox.ru, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Ключевые слова
рак легкого, Т-клетки, репрограммирование, стволовые опухолевые клетки
Актуальность
Развитие и прогрессирование злокачественных опухолей легких во многом обусловлено подавлением иммунной системы [1]. Результатом ингибирующего действия опухоли и ее окружения является снижение количества и активности метаболических путей иммунных клеток. Формирующиеся в этих условиях гипо-реактивные фенотипы Т-клеток не восстанавливаются известными на настоящий момент подходами терапии [2]. В этой связи для усиления противоопухолевого Т-клеточного иммунитета и подавления роста опухоли может быть перспективно репрограммирование путем ингибирования пути MAPK/ERK посредством MEKi и сигнального пути иммунных контрольных точек PD-1/PD-L1 в популяции CD8 T-клеток. Однако клиническая практика часто сталкивается с дефицитом иммунных клеток для проведения клеточной терапии. Мы предположили, что репрограммирование CD8 T-клеток, независимо от источника их получения (костный мозг, селезенка и др.), позволит создать популяцию клеток, способных влиять на иммунную систему организма хозяина и опухолевые клетки. Исследование поддержано грантом Министерства науки и высшего образования РФ № 075-15-2020-773.
Цель
Исследовать и сравнить противоопухолевую активность, устойчивость к действию опухолевых клеток репрограммированных CD8 Т-клеток, выделенных из костного мозга и селезенки мышей.
Материалы и методы
Популяцию CD8 Т-клеток выделяли из костного мозга и селезенки мышей линии C57BL/6, репрограм-мировали, используя ингибитор MEK и блокатор PD-1. В культуре клеток карциномы легких Льюис (КЛЛ) изучали экспрессию CCR7, устойчивость к апоптозу и цитотоксичность репрограммированных CD8 Т-клеток, выделенных из костного мозга (ркмCD8 Т-клетки) и селезенки (рселCD8 Т-клетки) мышей. Введением суспензии клеток КЛЛ в левое легкое мыши моделировали рак легкого, день введения КЛЛ принимали за 0-й день эксперимента. Репрограммированные Т-клетки вводили внутривенно на 4-й и 6-й дни эксперимента. Материал для исследования забирали на 7-й день эксперимента. Проводили гистологическое исследование легочной ткани, цитометрически изучали содержание стволовых опухолевых клеток (СОК) и Т-клеток в крови и легких мышей.
Результаты
При сравнении экспрессии CCR7 Т-клетками костного мозга и селезенки достоверных различий выявлено не было. И ркмCD8 Т-клетки, и рселCD8 Т-клетки были более стабильны при культивировании и более устойчивы к цитотоксическому действию опухолевых клеток по сравнению с наивными CD8 Т-клетками. На модели КЛЛ ркмCD8 Т-клетки и рселCD8 Т-клетки оказывали противоопухолевое и антиметастиче-ское действие. На фоне терапии репрограммированными Т-клетками снижалось количество СОК в крови, при этом ркмCD8 Т-клетки более влияли на Axl- клеточные популяции, рселCD8 Т-клетки — на Sox2. В легких ркмCD8 Т-клетки были более активны в отношении CD274 популяций по сравнению с рселCD8 Т-клетками. Количество популяций CD4 и CD8 Т-клеток под влиянием терапии репрограммированными клетками увеличивалось в крови и уменьшалось в легочной ткани по сравнению с патологическим контролем.
Выводы
Репрограммирование CD8 Т-клеток приводит к формированию популяции репрограммированных CD8 Т-клеток, устойчивых к действию опухолевых клеток и обладающих цитотоксической активностью in vitro, противоопухолевым и антиметастическим действием in vivo. Активность репрограммированных CD8 Т-клеток не зависит от места их выделения, что в перспективе предполагает возможность использования для выделения CD8 Т-клеток периферической крови пациентов.
Список литературы
1. Sathaliyawala T , Kubota M ., Yudanin N .et al . Distribution and compartmentalization of human circulating and tissue-resident
memory T cell subsets . //Immunity. 2013 . 38(1) . P187-197. 2 . Speiser D . E . , Ho P. C . , Verdeil G . Regulatory circuits of T cell function in cancer. //Nat Rev Immunol . 2016 .16(10) . P599-
611.
