CC BY
7Актуальность
При лучевом лечении больных с опухолями вну-тригрудной локализации (рак легких, злокачественные лимфомы и др.) регистрируются в отдаленные сроки после радиогенного воздействия пульмоно-склеротические изменения, приводящие больных к инвалидизации и даже смерти.
Цель
Разработать экспериментальную модель лучевого пульмоносклероза.
Материалы и методы
Исследование проведено на 30 кроликах породы шиншилла с массой тела 2,5-3 кг. Лучевому воздействию подвергали участок легких (2*2 см). Кроликов фиксировали на спине на деревянном станке. Условия облучения были приближены к клиническим. Облучение проводили на рентгено-терапевтическом аппарате РУМ-17 при следующих технических характеристиках: сила тока 15 мА, напряжение 200 КэВ, фильтры 0,5 мм Си±1 мм А1. Кожно-фокусное расстояние 50 см (по тубусу). Доза за фракцию 10 Гр. Количество фракций 12. Суммарная доза 120 Гр. Учитывали величину артериального давления (давление измерялось бескровным путем на центральной артерии ушной раковины кролика). Следили за общим состоянием и массой тела. Через 5,5 месяца после лучевого воздействия производили эвтаназию кроликов. При
патологоанатомическом вскрытии кроликов для последующего морфологического анализа брали легкие и фиксировали в 10% нейтральном формалине. Гистологические препараты окрашивали гематоксилином и эозином.
Результаты
У контрольных кроликов величина артериального давления составляла 80±20 мм рт. ст. В то время как у всех облученных животных артериальное давление было выше нормы и через 5,5 месяца после лучевого воздействия достигло величины 230±10 мм рт. ст. Наблюдалось недостоверное уменьшение массы тела облученных кроликов, ухудшение общего состояния, но все животные были живы в течение 5,5 месяца наблюдения. При морфологическом исследовании ткани легких было обнаружено в зоне лучевого воздействия у всех кроликов зарастание капилляров, деформация бронхов, уплотнение и сморщивание ткани легких и разрастание соединительной ткани. Анализ морфологического материала легких облученных кроликов позволил констатировать у 100% животных выраженные пульмоносклеротические изменения в зоне лучевого воздействия
Выводы
Получена экспериментальная модель лучевого пневмосклероза для разработки методов профилактики и терапии пульмонотоксичности.
Список литературы
1. Александров С . Н . Отдаленная лучевая патология млекопитающих . СПб: ФГБУ «РНЦРХТ им . ак . А . М . Гранова»
Минздрава России, 2019 . 260 с . 2 . С . Ф . Вершинина . Разработка патогенеза отдаленных последствий лучевого воздействия в свете идей С . Н . Александрова (К 100-летию со дня рождения) // Практическая онкология . 2019 . Т 20 . № 2 . С . 165-167 .
Метаболическое репрограммирование как новый подход к повышению противоопухолевой активности CD8+ Т-лимфоцитов
при раке легкого
Авторы
Скурихин Евгений Германович, eskurihin@inbox.ru, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга», ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
Ермакова Наталия Николаевна, nejela@mail.ru, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга», ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
Першина Ольга Викторовна, ovpershina@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга», ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
Пахомова Ангелина Владимировна, angelinapakhomova2011@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга», ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
Жукова Мария Андреевна, mashazyk@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга», ФГБНУ «Томский национальный исследовательский
медицинский центр РАН», ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Томск
Пан Эдгар Сергеевич, artifexpan@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга», ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
Сандрикина Любовь Александровна, ermolaeva_la@mail.ru, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга», ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск
Когай Лена Владимировна, kogay-lena@mail.ru, ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Томск
Кубатиев Аслан Амирханович, akubatiev.niiop@mail.ru, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Морозов Сергей Георгиевич, smorozov.biopharm@mail.ru, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Дыгай Александр Михайлович, amdygay@gmail.com, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга», ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН», Томск, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Ключевые слова:
рак легкого, метаболическое репрограммирование, стволовые опухолевые клетки, CD8+ Т-лимфоциты
Актуальность
Рак легкого является одной из распространенных форм рака и ведущей причиной смерти от рака. CD8+ Т-лимфоциты — ключевое звено противоопухолевого иммунитета, а клеточная терапия на основе Т-клеток служит перспективным подходом терапии рака легкого. Однако Т-клетки, полученные от пациентов, часто бывают дисфункциональны. В этой связи поиск и разработка путей усиления противоопухолевой активности Т-клеток актуальна. Потенциальным подходом может быть ингибирование MEK и PD-1 контрольных точек [1].
Цель
На модели карциномы легкого Льюис изучить противоопухолевый эффект репрограммированных CD8+ Т-лимфоцитов костного мозга.
Материалы и методы
CD8+ Т-лимфоциты, выделенные из костного мозга мышей линии C57/BL6, подвергались метаболическому репрограммированию ингибитором MEK и блокатором PD-1. В культуре клеток карциномы легких Льюис (LLC) изучили экспрессию CCR7, апоптоз и цитотоксичность репрограммированных CD8+ Т-лимфоцитов (рТ-клетки). Ортотопическую модель опухоли легких вызывали введением суспензии клеток LLC в количестве 1,5-106 клеток на мышь
в левое легкое. Введение LLC принимали за 0-й день эксперимента. рТ-клетки вводили в количестве 1-106 на мышь внутривенно на 4-й и 6-й дни эксперимента. Забор материала проводили на 7-й день эксперимента. Методом проточной цитометрии исследовали содержание стволовых опухолевых клеток СОК (EGF+Sox2+, CD44+Sox2+, EGF+CD44+Sox2+, Axl+) и лимфоцитов (CD3+CD8+, CD3+CD8+CD274+, CD3+CD8+CD279+) в крови и легких мышей.
Результаты
Репрограммирование значительно увеличивало количество CD8+ Т-лимфоцитов, экспрессирующих CCR7. После внутривенного введения рТ-клетки мышей-доноров активно мигрировали в легкие мышей-реципиентов с LLC. В культуре клеток LLC рТ-клетки демонстрировали большую цитотоксическую активность и выживаемость по сравнению с наивными Т-лимфоцитами. Терапия рТ-клетками снижала количество СОК в крови и легких, при этом количество CD8+ клеток в крови увеличивалось.
Выводы
Метаболическое репрограммирование с использованием ингибитора MEK и блокатора PD-1 является перспективным методом повышения эффективности противоопухолевой активности CD8+ Т-лимфоцитов костного мозга при клеточной терапии рака легкого.
Список литературы
1. Verma V., Jafarzadeh N . , Boi S . et al . MEK inhibition reprograms CD8+ T lymphocytes into memory stem cells with potent antitumor effects // Nat . Immunol . 2021. Vol . 22 . Р 53-66 .
