CC BY
32Вестник фармации № 3 (34) 2006
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ТЕХНОЛОГИЯ
Ю.А.Голяк, О.М.Хишова
РАЗРАБОТКА СОСТАВА КАПСУЛИ-РОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ИЗМЕЛЬЧЕННОЙ ТРАВЫ ПУСТЫРНИКА
Витебский государственный медицинский университет
Разработана технология получения капсул травы пустырника. Установлено, что применение влажного гранулирования позволяет достигнуть оптимальных технологических свойств. Стандартизацию капсул травы пустырника проводили по следующим показателям: средняя масса капсул, отклонение от средней массы капсул, отклонение от средней массы содержимого капсул, рас-падаемость, количественное и качественное содержание иридоидов и флаво-ноидов.
В настоящее время в научной медицине применяется пустырник сердечный и пустырник пятилопастной. В качестве лекарственного сырья у этих видов пустырника используется трава, собранная в фазу цветения.
Лекарственные средства (ЛС) пустырника в медицинской практике вначале применялись в качестве кардиотоническо-го, регулирующего ритм сердечной деятельности средства при сердечнососудистых неврозах, стенокардии и начальных стадиях гипертонической болезни. И только в начале ХХ века пустырник стали использовать как седативное средство. По характеру действия ЛС пустырника близки к ЛС валерианы [1, 2, 3, 4].
Фармацевтической промышленностью выпускаются следующие ЛС травы пустырника:
- настойка травы пустырника (1:5) на спирте этиловом 70%,
- жидкий экстракт пустырника 1:2 на спирте этиловом 25%,
- таблетки, содержащие сухой экстракт пустырника в количестве 0,014 г (Ни-
жегородская фармацевтическая фабрика, РФ).
Пустырник входит в состав ланды-шево-пустырниковых капель, бальзама «Московия» и в состав более 10 лекарственных сборов.
В аптечной практике по экстемпо-ральной рецептуре из травы пустырника готовят настой пустырника (1:10), часто в сочетании с другими ЛС [2, 4].
Пустырник содержит богатый комплекс биологически активных веществ (БАВ). Химический состав травы пустырника очень разнообразен и еще недостаточно изучен. Вещества, выделенные из пустырника, относятся к различным классам химических соединений. БАВ, обладающими седативной и гипотензивной активностью, являются иридоиды: аюгол, аюгозид, гарпагид и гарпагида ацетат и флавоноиды: рутин, кверцетин, гиперозид [5, 6, 7, 8].
Большинство фитопрепаратов получают путем экстрагирования суммы БАВ из лекарственного растительного сырья (ЛРС). Общим недостатком всех экстракционных ЛС является то, что истощение ЛРС в процессе производства по существующим технологиям на фармацевтических предприятиях происходит на 50 -60%, в результате чего более 40% БАВ теряется в виде отработанного шрота [9].
Одним из путей комплексной переработки является использование ЛС на основе измельченного порошка. ЛРС в виде измельченного порошка в течение многих веков используется в тибетской медицине и народной медицине Китая. Создание таких ЛС является одним из перспективных направлений развития фармацевтического производства, так как позволяет максимально использовать весь комплекс БАВ, рационально применять растительные ресурсы.
Одной из наиболее ответственных стадий при производстве капсул и является наполнение их корпуса. Воспроизводимость и точность дозирования зависит от характеристики наполнителя, метода наполнения и типа заполняющей машины.
Активные вещества для наполнения твердых желатиновых капсул должны обладать определенными физико-химическими и технологическими свойствами: определенная величина и форма частиц, однородность размера частиц, сыпучесть, содержание влаги, способность к компактному формованию под давлением [10].
Для придания активным компонентам необходимых технологических свойств к ним добавляют вспомогательные вещества. Необходимо учитывать тот факт, что капсульные машины работают по принципу полного засыпания объема капсулы, поэтому следует вводить наполнители для заполнения всего объема капсулы [11].
Целью нашего исследования явилась разработка технологии получения и методов стандартизации капсулированной лекарственной формы измельченной травы пустырника (степень измельчения 0,1 -0,25 мм).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
При разработке методик оценки качества капсул измельченной травы пустырника учитывали то, что БАВ пустырника являются иридоиды и флавоноиды. По данным [12] проводят количественное определение иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат. Европейская фармакопея рекомендует определять флавоноиды спектрофотометрическим методом в пересчете на гиперозид [13]. Имеются методики спектрофотометрического определения флавоноидов в пересчете на рутин [5]. Нами для оценки качества разработанных капсул предложена методика спектрофо-тометрического определения иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат и флавонои-дов в пересчете на рутин.
Методика количественного определения иридоидов. Около 2,5 г (точная навеска) тщательно перемешанного содержимого 20 - 25 капсул помещали в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, прибавляли 40 мл спирта этилового 40%. Нагревали на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 45
мин. Затем колбу охлаждали до комнатной температуры и фильтровали извлечение через ватный тампон в мерную колбу вместимостью 50 мл. Вату с осадком помещали в колбу для экстрагирования, прибавляли 15 мл спирта этилового 40% и повторяли экстрагирование указанным выше способом в течение 15 мин. Охлаждали и фильтровали извлечение через ватный тампон в ту же мерную колбу. Доводили объем извлечения спиртом этиловым 40% до метки и перемешивали.
10 мл фильтрата упаривали до 5 мл и доводили объем до 10 мл водой очищенной. Фильтровали через стеклянную колонку диаметром 1 см с 3 г оксида алюминия для хроматографии 2 степени активности. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещали 5 мл элюата, прибавляли 5 мл щелочного раствора гидроксиламина и выдерживали 5 мин. Прибавляли 10 мл 1 М раствора кислоты хлористоводородной и доводили объем раствором железа окисно-го хлорида 1% в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной, перемешивали.
Измеряли оптическую плотность на спектрофотометре СФ-46 при длине волны 512 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали раствор, содержащий 5 мл воды очищенной, 5 мл щелочного раствора гидроксила-мина, 10 мл 1 М раствора кислоты хлористоводородной, доведенный раствором железа окисного хлорида 1% в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной в мерной колбе вмесимостью 25 мл.
Содержание иридоидов (Х) в одной капсуле в миллиграммах вычисляли по формуле:
X =
Б • 50•25•Ъ -1000
■ 5 • а • 100
(1)
где Б - оптическая плотность исследуемого раствора;
Е - удельный показатель поглощения, равный 56,03;
а - масса навески содержимого капсул в мг;
Ь - средняя масса содержимого капсулы в мг;
5 - количество мл извлечения, взятого на анализ.
Методика качественного определения иридоидов. 10 мл извлечения, полученного для количественного определения, наносили на стеклянную колонку диаметром 1 см, заполненную 3 г алюминия оксида. На линию старта хроматогра-фической пластинки ''Силуфол УФ-254'' размером 15 х 15 наносили 0,05 мл элюата и высушивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Хроматографировали восходящим способом в системе растворителей хлороформ - метанол - вода (80:2:0,1). Когда фронт растворителей пройдет 10 см от линии старта, пластинку вынимали из камеры и высушивали в вытяжном шкафу в течение 5 мин. Пластинку обрабатывали реактивом Шталя и выдерживали в сушильном шкафу при температуре (100±5) 0С в течение 5 мин.
На хроматограмме раствора испытуемого образца должно появиться не менее трех зон сиреневого окрашивания с ЯГ около 0,40 (гарпагид), пятно с ЯГ около 0,60 (аюгозид), пятно с ЯГ около 0,80 (гар-пагида ацетат).
Методика количественного определения флавоноидов. Около 2,5 г (точная навеска) тщательно перемешанного содержимого 20 - 25 капсул помещали в круглодонную колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 25 мл спирта этилового 70 %. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Затем колбу охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через ватный тампон в мерную колбу вместимостью 50 мл. Ватный тампон с сырьем снова помещали в колбу для экстрагирования, прибавляли 25 мл спирта этилового 70% и продолжали экстрагирование указанным выше способом в течение 15 мин. Охлаждали и фильтровали извлечение через ватный тампон в ту же мерную колбу. Сырье обрабатывали еще 5 мл спирта этилового 70 %, фильтруя в ту же мерную колбу. Объем извлечения в колбе доводили спиртом этиловым 70% до метки и перемешивали. 20 мл полученного извлечения упаривали на кипящей водяной бане до 10 мл и разбавляли водой до первоначального объема. Раствор фильтровали через ватный тампон в стеклянную ко-
лонку диаметром 1 см, заполненную 1 г полиамидного сорбента. Колонку промывали 30 мл воды, из которых 10 мл использовали для промывания ватного тампона, который после этого убирали. Водный элюат отбрасывали.
Элюирование флавоноидов проводили 25 мл спирта этилового 70%, который добавляли в колонку постепенно порциями по 5 мл. Продвижение флавоноидов контролировали визуально (коричневая зона). Когда зона достигала нижней части сорбента, элюат собирали в мерную колбу вместимостью 25 мл. Объем раствора в колбе доводили спиртом этиловым 70% до метки и перемешивали.
Переносили 3 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляли 10 мл спирта этилового 96%, 0,5 мл раствора кислоты уксусной 33%, 1,5 мл раствора хлорида алюминия 10 %, 2 мл раствора гексаметилентетрамина и доводили объем раствора водой до метки. Через 30 мин измеряли оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 407 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм по сравнению с контрольным раствором. В качестве раствора сравнения использовали раствор, содержащий 3 мл испытуемого раствора, 10 мл спирта этилового 96% , 0,5 мл раствора кислоты уксусной 33%, доведенный водой очищенной до 25 мл.
Параллельно измеряли оптическую плотность 1 мл раствора рабочего стандартного образца (РСО) рутина, приготовленного аналогично испытуемому раствору.
Содержание флавоноидов (Х) в одной капсуле, в миллиграммах вычисляли по формуле:
X =
Б • 0,02 • 50 • 25 • 25 • Ъ Бп •а•3•20 :
(2)
где Б - оптическая плотность испытуемого раствора;
Б0 - оптическая плотность раствора стандартного образца рутина;
0,02 - содержание рутина в 1 мл стандартного образца в мг;
а - масса навески содержимого капсул в мг;
b - средняя масса содержимого капсулы в мг.
Методика качественного определения флавоноидов. Около 1,0 г (точная навеска) тщательно смешанного содержимого капсул помещаи в круглодонную колбу вместимостью 50 мл, прибавляли 10 мл спирта этилового 70% . Нагревали на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 5 мин. Затем колбу охлаждали до комнатной температуры и фильтровали извлечение через ватный тампон, отбрасывая первые 1-2 мл (испытуемый раствор).
На линию старта хроматографиче-ской пластинки «Сорбфил-ПТСХ-П-В-УФ» размером 10 х 10 наносили 0,02 мл испытуемого раствора, 0,02 мл раствора рабочего стандартного образца (РСО) рутина и 0,02 мл раствора рабочего стандартного образца (РСО) гиперозида. Пластинку с нанесенными пробами высушивали на воздухе в течение 5 мин и хрома-тографировали восходящим способом в системе растворителей этилацетат - муравьиная кислота - вода (10:2:3). Когда фронт растворителей пройдет 8 см от линии старта, пластинку вынимали из камеры, высушивали в вытяжном шкафу в течение 5 мин и обрабатывали парами раствора аммиака 25%. На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться пятна светло-коричневого цвета на уровне пятен хроматограммы раствора РСО рутина и хроматограммы раствора РСО гиперозида.
Приготовление раствора РСО рутина. 0,0500 г (точная навеска) рутина, предварительно высушенного при температуре 100 - 105 0С до постоянной массы, помещали в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляли 60 мл спирта этилового 70% и нагревали на водяной бане в колбе с обратным холодильником до полного растворения кристаллов. После охлаждения раствор количественно переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили объем раствора спиртом этиловым 70% до метки и перемешивали.
Срок годности раствора 1 мес.
Приготовление РСО гиперозида.
0,0500 г (точная навеска) гиперозида, предварительно высушенного при температуре 100 - 105 0С до постоянной массы, помещали в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляли 60 мл спирта этилового 70% и нагревали на водяной бане в колбе с обратным холодильником до полного растворения кристаллов. После охлаждения раствор количественно переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили объем раствора спиртом этиловым 70% до метки и перемешивали.
Срок годности раствора 1 мес.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В предыдущей работе были опубликованы данные о технологических свойствах измельченной травы пустырника [14]. Результаты изучения технологических свойств измельченной травы пустырника: сыпучесть (0,94±0,04) г/с, насыпная масса (268,00±0,01) кг/м3, насыпная масса при уплотнении (372,00±0,02) кг/м3.
При анализе полученных результатов можно сделать заключение о том, что порошковые фракции травы пустырника обладают недостаточной сыпучестью. Авторами [15] предложена примерная классификация сыпучести материалов. Согласно этой классификации выделено 6 классов сыпучести. Сыпучесть порошковых фракций травы пустырника относится к 6 классу - очень плохая.
Применяют 2 основных способа для повышения сыпучести: предварительное гранулирование и применение вспомогательных веществ, повышающих сыпучесть.
Для установления оптимального состава капсул измельченной травы пустырника было проведено изучение сыпучести с добавлением аэросила, кальция стеарата, крахмала, лактозы, в концентрациях 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%. Полученные данные представлены на рис. 1.
2,2 2 1,8
И о
л
8 1,6 V
л
и
^ 1,4 1,2 1
А
...........а
х ™ « " ш а., ч*™........................................."..... ..... щ
А............ .......—-
2 3 4
Концентрация, %
6
• аэросил - - • - - кальция стеарат —А— крахмал ..................."...................Лактоза
Рис. 1. Зависимость сыпучести от содержания и концентрации вспомогательных веществ.
Результаты исследований показали, что присутствие вспомогательных веществ позволяет лишь незначительно улучшить сыпучесть. Наибольшее увеличение сыпучести наблюдается при использовании композиции с аэросилом, которого вводили в количестве 1%. Дальнейшее увеличение концентрации аэросила приводило к
2,1
« 2,05
е
£ 2
£ 1,95
Р 1,9
у
1,85 1,8 1,75
небольшому ухудшению сыпучести. Поэтому в последующем использовали композиции измельченной травы пустырника с аэросилом в количестве 1%.
Следующим этапом исследований явилось изучение влияния влажности на сыпучесть. Полученные данные представлены на рис. 2.
ы С
5
7
9
11
13
15
Влажность, %
Рис. 2. Зависимость сыпучести от влажности измельченной травы пустырника.
Из данных, представленных на рис. 2 видно, что влажность измельченной травы пустырника практически не оказывает влияния на сыпучесть.
Использование вспомогательных веществ в предложенных концентрациях не позволяет значительно улучшить сыпучесть. Поэтому использовали метод влаж-
ного гранулирования для повышения сыпучести. В качестве связывающего вещества применяли раствор крахмала 6%. Увлажненную массу протирали сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Значение сыпучести полученного гранулята составило (5,57±0,60) г/сек, насыпной массы (262,83±3,53) кг/м3. Применение влажного гранулирования позволило значительно улучшить сыпучесть.
Исходя из значения насыпной массы гранулята, можно предположить использование капсул № 1, тогда капсула будет содержать 0,13 г гранулята (0,125 г измельченной травы пустырника) или капсул № 0, тогда капсула будет содержать 0,18 г гранулята (0,174 г измельченной травы
Как видно из представленных данных (табл. 1) все серии капсул соответствуют требованиям нормативной документации (НД).
ВЫВОДЫ
1. Изучена зависимость сыпучести измельченной травы пустырника от природы и количества вспомогательных ве-
пустырника). Выбор капсул большего размера приведет к необоснованному дополнительному введению вспомогательных веществ. Капсулы меньшего размера не будут содержать терапевтическую дозу измельченной травы пустырника.
Оценку качества предложенных капсул проводили по следующим показателям: средняя масса капсул, отклонение от средней массы капсул, средняя масса содержимого капсул, отклонение от средней массы содержимого капсул, распадае-мость, количественное и качественное содержание иридоидов и флавоноидов. Показатели качества капсул измельченной травы пустырника приведены в табл. 1.
ществ. Установлено, что для значительного улучшения сыпучести необходимо применение метода влажного гранулирования.
2. Проведена стандартизация капсул измельченной травы пустырника по следующим показателям: средняя масса капсул, отклонение от средней массы капсул, средняя масса содержимого капсул, отклонение от средней массы содержимого капсул, распадаемость, количественное и
Таблица 1
Показатели качества капсул измельченной травы пустырника (п = 5, Р = 95)
№ Показатели качества
серии Сред няя масса капсул, мг Отклонение от средней массы капсул, % Средняя масса содержимого капсул, мг Отклонение от средней массы со-держимо-го капсул, %. Распа- дае-мость, Количественное содержание флавоноидов, ( Х ± АХ ), мг Количественное содержание иридоидов, (Х ± АХ), мг
1 273 От -3,7 до +4,0 177 От -4,0 до +2,3 526 0,479±0,023 0,835± 0,028
2 274 От -1,8 до +2,2 177 От -4,5 до +3,4 583 0,652±0,030 0,908± 0,044
3 275 От -2,2 до +2,9 176 От -3,4 до +3,4 519 0,505±0,027 0,808± 0,047
4 279 От -3,2 до +1,8 176 От -4,0 до +3,4 539 0,580±0,016 0,797± 0,045
5 276 От -4,7 до +2,5 176 От -3,4 до +3,4 519 0,551±0,017 0,881± 0,029
качественное содержание иридоидов и флавоноидов. По всем показателям качества разработанные капсулы пустырника соответствуют требованиям НД.
SUMMARY Haliak Y. A., Chishova O. M.
THE MATERIAL OF GRANULATED HERB LEONURUS CAPSULES CONTENT
The technology of the herb Leonurus capsules obtaining is worked out. It is state that the application of a wet granulation allows to achieve optimum running characteristics. Standardizing of the herb Leonurus capsules was made on the following parameters: mean mass of capsules, uniformity of mass, uniformity of content, disintegration, quantitative and qualitative contents of iridods and fla-vonoids.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР: 2 т. / М-во здравоохранения СССР. - 11 изд. - М.: Медицина, 1987-1989. - Т. 2: Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. - 1989. - 400 с.
2. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. / М. Д. Машковский. -14 изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2002. - Т. 1. - 540 с.
3. Растительные лекарственные средства / Н.П. Максютина [и др.]; под ред. Н.П. Максютиной. - К.: Здоров,я, 1985. -280 с.
4. Соколов, С.Я. Справочник по лекарственным растениям (Фитотерапия) / С.Я. Соколов, И.П. Замотаев. - 3-е изд. - М.: Медицина. - 1990. - 464 с.
5. Попов, Д. М. Контроль качества сырья препаратов пустырника спектрофото-метрическим методом / Д. М. Попов, Е.В. Пащинская, Л.И. Коваленко // Фармация. - 1992. - № 4 - С. 27-31.
6. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Hippurida-ceae - Lobeliaceae / АН СССР, ботан. ин-т им. В.Л. Комарова; редкол Е.А.
Мазная [и др.]. - СПб: Наука, 1991. -197 с.
7. Федосеева, Л.В. Количественное определение иридоидов в сырье пустырника/ Л.В. Федосеева, Д.М. Попов // Фармация. - 1997. - № 4. - С. 18-21.
8. Buzogany, T. Comparative study between the species Leonurus cardiaca L. and Leonurus quinquelobatus Gilib Part II. Iridoids. / T. Buzogany, V. Cucu // Clujul Medical. - 1983. - Vol. 56. - № 4. - P. 385-388.
9. Каухова, И.Е. Новая методика получения растительных препаратов / И.Е. Каухова // Фармация. - 2006. - № 1. -С. 37-39.
10. Промышленная технология лекарств: учебник: в 2 т. / В.И. Чуешов [и др.]; под ред. В.И. Чуешова. - Х.: МТК-Книга; Изд. НФАУ, 2002. - Т. 2. - 716 с.
11. Ярных, Т.Г. Разработка состава и исследование капсулированной лекарственной формы с препаратом прополиса/ Т.Г. Ярных, О.С. Данькевич, О.В. Лукиенко // Провизор. - 1999. - № 14. -С. 23-28.
12. Изменение №5 МЗ РФ к статье 54 ГФ XI вып. 2 ст. 54 «Трава пустырника» от 16.06.1999.
13. European Pharmacopoeia 4th Edition.
14. Голяк, Ю.А. Изучение технологических характеристик измельченной травы пустырника / Ю.А. Голяк, О.М. Хишова // Современная медицина и фармация (теоретические и практические аспекты): Материалы 53-й итоговой конференции студентов и молодых ученых ВГМУ. / Витебский гос. мед. ун-т; редкол.: О.Я.-Л. Бекиш [и др.]. -Витебск, 2001. - С. 278-270.
15. Вальтер, М. Б. Постадийный контроль в производстве таблеток / М. Б. Вальтер, О.Л.Тютенков, Н.А.Филипин. - М.: Медицина, 1982. - 208 с.
Поступила 04.12.2006 г.
