CC BY
0Список литературы: -
Разработка 3d-клеточных систем для создания персонализированного подхода в лечении агрессивных форм солидных опухолей
Авторы:
(1) Данилова А.Б., anna_danilova@bk.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(2) Нехаева Т.Л., nehaevat151274@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(3) Ефремова Н.А., nataliaavdonkina@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(4) Балдуева И.А., biahome@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Ключевые слова
солидные опухоли, клеточные модели, сфероиды
Актуальность
Использование клеточных моделей, адекватно отражающих реальную клиническую ситуацию, является важной составляющей экспериментальных исследований в области онкологии. До недавнего времени in vitro использовали упрощенные двухмерные системы культивирования клеток, которые не позволяли воссоздать фенотип опухоли пациента. 3D-модели способны воспроизводить важнейшие характеристики опухолей, такие как структура, рецепторный состав, секреторные функции, и могут служить в качестве предиктивных и диагностических систем при персонализированном подходе к выбору противоопухолевой терапии [1].
Цель
Разработка экспериментальных 3D-моделей in vitro опухолевого очага для создания персонализированного подхода в лечении солидных опухолей.
Материалы и методы
Для создания 3D-клеточных моделей использовали технологию низкоадгезивных поверхностей на 96-лу-ночных планшетах Ultra-Low Attachment Surface (Corning, США). Сфероиды, полученные из клеток 15 культур меланомы кожи, 20 сарком мягких тканей и 9 опухолей эпителиального происхождения, культивировали 3-8 сут в СО2-инкубаторе Heracel (Thermo Electron LTD GmbH, Германия) при 37 °С, 100% влажности и 5% СО2.
Результаты
При изучении особенностей создания сфероидов из клеток солидных опухолей не обнаружили прямой зависимости эффективности их формирования от гистогенетического происхождения малигнизированных клеток. Пространственная организация клеточных моделей определяла секреторный профиль опухолевых клеток и их способности к инвазии. Иммуногисто-/цитохимическое исследование выявило сходство структуры сфероидов и исходной опухолевой ткани. При переходе к 3Б-культивированию опухолевые клетки демонстрировали появление и/или увеличение экспрессии N-кадгерина, CD44, фактора гипоксии HIF1A, шаперона Hsp70, что коррелирует с выраженными инвазивными свойствами опухолевых клеток в трехмерной среде. Изучение жизнеспособности и инвазивных свойств клеток солидных опухолей в 3D-системе под действием химиопрепаратов и их комбинаций, используемых в клинике, показало, что из всех проведенных экспериментов по изучению эффективности химиопрепаратов трехмерная клеточная система оправдала себя в 77,7% случаев.
Выводы
В системах 3D-культивирования опухолевые клетки имеют более выраженные секреторные свойства и метастатический потенциал, формируют механизмы устойчивости к условиям гипоксии, активируют систему аутофагии. Сфероиды могут рассматриваться в качестве эффективной модели для изучения воздействия химиотерапевтических препаратов на опухолевые клетки и подбора рациональной терапии.
Использованная литература
1. Calpe B . , Kovacs W. J . High-throughput screening in multicellular spheroids for target discovery in the tumor microenvironment // Expert Opin Drug Discov. 2020 . Vol ,15(8):955-967 . DOI: 10 .1080/17460441. 2020 .1756769 .
Два типа опухоль-ассоциированных макрофагов имеют различную корреляцию с прогрессированием рака предстательной железы
Авторы:
(1) Павлов Валентин Николаевич, pavlov@bashgmu.ru, Институт урологии и клинической онкологии,ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа
(2) Данилко Ксения Владимировна, kse-danilko@yandex.ru, Лаборатория клеточных культур ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России, Уфа
(3) Еникеева Кадрия Ильдаровна, kienikeeva@bashgmu.ru, Лаборатория иммунологии Института урологии и клинической онкологии, ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа
(4) Рафикова Гузель Альбертовна, garafikova@bashgmu.ru, Лаборатория иммунологии Института урологии и клинической онкологии, ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа
(5) Максимова Серафима Юрьевна, maksimova-serafima@mail.ru, Институт урологии и клинической онкологии,ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа
(6) Кабиров Ильдар Раифович, ildarkabirov@gmail.com, Биобанк, Институт урологии и клинической онкологии,ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа
(7) Вишняков Дмитрий Сергеевич, nomadsoul84@gmail.com, ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа
(8) Кжышковска Юлия Георгиевна, julia.kzhyshkowska@medma.uni-heidelberg.de, Институт трансфузионной медицины и иммунологии, Медицинский факультет Мангейма, Гейдельбергский университет, Мангейм
Ключевые слова
макрофаг, рак предстательной железы, опухоль-ассоциированные макрофаги, метастазы
Актуальность
Смертность при прогрессировании рака предстательной железы связана с отсутствием терапевтических схем, способных дать устойчивый ответ на терапию. Крайняя гетерогенность рака предстательной железы на генетическом и клеточно-биологическом уровнях, как предполагается, лежит в основе резистентности рака предстательной железы к терапии. Накопленные данные свидетельствуют о том, что воспалительное микроокружение, особенно опухоль-ассоциированные макрофаги (ОАМ), участвуют в канцерогенезе предстательной железы и выступают в качестве важного модулятора злокачественной прогрессии, метастазирования и общего терапевтического ответа. Однако конкретная роль резидентных и моноцитарных макрофагов в про-грессировании рака предстательной железы остается неясной.
Цель
Анализ морфологических особенностей, размера и количества макрофагов в образцах ткани рака предстательной железы, анализ корреляции специфических подтипов ОЛЖ с клиническими характеристиками пациентов с раком предстательной железы.
Материалы и методы
Мы провели ретроспективный анализ 36 больных раком предстательной железы (без метастазов в лимфатических узлах на момент операции, с метастазами, с баллом Глисона и с уровнем риска биохимического рецидива), которым было проведено хирургическое лечение. Иммуногистохимическое окрашивание проводилось для маркера макрофагов CD68. Световая микроскопия использовалась для визуализации и количественной оценки CD68+ клеток диаметром более 100 мкм2 и менее 100 мкм2.
Результаты
Были выявлены два основных морфологических типа CD68+ ОАМ: мелкие макрофаги размером до 100 мкм2 и макрофаги пенистого типа размером более 100 мкм2. Мы выявили участки с крупными пенистыми макрофагами округлой формы и крупнозернистой структурой цитоплазмы, расположенные в
