CC BY
38
УДК 616.9-097-036
V. V. Novikov1- 2,1. V. Evsegneeva3, А. V. Karaulov3, A. Yu. Baryshnikov4
THE SOLUBLE FORM OF IMMUNE CELLS MEMBRANE ANTIGENS AT SOCIAL CHARACTER INFECTIONS. REPORT 2. THE INVESTIGATION OF THEIR ROLE AT VIRAL INFECTION
1 Lobachevsky State University, Nizhny Novgorod
21. N. Blokhina Institute of Epidemiology and Microbiology, Nizhny Novgorod
31. M. Sechenov Moscow Medical Academy 4 N. N. Blokhin Russian Cancer Research Center RAMS, Moscow
ABSTRACT
The structural and functional characteristics of immune cellular soluble marker expression are presented. The alterations of core protein in blood serum of liver damage in hepatitis В, С and G and AIDS were discussed. The prognostic and monitoring significance of immune cellular soluble membrane antigens in pathogenesis of the diseases caused by hepatitis viruses and HIV are suggested.
/
Key words: social character infections, soluble antigens, immune response, prognosis.
В. В. Новиков1’2, И. В. Евсегнеева3, А. В. Караулов3, А. Ю. Барышников4
РАСТВОРИМЫЕ ФОРМЫ МЕМБРАННЫХ АНТИГЕНОВ КЛЕТОК ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ СОЦИАЛЬНО ЗНАЧИМЫХ ИНФЕКЦИЯХ.
СООБЩЕНИЕ 2.
ИССЛЕДОВАНИЕ ИХ РОЛИ ПРИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЯХ
1 Нижегородский госуниверситет им. Н. И. Лобачевского 2 Нижегородский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. И. Н. Блохиной 3 Московская медицинская академия им. И. М. Сеченова 4 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва
РЕЗЮМЕ
Дана структурная и функциональная характеристика растворимых форм широкого круга мембранных антигенов клеток иммунной системы. Продемонстрирован характер изменения их сывороточного содержания при вирусных гепатитах В, С и G, ВИЧ-инфекции и смешанных инфекциях. Показана прогностическая и мониторинговая значимость растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы при социально значимых вирусных инфекциях.
Ключевые слова: социально значимые вирусные инфекции, растворимые антигены, иммунный ответ, прогнозирование.
Несомненный интерес представляют молекулярные механизмы участия растворимых антигенов в иммунном ответе, развивающемся при наиболее распространенных вирусных инфекциях, таких, как вирусные гепатиты и ВИЧ-инфекция, а также прогностическая значимость сывороточного содержания растворимых антигенов при этих заболеваниях.
У НВв-положительных больных хроническим гепатитом В, характеризующихся активной репликацией вируса и высокими биохимическими показателями, были выявлены высокие уровни бСБЗ 0-антигена. Содержание данного антигена было в 2,5 раза выше, чем у доноров — носителей НВэ-антигена, и в 9 раз выше, чем у здоровых доноров. Обнаружена связь высоких
132 КЛИНИЧЕСКАЯ ОНКОЛОГИЯ
) уровней бСБЗ0-антигена с активной стадией заболева- зультатов, что свидетельствует о высокой лабильности ния. Завершение репликации вируса и биохимическая данного показателя и о наличии широких индивиду-ремиссия ассоциировались со снижением сывороточ- альных колебаний [6]. ного уровня этого антигена. Высокое сывороточное При остром гепатите С сывороточное содержание содержание его, обнаруживаемое в активной фазе зС050-антигена на протяжении всего курса лечения ИВБ-положительного хронического гепатита В, свиде- также имело выраженную тенденцию к повышению, тельствует, по мнению авторов, о выраженности И в этом случае вирусная инфекция сопровождалась по крайней мере ТЬ2-звена, отвечающего за эффектов- широким разбросом индивидуальных уровней этого ность продукции антител [27]. В то же самое время антигена: у больных хроническим гепатитом С зареги-при гепатите С не обнаружено значительных измене- стрировано более выраженное увеличение его сыворо-ний уровня БСБЗО-антигена, что свидетельствует о бо- точного содержания (в 2,3 раза в сравнении с нормой), лее существенной роли Т-клеточного цитотоксическо- Относительное количество СБ5 О-положительных го ответа при вирусном гепатите С в сравнении с ти- мононуклеарных клеток периферической крови при пом В [69]. остром и хроническом гепатите С не менялось и соот-Получены данные о повышении при вирусном ге- ветствовало нормальному донорскому уровню. Отсут-патите В уровня сывороточных бС054 (з1САМ-1) ствие изменений в содержании СБбО-положительных и бС058 (вЬЕА-З), являющихся антигенами адгезии, клеток при вирусном гепатите С позволяет предполо-Однако такое повышение не коррелирует с тяжестью жить, что лимфоциты, часть которых экспрессирует заболевания и связано, по мнению авторов, с понижен- С050-антиген, не являются источником растворимой ной скоростью выведения из организма сывороточных формы этого антигена. Вероятным источником повы-белков вследствие нарушения функций печени [42]. шенного его количества в сыворотке крови больных Нами совместно с Ю. С. Птицыной исследовано вирусным гепатитом С могут быть нейтрофилы, также содержание другого антигена адгезии — СЭ50. Мем- экспрессирующие СБ50-антиген и способные к его бранная форма антигена 1САМ-3 (СБ50) экспрессиру- сбросу при активации. Повышенный шедцинг с мем-ется на поверхности лейкоцитов и играет важную роль браны нейтрофилов СБ50-антигена в очагах воспале-в инициации иммунного ответа. СБ50-антиген спосо- ния, формирующихся при хроническом активном ге-бен переходить в свободную растворимую форму в ре- патите, может приводить к значительному увеличению зультате протеолитического шедцинга мембранной его содержания в крови больных [59, 72]. формы. Известно, что растворимый С050-антиген об- Выявлена положительная корреляция между уров-разуется за счет схода с мембран трех основных типов нем сывороточного бСВ50-антигена и показателями клеток: активированных нейтрофилов, макрофагов тимоловой пробы у больных хроническим гепатитом и активированных Т-лимфоцитов. СБ50 наряду с ши- С. Повышение показателей тимоловой пробы регист-роко известной молекулой 1САМ-1 (СЭ54) является рируется, как правило, при хроническом активном ге-лигандом 1Л*А-1 -антигена. Но, в отличие от 1САМ-1, патите и свидетельствует о нарушении белково-синте-мембранная экспрессия которого индуцируется при тической функции печени. Полученные результаты по-воздействии многих факторов и, в первую очередь, зволяют сделать заключение о том, что при при воспалении, С050-антиген характеризуется кон- хронической форме вирусного гепатита С изменение ститутивной экспрессией [18, 55, 79]. концентрации 5СБ50-антигена отражает интенсив-В крови больных острым гепатитом В концентра- ность воспалительных процессов в печени, ция бС050-антигена имела выраженную тенденцию У больных острым гепатитом В на фоне хрониче-к повышению. Наиболее высоких значений она дости- ского гепатита С уровень 8С050-антигена в сыворотке гала через 3 нед. после поступления больного в стаци- крови был повышен в сравнении с нормой и соответ-онар, а затем несколько снижалась. Относительное со- ствовал величине, характерной для больных хрониче-держание С050-положительных мононуклеарных кле- ским гепатитом С. В то же время при смешанном ин-ток в периферической крови, определенное при фицировании вирусами гепатитов В, С и Б уровень поступлении больных острым гепатитом В в стацио- СБ50-антигена поднимался намного более значитель-нар, обнаруживало тенденцию к снижению с последу- но. При вирусных гепатитах повышенное количество ющей нормализацией при выписке больного из стаци- зС050-антигена, вероятно, образуется за счет либо ус-онара. Поскольку С050-антиген характеризуется кон- коренного шедцинга, приводящего к снижению плот-ститутивной экспрессией и уровень ее не чувствителен ности экспрессии антигена на мембране, либо наруше-к медиаторам воспаления, можно предположить, что ния функций печени. В любом случае следствием та-ярко выраженные тенденции к снижению относитель- ких изменений является торможение адгезионных ного количества С050-положительных клеток и к од- процессов, участвующих в формировании механизмов новременному повышению сывороточного уровня цитотоксических реакций [7, 79]. бС05 0-антигена при остром гепатите В являются ре- Группа французских специалистов также провела зультатом шедцинга молекулы СБ50 с мембраны моно- исследование уровня ряда растворимых антигенов ад-нуклеарных клеток. При хроническом гепатите В уро- гезии при хроническом гепатите С. Выявлено повы-вень бС05 0-антигена был таким же высоким, как при шенное содержание растворимых антигенов СБ54, остром гепатите В. Отмечался большой разброс ре- СО 106 (УСАМ) и СБ62Е (Е-селектин). Уровень
№3/том4/2005 . РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
$С054-антигена коррелировал с активностью воспалительных процессов печени, а уровни растворимых антигенов СО 106 и С062Е — с частотой формирования фиброза печени. При хроническом гепатите С растворимые молекулы адгезии являются таким образом маркерами воспалительных и фиброзных явлений [40].
Нами изучено содержание растворимого С050-ан-тигена в сыворотке крови лиц, инфицированных вирусом гепатита в. Присутствие в крови РНК вируса гепатита в сопровождалось повышением уровня бС050-антигена в еще большей степени, чем при смешанном гепатите В+С+О. Такие же высокие уровни были зарегистрированы в крови лиц, у которых наряду с РНК вируса гепатита в обнаруживались маркеры вирусных гепатитов В и С.
Гепатит в характеризуется медленным развитием ответа на инфицирование вирусом. Во многих случаях у лиц, инфицированных вирусом, антительный иммунный ответ развивается только через 10-15 лет. Отличительной чертой является также редкая встречаемость иммунологических и молекулярно-биологичес-ких маркеров гепатита в одновременно. Гуморальный ответ в виде защитных антител к поверхностному белку вируса Е2 регистрируется только после исчезновения в крови РНК вируса, т. е. после санации организма. Вероятно, повышенный уровень зС050-антигена вносит свой вклад в торможение адгезионных процессов и формирование медленно развивающегося иммунного ответа на вирус гепатита в [7].
Интересными представляются данные, полученные группой немецких авторов, проводивших широкое эпидемиологическое изучение взаимосвязи между подверженностью лиц острым респираторным заболеваниям и уровнем антигенов бС054 и бС058 в крови обследованных. Была выявлена высокая обратная корреляция между уровнем бС058-, а также $С054-анти-гена и частотой простудных заболеваний. Дополнительное исследование подтвердило, что последняя ассоциирована с низким уровнем растворимых молекул адгезии зС054 и бС058 [16]. Тем самым была показана высокая значимость растворимых молекул адгезии в защите от вирусных агентов, вызывающих респираторные заболевания. С этими данными перекликаются результаты, полученные нашей группой при исследовании уровня вСОбО-антигена в крови больных гриппом. У этих больных, госпитализированных в стационар, выявлено падение сывороточного содержания БС050-антигена, указывающее на снижение уровня активационных процессов, идущих с участием С050-антигена [13]. Одновременно обнаружен подъем сывороточного содержания растворимого антигена Рае (зС095) и падение уровня растворимых молекул НЬА I класса (бНЬА-!).
Известно, что вакцинопрофилактика против гриппа не всегда эффективна, что связано с особенностями иммунной системы организма. Это вызывает необходимость разработки индивидуально дифференцированных подходов к оценке эффективности вакцинации. Обнаружено, что после вакцинации против грип-
па лиц, не заболевающих затем гриппом, регистрируется повышение сывороточного уровня растворимых антигенов гистосовместимости I класса. Соответственно лица, которые, несмотря на вакцинацию, заболевали гриппом, характеризовались отсутствием изменений или понижением уровня молекул зНЬА-1. Представляется весьма вероятным, что, используя данный показатель, можно идентифицировать лиц, входящих после вакцинации в группу риска по заболеваемости гриппом.
Большое внимание уделено изучению роли растворимого С08-антигена в патогенетических механизмах формирования ответа на вирусные инфекции. Значительное увеличение содержания БСОв-антигена, сходящего с мембраны цитотоксических Т-лимфоци-тов, было зарегистрировано при различных формах поражения печени: острых вирусных и хронических активных гепатитах, первичном билиарном циррозе, аутоиммунном и фульминантном гепатите, циррозе печени. Наиболее высокий уровень вСОв-антигена наблюдался при хроническом активном гепатите. При этом, за исключением фульминантного гепатита, не выявлено больших изменений в содержании эС04-антигена, продуцируемого Т-хелперами. Причиной таких различий в характере изменений уровня растворимых антигенов заключается в том, что при гепатитах С08-положительные цитотоксические Т-клетки принимают непосредственное участие в повреждении ге-патоцитов, а повышение сывороточной концентрации $С08-антигена отражает степень их активации.
В последующих исследованиях показано, что уровень 5С08-антигена выше при острых гепатитах, нежели при хронических [33], причем при хроническом гепатите С изменения в содержании БСОБ-антигена шли параллельно с изменением активности аланинаминот-рансферазы. Выявлено снижение содержания этого антигена в ходе эффективной терапии больных а-интер-фероном. Это позволило предложить тест на сывороточный уровень 5С08-антигена в качестве показателя эффективности интерферонотерапии. Одновременно было исследовано содержание 8С025-антигена, которое повышалось у больных хроническим гепатитом С и еще более увеличивалось в ответ на введение а-ин-терферона. Корреляции с эффективностью интерферонотерапии этот показатель не обнаружил [45].
Много данных получено при исследовании растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы в крови ВИЧ-инфицированных лиц и больных СПИДом. Известно, что нарушение профиля продукции цитокинов и других продуктов клеток играет важную роль в иммунопатогенезе ВИЧ-инфекции. В этих условиях сдвиг функции Т-хелпе-ров с ТЫ- на ТЬО- или ТЬ2-тип, наблюдаемый у ВИЧ-инфицированных лиц, приводит к прогрессированию заболевания. Дисбаланс цитокиновой сети сопровождается активацией иммунной системы, приводящей к потере ею способности к адекватному иммунному ответу (анергии) и развитию апоптотичес-ких процессов [21].
Ряд лабораторий исследовали' прогностическое значение при ВИЧ-инфекции растворимых и мембранных форм дифференцировочных антигенов. S. Plaeger и соавт. [58] показали, что прогностическими маркерами развития ВИЧ-инфекции наряду со снижением относительного и абсолютного количества СБ4-положи-тельных клеток являются: увеличение концентрации sCD25-aHTnreHa, неоптерина и р2-микроглобулина, увеличение относительного количества HLA-DR+CD4+-, CD38+CD8+-, CD71+CD4+-imeTOK и снижение общего количества CD25+- и CD 1 ^-лимфоцитов. Аналогичное исследование провели R. Henkei и соавт. [35], которые показали, что повышенная активация С08+-Т-клеток, несущих мембранный CD3 8-антиген, очень тесно коррелирует с риском развития СПИДа и смертностью. Одновременно у ВИЧ-инфицированных лиц выявлено повышение уровня sCDS-антигена и клеток, несущих мембранные антигены CD8 и HLA-DR. Однако динамика нарастания сывороточного уровня данных антигенов не коррелирует с динамикой развития СПИДа [67].
Нужно заметить, что в описанных исследованиях на фоне повышения CD8+CD38+-KneTOK исследовался уровень sCD8-aHTHreHa. В нашей лаборатории у ВИЧ-инфицированных лиц была проведена оценка уровня sCD3 8-антигена. Обнаружено повышение его сывороточного содержания почти в 2 раза в сравнении со здоровыми донорами. Подобные статистически достоверные различия выявлены для ВИЧ-инфицированных лиц, в крови которых содержались антитела к вирусу гепатита С или HBs-антиген. Увеличенное содержание растворимой формы CD3 8-антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц свидетельствует об участии не только sCD8-, но и sCD3 8-антигена в патогенетических механизмах развития ВИЧ-инфекции и предполагает его возможное использование в прогнозировании развития заболевания [41].
CD3 8-антиген является активационным антигеном лимфоцитов. Он обладает внеклеточной ферментативной активностью, связанной с метаболизмом циклической АДФ-рибозы, служащей мощным мобилизатором внутриклеточного кальция. Растворимая форма CD38 образуется за счет протеолитического расщепления мембранного CD38. Показано существование димерной формы CD3 8-антигена как на мембране клеток, так и в растворимой форме [46].
Проведенное нами исследование сывороточного уровня димерного sCD38 в сыворотке крови ВИЧ-мо-ноинфицированных лиц показало, что его содержание было повышено в 4 раза в сравнении с нормой. Дополнительное присутствие анти-HCV в сыворотке крови приводило к еще более выраженному уровню sCD38-димера, средняя концентрация которого у ВИЧ-инфи-цированных лиц с маркерами гепатитов В и С была увеличена в 100 раз. Такой же значительный подъем димерного sCD3 8-антигена наблюдался у ВИЧ-инфицированных, в крови которых дополнительно присутствовали антитела против протеина Е2 вируса гепатита G или антитела класса IgM против цитомегаловиру-
са. Более существенное изменение уровня димерного бСБЗ 8-антигена по сравнению с уровнем его общей фракции предполагает особую роль бОБЗ 8-димера в молекулярных механизмах иммунного ответа при вирусных инфекциях.
В дополнение к исследованию сывороточного уровня вСБЗ 8-антигена при ВИЧ-инфекции нами проведена оценка его содержания в сыворотке крови при вирусных гепатитах В и С [3, 5, 8]. Выявлено, что уровень бСОЗ 8-антигена в крови больных острым гепатитом В до начала курса лечения в несколько раз превышает его содержание у здоровых доноров. К моменту выписки больных из стационара содержание этого антигена несколько снижалось, но оставалось выше, чем у здоровых лиц. При хроническом гепатите В уровень вСБЗ 8-антигена был почти в 3 раза выше, чем у здоровых лиц. Однако он не достигал уровня, характерного для больных острым гепатитом В в разгар заболевания, и соответствовал концентрации бСБЗ 8-антигена в крови больных острым гепатитом В в период рекон-валесценции.
Относительное количество мононуклеарных клеток крови, экспрессирующих С038-антиген, было повышено, как и у больных острым гепатитом В. Вероятно, повышенный уровень бСБЗ 8-антигена формируется за счет его схода с мембраны С08+С038+-клеток. Можно предположить, что бСОЗ 8-антиген принимает участие в реализации механизмов супрессии в ответ на развитие аутоиммунных процессов, наблюдаемых при таких заболеваниях, как гепатит В. Подобное предположение подтверждают полученные нами данные об увеличении уровня сывороточного бСОЗ 8-антигена у больных ревматоидным артритом и системной красной волчанкой [4].
Сывороточный уровень 5С038-антигена увеличивался и при вирусном гепатите С. Обнаружено, что больные хроническим гепатитом С, положительные по РНК вируса, имели значительно повышенный уровень этого антигена. При отсутствии РНК вируса гепатита С регистрировался нормальный уровень $С038. Кроме того, концентрация вСБЗ 8-антигена коррелировала с сывороточным содержанием аланинаминотрансфе-разы. Полученные данные указывают на наличие связи между сывороточной концентрацией бС038 и активностью репликации вируса гепатита С.
Совместно с А. А. Кущ и Т. В. Вишневской зарегистрировано значительное повышение содержания бСОЗ 8-антигена у больных острым гепатитом С с формирующимся тяжелым фиброзом печени. У пациентов с генотипами вируса 1а и 1Ь уровень бС038 был достоверно выше, чем в сыворотках больных с другими генотипами вируса. Выявлена отрицательная корреляционная связь между наличием белка №4А вируса гепатита С в гепатоцитах больного и сывороточным содержанием растворимого СБЗ 8-антигена. Белок N84 А является кофактором сериновой протеазы N83, необходимой для протеолитического процессинга неструктурных белков и репликации вируса. Соответственно менее высокий сывороточный уровень 5СБ38-антиге-
КЛИНИЧЕСКАЯ ОНКОЛОГИЯ 135
на при высокой частоте экспрессии белка КБ4А в гепа- керы вирусных гепатитов С, В, в и других инфекций, тоцитах может служить благоприятным признаком те- мы исследовали сывороточный уровень растворимых чения инфекции. У пациентов с предполагаемой хро- форм мембранных антигенов адгезии при смешанной низацией процесса наблюдалось достоверное повыше- ВИЧ-инфекции. При моноинфицировании ВИЧ выяв-ние концентрации бСБЗ 8-антигена в отличие от лена тенденция к повышению среднего сывороточного возможных реконвалесцентов. уровня эСБбО-антигена. Подобная направленность от-При ВИЧ-инфекции повышается также уровень мечена в образцах, положительных по антителам про-бСБ 14-антигена. Наиболее высокие его уровни регис- тив вируса гепатита С и антителам класса 1|»М против трируются у больных на последней стадии СПИДа, цитомегаловируса. У ВИЧ-инфицированных лиц, име-Мониторинговые исследования сывороточного уровня ющих в крови НВэ-антиген и антитела против вируса БСБМ-антигена дают прогностическую информацию гепатита С, сывороточное содержание 8СБ50-антигена о тяжести инфекции и выживаемости больных [44]. повышалось более значительно в сравнении с донора-У большинства ВИЧ-инфицированных лиц обна- ми и ВИЧ-моноинфицированными. У ВИЧ-инфициро-ружено, кроме того, повышенное содержание бСОЗО- ванных, в сыворотке крови которых одновременно об-антигена, коррелирующее с содержанием в плазме наруживались антитела к вирусу гепатита С, НВэ-ан-крови РНК ВИЧ-1. Показано, что источником раство- тиген и антитела против цитомегаловируса класса римой формы СБЗО-антигена являются С08+С030+- 1§М, уровень растворимого С050-антигена был повы-клетки, количество которых возрастает у ВИЧ-инфи- шеи в 5 раз в сравнении с нормой и в 3 раза в сравне-цированных лиц [77]. Высокие уровни этого антигена нии с ВИЧ-моноинфицированными. Можно сделать в большинстве случаев регистрировались на самых вывод, что одновременное присутствие 4 вирусов в на-ранних стадиях развития ВИЧ-инфекции и несли не ибольшей степени влияет на повышение сывороточнозависимую от других показателей информацию го уровня растворимого антигена 1САМ-3, что, вероят-о дальнейшем ходе инфекции, являясь неблагоприят- но, вызвано кумулятивным эффектом усиления им-ным показателем прогноза [86, 96]. Отмечено также мунного ответа на инфицирование сразу несколькими возможное использование уровня бСОЗ 0-антигена вирусами. в мониторинге ответа организма на антивирусную те- Подобные результаты были получены при изуче-рапию [57]. нии у ВИЧ-инфицированных сывороточного уровня У ВИЧ-инфицированных обнаружена связь между растворимого С054-антигена. Наиболее значительное содержанием в крови РНК ВИЧ и концентрацией ре- повышение сывороточного содержания БС054-антиге-цепторов фактора некроза опухоли I и II (зС0120Ь на происходило при наличии в крови ВИЧ-инфициро-и бСВ120Ь). Показано, что оценка уровня рецепторов ванных антител к вирусу гепатита С. Функциональное фактора некроза опухоли в плазме крови может быть значение растворимых антигенов С050 (1САМ-3) использована для идентификации пациентов с риском и СБ54 (1САМ-1) состоит в ограничении процессов ад-быстрой прогрессии заболевания [17, 66, 75]. Марке- гезии. Увеличение концентрации молекул бС050 ром неблагоприятного прогноза также является повы- и вС054 в биологических жидкостях предполагает бло-шенный сывороточный уровень $С025-антигена [31, каду взаимодействия их мембранных форм с ЬРА-1. 71], который увеличивается еще в большей степени, Кроме того, может нарушаться связывание мембранно-если ВИЧ-инфицированные лица заражены также ви- го С050-антигена с молекулой СБ209 (ОС-БЮМ) русами парентеральных гепатитов и цитомегаловиру- на поверхности дендритных клеток [18], приводящее сом. Как показано нами в совместном исследовании к модуляции уровня активации Т-лимфоцитов. с Н. Е. Худяковой, смешанное инфицирование ВИЧ У ВИЧ-инфицированных лиц повышается также и вирусами гепатитов В и/или С приводит к повыше- сывороточный уровень опосредующего апоптоз нию уровня зС025-антигена в десятки раз. Подобный зС095-антигена. При этом увеличивается и количест-подьем сывороточного содержания этого антигена вы- во С08+-клеток, экспрессирующих на своей поверхно-явлен в крови ВИЧ-инфицированных, имеющих до- сти С095-антиген. Концентрация зСВ95-антигена полнительно антитела к вирусу гепатита С и антитела у ВИЧ-инфицированных лиц не коррелирует с относи-класса 1§М против цитомегаловируса [41]. тельным содержанием С095-положительных лимфо-В плазме крови ВИЧ-инфицированных лиц обна- цитов периферической крови. Однако выявлена обрат-ружены повышенные уровни растворимых форм ряда ная связь между концентрацией зСВ95-антигена и от-молекул адгезии: 5СБ50, бСВ54 и бУСАМ-!, сохраня- носительным содержанием СБ4+СВ95+-клеток. ющиеся при проведении антивирусной терапии [48]. Содержание растворимого лиганда СБ95-антигена Вьивлена положительная корреляция между сыворо- также возрастало и коррелировало с вирусной нагруз-точным уровнем антигена 31САМ-1 и содержанием кой. В крови ВИЧ-инфицированных лиц наряду с рас-1§А, р2-микроглобулина и аденозиндезаминазы [32]. творимой формой этого антигена обнаружены аутоан-Уровень 8СБ54-антигена в сыворотке ВИЧ-инфициро- титела против него, вносящие свой вклад в общую ванных лиц колебался от 184 до 1116 нг/мл. В норме картину, приводящую к неадекватной активации кле-он составил от 152 до 354 нг/мл [50]. ток и вхождению их в анергию и апоптоз [36, 38, 74]. Поскольку в России значительная часть ВИЧ-ин- СБ95-антиген относится к рецепторам семейства фицированных лиц одновременно имеют в крови мар- фактора некроза опухоли и экспрессируется на мем-
М»3/том4/2005 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
бране широкого спектра клеток, в т. ч. на лимфоцитах и гепатоцитах. Функционально активной мембранной формой СБ95-антигена является гомотример. Для индукции апоптоза необходимо его взаимодействие с Раэ-лигандом, который также является гомотриме-ром [76]. Растворимые формы С095-антигена образуются за счет альтернативного сплайсинга мРНК первичного транскрипта или шеддинга мембранной формы [23, 51]. В мономерной форме они блокируют центры связывания на Раз-лиганде или мешают формированию функционально активного мембранного СВ95-антигена. Обнаружена олигомерная форма растворимого С095-антигена, выявленная нами с помощью иммуноферментного анализа и моноклональных антител [2]. Олигомерная (тримерная) растворимая форма взаимодействует с клетками, несущими на мембране РаБ-лиганд, и вызывает их гибель [60].
В наших исследованиях показано, что при остром гепатите В в разгар заболевания сывороточное содержание $СВ95-антигена повышалось в 1,4 раза и сохранялось повышенным на протяжении нескольких недель. К моменту выписки из стационара уровень суммарного антигена приближался к норме. Сывороточное содержание олигомерного бСВ95 при остром гепатите В имело статистически недостоверную, однако ярко выраженную тенденцию к повышению. Подобные изменения суммарной фракции 5СВ95-антигена и его олигомерной фракции были зарегистрированы при хроническом гепатите В [61].
У больных острым гепатитом В, в крови которых присутствовал НВе-антиген, уровень олигомерного бС095-антигена превышал норму почти в 2 раза. Больные, отрицательные по НВе-антигену, имели нормальное содержание олигомерного зСВ95-антигена. При хроническом гепатите В подобных различий не выявлено.
Сывороточное содержание суммарной фракции зС095-антигена и его олигомерной фракции повышалось также при остром и хронической гепатите С. Однако у больных хроническим гепатитом С оно было более выражено. Больные острым и хроническим гепатитом С, у которых присутствовали антитела класса 1§М к соге-антигену вируса гепатита С, имели более высокий уровень суммарного зСВ95-антигена, чем здоровые доноры крови и больные, не имеющие антител класса IgM против соге-антигена. Для олигомерного 8СВ95-антигена таких различий не выявлено.
Исследовано содержание суммарной и олигомерной фракций БСВ95-антигена в сыворотке крови нарко-зависимых больных вирусным гепатитом С и больных, не принимавших наркотиков. При остром гепатите С статистически достоверных изменений в содержании растворимого олигомера С095-антигена не выявлено, несмотря на выраженную тенденцию к его повышению. При хроническом гепатите С обнаружены значительные различия в содержании растворимого олигомера С095-антигена среди больных, употреблявших и не употреблявших наркотики. У наркозависимых больных отмечалась лишь тенденция к повышению
уровня сывороточного олигомерного sCD95-aHTHrena в отличие от больных, не употреблявших наркотиков, у которых уровень этого антигена был повышен в сравнении с нормой почти в 3 раза. Суммарное содержание мономерного и олигомерного sCD95-aHTHreHa было одинаково повышено как у наркозависимых лиц, так и у больных хроническим гепатитом, не употреблявших наркотиков [2].
При остром гепатите В на фоне хронического гепатита С содержание суммарного sCD95-aHTiireHa и его олигомерной формы в сыворотке крови было значительно выше, чем при остром гепатите В или хроническим гепатите С.
Полученные нами данные о повышении сывороточного содержания суммарной фракции СВ95-анти-гена соответствуют результатам других авторов [39, 77]. Ранее показано, что увеличение уровня sCD95-aH-тигена в сыворотке крови сочетается с плохим прогнозом и переходом вирусного гепатита С в цирроз печени или гепатоклеточную карциному [26, 68]. В связи с этим не удивительно, что хронический гепатит С сопровождается более высоким содержанием в крови данного белка, а наличие антител класса IgM против соге-белка вируса гепатита С ассоциировано с повышением концентрации суммарного sCD95-airmreHa. Группа японских исследователей оценила уровень sCD95-aHTnreHa в крови больных циррозом печени и гепатоклеточной карциномой, инфицированных вирусами гепатита В или С, и выявила его повышенное содержание. Регистрировался очень широкий разброс данных. Высокие концентрации sCD95-антигена чаще всего обнаруживались у больных карциномой. Было проведено сравнение данного теста с определением альфа-фетопротеина в крови больных. Полученные результаты позволили авторам предложить не менее эффективный, чем определение альфа-фетопротеина, тест на содержание sCD95 в качестве показателя первичного рака печени [39].
При вирусных гепатитах источником растворимой формы С095-антигена могут быть 2 основных вида клеток: активированные Т-лимфоциты и гепатоциты. Показано, что гепатоциты обладают способностью к конститутивной продукции ингибирующего апоптоз гепатоцитов растворимого CD95 -антигена, увеличивающейся при патологии печени [43].
Нейтрализацию растворимым зСВ95-антигеном активированных цитотоксических Т-клеток, несущих на поверхности Fas-лиганд, можно рассматривать как защитную реакцию печени на апоптотическое уничтожение гепатоцитов.
Согласно представленным выше данным больные хроническим гепатитом С, не употреблявшие наркотиков, характеризуются повышенным сывороточным уровнем олигомерного sCD95-aHTHreHa в отличие от наркозависимых больных. Неодинаковый уровень этого антигена является отражением различий в механизмах реакции иммунной системы и гепатоцитов на инфицирование вирусом гепатита С у наркоманов и лиц, не употреблявших наркотиков. Можно предположить,
что у наркозависимых лиц ослаблена защита гепатоци-тов от действия Т-клеток, связанная с нейтрализацией Т-лимфоцитов за счет цитотоксического действия олигомерного sCD95-aHTHreHa.
Наряду с растворимым СВ95-антигеном в регуляции апоптотических процессов могут участвовать растворимые формы молекул гистосовместимости I и II классов. Растворимые HLA I и II классов (sHLA-I и sHLA-II) обнаружены во многих биологических жидкостях, в т. ч. в сыворотке и плазме крови, слюнной жидкости, перитонеальных диализатах и моче [52]. Установлено, что значительные их количества могут секретироваться активированными лимфоцитами как in vitro, так и in vivo. Активация может происходить в результате воздействия митогенов и различных антигенов [20, 53, 78]. Показано, что молекулы sHLA-I и sHLA-II являются продуктами протеолити-ческого отщепления от мембраны и/или альтернативного сплайсинга мРНК. Молекулы sHLA-I могут модулировать реактивность цитотоксических Т-клеток и стимулировать апоптоз в условиях in vitro, поддерживая толерантность. Они связываются с С08-моле-кулами на поверхности Т-лимфоцитов, препятствуя распознаванию презентируемых антигенных пептидов [80]. Активность естественных киллеров также подвержена модулирующему действию молекул sHLA-I. Показано, что в их присутствии ингибируется узнавание естественными киллерами клеток-мишеней [22]. Молекулы sHLA-I могут вызывать также Fas/FasL-зависимый апоптоз естественных киллеров, взаимодействуя с СР8-антигеном на их поверхности. Молекулы sHLA-I взаимодействуют также с CLIR- и KIR-рецепторами естественных киллеров, что приводит к продукции растворимого Fas-лиганда с последующим запуском апоптоза СБ95-положи-тельных клеток [25, 73].
Молекулы sHLA-II связываются с С04-антигепом на поверхности лимфоцитов и способны вызывать апоптоз хелперных клеток, также модулируя иммунные реакции [24, 70]. По данным зарубежных исследователей, у больных хроническим активным гепатитом С выявлен высокий уровень растворимых HLA I класса. Прогрессирование заболевания с переходом в цирроз печени или гепатоклеточную карциному сопровождается снижением их уровня [33]. Согласно нашим данным, сывороточный уровень молекул sHLA-I повышен у больных острым и хроническим гепатитом
В. Обнаружена положительная корреляция между содержанием молекул sHLA-I и уровнем аланинаминот-рансферазы. Как известно, высвобождение в кровь аланинаминотрансферазы происходит при нарушениях внутренней структуры гепатоцитов, повышении проницаемости клеточных мембран, что свойственно как острому вирусному гепатиту, так и рецидивам хронического гепатита [1].
Полученные данные указывают на возможность существования связи между повреждением клеток печени и повышением уровня sHLA-I. Молекулы HLA I класса представлены на всех ядерных клетках орга-
низма. Можно предположить, что рост уровня молекул бНЬА-1 в сыворотке крови происходит в результате массовой гибели гепатоцитов и выделения в кровь продуктов их деградации. С другой стороны, молекулы вНЬА-! могут продуцироваться цитотоксическими Т-лимфоцитами вследствие их активации или выполнения ими эффекторной функции [64]. Повышенная концентрация молекул зНЬА-1 является фактором, ограничивающим значительную цитотоксическую активность Т-клеточного звена иммунитета. В связи с этим высокий уровень молекул зНЬА-1 можно рассматривать как механизм компенсации большого разрушительного потенциала цитотоксических Т-клеток. Нужно заметить, что высокий сывороточный уровень молекул бНЪА-1 у больных острым гепатитом В сопровождался присутствием НВе-антигена, что связано с высокой репликативной активностью вируса [9].
У больных острым и хроническим гепатитом С также выявлено повышение сывороточного содержания молекул $НЬА-1, что соответствует результатам, полученным ранее [49, 54]. Интересно, что больные хроническим гепатитом С, в крови которых обнаруживалась РНК вируса гепатита С, имели нормальный уровень бНЬА-!. В то же время больные, отрицательные по РНК вируса гепатита С, характеризовались повышением сывороточного содержания бНЬА-1 почти в 3 раза. Кроме того, выявлена отрицательная корреляционная связь между количеством лейкоцитов в периферической крови больных хроническим гепатитом С и сывороточным содержанием молекул зНЬА-1.
Нередко встречающийся среди больных острый гепатит В на фоне хронического гепатита С характеризовался увеличением сывороточного зНЬА-1, уровень которого был выше, чем при каждом из гепатитов в отдельности.
Таким образом, высокое содержание молекул зН1^А-1 в сыворотке крови больных хроническим гепатитом С ассоциировано со снижением вирусной активности и выраженности воспалительных процессов. С этой позиции объясняется выявленный нами более высокий уровень сывороточных бНЪА-1 у больных острым гепатитом С при выписке из стационара в сравнении с периодом манифестации заболевания. Полученные результаты находятся также в соответствии с повышением уровня зНЬА-1 при успешной интерфе-ронотерапии [63] и снижением его сывороточного содержания при прогрессировании хронического гепатита С, а также при переходе его в цирроз печени и гепатоклеточную карциному [33].
Исследование образцов сыворотки крови лиц, положительных по РНК вируса гепатита в, показало, что концентрация молекул бНЬА-1 не отличалась от нормы. При наличии РНК вируса и антител к Е2-протеи-ну вируса концентрация свободно циркулирующих молекул зНЬА-1 статистически достоверно снижалась. При смешанном инфицировании вирусами гепатитов В или С на фоне инфицирования вирусом гепатита в сывороточный уровень бНЬА-1 увеличивался, что скорее всего было связано с развитием гепатитов В и С.
Неизменный сывороточный уровень молекул 5НЬА-1 при моноинфицировании вирусом гепатита С можно рассматривать как следствие высокого содержания зС050-антигена (см. выше). Повышение сывороточного уровня растворимых молекул НЬАI класса при вирусных инфекциях связывают с активной презентацией вирусных пептидов и последующей активацией цитотоксических клеток. Активация сопровождается увеличивающимся шедцингом молекул зНЬА-1 и повышением их концентрации в сыворотке крови [14, 19, 78]. Сохранение нормального уровня зНЬА-1 является свидетельством отсутствия выраженных активационных процессов. Этот факт также может быть одной из причин длительной персистенции вируса гепатита О.
У больных вирусными гепатитами повышается сывороточное содержание молекул гистосовместимости II класса. Так, японскими исследователями обнаружено увеличение концентрации этих молекул у больных хроническим гепатитом С. Однако корреляции между уровнями бЖА-ЭЯ и аланинаминотрансфера-зы выявлено не было. Это свидетельствует о том, что содержание молекул зНЬА-1Ж не отражает интенсивности воспалительных и некротических процессов в печени. Тем не менее сывороточный уровень данного антигена может служить прогностическим маркером ответа на интерферонотерапию, т. к. его содержание достоверно снижалось у больных, отвечающих на терапию [37]. Продемонстрировано, что степень повышения уровня зНЬА-БК связана со стадией ВИЧ-инфекции [30].
Повышение уровня зНЬА-1Ж-антигенов наблюдалось у больных аутоиммунным гепатитом, причем изменения сывороточной концентрации данных антигенов коррелировали с активностью заболевания [34]. В наших исследованиях также показано повышение сывороточного содержания молекул бНЬА-1Ж при вирусных гепатитах В, С и в [10-12, 41]. Кроме того, в совместных исследованиях с А. А. Кущ обнаружено, что у больных хроническим гепатитом С, имеющих в крови РНК вируса, уровень молекул зНЬА-ОИ. был ниже, чем у пациентов без РНК. Острый гепатит С с тяжелыми фиброзными изменениями печени характеризовался втрое меньшим сывороточным содержанием молекул зНЬА-ОК, чем гепатит с умеренными фиброзными изменениями. Инфицирование вирусами генотипа 1а и 1Ь сопровождалось в 3 раза более высоким сывороточным уровнем молекул вНЬЛ-БЯ в сравнении с генотипами вируса 2а и За.
В образцах сыворотки ВИЧ-инфицированных лиц концентрация молекул эНЬЛ-ОЯ также была выше (в 1,8 раза), чем у здоровых доноров. Однако наиболее драматические изменения в сывороточной концентрации молекул бНЬА-ОЯ были обнаружены нами у ВИЧ-инфицированных, имеющих в крови антитела к вирусу гепатита С. Необходимо отметить, что среди обследованных ВИЧ-инфицированных антитела к вирусу гепатита С имело более 80 % лиц. Сывороточный уровень молекул зНЬЛ-БЯ у них был почти в 40 раз вы-
ше, чем у здоровых доноров, и в 20 раз выше, чем у лиц с ВИЧ-моноинфекцией. Дополнительное инфицирование вирусом гепатита В сопровождалось повышением сывороточного уровня молекул бНЬА-ОИ еще в 2 раза. При наличии маркеров цитомегаловирусной инфекции у лиц, инфицированных ВИЧ и вирусом гепатита С, уровень зНЬА-БК. был повышен в 52 раза в сравнении со здоровыми донорами..
Таким образом, значительное влияние на сывороточное содержание зНЬЛ-ОЯ-антигенов у ВИЧ-инфицированных лиц оказывает инфицирование вирусами гепатитов В и С, а также цитомегаловирусом, что приводит к увеличению сывороточной концентрации этих антигенов в десятки раз. Кроме того, сывороточный уровень данных антигенов статистически достоверно повышается при одновременном присутствии у ВИЧ-инфицированных антител к вирусам гепатита С и О. Полученные данные свидетельствуют, что при смешанном инфицировании ВИЧ и вирусом гепатита С увеличение уровня циркулирующих антигенов НЬА-ОЯ преимущественно связано с инфицированием вирусом гепатита С [12].
В образцах сыворотки крови больных СПИД и ВИЧ-инфицированных увеличена концентрация растворимых антигенов гистосовместимости I класса. Мониторинговые исследования, проводимые в течение длительного времени, показали постепенный подъем уровня этих антигенов по мере прогрессирования заболевания. Продемонстрировано, что комбинированная оценка содержания СБ4+-клеток, свободного р2-мик-роглобулина, неоптерина и концентрации зНЬА-1 наиболее эффективна в мониторинге ВИЧ-инфекции [28, 29, 62]. В изменение сывороточного уровня растворимой формы молекул $НЬА-1 может вносить вклад инфицирование сопутствующими вирусами, часто встречающееся на территории России. В соответствии с нашими данными, значительное влияние оказывает инфицирование цитомегаловирусом и особенно вирусом гепатита С. В обоих случаях происходит дополнительное повышение сывороточного уровня молекул бНЬА-1, что, несомненно, должно находить отражение в механизмах развития ВИЧ-инфекции.
Суммируя приведенные выше данные об уровне растворимых форм мембранных антигенов в крови ВИЧ-инфицированных лиц, можно заключить, что при моноинфицировании наблюдается повышение уровня многих антигенов. Среди них — суммарная и димерная фракции вСБЗ 8-антигенов, причем изменение сывороточного уровня 8СБ38-димера носит более выраженный характер. Содержание растворимых молекул НЬА I и II класса, антигенов зС050, зСБ25 и суммарного бСВ95 имеет выраженную тенденцию к увеличению. Присутствие антител к вирусу гепатита С у ВИЧ-инфицированных лиц приводит к более существенному росту сывороточного уровня исследованных антигенов. Заражение организма наряду с ВИЧ и вирусом гепатита С цитомегаловирусом и вирусом гепатита В в различных сочетаниях либо присутствие антител против вируса гепатита в сопровождается еще бо-
лее выраженным подъемом сывороточного уровня растворимых форм исследованных антигенов, однако основным фактором, влияющим на содержание растворимых молекул, является инфицирование вирусом гепатита С.
Динамика изменения сывороточного уровня растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы при смешанной ВИЧ-инфекции остается не исследованной. Прогностическая и мониторинговая значимость определения растворимых антигенов показана только для моноинфицирования ВИЧ. В то же время высокая частота встречаемости на территории Российской Федерации смешанного инфицирования ВИЧ, вирусами гепатитов и цитомегаловирусом диктует необходимость дополнительного исследования прогностического значения уровня растворимых форм мембранных антигенов.
Растворимые формы мембранных антигенов обладают несомненной прогностической значимостью при различных вирусных инфекциях, в т. ч. и при ВИЧ-ин-фекции. Учитывая большое разнообразие дифферен-цировочных антигенов иммунокомпетентных клеток и многообразие их функций, можно заключить, что функциональное и прогностическое значение растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы изучено далеко не полностью. Последующие исследования могут открыть неожиданные стороны сложной картины участия растворимых форм мембранных антигенов в патогенезе бактериальных и вирусных инфекций.
ЛИТЕРАТУРА
1. Балаян М. С., Михайлов М. И. Энциклопедический словарь — вирусные гепатиты. — М.: Амипресс, 1999. —302 с.
2. Новиков В. В., Птицына Ю. С., Отмахова И. А., Мартынова Т. Г. Влияние наркотиков на сывороточный уровень ингибирующей апоптоз РАБ-мол екулы у лиц, инфицированных вирусом гепатита С (ВГС) / Материалы VIII Всероссийского съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов, Москва, март,
2002. Т. 3. — М., 2002. С. 52-53.
3. Отмахова И. А. Корочкина О. В., Птицына Ю. С., Новиков В. В. Значение растворимых форм диф-ференцировочных антигенов (СБ38 и НЬА-1) при острой и хронической формах вирусного гепатита С // Мир вирусных гепатитов. — 2002. — № 4. — С. 6-9.
4. Птицына Ю. С., Лебедев М. Ю., Королева В. В. и др. Различия в содержании сывороточной формы СЭ38 антигена при иммунных нарушениях разной этиологии // Мед. иммунол. — 1999. — Т. 1, № 3-4. —
С. 82.
5. Птицына Ю. С., Борнякова И. А., Новиков В. В. и др. Содержание растворимой формы СБ38 антигена в сыворотке крови больных гепатитами В и С // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. — 1999.
— Т.9,№ 1. —С. 75.
6. Птицына Ю. С., Матвеева Е. В., Мартынова Т. Г. и др. Растворимая форма СБ50 антигена в сыво-
ротках крови ВИЧ-инфицированных лиц и больных гепатитами В и С // Русский журнал ВИЧ/СПИД и родственные проблемы. — 2000. — Т. 4, № 1. — С. 46.
7. Птицына Ю. С., Новиков Д. В., Мартынова Т. Г. и др. Повышенное содержание растворимой формы CD50 антигена (ICAM-3) в сыворотке крови больных вирусным гепатитом G // Аллергология и иммунология. — 2000. — Т. 1, № 2. — С. 107.
8. Птицына Ю. С., Отмахова И. А., Кравченко Г. А. и др. Содержание растворимой формы CD38 антигена в крови больных вирусным гепатитом В // Иммунология. — 2003. — № 3. — С. 45-48.
9. Соринсон С. Н. Вирусные гепатиты. — Санкт-Петербург: ТЕЗА, 1997. — 306 с.
10. Худякова Н. Е., Птицына Ю. С., Новиков Д. В. и др. Сывороточный уровень растворимых форм HLA-DR антигенов при вирусном гепатите G // Мед. иммунол. — 2002. — Т. 4, № 2. — С. 265-266.
11. Худякова Н. Е., Егорова Н. И., Иванова Н. И. и др. Уровень растворимых HLA-DR антигенов в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц и больных вирусными гепатитами В и С / Материалы научной конференции «Проблема инфекции в клинической медицине». — Санкт-Петербург, 2002. С. 230-231.
12. Худякова Н. Е„ Новиков В. В., Кравченко Г. А. и др. Уровень растворимых антигенов HLAI и II классов в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. — 2004, —№ 1, —С. 42-45.
13. Шломина И. А., Вязъмина Е. С., Новиков В. В. и др. Определение уровня растворимых CD38, CD50, CD95 антигенов и растворимого гетеродимера <ф2-ми-кроглобулин-HLA антигены I класса» при цитомегало-вирусной инфекции и гриппе // Вестник Нижегородского госуниверситета им. Н. И. Лобачевского. Серия Биология. — 2001. — Вып. 1 (2). — С. 225-230.
14. Antonaci S., Jirillo Е., Schiraldi О. Soluble HLA class I antigens in chronic hepatitis C: a disease-associat-ed manifestation or molecules modulating immunorespon-siveness? // Immunopharmacol. Immunotoxicol. — 1999.
— Vol. 21. — No. 4. — P. 727-738.
15. Becker J. C., Dummer R., Hartmann A. A. et al. Shedding of ICAM-1 from human melanoma cell lines induced by IFN-gamma and tumor necrosis factor-alpha. Functional consequences on cell-mediated cytotoxicity // J. Immunol. — 1991. — Vol. 147, No. 12. — P. 4398-4401.
16. Becker N.. Krause G„ Rensch K„ Meuer S. C. Epidemiologic investigation of serum levels of the soluble forms of CD25, CD54 and CD58, and T cell responsiveness after stimulation via the CD2-dependent pathway in a random sample of the general population // Immunology. — 1996. — Vol. 195. — P. 47-60.
17. Bedini J. L., Garcia E, Miro J. M. et al. Serum levels of beta2-microglobulin, neopterin, TNF-alpha and soluble receptors of TNF-alpha and interleukin-2 in intravenous drug abusers according to HIV-1 status and stage of the HIV-1 infection // Clin. Microbiol. Infect. — 1998.
— Vol. 4, No. 1. —P. 4-10.
18. Bleijs D. A., Geijtenbeek T. B., Figdor C. G. et al. DC-SIGN and LFA-1: a battle for ligand // TRENDS in Immunology. — 2001. — Vol. 22, No. 8. — P. 457-463.
19. Bresciani A., Pirozzi G„ Spera M. et al. Increased level of serum HLA class I antigens in patients with systemic lupus erythematosus. Correlation with disease activity // Tissue Antigens. — 1998. — Vol. 52, No. 1. — P. 44-50.
20. Brieva J. A., Villar L. M„ Leoro G. et al. Soluble HLA class I antigen secretion by normal lymphocytes: relationship with cell activation and effect of interferon-gamma // Clin. Exp. Immunol. — 1990. — Vol. 82, No. 2.
— P. 390-395.
21. Capobianchi M. R. Induction of lymphomonocyte activation by HIV-1 glycoprotein gpl20. Possible role in AIDS pathogenesis // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. —
1996. —Vol. 10. —P. 83-91.
22. Carbone E., Terrazzano G., Colonna M. et al. Natural killer clones recognize specific soluble HLA class I molecules // Eur. J. Immunol. — 1996. — Vol. 26, No. 3.
— P. 683-689.
23. Cascino I., Fiucci C., Papoff C„ Ruberti C. Three functional soluble forms of the .human apoptosis-inducing Fas molecule are produced by alternative splicing // J. Immunol. — 1995. — V. 154. — P. 2706-2713.
24. Claus R., Hausmann S., Zavazava N. et al. In vitro effects of solubilized HLA-DR—role in immunoregula-tion? // Cell. Immunol. — 1994. — Vol. 155, No. 2. — P. 476-485.
25. Contini P., Ghio M, Poggi A. et al. Soluble HLA-A, -В, -C and -G molecules induce apoptosis in T and NK CD8+ cells and inhibit cytotoxic T cell activity through CD8 ligation // Eur. J. Immunol. — 2003. — Vol. 33, No.
1. —P. 125-134.
26. Crespo J., Rivero M., Mayorga M. et al. Involvement of the fas system in hepatitis C virus recurrence after liver transplantation // Liver Transpl. — 2000.
— Vol. 6. —P. 562-569.
27. Fattovich G„ Vinante F., Giustina G. et al. Serum levels of soluble CD30 in chronic hepatitis В virus infection // Clin. Exp. Immunol. — 1996. — Vol. 103. — P. 105-110.
28. Ferreira A., Villar M. L., Alvarez CermenoJ. C. et al. Quantification of soluble serum HLA class I antigens in healthy volunteers and AIDS patients // Clin. Chim. Acta.
— 1988. — Vol. 174, No. 2. — P. 207-211.
29. Ferreira A., Garcia Rodriguez M. C., Omenaca F. et al. Soluble class I histocompatibility antigens (s-HLA) and beta 2-microglobulin at delivery // Clin. 30. Filaci G., Contini P., Brenci S. et al. Increased serum concentration of soluble HLA-DR antigens in HIV infection and following transplantation // Tissue Antigens. — 1995. — Vol. 46, No. 2. —P. 117-123.
31. Fortis C„ Soldini L„ Ghezzi S. et al. Tumor necrosis factor alpha, interleukin 2, and soluble interleukin 2 receptor levels in human immunodeficiency virus type 1-infected individuals receiving intermittent cycles of interleukin 2 // AIDS Res. Hum. Retroviruses. — 2002. — Vol.
18, No. 7. — P. 491-499.
32. Gaddi E., Laucella S., Balbaryski J. et al. Prognostic value of soluble intercellular adhesion molecule-1 (s-ICAM-1) in HIV-infected children // Scand. J. Immunol. — 2000. — Vol. 52, No. 6. — P. 628-633.
33. Hagihara M., Shimura T., Takebe K. et al. Serum concentrations of soluble HLA— class I and CD8 forms in patients with viral hepatic disoders // J. Gastroenterol. —
1997. — Vol. 32, No. 3. — P. 338-343.
34. Hagihara M., Hosoi K, Kagawa T. et al. Serum soluble HLA-DR antigens in autoimmune hepatitis // Autoimmunity. — 1999. — Vol. 31, No. 2. — P. 85-93.
35. Henkei R., Bratt G., Holmberg V. et al. Indicators of T-cells activation: correlation between quantitative CD38 expression and soluble CD8 levels in asymptomatic HIV+ individuals and healthy controls // Cytometry. —
1998. — Vol. 90. — P. 238-246.
36. Hosaka N„ Oyaizu N., Kaplan M. H. et al. Membrane and soluble forms of Fas(CD95) and Fas ligand in peripheral blood mononuclear cells and in plasma from human immunodeficiency virus-infected persons // J. Infect. Dis. — 1998. — Vol. 178, No. 4. — P. 1030-1039.
37. Hosoi K., Hagihara M., Kagawa T. et al. The serum soluble HLA-DR antigens as a predictive marker of the response to interferon-alpha treatment in patients with chronic hepatitis C // Tokai. J. Exp. Clin. Med. — 2000. — Vol. 25, No. 3. —P. 117-124.
38. Jiang J. D„ Schlesinger M., Sacks H. et al. Concentrations of soluble CD95 and CD8 antigens in the plasma and levels of CD8+CD95+, CD8+CD38+, and CD4+CD95+ T cells are markers for HIV-1 infection and clinical status // J. Clin. Immunol. — 1997. — Vol. 17, No.
2. —P. 185-192.
39. Jodo S., Kobayashi S., Nakajima Y. et al. Elevated serum levels of soluble Fas/APO-1 (CD95) in patients with hepatocellular carcinoma // Clin. Exp. Immunol. — 1998. — Vol. 112, No. 2. — P. 166-171.
40. Kaplanski G., Farnarier K, Payan M. et al. Increased levels of soluble adhesion molecules in the serum of patients with hepatitis C // Dig. Dis. — 1997. — Vol. 42. — P. 2277-2284.
41. Khudyakova N. E., Egorova N. I., Ptytsina Ju. S. et al. Serum level of soluble adhesion molecules in HIV-infected with markers of other viral diseases // Rus. J. Immunol. — 2003. — T. 8, No. 4. — P. 245-250.
42. KnolleP.A., EckardtA. J., Protzer-Knolle U. et al. Circulating ICAM-l(sCD54) and LFA-3 (sCD58) in chronic hepatitis B — A longitudinal study in patients treated with interferon-alpha // J. Gastroenterol. — 1997.
— Vol. 35. — P. 459-467.
43. Krams S. M., Fox S. K, Beatty P. R. et al. Human hepatocytes produce an isoform of FAS that inhibits apoptosis // Transplantation. — 1998. — Vol. 65. — P. 713-721.
44. Lien E., Aukrust P., Sundan A. et al. Elevated levels of serum-soluble CD14 in human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) infection: correlation to disease progression and clinical events // Blood. — 1998. — Vol. 92, No. 6. — P. 2084-2092.
45. Maekawa II, Ishiyama N., Furuya N. et al. Serum soluble CD8 and soluble interleukin-2-receptor levels during interferon therapy in chronic hepatitis C // Rinsho Byori. — 1997. — Vol. 45. — P. 1003-1007.
46. Mallone R., Ferrua S., Morra M. et al. Characterization of a CD3 8-like 78-kilodalton soluble protein released from B cell lines derived from patients with X-linked agammaglobulinemia // J. Clin. Invest. — 1998. — Vol. 101, No. 12. — P. 2821-2830.
47. Manetti R., Annunziato F., Biagiotti R. et al. CD30 ezpression by CD8+ T cells producing type 2 helper cytokines. Evidence for large numbers of Cd8+CD30+ T cell clones in human immunodeficiency virus infection // J. Exp. Med. — 1994. — Vol. 180, No. 6. — P. 2407-2411.
48. Mastroianni C. M, Lichtner M. et al. Changes in circulating levels of soluble cell adhesion molecules following highly active antiretroviral treatment of HIV-1-infected patients // Clin. Immunol. — 2000. — Vol. 95, No. 3. —P. 212-217.
49. Migliaresi S., Bresciani A., Ambrosone L. et al. Increased serum concentrations of soluble HLA-class I antigens in hepatitis C virus related mixed ciyoglobuli-naemia // Ann. Rheum. Dis. — 2000. — Vol. 59, No. 1. — P. 20-25.
50. Nordoy I., Aukrust P., Muller F., Froland
S. S. Abnormal levels of circulating adhesion molecules in HIV-1 infection with characteristic alterations in opportunistic infections // Clin. Immunol. Immunopathol. — 1996, —Vol. 81, No. 1.—P. 16-21.
51 .Papoff G., Cascino I., Eramo A. et al. An terminal domain shared by Fas/Apo-1 (CD95) soluble variant prevents cell death in vitro // J. Immunol. — 1996. — Vol. 25.
— P. 4625-4630.
52. Park C. W., Yurt S. N„ Yang C. W. et al. Serum and urine soluble HLA class I antigen concentrations are increased in patients with hemorrhagic fever with renal syndrome // Korean J. Intern. Med. — 1997. — Vol. 12, No. 1, —P. 52-57.
53. Park C. W„ Song H. C., Shin Y. S. et al. Urinary soluble HLA class I antigen in patients with minimal change disease: a predictor of steroid response // Nephron.
— 1998. — Vol. 79, No. 1. — P. 44-49.
54. Piazzolla G., Tortorella C., Fiore G. et al. Immunoresponsiveness in chronic hepatitis patients: correlation between tissue and serum findings // Immunopharmacol. Immunotoxicol. — 1998. — Vol. 20, No. 3. — P. 337-354.
55. Pino-Otin M R., Vinas O., de la Fuente MA. et al. Existence of a soluble form of CD50 (intercellular adhesion molecule-3) produced upon human lymphocyte activation. Present in normal human serum and levels are increased in the serum of systemic lupus erythematosus patients // J. Immunol. — 1995. — Vol. 154. — P. 3015-3023.
56. Pizzolo G., Vinante F, Morosato L. et al. High serum level of the soluble form of CD30 molecule in the early phase of HIV-1 infection as an independent predictor of progression to AIDS //AIDS. — 1994. — Vol. 8, No. 6.
— P. 741-745.
57. Pizzolo G., Vinante F, Nadali G. et al. High serum level of soluble CD30 in acute primary HIV-1 infection // Clin. Exp. Immunol. — 1997. — Vol. 108, No. 2. — P. 251-253.
58. Plaeger S., Bass H. Z., Nishanian P. et al. The prognostic significance in HIV infection of immune activation represented by cell surface antigen and plasma activation marker changes // Clin. Immunol. — 1999. — Vol. 90. — P. 238-246.
59. Pozo M. A., Pulido R„ Munoz C. et al. Regulation of ICAM-3 (CD50) membrane expression on human neutrophils through a proteolytic shedding mechanism // Eur. J. Immunol. — 1994. — Vol. 24. — P. 2586-2594.
60. Proussakova O. V, Rabaya N. A., Moshnikova A. B. et al. Oligomerization of soluble Fas antigen induces its cytotoxicity // J. Biol. Chem. — 2003. — Vol. 278, No.
38, —P. 36236-36241.
61. Ptitsina Yu. S., Matveeva E. M., Kopnina E. O. et al. Increased level of soluble CD38 antigen in sera of HIV-infected persons // Rus. J. HIV/AIDS Related Problems.
— 1999. —Vol. 3, No. 1, —P. 166-167.
62. Puppo F, Brenci S., Lanza L. et al. Increased level of serum HLA class I antigens in HIV infection. Correlation with disease progression // Hum. Immunol. — 1994. — Vol. 40, No. 4. — P. 259-266.
63. Puppo F, PicciottoA., Brenci S. et al. Behavior of soluble HLA class I antigens in patients with chronic hepatitis C during interferon therapy: an early predictor marker of response? // J. Clin. Immunol. — 1995. — Vol. 15, No. 4. —P. 179-184.
64. Puppo E, Contini P., Ghio M. et al. Soluble human MHC class I molecules induce soluble Fas ligand secretion and trigger apoptosis in activated CD8+ Fas (CD95)+ T lymphocytes // International Immunology. — 2000. — Vol. 12, No. 2, —P. 195-203.
65. Riizzardi G. P., Barcellini W., Tambussi G. et al. Plasma levels of soluble CD30, tumour necrosis factor (TNF)-alpha and TNF receptors during primary HIV-1 infection: correlation with HIV-1 RNA and the clinical outcome // AIDS. — 1996. — Vol. 10, No. 13. — P. 45-50.
66. Riizzardi G. P., Tambussi G., Barcellini W. et al. Soluble CD30, tumor necrosis factor (TNF)-alpha, and TNF receptors in primary HIV-1 infection: relationship with HIV-1, RNA, clinical outcome and early antiviral therapy // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. — 1997. — Vol. 11, No. 1-2. — P. 43-49.
67. Riizzardi G. P., Marriott J. B., Cookson S. et al. Tomour necrosis factor (TNF) and TNF-related molecules in HIV-1+ individuals: relationship with in vitro Thl/Th2-type response // Clin. Exp. Immunol. — 1998.
— Vol. 114, No. 1. —P. 61-65.
68. Ryo K, Kamogaxva Y, Ikeda I. et al. Significance of Fas antigen-mediated apoptosis in human fulminant hepatic failure // Am. J. Gastroenterol. — 2000. — Vol. 95. — P. 2047-2055.
69. Sabin C. A et al. // J. Acquir. Immune Defic. Syndr. Hum. Retroviral. — 1997. — Vol. 16. — P. 279-283.
70. Seidl C., Lee J. S. Expression of alternatively spliced HLA class II transcripts in lymphoid and nonlym-
phoid tissues // Immunogenetics. — 1992. — Vol. 35. — P. 385-390.
71. Sipsas N. V, Sfikakis P. P., Touloumi G. Elevated serum levels of soluble immune activation markers are associated with increased risk for death in HAART-naive HIV-1-infected patients // AIDS Patient Care STDS. —
2003. — Vol. 17, No. 4. — P. 147-153.
72. Skubitz K. M., Khalil A. Campbell K. D. et al. CD50 (ICAM-3) is phosphorylated on tyrosine and is associated with tyrosyne kinase activity in human neutrophils // J. Immunol. — 1995. — Vol. 154. — P. 2888-2895.
73. Spaggiari G. M., Contini P., Dondero A. et al. Soluble HLA class I induces NK cell apoptosis upon the engagement of killer-activating HLA class I receptors through FasL-Fas interaction // Blood. — 2002. — Vol. 100, No. 12. — P. 4098-4107.
74. Strieker K., Knipping E., Bohler T. et al. Anti-CD95 (APO-1/Fas) autoantibodies and T cell depletion in human immunodeficiency virus Type 1 (HlV-l)-infected children // Cell. Death. Differ. — 1998. — Vol. 5, No. 3.
— P. 222-230.
75. Sulkowski M. S., Chaisson R. E., Karp C. L. et al. The effect of acute infectious illnesses on plasma human
immunodeficiency virus (HIV) type 1 load and expression of serologic markers of immune activation among HIV-infected adults // J. Infect. Dis. — 1998. —Vol. 178, No.
6. — P. 1642-1648.
76. Thompson C. B. New insights into V(D)J recombination and its role in the evolution of the immune system // Science. — 1995. — V. 267. — P. 1456-1462.
77. Toyoda M, Kakizaki S., Horiguchi N. et al. Role of serum soluble Fas/soluble Fas ligand and TNF-alpha on response to interferon-alpha therapy in chronic hepatitis C // Liver. — 2000. — Vol. 20. — P. 305-311.
78. WolfR. E., Adamashvili I. M., Gelder E B. et al. Soluble HLA-I in rheumatic diseases // Hum. Immunol. —
1998. — Vol. 59, No. 10. — P. 644-649.
79. Woska J. R., Morelock M, M., Durham D. J. et al. Molecular comparison of soluble intercellular adhesion molecule (sIC AM)-1 and si CAM-3 binding to Lymphocyte Function-associated Antigen-1 // J. Biol. Chem. — 1998. — Vol. 273, No. 8. — P. 4725-4733.
80. Zavazava N.. Kronke M. Soluble HLA class I molecules induce apoptosis in alloreactive cytotoxic T lymphocytes // Nature Med. — 1996. — Vol. 2. — P. 1005-1007.
