CC BY
77
УДК 612.017.1:616.002 ББК 28.707.
ПУТИ РАЦИОНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ
НИКУЛЬШИНА Л.Л. ФГБОУВО ЮУГМУМинздрава России, Челябинск, Россия e-mail: nika-ly@mail.ru
Аннотация
В статье рассмотрены пути рациональной диагностики ВИЧ-инфекции. Приведены наиболее эффективные и менее затратные современные методы для проведения скрининга ВИЧ-инфицированных, а также методы для подтверждения диагноза. Указаны плюсы и минусы используемых этапов диагностики.
Ключевые слова: диагностика ВИЧ-инфекции, скрининг, экспресс-тест, ИФА, иммуноблоттинг, вестернблоттинг, ПЦР.
Актуальность. Для успешной борьбы с ВИЧ-инфекцией Всемирная организация
здравоохранения (ВОЗ) поставила задачу реализовать к 2020 году программу "90-90-90": 90% людей знают свой ВИЧ-статус, 90% знающих свой диагноз получают лечение, 90% из них достигают неопределяемую вирусную нагрузку [4, 6, 8, 9]. Для успешного применения этой программы в России необходимы рациональные методы диагностики ВИЧ-инфицированных, которые допустят охват не только всего населения, но и будут экономичными.
Цель работы. Рассмотреть пути рациональной диагностики ВИЧ-инфекции на современном этапе.
Материалы и методы. Проведён систематический обзор литературы по данной теме.
Результаты исследования. ВИЧ-инфекция -инфекционное заболевание, этиологией которого является вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), в большинстве случаев, медленно прогрессирующее,
характеризующееся специфическим
поражением иммунной системы, приводящим к медленному ее разрушению до формирования синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД), приводящего ВИЧ-инфицированного к быстрой смерти от оппортунистических инфекций. Распознать на ранних стадиях его сложно, так как вирус иммунодефицита поражает СБ4 клетки, не вызывая специфических и ярких проявлений. Но слабые симптомы не снижают тяжесть этого заболевания [7]. Поэтому важна ранняя
диагностика ВИЧ-инфекции, которую сегодня проводят в следующих случаях:
1. Диагностика и постановка диагноза индивидуумам.
2. Скрининг беременных женщин, хирургических больных, доноров крови, органов и тканей - это направление выявляет больше всего ВИЧ-инфицированных. По нему мы судим о превалирующих способах заражения инфекцией.
3. Эпидемиологический надзор над зонами с повышенным риском заражения ВИЧ-инфекцией. Это потребители внутривенных наркотиков (основная группа ВИЧ-зараженных), коммерческие секс-работники и мужчины-гомосексуалисты. Уязвимыми для ВИЧ-инфекции являются заключенные, лица, имеющие большое количество половых партнеров, беспризорные дети, люди, злоупотребляющие алкоголем и другими не инъекционными психоактивными веществами.
Диагностику ВИЧ-инфекции осуществляют, как определяя уровень антител в сыворотке пациента, так и непосредственно вирусные белки в крови.
Определение антител в сыворотке крови - это один из главных методов этапа скрининга, благодаря которому выявляют потенциально зараженных ВИЧ-инфекцией.
Определение генома вируса методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) необходимо для определения стадии ВИЧ-инфекции. Также оценивают функцию клеточного звена иммунитета (уровень СБ4+ клеток) методом проточной цитофлюориметрии
для решения вопроса о начале и способе антиретровирусной терапии [1-3].
Для первичного скрининга ВИЧ-инфицированных используют экспресс-тест (полоски) и иммуноферментный анализ (ИФА).
Экспресс-тест удобен и применяется для обследования большого количества людей. Имеет ряд преимуществ [1-3].
1. Скорость выяснения результата - 10-15 минут. Если у человека есть антитела к вирусу иммунодефицита человека, то цвет контрольной полоски будет совпадать с полоской в тесте (положительный результат).
2. Диагностическим материалом служит кровь из пальца или околодесневая жидкость, что делает тест-полоски удобными в применении.
3. Данные полоски можно использовать как при проведении обширных мероприятий, посвященных диагностике ВИЧ-инфекции, так и индивидуально купить в аптеке или супермаркете, чтобы узнать ВИЧ-статус свой и полового партнера.
4. Чувствительность метода 93%, специфичность - 99%.
5. Стоимость: 250-900 руб.
Однако у данного метода есть и недостатки: определяет только антитела в сыворотке крови, серонегативный период составляет 28 дней.
В России в 2016 году был запущен проект бесплатных и анонимных экспресс-тестов SAFE BOX. Для постановки своего ВИЧ-статуса нужно зайти на сайт системы и оставить заявку. В 2016 году подобными методами было протестировано на ВИЧ 30 752 828 образцов крови российских и 2 102 769 иностранных граждан. Впервые выявлен позитивный результат на ВИЧ у 103 438 протестированных (31%).
С помощью ИФА проводят скрининг пациентов хирургического и гинекологического профиля. Для этого анализа нужно 5 мл венозной крови пациента. Исследование проводится натощак: между последним приемом пищи и забором крови должно пройти не менее 8 часов. Через 2-10 дней получают результаты. Необходимо учитывать, что положительный результат на ВИЧ-инфекцию с помощью данного анализа будет не ранее чем через 10 дней, до 3 недель после предполагаемого заражения.
Иммуноферментный анализ определяет не только суммарные антитела к ВИЧ, циркулирующие в сыворотке крови, но и
вирусный белок р24. Стоимость: около 700 руб. [1-3].
Минусом скрининговых методов
диагностики является высокая частота ложноположительных и ложноотрицательных результатов относительно других методов определения ВИЧ. Ложноположительные результаты могут быть связаны с недостаточной очисткой иммуносорбента от балластных белков; перекрестным взаимодействием иммуносорбента с протеинами,
присутствующими у лиц с аутоиммунными процессами (например, системная красная волчанка), инфекционными и онкологическими заболеваниями, повторными гемотрансфузиями, с присутствием ревматоидного фактора [5].
Полученные положительные результаты на скрининговом этапе перепроверяют с помощью более точного, но дорогостоящего метода -иммуноблоттинга. Он подтверждает или отклоняет первоначальный результат, определяя антитела к отдельным вирусным белкам §р160, §р 120, §р 41. Он сочетает в себе ИФА с предварительным электрофоретическим
разделением белков вируса в
полиакриламидном геле и их переносом на нитроцеллюлозную мембрану
(электроблоттанг). Если антитела к белкам вируса присутствуют в сыворотке обследуемого, то они связываются с антигенными полосками и проявляются в виде линий. Чувствительность метода 99,3-99,7%, специфичность - 99,7%. Стоимость: от 3500 руб. [1-3].
Окончательный диагноз инфицирования ВИЧ может устанавливаться только после получения положительного результата методом иммуноблоттинга, что является
заключительным этапом. ВОЗ считает положительными сыворотки, в которых методом иммуноблоттинга обнаруживаются антитела к каким-либо двум белкам оболочки ВИЧ. Если будут положительные результаты, полученные с помощью ИФА или диагностических тест полосок, но при иммуноблоттинге результат отрицательный, необходима повторная диагностика через полгода после первого обследования. Если через год результаты иммуноблоттинга после проведения первой пробы будут неопределёнными или отрицательными, то при отсутствии симптомов и факторов рисков ВИЧ-инфекции пациента снимают с диспансерного наблюдения [5].
Минусы заключительных методов подтверждения наличия ВИЧ заключаются в сложности реакций, большого количества времени на их проведение и, соответственно, высокой стоимости. Поэтому их не используют при "рутинной" диагностике, а только после выявления инфицированных при помощи скрининговых тестов [1-3].
Выводы. Для эффективной диагностики ВИЧ-инфицированных проводят массовые скрининговые методы (тест-полоски и ИФА)
соответственно группам населения, выявляя потенциально инфицированных. Затем полученные результаты перепроверяют с помощью иммуноблоттинга, т.к. скрининговые методы могут давать ложноположительные и ложноотрицательные результаты. Затем решают вопрос стадии инфекции о назначении антиретровирусной терапии с помощью ПЦР и проточной цитофлюориметрии. Проводить сразу всем иммуноблоттинг нецелесообразно, так как данный метод ресурсозатратен.
Список литературы
1. ВИЧ-инфекция и СПИД: нац. рук-во / под ред. В.В. Покровского. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013. - 608 с.
2. ВИЧ-инфекция. Этиология, патогенез, лабораторная диагностика /И.И. Долгушин [и др.]. - Челябинск, 2014. - 60 с.
3. ВИЧ-инфекция: клиника и лечение, химиопрофилактика передачи ВИЧ от матери к ребёнку, диагностика и лечение ВИЧ-инфекции у детей: рекомендации для мед. и соц. - психол. службы /А.Г. Рахманова [и др.]. - 2-е изд. перераб. и доп. - СПб., 2005. - 112 с.
4. Комплексный анализ профилактических мероприятий по предотвращению распространения ВИЧ-инфекции в Челябинской области за 2011-2016 гг. / М.В. Радзиховская [и др.] // Вестн. Совета молодых ученых и специалистов Челябинской области. - 2017. - №3 (18), т. 1. - С. 61-65.
5. Либман Г. ВИЧ-инфекция: пер. с англ. /Г. Либман, X. Макадон. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013. - 560 с.
6. Организация и проведение мероприятий, направленных на предупреждение распространения ВИЧ-инфекции, проводимые в Челябинской области в 2016 году, в рамках взаимодействия Южно-Уральского государственного медицинского университета и областного Центра по профилактике и борьбе со СПИДом /Радзиховская М.В. [и др.] // Фтизиатрия и пульмонология. - 2017. - №3 (16). - С. 161-175.
7. Ратникова Л.И. ВИЧ-инфекции и инфекционные поражения центральной нервной системы /Л.И. Ратникова, С.А. Шип, А.А. Глинкина и др. //Инфекционные болезни. - 2016. - Т. 14, №S1. - С. 242.
8. Стратегия ускорения: прекращение эпидемии СПИДа к 2030 г. - ЮНЭЙДС, 2014. - 37 с.
9. Шлепотина Н.М. Опыт проведения мероприятий, посвященных профилактике ВИЧ-инфекции среди молодежи / Н.М. Шлепотина, И.В. Красильникова, М.В. Пешикова //Вестн. Совета молодых учёных и специалистов Челябинской области. - 2016. - Т. 2, №3 (14). - С. 79-82.
WAYS OF RATIONAL DIAGNOSTICS OF HIV INFECTION*
NIKULSHINA L.L. FSBEI HE SUSMUMOH Russia, Chelyabinsk, Russia e-mail: nika-ly@mail.ru
Abstract
The article considers the ways of rational diagnosis of HIV infection. Presented the most effective and less expensive modern methods for screening HIV-infected and confirming the diagnosis. Indicated the pros and cons of the diagnostic steps used.
Keywords: diagnosis of HIV infection, screening, express test, ELISA, immunoblotting, western blotting, PCR.
* Научные руководители: к.м.н., доц. Шип С.А., к.м.н., ст. преп. Пешикова М.В.
