Прогностические факторы, влияющие на выживаемость при лечении мелкоклеточного рака легкого Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ПОСТЕРЫ

РАК ЛЕГКОГО

метре NanoDrop-2 000 (Thermo Scientific, USA). Целостность РНК оценивалась при помощи капиллярного электрофореза на приборе TapeStation (Agilent Technologies, USA). Уровень экспрессии гена BRCA1 (PubMed NM_007294.3) оценивали при помощи RT-qPCR с оригинальными праймерами и зондами по технологии TaqMan Относительная экспрессия МЛУ была оценена с помощью метода Pfaffl. В качестве гена-рефери использовали ген «домашнего хозяйства» фермента GAPDH (glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase). Статистические методы. Статистическая обработка данных проводилась с использованием пакета прикладных программ «STATISTICA 8.0» (StatSoft Inc., USA). Для проверки гипотезы о значимости различий между исследуемыми группами использовали критерий Вилкоксона-Манна-Уитни. Сравнение частот по качественным данным анализировали при помощи двухстороннего критерия Фишера.

Результаты. Среднее значение экспрессии данного гена до лечения составило 0,85±0,1 в операционном материале после НХТ — 0,65±0,08. Далее было установлено, что экспрессия изучаемого гена слабо коррелирует с основными клинико-морфологическими параметрами. Статистически значимые различия были показаны лишь для менструального статуса и молекулярного подтипа РМЖ. Затем мы оценили ассоциацию уровня экспрессии гена BRCA1 в опухоли до лечения с эффектом НХТ в общей группе и при различных схемах лечения.

В результате было показано, что статистически достоверные различия между группой с наличием объективного ответа и группой с отсутствием ответа на НХТ характерны для общей группы больных (p=0,01) и для пациентов, пролеченных доцетакселом в монорежиме (p=0,05). В обоих случаях уровень экспрессии исследуемого гена выше в группе пациентов с объективным ответом на химиотерапию (0,99±0,12 против 0,69±0,19 в общей группе; 1,36±0,33 против 0,41±0,15 в группе доцетаксел). Полученный результат для таксанов можно объяснить тем, что индукция экспрессии гена BRCA1 после воздействия таксотера приводит к активации контрольной точки митоза (т. е. остановке деления клетки) и последующей клеточной гибели. При этом дефицит продукта гена BRCA1, наоборот, приводит к тому, что апоптоз опухолевых клеток под действием таксанов не индуцируется. Заключение. Таким образом, в результате проведенного исследования была показана связь экспрессии гена BRCA1 в опухоли молочной железы с эффективностью неоадъю-вантной химиотерапии. На основании полученных данных можно полагать, что экспрессия гена BRCA1 может также являться маркером эффективности неоадъювантной химиотерапии, но это требует дальнейшего изучения.

Исследование роли транскрипционного фактора Snail в устойчивости клеток рака молочной железы к гипоксии

М.А. Ястребова', А.И Хамидуллина.' А.М. Щербаков2, В. В. Татарский2

Место работы: 'Московский государственный университет имени М. В. Ломоносова, биологический факультет, кафедра клеточной биологии и гистологии, Москва, Россия; 2ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Российская Федерация e-mail: RitaYastrebova2009@gmail.com Значительная часть клеточной реакции на длительную гипоксию связана со стимуляцией процессов эпителиально-мезен-

химального перехода (ЭМП). Транскрипционные факторы семейства Snail наиболее исследованы в качестве стимуляторов ЭМП, а также способствуют развитию опухолевой прогрессии, миграции и инвазии опухолевых клеток. Цель. Определить роль транскрипционного фактора Snail в устойчивости рака молочной железы (РМЖ) к гипоксии. Материалы и методы. Клетки РМЖ линий MCF7, MDA-MB-231 и трансформированные SV40 клетки HBL-100 культивировали в среде DMEM с 10% телячьей эмбриональной сывороткой. Для моделирования условий гипоксии клетки инкубировали в атмосфере с содержанием 1 % О2. Анализ транскрипционной активности Snail выполняли с помощью ген-репортерного анализа.

Результаты. Ингибирование транскрипционного фактора Snail приводит к увеличению чувствительности РМЖ к гипоксии. Под действием гипоксии в клетках РМЖ (MCF7, HBL-100) происходит перераспределение Е-кадгерина по цитоплазме, а (J-катенин и Snail активируются и транслоцируются в ядро. Помимо этого Snail оказывает влияние на клеточный цикл культур РМЖ, вызывая задержку в S фазе клеточного цикла. С помощью ген-репортерного анализа показано, что трансдукция Snail в клетки MCF-7 приводит к значительной репрессии промоторного региона гена E-кадге-рина. На трансдуцированных клеточных линиях РМЖ (MCF7, МDA-MB-231) установлено, что увеличение экспрессии белка Snail приводит к гиперэкспресии маркера мезенхимных клеток (N-кадгерин) в клетках МDA-MB-231, а также к снижению уровня эпителиального маркера (Е-кадгерина) в клеточной культуре MCF7. Продолжается исследование соединения GN25 как специфического разобщителя связи между Snail и опухолевым супрессором p53. Показано, что данное вещество в норме оказывает больший цитотоксический эффект, чем в гипоксии. Разобщение Snail и p53 вызывает апоптоз, активацию Snail и нарушение экспрессии Е-кадгерина. Заключение. Направленное ингибирование Snail-ассо-циированных сигнальных путей может быть рассмотрено как возможный подход к регуляции роста опухолей с гипок-сическими регионами. Разобщение Snail и p53 приводит к нарушению межклеточных контактов и р53-зависимому апоптозу в клетках РМЖ. В дальнейшем планируется изучить влияние Snail-ассоциированных сигнальных каскадов в РМЖ на устойчивость к гипоксии и роль химических ингибиторов для преодоления данной устойчивости. Гранты РФФИ № 16-04-00347 и № 15-04-02172.

Прогностические факторы, влияющие на выживаемость при лечении мелкоклеточного рака легкого

Н. Г. Бахмутский', В. А. Порханов', В. Н. Бодня', Р. П. Ширяев2 Место работы: 'ФГБОУ ВО Кубанский государственный медицинский университет; 2ГБУЗ КОД №' Краснодарского края, г. Краснодар e-mail: bachnik@mail.ru

Цель. выяснить роль прогностических факторов при мелкоклеточном раке легкого (МРЛ) и их влияние на прогрессиро-вание болезни и выживаемость пациентов. Материалы и методы. Согласно наиболее приемлемой классификации МРЛ в исследовании больных разделили на две группы — пациенты с локальной и распространенной стадиями заболевания. Все больные имели гистологическое или цитологическое подтверждение МРЛ.

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ПОСТЕРЫ

РАК ЛЕГКОГО

Для локальной стадии МРЛ изучили клиническое течение болезни у 90 пациентов после прохождения первой линии химиотерапии в клинике. Критерии включения пациентов в исследование для локальной стадии были следующими: возраст старше 20 лет; performance status 0—2 в начале терапии первой линии;пациенты с подведенной дозой > 40 Гр на грудную клетку и прошедшие курс химиотерапии первой линии. Также ретроспективно анализировали результаты лечения 196 пациентов с распространенной стадией МРЛ, которым проводили системную химиотерапию. В этой группе больных для изучения были отобраны как прогностические факторы — максимальный размер первичной опухоли, число метастазов и лабораторные данные, включая уровни альбумина, ЛДГ, натрия, РЭА, НСЕ. Ответы пациентов на лечение обычно оценивали после 2—4 курсов химиотерапии. Рецидив подтверждали данными КТ и МРТ. Общую выживаемость определяли как время от начала химиотерапии первой линии до смерти. Средний размер первичной опухоли для больных с распространенной стадией был равен 5,4 см. 76 пациентов имели плевральную диссеминацию и у 8 диагностировали метастазы в головной мозг. У 84 пациентов имелось распространение опухоли на отдаленные органы, а у 112 регистрировали множественные метастазы (2—5 локализаций), исключая прикорневые, медиастинальные и надключичные лимфоузлы. Результаты. Для локальной стадии МРЛ, поскольку общая выживаемость сильнее коррелировала с пострецидивной выживаемостью (р < 0,05), чем с безрецидивной выживаемостью (р < 0,05), мы оценили значимость потенциальных прогностических факторов для пострецидивной выживаемости. Мультифакторный анализ показал, что только ответ на лечение препаратами второй линии (без прогрессии или с прогрессией), наличие отдаленных метастазов при рецидиве (имеются или нет) и количество курсов терапии первой линии являются показательно значимыми прогностическими факторами для пострецидивной выживаемости. Используя эти три прогностических фактора при построении кривых Каплана-Мейера для пострецидивной выживаемости, мы отметили, что общая выживаемость в ответ на лечение препаратами второй линии (без прогрессии или с прогрессией), наличие отдаленных метастазов при рецидиве (имеются или нет) и количество дополнительных курсов терапии первой линии (< 2 или > 2) значительно отличаются (log-rank test, р < 0,05). В частности, медиана пострецидивной выживаемости у пациентов, не имеющих прогрессии заболевания (16,9 месяцев), была значительно больше, чем у пациентов с прогрессией (7,0 месяцев, р < 0,05), средняя пострецидивная выживаемость у пациентов без отдаленных метастазов (17,6 месяцев) была значительно больше, чем у пациентов, имеющих отдаленные метастазы (8,5 месяцев, р < 0,05). Кроме того, медиана пострецидивной выживаемости пациентов, получивших два или более курсов химиотерапии первой линии (16,3 месяцев), была значительно больше, чем у пациентов, которые получили менее двух дополнительных курсов терапии первой линии. В группе пациентов с распространенной стадией МРЛ 114 пациентов (58 %) были пролечены комбинированной химиотерапией с включением препаратов платины и 82 пациента — монохимиотерапией пакли-такселом (42%). 145 больных (74%) получили три и больше циклов химиотерапии первой линии и 127 (65 %) пациентов получили курс и более второй линии химиотерапии после рецидива. Общее число ответов составило 52% (102/196),

и медиана безрецидивного выживания была равна 5,4 месяцам. У 55 пациентов (28%) зарегистрирован рецидив через три месяца после лечения. Общая выживаемость составила 8,9 месяцев, 19,4 месяца — для чувствительной к химиотерапии группы и 6,9 — для рефрактерной. Выявлено, что общая выживаемость была значительно короче у больных с большими опухолями (медиана выживаемости 8,7 месяцев при >3 см и 18,9 месяцев при <3 см, р < 0,02) и с множественными метастазами (медиана выживаемости 7,2 месяцев для нескольких метастазов и 13,0 месяцев для единичных метастазов, р=0,015). Безрецидивная выживаемость короче у пациентов с большими опухолями (4,8 месяца при >3 см и 6,5 месяцев при <3 см, р=0,043), у пациентов с множественными метастазами меньше безрецидивная выживаемость, чем с единичным метастазом (4,8 и 5,4 месяцев соответственно). На общую и безрецидивную выживаемость при распространенной стадии также влияли: возраст, пол, performance status, уровни ЛДГ, натрия.

Выводы. Таким образом, при локальной стадии МРЛ общая выживаемость сильнее коррелирует с пострецидивной выживаемостью, чем с безрецидивной. Последующее лечение имеет большее влияние на общую выживаемость, чем терапия первой линии. Поэтому при локальной стадии МРЛ на основании клинических исследований должны учитываться прогностические факторы, которые могут повлиять на пострецидивную выживаемость, чтобы улучшить общую. При распространенной стадии прогностическими факторами, влияющими на прогрессирование заболевания и выживаемость, являются: максимальный размер первичной опухоли, число метастазов, возраст, пол, performance status и лабораторные данные — уровни ЛДГ, натрия.

Взаимосвязь амплификации гена HER2/NEU и реаранжировки EML4-ALK с некоторыми клинико-морфологическими параметрами и выживаемостью при аденокарциноме легкого 1-2 стадии

А. С. Близнюк', А.М. Авдалян', А. Ф. Лазарев'

Место работы: 'ФГБУ Алтайский филиал «РОНЦ

им. Н. Н. Блохина»

e-mail: sashulka_bliznuk@mail.ru

Цель. На сегодняшний день среди немелкоклеточного рака легкого отмечается увеличение частоты аденокарциномы (Ак) легкого по отношению к плоскоклеточному раку. Также в Ак найдены специфические генетические изменения, определяющие назначение таргетной терапии. Одним из таких факторов является реаранжировка гена ALK, которая происходит в основном за счет парацентрической инверсии гена EML4, что приводит к присоединению 2—20 экзона EML4 к 20 экзону ALK EML4-ALK, и которая при аденокарциноме выявляется от 1,4% до 11,2%. Кроме того, фактором, влияющим на прогноз и выбор терапии, является онкоген Her2 (erbB2), продуктом которого является трансмембранный белок Her2 (erbB2) — рецептор с тирозинкиназной активностью к эпидермальному фактору роста. Амплификация гена Her2 — частое событие в инвазивном раке молочной железы, в противоположность этому частота амплификации гена Her2 при аденокарциноме легкого оценивается крайне вариабельно — от 2 до 38%. Анализ существующей литературы показал противоречивый характер связи изменений в генах ALK и Her2 с выживаемостью больных аденокарци-номой легкого. Таким образом, целью исследования стало

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org