CC BY
14
через 300 км. Это обстоятельство первоначально привело к ошибочному выводу, что содержание вредных веществ уменьшилось. В последующем мы обратили внимание на то,, что количество связанного органическими соединениями азота, проходящее через сечение реки в непосредственной близости к комбинату и через сечение, где нитробензол и анилин не обнаруживаются, очень близко. Это вызвало предположение, что нитробензол и анилин превратились в результате биохимических процессов в какие-то другие азотсодержащие соединения с тем же количеством азота.
Дальнейшими исследованиями было установлено, что таким соединением является, главным образом п-хинонимин. Многократная проверка наличия хинонимина в стоке Рубежанского комбината и з сточных водах других производств, расположенных выше и ниже его, привела к отрицательным результатам.
Таким образом, исчезновение из воды Сев. Донца нитробензола и аналина сопровождалось образованием п-хннонимина.
Рассматривая пути возможных превращений нитробензола и анилина в п-хинонимин, мы обратили внимание на процесс превращения этих двух соединений в организме животных. Если допустить, что анилин и нитробензол претерпевают аналогичные превращения в организмах водных обитателей, т. е. бактерий, зоопланктона и т. д., и что в результате этих превращений образуется как один из продуктов п-аминофе-нол, то образование n-хинонимина можно объяснить окислением п-'аминофенола легко идущего в водном растворе под действием растворенного в воде кислорода. В связи с отмеченным * приобретает интерес исследование основных путей трансформации производных ароматического ряда при их попадании в открытые водоемы.
ЛИТЕРАТУРА
Клименко В. К. Известия № 96 (11475) от 23 апреля 1954, стр. 4. — Лазарев Н. В. Вредные вещества в промышленности. Л., 1954, ч. 1, стр. 529. — M а й е р Г. Анализ и определение органических соединении, Л., 1937. — Соболев В. Г. В кн.: Донбасс, его санитарное изучение и оздоровление. Киев, 1936, ч. 1, стр. 9. — Щ е л о-гев К. В. Водоснабж. и сан. техника, 1936, № 12, стр. 69. — Хиккинботтом В. Реакции органических соединений, М., 1939.
Поступила 30/IV 1957 г.
# т!г *
ПРИМЕНЕНИЕ РЕАКЦИИ НАРАСТАНИЯ ТИТРА БАКТЕРИОФАГА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ МИКРОБОВ ДИЗЕНТЕРИИ В ИСКУССТВЕННО ЗАРАЖЕННОЙ ВОДЕ»
Е. Н. Миляева
Из Куйбышевского научно-исследовательского института эпидемиологии, микробиологии и гигиелы
Целью работы было выяснение эффективности реакции нарастания титра бактериофага, разработанной В. Д. Тимаковым и Д. М. Гольдфарб (1956), при определении микробов дизентерии в воде.
При постановке реакции 'нарастания титра бактериофага в качестве индикаторного признака используются количественные изменения (увеличение титра бактериофага, которое происходит при взаимодействии индикаторного фага с соответствующей ему бактериальной клеткой).
Принцип реакции заключается в том, что к исследуемой воде и в колбу с мясо-пептонным бульоном для контроля титра бактериофага добавляется определенное, одинаковое количество индикаторного фага. При наличии возбудителен в исследуемой воде бактериофаг вступает с ними во взаимодействие и размножается. По увеличению числа колоний фага (представленных на чашках в виде зон лизиса) по сравнению с контролем судят о наличии возбудителя. Ход исследования с помощью реакции нарастания титра бактериофага длится 20—24 часа.
Методика исследования освоена нами в Институте эпидемиологии и микробиологии имени Гамалея АМН СССР. Там же было получено необходимое количество дизентерийного бактериофага.
Результаты исследования воды бактериологическим методом и реакцией нарастания титра бактериофага (РНФ) представлены в таблице.
1 Работа доложена 30 сентября 1958 г. на заседании Куйбышевского отделения Всероссийского научного общества микробиологов, эпидемиологов и инфекционистов.
Количество Продол- Сроки выживания микробов
микробов ди- житель- при исследовании
Характеристика воды зентерии ность
Флекснера 170 С в 1 мл наблюдения (в сут- бактериологи- методом Р Н Ф
воды ках) ческим
методом
Водопроводная кипяченая ...... 1 млн. 139 129 суток 129 суток
100 107 62 » 81 сутки
» »............... 10 69 29 » 69 суток
» »............... Единицы 69 32 1 69 >
Водопроводная хлорированная. Оста-
точный хлор в момент заражения
0,1—0,18 мг/л........... 1 млн. 4 6 часов 6 часов
Водопроводная хлорированная. Стояла
в открытой стеклянной посуде 2 не-
дели от момента забора до зараже-
ния. Остаточный хлор в момент за-
ражения 0.....-..... 1 млн. 12 9 суток 9 суток
Водопроводная хлорированная. Стояла
в открытой стеклянной посуде 3 су-
ток от момента забора до зараже-
ния. Остаточный хлор в момент за-
ражения 0........ • . . . 1 млн. 39 31 сутки 31 сутки
Как видно из таблицы, реакция нарастания титра бактериофага оказалась чувствительнее бактериологического метода и была положительной в более поздние сроки исследования.
Исследование искусственно зараженной кипяченой водопроводной воды в концентрации 1 млн. микробных клеток Флекснера 170 С в 1 мл производилось 139 дней. До, 45-го дня результаты исследования обеими методиками совпадали (были положительными). С 45-го по 66-й день из воды выделяли культуры, у которых при наличии биохимических свойств, характерных для микробов дизентерии, реакция агглютинации была положительной только 1 : 25, 1 : 100 при исходном титре сыворотки 25 600, в то время как реакция нарастания титра бактериофага в эти дни была положительной на ++++.
С 78-го по 125-й день при наличии положительной реакции нарастания титра бактериофага наблюдалась непостоянная (прерывистая) высеваемость возбудителей дизентерии при исследовании бактериологическим методом. На 129-й день результаты исследования при помощи обеих методик были положительными. В остальные дни я до конца наблюдения результаты анализов были отрицательными.
При заражении кипяченой водопроводной воды 100, 10 и единицами микробных клеток в 1 мл результаты исследования обеими методиками совпадали (были положительными) соответственно до 36—24—24-го дня. В последующие дни при наличии положительной реакции нарастания титра бактериофага отмечалась непостоянная (через 1—2 дня) высеваемость дизентерийных микробов из воды.
Возбудителей дизентерии в хлорированной воде (остаточный хлор 0,1—0,18 мг/л) обнаруживали до 6 часов.
В водопроводной воде, хранившейся в течение различного времени, открытой до заражения, при отсутствии остаточного хлора возбудителей дизентерии обнаруживали от 9 до 31 суток в зависимости от массивности обсеменения воды посторонней микрофлорой. Чем дольше вода оставалась открытой, тем больше колоний посторонней микрофлоры вырастало на чашках Петри и тем короче были сроки выживания микробов дизентерии.
В одном из опытом в 7 л водопроводной воды было внесено 100 микробных клеток дизентерии Флекснера. При бактериологическом исследовании этой воды был получен отрицательный результат, реакция же нарастания титра бактериофага была положительной на Ч—(~|—
При исследовании искусственно зараженной воды эффективность реакции увеличивалась с уменьшением дозы микробов в 1 мл воды.
Даже при исследовании воды, зараженной большими дозами микробов (1 млн. 100 тыс. микробных клеток в 1 мл), при наличии отрицательного бактериологического исследования реакция нарастания титра бактериофага в 11,71 °/о случаев была положительной. Наиболее эффективна реакция нарастания титра бактериофага при определении возбудителей дизентерии в воде, зараженной небольшими дозами (100—10—1 в 1 мл).
В этих опытах при отрицательных бактериологических исследованиях реакция нарастания титра бактериофага была положительной в 24,6°/о.
Таким образом, при исследовании воды, зараженной небольшими дозами микробов. эффективность реакции нарастания титра фага в 2 раза выше, чем при исследовании воды, зараженной большими концентрациями микробов. Заметим, что аналогичные данные получены нами при исследовании смывов с зараженных поверхностей.
Выводы
1. Реакция нарастания титра бактериофага является быстрым и высокочувствительным методом обнаружения дизентерийных микробов в воде.
2. При исследовании воды, зараженной небольшими концентрациями микробов, эффективность реакции нарастания титра фага в 2 раза выше, чем при исследовании веды, зараженной большими концентрациями, что имеет важное практическое значение.
ЛИТЕРАТУРА
Гольд фа рб Д. М. Журн. микробиол., эпидсмиол. и иммунобиол., 1957, № 1, стр. 26; 1958, № 5, стр. 64. — Гольд Фар б Д. М., Островская 3. С. Там же, 1957, № 5, стр. 17.— Г ольдфарб Д. М., Кузнецова В. Н., Островская 3. С Там же, 1958, № 1, стр. 110.— Гольдфарб Д. М., Ершов Ф. И., Там же, 1958, Л® 12, стр. 30, — Миляева Е. Н., Там же, 1958. № 12, стр. 34. — Т и м а к о в В. Д., Гольдфарб Д. М. Вести. АМН СССР, 1956, № 2, стр. 28. — О и и же. Журн. микробиол., эгшдемиол. и иммунобиол., 1956, № 10, стр. 3.
Поступил» 20/VI 1958 г
« -{г
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИКЛОГЕКСАНОНА И ЦИКЛОГЕКСАНОНОКСИА1А ПРИ ИХ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ'
А. С. Масленников
Из лаборатории отделения профилактической дезинфекции Горьковскон областной санитарно-эпидемиологической станции
В нашей предыдущей работе описан метод определения циклогекса'нона, основанный на выявленной нами способности его образовывать азокраситель с солью диазония Н-кислоты по уравнению:
с-м2х
но-с ¿„-с АЛ
Н2С + Н2С
С-0
А
сн
с н сн
V
сн,
снг
НС СН 2 =
ЛЛГ"НС
с=о
А
Н2С
\А/%
сн сн
УУУ
V
сн2
СН2
+2НХ
сн сн
При проведении реакции сочетания циклогексанона с солью диазоння Н-кислоты циклогексаноноксим в значительной степени деоксимируется. В присутствии азотистой кислоты деоксимироваиие циклогексаноноксима протекает быстро и количественно Если же в исследуемый раствор, содержащий циклогексаноноксим, ввести такие вещества, которые, согласно указаниям Г. Мейера, способны с кетоксимами образовывать двойные соли, то деоксимирования циклогексаноноксима не происходит.
По данным наших исследований, такими веществами, препятствующими процессу деоксимирования циклогексаноноксима могут быть роданиды, виннокаменная кислота и ее соли, сульфит натрия и метанол.
Способность циклогексаноноксима в одних случаях быстро и количественно део-ксимироваться в циклогексанон, а в других практически совсем не подвергаться этому процессу позволяет применить описанную реакцию образования азокрасителя для определения циклогексанона и циклогексаноноксима при их совместном присутствии.
1 Печатается в порядке обсуждения. Ред.
