CC BY
3165-я науч.-практ. конф. «Молодые ученые - российской оториноларингологии»
УДК 616.285-089.844+616.287-089.853 doi: 10.18692/1810-4800-2018-1-21-24
ПРИМЕНЕНИЕ ОБОГАЩЕННОГО ЛЕЙКОЦИТАМИ И ТРОМБОЦИТАМИ ФИБРИНА ПРИ ОПЕРАЦИЯХ НА СРЕДНЕМ УХЕ
Бородулин В. Г., Бервинова А. Н.
ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет
им. акад. И. П. Павлова», 197022, Санкт-Петербург, Россия
(Зав. каф. оториноларингологии с клиникой - проф. С. А. Карпищенко)
THE USE OF LEUKOCYTE-RICH PLATELET-RICH FIBRIN IN THE MIDDLE EAR SURGERY
Borodulin V. G., Bervinova A. N.
Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Vocational Education Pavlov First Saint Petersburg State Medical University, Saint Petersburg, Russia
В статье представлены результаты применения обогащенного тромбоцитами и лейкоцитами фибрина (ОбТЛФ) при операциях на среднем ухе. ОбТЛФ - тромбоцитарный концентрат на матрице из фибрина, получаемый из крови пациента методом центрифугирования. Нами были исследованы 2 группы пациентов. Группа 1 состояла из 50 человек, в возрасте от 19 до 67 лет, всем пациентам выполнялась тимпанопластика, группа 2 - из 23 пациентов, в возрасте от 22 до 62 лет, всем пациентам была выполнена стапедопластика. ОбТЛФ использовался для укрепления неотимпанальной мембраны при выполнении тимпанопластики и для устранения диастаза между ножкой протеза и окном преддверия при выполнении стапедопластики. Для получения ОбТЛФ использовалась стандартная методика.
Нами выявлена положительная связь между использованием ОбТЛФ и исходом оперативного вмешательства. Использование этого материала безопасно для пациента и экономически целесообразно. Необходимо проведение дальнейших исследований в этой области для изучения эффектов ОбТЛФ и внедрения его для широкого использования в клинической практике.
Ключевые слова: хронический средний гнойный отит, отосклероз, перфорация барабанной перепонки, обогащенный тромбоцитами фибрин, тимпанопластика, стапедопластика.
Библиография: 17 источников.
The article presents the results of the use of leukocyte-rich platelet-rich fibrin (L-PRF) in the middle ear surgery. L-PRF is a platelet concentrate on the matrix of fibrin prepared of the patient's blood by centrifugation. We have studied two groups of patients. Group 1 included 50 patients at the age of 19 to 67 years, all the patients had undergone tympanoplasty. Group 2 consisted of 23 patients at age of 22 to 62 years, all after stapedoplasty. L-PRF was used for reinforcement of neotympanic membrane during tympanoplasty and for closure of diastase between the stem of prosthesis and vestibular window during stapedoplasty. L-PRF was obtained using a standard method.
We have revealed a positive relation between the L-PRF application and the surgery outcome. The use of this material is both safe for the patient and cost-effective. The further study in this field is necessary for finding L-PRF effect and its implementation the wide application in clinical practice.
Key words: chronic suppurative otitis media, otosclerosis, tympanic membrane perforation, platelet rich fibrin, tympanoplasty, stapedoplasty.
Bibliography: 17 sources.
Впервые использование тромбоцитарных концентратов началось с применения фибрино-вого клея в 1991 году [1]. В настоящее время широко используются фибриновые клеи, полученные из человеческой плазмы, такие как Tisseel. Главными их недостатками являются возможность развития аллергических реакций у пациента и повышенный риск контаминации, вследствие переноса инфицирующих агентов компонентами крови [2, 3].
С недавнего времени аутотромбоцитарные концентраты начали активно применяться в хирургической практике, и в частности в оториноларингологии [4-15]. Это связано со стремительным развитием отохирургии и поиском новых, более современных материалов.
В 2001 году С^икгоип во Франции был разработан обогащенный тромбоцитами и лейкоцитами фибрин (ОбТЛФ). Он представляет собой тромбоцитарный концентрат на матрице из фи-
Российская оториноларингология № 1 (92) 2018 -
брина, получаемый из крови пациента методом центрифугирования. Фибрин образует гомогенную трехмерную сеть, в которую встроены цито-кины и факторы роста. Такая конфигурация предполагает увеличение продолжительности жизни цитокинов, так как их биологические эффекты реализуются только в момент начального ремо-делирования сгустка. Важным преимуществом является то, что тромбоциты содержат большое количество различных факторов роста, стимулирующих клеточную пролиферацию, ремоделиро-вание матрикса и ангиогенез. К ним относятся: тромбоцитарный фактор роста А и В, трансформирующий фактор роста b-1, фактор роста эндотелия сосудов [цит. по 4].
Кроме того, в ряде работ был выявлен антибактериальный эффект ОбТФ, в частности против метициллин-чувствительного (MSSA) и метицил-лин-резистентного (MRSA) золотистого стафи-локока (St. aureus) и кишечной палочки (E. coli) [16].
Механизм предположительно связан с содержащимися в тромбоцитах антимикробными пептидами (к настоящему времени выделено семь пептидов: fibrinopeptide A, fibrinopeptide B, thymosin b-4, platelet basic protein, connective tissue activating peptide 3, RANTES, platelet factor 4) и с лейкоцитами[17].
Цель исследования. Изучить эффективность применения биологически обогащенного тромбоцитами и лейкоцитами фибрина (ОбТЛФ) при операциях на среднем ухе.
Пациенты и методы исследования. На кафедре оториноларингологии с клиникой ПСПбГМУ им. акад. И. П. Павлова были исследованы две группы пациентов:
- группа 1 - пациенты, которым была проведена тимпанопластика по поводу хронического гнойного среднего отита;
- группа 2 - пациенты, которым была проведена стапедопластика по поводу отосклероза.
Всем пациентам было проведено стандартное оториноларингологическое обследование (передняя риноскопия, фарингоскопия, ларингоскопия, отоскопия), отомикроскопия, аудиологическое обследование (тональная аудиометрия) и рентгенологическое обследование (конусно-лучевая компьютерная 3D-томография височных костей).
Группа 1 состояла из 50 пациентов, в возрасте от 19 до 67 лет, из которых было 29 мужчин и 21 женщина. Всем пациентам выполнена тим-панопластика. В качестве аутотрансплантата в обеих группах был использован хрящевой трансплантат из ушной раковины и глубокой фасции височной мышцы, который укладывался по технике underlay.
При этом группа 1А состояла из пациентов, которым была проведена тимпанопластика без
использования ОбТЛФ - 28 пациентов. Группа 1Б состояла из пациентов, которым была проведена тимпанопластика с использованием ОбТЛФ -22 пациента.
Группа 2 состояла из 23 пациентов, в возрасте от 22 до 62 лет, из которых было 7 мужчин и 16 женщин. Всем пациентам выполнена стапедопластика в условиях местной анестезии. В качестве протеза в обеих группах был использован тефлоновый протез Medtronic Causse Loop Pistón.
Группа 2А состояла из пациентов, которым была проведена стапедопластика с использованием жировой клетчатки из мочки уха для закрытия диастаза между ножкой протеза и окном преддверия - 12 пациентов.
Группа 2Б состояла из пациентов, которым была проведена стапедопластика с использованием ОбТЛФ - 11 пациентов.
Для получения ОбТЛФ использовалась стандартная методика. Венозная кровь пациента (объемом 9 мл) собиралась в пробирку фирмы Vacuette без наполнителя и подвергалась центрифугированию в течение 10 минут со скоростью 2300 об./мин.
В результате кровь разделялась на три стандартных слоя:
- нижний, состоящий из эритроцитов;
- верхний, состоящий из бесклеточной плазмы;
- средний, состоящий из лейкоцитов и тромбоцитов (buffy coat). Средний слой образовывался в виде сгустка. Такой сгусток легко извлекался пинцетом, разделялся на части и использовался для облитерации диастаза между ножкой протеза и нишей преддверия.
Результаты и их обсуждение. Оценка результатов оперативного вмешательства проводилась больным в раннем послеоперационном периоде.
В группе 1 оценка результатов оперативного вмешательства осуществлялась на 14-й день после оперативного вмешательства с помощью ото-микроскопии, критерием являлось наличие или отсутствие перфорации.
В группе 1А у 13 пациентов из 28 (46,43%) была обнаружена перфорация в неотимпанальной мембране. В группе 1Б только у 1 пациента из 22 (4,5%) была выявлена перфорация. Таким образом, выявлена положительная связь между использованием ОбТЛФ и исходом оперативного вмешательства.
В группе 2 оценка результата оперативного вмешательства проводилась на 2-е, 14-е сутки после операции с помощью нескольких критериев, таких как: оценочная анкета по вестибулярным симптомам, степень спонтанного нистагма, тест Унтербергера.
В группе 2А у 4 пациентов из 12 (33,3%) были обнаружены вестибулярные расстройства через 1 сутки после операции, у 3 (25%) - на 14-е сутки. В группе 2Б только у 1 пациента из 11 (9%) были
: 65-я науч.-практ. конф. «Молодые ученые - российской оториноларингологии»
обнаружены вестибулярные расстройства через бластов и синтез коллагена. Трансформирующий
1 сутки после операции, у 1 (9 %) - на 14-е сутки. фактор роста бета (TGF-beta) контролирует кле-
Заключение. Таким образом, была выявлена точную пролиферацию, индуцирует образование
положительная связь между использованием обо- внеклеточного матрикса и восстановление ткани.
гащенным тромбоцитами и лейкоцитами фибрина Эпидермальный фактор роста (EGF) и основной
(ОбТЛФ) и исходом оперативного вмешательства. фактор роста фибробластов (FGFb) стимулируют
ОбТЛФ является универсальным материалом, дифференцировку кератиноцитов и ангиогенез,
который благодаря своим свойствам ускоряет хемотаксис фибробластов и предварительное об-
процессы регенерации и репарации. разование матрикса.
Фактор роста тромбоцитов (PDGF) стимули- Преимуществами ОбТЛФ являются также
рует пролиферацию клеток, хемотаксис фибро- простота получения и низкая стоимость.
ЛИТЕРАТУРА
1. Gibble J., Ness P. Fibrin glue: the perfect operative sealant? Transfusion. 1990. N 30. P. 741-747. PMID: 2219264
2. Wilson S., Pell P., Donegan E. A. HIV-1 transmission following the use of cryoprecipitated fibrinogen as gel/adhesive [abstract]. Transfusion. 1991. Vol. 31 (8 suppl):51S.
3. Hino M., Ishiko O., Honda K. I. Transmission of symptomatic parvovirus B19 infection by fibrin sealant used during surgery // Br Jurn. Haematol. 2000. Vol. 108. P. 194-195.
4. Завьялов Ф. Н., Гончарова О. Г. Использование обогащенной тромбоцитами аутоплазмы при санирующих операциях на среднем ухе // Рос. оториноларингология. 2008. № 2. С. 24-27.
5. Семенов Ф. В., Ридненко В. А., Немцева С. В. Влияние местного применения обогащенной тромбоцитами плазмы на состояние внутреннего уха при стапедопластике // Рос. оториноларингология. 2008. № 4. С. 161164.
6. Якобашвили И. Ю., Семенов Ф. В. Влияние местного применения обогащенной тромбоцитами плазмы на течение раневого процесса после тонзиллэктомии // Рос. оториноларингология. 2008. № 4. С. 26-30.
7. Adda F. Concetres plaquettaires and Platelet rich fibrin: une nouvelle Strategie en paroimplantologie D. U. dimplantologie. Paris. XII. 2001.
8. Braccini F., Tardivet L., Dohan Ehrenfest D. M. The relevance of Choukroun's Platelet-Rich Fibrin (PRF) during middle ear surgery: preliminary results // Rev Laryngol Otol Rhinol (Bord). 2009. Vol. 130, N 3. P. 175-180.
9. Gur O. E., Ensari N., Ozturk M. T., Boztepe O. F., Gun T., Selfuk O. T et al. Use of a platelet-rich fibrin membrane to repair traumatic tympanic membrane perforations: a comparative study. Acta Otolaryngol. 2016. May. 18. P. 1-7.
10. Habesoglu M., Oysu C., Sahin S., Sahin-Yilmaz A., Korkmaz D., Tosun A. [et al.]. Platelet-rich fibrin plays a role on healing of acute-traumatic ear drum perforation // Jurn. Craniofac Surg. 2014. Nov. Vol. 25, N 6. P. 2056-2058.
11. Завьялов Ф. Н., Косяков С. Я., Гончарова О. Г. Результаты применения биологически обогащенной тромбоцитами плазмы при поршневой стапедопластике и мирингопластике // Рос. оториноларингология. 2011. № 3. С. 53.
12. Garin P., Mullier F., Gheldof D., Dogne J. M., Putz L., Van Damme J. P. [et al.]. Platelet-rich fibrin (PRF): an autologous packing material for middle ear microsurgery. B-ENT. 2014. Vol. 10, N 1. P. 27-34.
13. Семенов В. Ф. Отоэндоскопическая оценка отдаленных результатов тимпанопластики, выполненной с использованием обогащенной тромбоцитами плазмы // Рос. оториноларингология. 2013. № 3. С. 132-135.
14. Завьялов Ф. Н., Гончарова О. Г., Попова Л. П. Применение обогащенной тромбоцитами аутоплазмы при операциях на среднем ухе // Рос. оториноларингология. 2009. № 1. С. 67-70.
15. Семенов Ф. В., Банашек-Мещерякова Т. В. Влияние местного применения обогащенной тромбоцитами плазмы на состояние внутреннего уха при стапедопластике // Рос. оториноларингология. 2008. № 4. С. 161-164.
16. Bielecki T., Gazdzik T., Arendt J., Szczepanski T. Antibacterial effect of autologous platelet gelenrich with growth factors and other active substances. In vitro study // Jurn. Bone Joint Surg. 2007. Vol. 89, N 3. Р. 417-420.
17. Tang Y. Q., Yeaman M. R., Selsted M. E. Antimicrobial peptides from human platelets // Infect Immun. 2002. Vol. 70. P. 24-33.
REFERENCES
1. Gibble J., Ness P. Fibrin glue: the perfect operative sealant? Transfusion. 1990;30:741-747, PMID: 2219264
2. Wilson S., Pell P., Donegan E. A. HIV-1 transmission following the use of cryoprecipitated fibrinogen as gel/adhesive [abstract]. Transfusion. 1991;31(8 Suppl):51.
3. Hino M., Ishiko O., Honda K. I. Transmission of symptomatic parvovirus B19 infection by fibrin sealant used during surgery. Br J Haematol. 2000;108:194-195.
4. Zav'yalov F. N., Goncharova O. G. Ispol'zovanie obogashchennoi trombotsitami autoplazmy pri saniruyushchikh operatsiyakh na srednem ukhe [The use of platelet-rich autoplasma in the middle ear sanitizing surgery]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2008;2:24-27 (in Russian).
5. Semenov F. V., Ridnenko V. A., Nemtseva S. V. Vliyanie mestnogo primeneniya obogashchennoi trombotsitami plazmy na sostoyanie vnutrennego ukha pri stapedoplastike [The effect of topical application of platelet-rich plasma on the middle ear condition in stapedoplasty]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2008;4:161-164 (in Russian).
6. Yakobashvili I. Yu., Semenov F. V. Vliyanie mestnogo primeneniya obogashchennoi trombotsitami plazmy na techenie ranevogo protsessa posle tonzillektomii [The effect of topical application of platelet-rich plasma on the wound process treatment after tonsillectomy]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2008;4:26-30 (in Russian).
7. Adda F. Concetres plaquettaires and Platelet rich fibrin: une nouvelle Strategie en paroimplantologie D. U. dimplantologie / F. Adda. Paris. XII. 2001.
Российская оториноларингология № 1 (92) 2018
8. Braccini F., Tardivet L., Dohan Ehrenfest D. M. The relevance of Choukroun's Platelet-Rich Fibrin (PRF) during middle ear surgery: preliminary results. RevLaryngol OtolRhinol (Bord). 2009;130(3):175-180.
9. Gür Ö. E., Ensari N., Öztürk M. T., Boztepe O. F., Gün T., Selijuk Ö. T et al. Use of a platelet-rich fibrin membrane to repair traumatic tympanic membrane perforations: a comparative study. Acta Otolaryngol. 2016. May;18:1-7.
10. Habesoglu M., Oysu C., Sahin S., Sahin-Yilmaz A., Korkmaz D., Tosun A. et al. Platelet-rich fibrin plays a role on healing of acute-traumatic ear drum perforation. JCraniofac Surg. 2014. Nov.;25(6);2056-2058.
11. Zav'yalov F. N., Kosyakov S. Ya., Goncharova O. G. Rezul'taty primeneniya biologicheski obogashchennoi trombotsitami plazmy pri porshnevoi stapedoplastike i miringoplastike [The results of biologically platelet-rich plasma application in piston stapedoplasty and myringoplasty]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2011;3:53 (in Russian).
12. Garin P., Mullier F., Gheldof D., Dogne J. M., Putz L., Van Damme J. P. et al. Platelet-rich fibrin (PRF): an autologous packing material for middle ear microsurgery. B-ENT. 2014;10(1):27-34.
13. Semenov V. F. Otoendoskopicheskaya otsenka otdalennykh rezul'tatov timpanoplastiki, vypolnennoi s ispol'zovaniem obogashchennoi trombotsitami plazmy [Otoendoscopic evaluation of the long-term outcomes of tympanoplasty performed with the use of platelet-rich plasma]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2013;3:132-135 (in Russian).
14. Zav'yalov F. N., Goncharova O. G., Popova L. P. Primenenie obogashchennoi trombotsitami autoplazmy pri operatsiyakh na srednem ukhe [The use of platelet-rich autoplasma in the middle ear surgery]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2009;1:67-70 (in Russian).
15. Semenov F. V., Banashek-Meshcheryakova T. V. Vliyanie mestnogo primeneniya obogashchennoi trombotsitami plazmy na sostoyanie vnutrennego ukha pri stapedoplastike [The effect of topical application of platelet-rich plasma on the inner ear condition]. Rossiiskaya otorinolaringologiya. 2008;4:161-164 (in Russian).
16. Bielecki T., Gazdzik T., Arendt J., Szczepanski T. Antibacterial effect of autologous platelet gelenrich with growth factors and other active substances. In vitro study. J Bone Joint Surg. 2007;89(3):417-420.
17. Tang Y. Q., Yeaman M. R., Selsted M. E. Antimicrobial peptides from human platelets. Infect Immun. 2002;70:24-33.
Бородулин Василий Григорьевич - кандидат медицинских наук, врач-оториноларинголог детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой. Россия, 197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, д. 6-8; тел. 8-905-278-82-18, e-mail: : [email protected]
Бервинова Анна Николаевна - ординатор Первого СПбГМУ им. акад. И. П. Павлова. Россия, 197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, д. 6-8; тел. 8-921-790-82-65, e-mail: [email protected]
Vasilii Grigor'evich Borodulin - MD Candidate, otorhinolaryngologist of Raisa Gorbacheva Memorial Research Institute for Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation. Russia, 197022, Saint Petersburg, 6/8, Lva Tolstogo str., tel.: 8-905-278-82-18, e-mail: [email protected]
Anna Nikolaevna Bervinova - resident physician of Pavlov First Saint Petersburg State Medical University. Russia, 197022, Saint Petersburg, 6/8, Lva Tolstogo str., tel.: 8-921-790-82-65, e-mail: [email protected]
