CC BY
17
II. ХИРУРГИЯ
ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ НАРУШЕНИЯ ЛИМФАТИЧЕСКОГО ДРЕНАЖА СЕРДЦА И СВЕРТЫВАЕМОСТЬ ЛИМФЫ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ
УДК 616-005.9
Гусейнова Ш.М., Алиев С.Д., Алиев М.Х., Самедова С.А.
Азербайджанский медицинский университет, кафедра патологической физиологии, г. Баку
Аннотация
Целью настоящего исследования явилось изучение роли активации внутрисосудистого свертывания лимфы в нарушении лимфатического дренажа сердце при моделировании сахарного диабета у кроликов. Опыты проводились под наркозом, на 33 кроликах, обоего пола, породы «Шиншилла». Результаты исследования показали, что моделирование СД с внутривенным введением аллоксана способствовало к активации внутрисосудистого свертывания лимфы. О чем свидетельствует весьма выраженные гиперкоагуляционные изменения таких показателей свертываемости в лимфе, как КВ, КФВ, АЧТВ, ПВ и ТВ. По мере увеличение срока исследования выявленные сдвиги усугублялись на фоне заметного угнетения лимфатического дренажа тканей, наиболее выражено в сердечной мышце. При этом увеличивались как ¡-этап, так и ¡¡-этап выведения лимфотропного красителя из сердца. Сравнение полученных данных с литературными, позволяет утверждать, что внутрисосудистая активация лимфы занимает одно из важных мест в патогенезе нарушение лимфатического дренажа сердце и, следовательно, в патогенезе кардиоваскулярных осложнений СД.
Эксперименталды кант диабет кезшде журектщ лимфалык дренаждаудьщ жэне кан уюы бузушылыктарыньщ патогенетикалык телктер1
Гусейнова Ш.М., Алиев С.Д., Алиев М.Х., Самедова С.А.
Эзербайжан Медицина университет!, патологиялык, физиология кафедрасы, Баку к,.
Ключевые слова
преемственность диагностики и лечения, глубокая флегмона шеи, ошибки и осложнения диагностики, КТ шеи, хирургическое лечение.
Ацдатпа
Осы зерттеудщ максаты уй кояндарында кант диабетн модельдеу кезнде журект! лимфалык дре-наждауы бузылеан жаедайда лимфаныщ тамыр1шшдеп кан уюын белсенд1руш зерттеу болып табылады. «Шиншилла» тукымыныщ ею жынысыньщ 33 уй коянында наркозбен сынамалар журпзшд1. Зерттеудщ нэтижелер1 бойынша аллоксанды тамырш1не енг!зу!мен СД модельдеу! лимфаныщ тамыршнде кан уюыныщ белсенд1рлу1не ыкпалын типзд1. Ондай жайтты КВ, КфВ, АЧТВ, ПВ жэне ТВ сиякты лим-фаларында кан уюыныщ керсетюштер! кебеюн гиперкоагуляциялык езгер!стерд!щ анык керсет!нд!г!н дэлелдейд1. Зерттеудщ мерз 'м кебеюне карай аныкталеан жылжулар т'шдерд'щ лимфалык дренаж-дауын айтарлыктай басылуыныщ аркасында кушейд!, эфесе журек булшыкет'шде. Сонымен, калай да ¡-ш! кезещде, солай да ¡¡-ш! кезещнде лимфотропты бояушысыныщ шыеуы кебейген. Алынеан деректерд! усынылатын эдебиепндепамен салыстыреанда, лимфаныщ тамырш1ндеп белсенд1рлу1 журект! лимфалык дренаждауыныщ бузылу патогенезнде мащызды орындарыныщ б1рше ие, сонымен СД кардиоваскулярлык аскынуларыныщ патогенезнде мащызды екенд! деп танылады.
Туйш сездер
лимфа, кан уюы, кант диабет¡, журектщ лимфалык дренаждауы.
ВУИЕТШ ОР БУРОЕРУ Ш КА1АКНБТАМ № 1-2013
21
Pathogenetic mechanisms disturbances of lymphatic drainage of heart and coagulability of lymph in experimental diabetes mellitus
Huseynova Sh.M., Aliev S.D., Aliev M.Kh., Samedova S.A.
Azerbaijan Medical University, Department of pathological physiology, Baku
Keywords
lymph, coagulability, diabetes mellitus, lymphatic drainage of heart.
Abstract
Purpose of this research is studying the role activation of intravascular coagulation of lymph in disturbances lymphatic drainage of the heart in modeling diabetes mellitus in rabbits. Experiments were under narcoses on 33 rabbits, both sexes, breed of"Chinchilla". Results of investigations showed, that modeling of diabetes mellitus with intra-venous administration of alloxan contributed to activation of intravascular coagulation of lymph. Signifi cance hyper coagulation changes in the indices of coagulation in lymph, as KT, KfT, PATT and TT are evidenced about it. With increasing duration of investigations identifi ed changes aggravated in the phone of signifi cance inhibition of lymphatic drainage of tissues, most pronounced in cardiac muscle. In this case increase both I-stage, also Il-stage of excretion of lymphotropic dye from the heart. Comparison of the results with literature, allow claim, that intravascular activation of lymph take one of the main place in the pathogenesis disturbances of lymphatic drainage of the heart, and sequent, in the pathogenesis of cardiovascular complications in DM.
Число больных с сахарным диабетом (СД) прогрессивно увеличивается во всех странах мира. Каждые 10-15 лет количество больных СД увеличивается в 2 раза и по прогнозам ученых к 2030 г. будет составлять 437 млн человек [6]. СД приводит к ранней инвалидизации и смертности в связи с сосудистыми осложнениями диабета, что определяет большую социальную значимость этой проблемы [4]. По данным большинства авторов, патология сердечно-сосудистой системы отмечается более, чем у половины больных СД [15]. По данным других авторов, изменения сердечно-сосудистой системы, обусловленные СД, наблюдаются у 90-100% больных [17]. СД является риска развития острых осложнений коронарного кровообращения не только у лиц пожилого, но и молодого возраста [7]. Несмотря на значительные успехи в диагностике и лечении больных СД, кардиоваскулярные осложнения и ныне остаются наиболее частой причиной смерти пациентов этой категории. Большое значение в патогенезе кардиоваскулярных осложнений при СД отводится изменениям системы гемостаза и реологическим нарушениям крови [5, 6, 9, 13]. В то же время известно, что при различных патологиях нарушения в системе гемостаза сопровождается с активацией внутрисосудистого свертывания лимфы и расстройствам лимфатического дренажа тканей [2, 3, 10, 11]. Последнее способствуя накоплению в межклеточном пространстве различных токсичных метаболи-
тов, крупномолекулярных частиц поврежденных клеток усугубляет эндотоксикоз на клеточных и органных уровнях со всеми вытекающими отсюда последствиями. Однако до настоящего времени состояния свертываемости лимфы и лимфатического дренажа сердце (ЛДС), их роль в патогенезе кардиоваскулярных осложнений при сахарном диабете не исследовано. Исходя из вышеизложенного целью настоящего исследования явилось изучение состояние свертываемости лимфы и лимфатического дренажа сердце и их роль в возникновении кардиоваскулярных осложнений при экспериментальном СД.
Материал и методы исследования
Опыты проводились на 33 кроликах, обоего пола, породы «Шиншилла», весом 2,2-3,0 кг, которые содержались на стандартном рационе вивария. Для моделирования СД животным внутривенно вводили 5% водный раствор аллоксана (Mol Weight: 244. 13), в дозе 150 мг/кг, при этом накануне в течение ночи (корм убирали за 14 час) животные не получали пищи [15, 16]. Проводили регулярный динамический контроль за развитием сахарного диабета, определяя уровень глюкозы крови натощак при помощи глюкометра (SensoLite Nova, Budapest-Hungary) на 15, 20, 25, 30 и 60-е сут. после введения аллоксана. Продолжительной гипергликемии (уровень глюкозы превышал исходные данные, более чем в 2 раза) наблюдали через 2 недели после инъекции
ВЕСТНИК ХИРУРГИИ КАЗАХСТАНА № 1-2013
22
Показатели Исходный фон Сахарный диабет Периоды исследования (сутки)
25 30 45 60
N 5 5 6 4 5 5 5
КВ(с) 71,6±3,4 64,4± 4,3д.д. 60,9±4,1* 53,9±3,1*** 44,4±2,9*** 41,5±2,4 *** 62,6±3,7***
КфВ(с) 84,7±4,2 85,9 ±4,6* 74,4±4,3** 70,9±4,1** 63,4±3,6*** 60,9±3,5 *** 79,6±5,1*
АЧТВ(с) 55,2±2,5 50,6±3,1д.д. 46,4±3,1* 40,9±2,2** 36,4±1,6 *** 44,4±2,1 ** 59,4±3,3дд-
ПВ(с) 34,7±1,8 29,4±1,1д.д. 25,6±0,8* 22,4±1,1** 27,4±1,7 * 35,4±1,8д.д. 41,4±2,3*
ТВ (с) 27,4±1,3 23,4±1,0* 20,6±0,7*** 18,9±0,6** 19,7±0,5д.д. 26,4±1,1д.д. 36,4±2,1***
КФ(г/л) 2,7±0,01 2,8±0,01д.д. 2,9±0,02д.д. 2,8±0,01д.д. 2,3±0,02* 2,2±0,01 ** 2,0±0,01***
РКФМ(+-) - - + + + + +
ПДФ(+-) - - + + + +
АТ-Ш(с) 137,6±5,2 113,4±4,3** 120,4±5,6 * 98,9±4,7*** 87,6±5,1*** 117,4±5,3* 129,4±5,2дд-
ФА(мин) 16,9±1,1 18,7±1,3д.д. 16,7±1,2д.д. 13,9±0,4** 12,4±0,6** 14,4±0,5 д.д. 11,2±0,2***
СЛО (мл.кг/мин) 0,20±0,02 0,29±0,03*** 0,21±0,02дд- 0,14±0,02** 0,15±0,02** 0,13±0,01*** 0,15±0,01**
ЛДС (мин) I II 3,3±0,6 3,1±0,8д.д. 4,7±0,9* 5,3±0,2** 5,9±0,3*** 6,4±0,7*** 5,9±0,7**
16,7±1,1 13,9±1,7* 20,1 ±2,2* 25,9±2,Г** 22,4±1,9** 29,3±3,2*** 30,9±2,9***
Примечание: статистически значимая разница с исходными показателями: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001
Таблица 1
Состояния
свертываемости лимфы и лимфатического дренажа сердце при моделировании аллоксаного сахарного диабета. (М±т; п=33)
аллоксана, что считали моделирования СД состоявшийся.
Для анализов, лимфу получали из дренированного грудного протока по методу A.A. Крни-енко и др. (1977) с модификацией М.Х. Алиева и В.К. Мамедова (1990). При этом в качестве наркозных средств использовали растворы ка-липсола (8 мг/ кг) и димедрола (0,15 мг/кг-1%-го раствора), который вводили в ушную вену ухо кролика. Скорость лимфооттока (СЛО) определяли по объему лимфы, оттекающей из дренированного грудного протока в единицу времени. Состояние системы свертывания, антисвертывания и фибринолиза (САФ) лимфы оценивали по комплексу общепринятых пробирочных тестов таких, как каолиновое время (КВ), кефалиновое время (КфВ), активизированное частичное тром-бопластиновое время (АЧТВ), протромбиновое время (ПВ), тромбиновое время (ТВ), концентрация фибриногена (КцФ), растворимые фибрин мономерные комплексы (РФМК), продукты деградации фибриногена (ПДФ), антитромбина-III (АТ - III) и фибринолити-ческой активности (ФА). Изученные показатели свертываемости лимфы определяли на полуавтоматическом коагуло-метре «Хумаклот-Дуо» (Германия) с помощью готовых наборов реактивов фирмы «Хуман» (Германия) и «Коагулотест» (Россия). Состояния дренажной функции лимфатической системы сердца
изучали по методу Feola (1977) в модификации A.A. Кедика (1982). Лимфотропный краситель -0,25% раствор синего Эванса (Т-1824) из расчета 0,1мг на 100г массы сердца - инъецировали тонкой туберкулиновой иглой субэпикардиально в заднебоковую стенку левого желудочка в области верхушки. Определение скорости выведения лимфотропного красителя производили на уровне «надсердечного» лимфатического ствола, в районе, примыкающем к сердечному лимфоузлу. При этом регистрировали время от момента инъекции до появления красителя в лимфе, протекающей по «надсердечному» лимфатическому стволу (I- этап выведение), а также - время полного очищения лимфотропного красителя из сердца (II-этап выведения).
При статистической обработке результатов эксперимента применяли непараметрические и параметрические методы анализа; данные обрабатывались при помощи пакетов программ EXCEL и Statistika по Стьюденту-Фишеру и методом Вилкоксона.
Результаты и их обсуждение
Как видно из представленных данных (таблица) моделирование аллоксанового диабета приводит к значительным изменениям изученных показателей свертываемости лимфы и лимфатического дренажа тканей, в частности сердце.
Заметные гиперкоагуляционные изменения в лимфе обнаружили 20 сутки исследования. По мере увеличение срока исследования гиперкоа-гуляционные сдвиги в лимфе усугублялись. Так, через 25 сутки исследования оно выражалось в укорочении (по сравнении с нормальными величинами) таких показателей САФ в лимфе, как КВ, КфВ, АЧТВ, ПВ и ТВ, соответственно на 24,7%, 16,3%, 15,9%, 25,5% и 21,3% (р >0,05-0,001). В этот период исследования появились маркеры активации внутрисосудистого свертывания лимфы - РКФМ и ПДФ. Такая динамика изученных показателей наблюдалась и в последующих периодах исследования. Так, КВ и КфВ лимфы максимально укорачивались (составляли 57,9% и 71,9% соответствующего исходного показателя) через 45 суток исследования, а АЧТВ и ТВ -через 30 сутки исследования, составляя 65,9% и 71,6% соответствующего исходного показателя (р< 0,01-0,001). При этом ТВ лимфы максимально снижалось через 25 сутки исследования, а затем наблюдали обратная волна сдвигов. Изученные показатели постепенно возрастали и некоторые показатели (КфВ, АЧТВ) к концу исследования нормализовались, а некоторые (ПВ и ТМ) - превышали даже соответствующие исходные показатели (соответственно на 13,3% и 32,4%). Несмотря на то, что КВ лимфы также возрастали, однако не достигала до исходного уровня, составляло 87,4% исходной величины (р< 0,05). Начиная с 20 сутки исследования, в лимфе появились маркеры внутрисосудистого свертывания такие, как РКМФ и ПДФ. Активность противо-тромботических систем в течение 20 суток заметно возрастали, превышая исходный уровень на 27,2% (АТ-111) и 44,1% (ФА), соответственно (р< 0,01-0,001). В дальнейшем оба показателя имели тенденции к уменьшению, активность АТ-111 снижалась даже ниже нормы на 29,3% (р< 0,01). К значительным изменениям подвергалась также СЛО из грудного протока. Так, в начале исследования (в течение 20 суток после инъекции аллоксана) СЛО из грудного протока имела тенденцию к возрастанию. Однако, начиная с 20 сутки исследования СЛО из грудного протока постепенно угнеталась, через 45 дней исследования -до 65,0% от исходного (р< 0,001).
Результаты исследования состояние лимфатического дренажа сердца показали, что
Литература
1. Алиев М.Х., Мамедов В.К. Способ получения лимфы в хроническом эксперименте. Удостов. на рац. предл. № 264, от 10 мая 1990 года, 6с.
2. Алиев С.Д., Алиев М.Х., Мамедзаде А.Я. Нарушения лимфодренажа сердца и свертываемость кро-
моделирование сахарного диабета приводит к заметному угнетению дренажной функции лимфатической системы сердца. Наиболее выраженному изменению подвергался I этап очищения сердце от лимфотропного красителя. Так, через 20 суток исследования I этап стал продолжительнее на 42,4% по сравнению с исходным уровнем (р<0,001). Такая динамика сохранялся и в последующих периодах исследования. Максимальное увеличение времени появление лимфотропного красителя в надсердечном коллекторе фиксировали через 45 дней после инъекции (превышал исходную величину на 93,5%). К концу исследования указанный показатель незначительно снижался, однако и на этом периоде исследования был больше исходного уровня на 78,8% (р<0,001). Однако II этап выведение лим-фотропного красителя из сердца, по сравнению с I этапом, к заметным изменениям подвергался только через месяц после введения аллоксана, превышая исходный уровень на 55,3% (р<0,001). Однако, такая динамика сохранялась и на последующих периодах исследования. До конца исследования II этап выведение лимфотропного красителя стал продолжительнее на 85,0% по сравнению с исходной величиной (р<0,001).
Таким образом, результаты наших исследований показали, что при моделировании сахарного диабета лимфатический дренаж сердце нарушается на фоне внутрисосудистой активации свертываемости лимфы и заметной уменьшении СЛО из грудного протока. Сопоставляя данные настоящего исследования с литературными [2, 3, 10, 11, 12], можно заключить, что внутрисосудистая активация свертываемости лимфы и угнетение лимфатического дренажа тканей на уровне грудного протока отрицательно влияют на дренажную функцию сердце при моделировании аллоксано-вого СД. Все это создают условия для накопления в межклеточном пространстве миокарда токсичных продуктов нарушенного обмена, усугубление ендотоксикоза на клеточных и органных уровнях со всеми отсюда вытекающими последствиями. Подытоживая вышеизложенные можно прийти к мнению, что при построении лечебно-профилактических мероприятий кардиоваскулярных осложнений у больных с сахарным диабетом необходимо учесть состояние свертываемости лимфы и лимфатического дренажа сердце.
ви и лимфы в постреанимационном периоде / Мат. юбил. конф. посв. 80 летию проф. М.С. Абдуллае-ва. Баку, 2004, с.35-43 3. Алиев М.Х., Мамедов Я.Д., Мусаев И.Г. и др. Роль нарушений лимфатического дренажа в патогенезе
24
ВЕСТНИК ХИРУРГИИ КАЗАХСТАНА № 1-2013
по-стишемической недостаточности функций миокарда/ Мат. первого Рос. конгр. по патофизиологии. М., 1996, с.280
4. Балаболкин М.И. Патогенез и механизм развития анги-опатий при сахарном диабете // Кардиология, 2000, №10, с.74-87.
5. Датиева Ф.С., Дзугкоев С.Г. Особенности изменений в системах гемос таза и микроциркуляции при экспериментальном сахарном диабете // Материалы конференции молодых ученых СОГМА, 2007, с.45-48
6. Дзугкоева Ф.С., Дзугкоев С.Г., Хетагурова Л.Г. Изменения гемодинамики, перекисного окисления липидов и системы гемостаза при экспериментальном сахарном диабете // Фундаментальные исследования, 2008, №8, с.105-106
7. Дроздова, Е.А. Эпидемиология сахарного диабета сегодня и в будущем /Матер. IV Региональной научно-практической конференции «Молод- дежь XXI века - шаг в будущее». Благовещенск, 2003. с. 212.
8. Кедик А.А. Стимуляция дренажной функции лимфатической системы сердце при острой очаговой ишемии миокарда. Автор. к. м. н., М., 1984, 20с
9. Ключерева Н. И., Колесниченко Л. Р., Хамаева Ц. Б. Коагуляционный гемостаз при сахарном диабете первого типа // Забайкальский медицинский вестник, Чита, 2004, №4, с.44-47
References
1. Aliyev M.Kh., Mamedov V.K. A method for producing a lymph chronic experiment. ID Card. on rac. Prop. Number 264, dated May 10, 1990, 6 p. (in Russ.).
2. Aliyev S.D., Aliyev M.Kh., Mammadzade A.Ya. Violation of lymphatic drainage of the heart and blood clotting and lymph in the postoperative period. Mat. anniversaries. Conf., dedicated to 80th anniversary of prof. M.S. Abdul-layev. Baku, 2004, p.35-43. (in Russ.).
3. Aliyev M.Kh., Mammedov Ya.D., Musayev I.G. et al. The role of the lymphatic drainage disorders in the pathogenesis of post-ischemic myocardial function failure. Mat. Roth first. Congreve. on pathophysiology. M., 1996, p.280. (in Russ.).
4. Balabolkin M.I. Pathogenesis and mechanism of development of angiopathy in diabetes. Cardiology, 2000, №10, p.74-87. (in Russ.).
5. Datieva F.S., Dzugkoev S.G. Especially changes in the systems Gemos pelvis and microcirculation in experimental diabetes mellitus. Proceedings of the conference of young scientists SOGMA 2007, p.45-48. (in Russ.).
6. Dzugkoeva F.S., Dzugkoev S.G., Khetagurova L.G. Hemodynamic changes, lipid peroxidation and the hemo-static system in experimental diabetes mellitus. Fundamental Research, 2008, №8, p.105-106. (in Russ.).
7. Drozdov E.A. Epidemiology of diabetes today and in the future. Mater. IV regional scientific-practical conference "Youth of the XXI century - a step into the future." Blagoveshchensk, 2003, p. 212. (in Russ.).
8. Kedik A.A. Stimulation of the drainage function of the lymphatic system of the heart during acute focal ischemia. Author. a. m. Sc., M., 1984, 20 p. (in Russ.).
10.Левин Ю.М. Практическая лимфология. Баку, «Ма-ариф», 1982, 302с.
11. Мамедов Я.Д. Инфаркт миокарда. Лимфатическая система сердца. Патофизиология и патогенетические основы лечения. М.: Медицина, 1989. 224с.
12.Свиридкина Л.П. Лимфатический дренаж сердца и его стимуляция в условиях моделирования инфаркта миокарда у кроликов. / Мат. второй Рос. конф.«Клиническая лимфология и эндоэкология». Москва-Анапа, 1999, с.102-104
13. Солун М.Н., Киричук В.Ф., Дихт Н.И. Особенности микроциркуляторного гемостаза при сахарном диабете// Фундаментальные исследования, 2008, № 6, с. 67-69
14. Mahgoub M.A., Abd-Elfattah A.S. Diabetes mellitus and cardiac function// Mol. Cell. Biochem., 1998, 180 (1-2): 59-64
15.Vagua P., Juhan-Vagua I. Fibrinigen, fi brinolisis and diabetes mellitus: a comment, Diabetologiya, 1997, 40(6), 738-740.
16.Wild S., Roglic G., Green A. et al. Global prevalence of diabetes: estimates for the year 2000 and projections for 2030// Diabetes Care, 2004, v.27, р. 1047-1053.
17. Zimmet P.Z. Diabetes epidemiology asa tool to trigger dibetes research and care. Diabetologia, 1999, 42, pp.499-518.
9. Klyuchereva N.I., Kolesnichenko L.R., Khamaeva C.B. Coagulation homeostasis in diabetes first type. Zabai-kalskii Medical Gazette, Chita, 2004, №4, p.44-47. (in Russ.).
10. Levin Yu.M. Practical lymphology. Baku, "Maarif", 1982, 302 p. (in Russ.).
11. Mamedov Yu.D. Myocardial infarction. The lymphatic system of the heart. Pathophysiology and treatment of pathogenetic bases. M.: Medicine, 1989. 224p. (in Russ.).
12. Sviridkina L.P. Lymphatic drainage of the heart and its stimulation in a simulation of myocardial infarction in rabbits. Mat. second Rus. Conf., "Clinical Lymphology and endoecology." Moscow-Anapa, 1999, p.102-104. (in Russ.).
13. Solun M.N., Kirichuk V.F., Diht N.I. Features micro-circulatory hemostasis in diabetes. Fundamental Research, 2008, № 6, p. 67-69. (in Russ.).
14. Mahgoub M.A., Abd-Elfattah A.S. Diabetes mellitus and cardiac function. Mol. Cell. Biochem., 1998, 180 (1-2): 59-64.
15.Vagua P., Juhan-Vagua I. Fibrinigen, fi brinolisis and diabetes mellitus: a comment, Diabetology, 1997, 40(6), 738-740.
16.Wild S., Roglic G., Green A. et al. Global prevalence of diabetes: estimates for the year 2000 and projections for 2030. Diabetes Care, 2004, v.27, p. 10471053.
17. Zimmet P.Z. Diabetes epidemiology as a tool to trigger diabetes research and care. Diabetology, 1999, 42, pp.499-518.
