CC BY
0
ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ
Для определения цитотоксичности исследуемых растворов ксуспензии клеток добавляли в равном объеме физиологический раствор; физиологический раствор, обогащенный озоном (50 и 80 мг/мл) и инкубировали 10 минут при температуре 37 °С. К 10 мкл клеточной суспензии добавляли равный объем 0,4% раствора трипанового синего (ООО «БиолоТ», Россия) из расчета и осуществляли подсчет количества клеток на автоматическом счетчике клеток ТС 20 (Bio-Rad, Сингапур). Для статистической обработки данных использовалась программа Statistica 12.0. Для оценки достоверности различий использован параметрический t-критерий Стьюдента.
Результаты и обсуждение: Определение жизнеспособности клеток с трипановым синим показало снижение % живых клеток. После инкубации с физиологическим раствором, физиологическим раствором, обогащенным озоном 50 мг/мл и 80 мг/мл количество клеток составило 97,37 ± 4,6; 71,48 ± 4,6 и 60,55 ± 4,5% соответственно (Р < 0,05).
Заключение: Физиологический раствор, обогащенный озоном (50 и 80 мг/мл) снижает жизнеспособность клеток эпидермоидной карциномы человека А431 и может быть рассмотрен в исследовании цитотоксических свойств при терапии эпидермоидной карциномы на анималь-ных моделях.
■ МОРФОЛОГИЯ ОПУХОЛЕЙ
HRD-ТЕСТИРОВАНИЕ ПРИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЯХ ЯИЧНИКА. РОЛЬ МОРФОЛОГА
А.Ю. Шаманова12, В.В. Саевец12
Место работы: 1. ГАУЗ «Челябинский областной клинический центр онкологии и ядерной медицины», Челябинск, Россия; 2. ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, Челябинск, Россия Эл. почта: anna-sha@bk.ru
Цель: Провести сопоставление HRD-статуса, пригодности тканевого материала для HRD-тестирования в зависимости от структурных изменений в опухоли и её микроокружении при распространенных формах рака яичников. Материалы и методы: Проведено ретроспективное гистологическое исследование тканевых фрагментов в окраске гематоксилин и эозин 100 случаев РЯ от пациенток, проходивших HRD-тестирование в рамках исследования на базе ГАУЗ ЧОКЦОиЯМ, составившими 3 группы исследования (ГИ): 1 ГИ — случаи с положительным HRD-cта-тусом (п = 45), 2 ГИ — с отрицательным HRD-cтатусом
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
Морфология опухолей
(n = 40), 3 ГИ — случаи с неустановленным HRD-стату-сом (n = 15).
Результаты: Все случаи были представлены серозной карциномой яичника высокой степени злокачественности (G3) стадии III-IV по FIGO. Ранее фиксация, проводка тканевого материала, приготовление микропрепаратов было проведено в соответствии со стандартами, требованиями. В 1 ГИ тканевой материал был представлен жизнеспособными опухолевыми клетками с долей более 50% площади тканевого фрагмента, с соотношением опухолевых клеток к соединительной ткани — 4:1; с отсутствием тканевого детрита, с единичными мелкими кальцинатами в опухоли; с диффузно рассеянным лимфогистиоцитарным сопутствующим инфильтратом.
В 2 ГИ — процент жизнеспособных опухолевых клеток 3050%, соотношение опухолевых клеток к строме — 2:1; наличие очагов некроза; мелкие рассеянные кальцинаты; вариабельный воспалительный клеточный инфильтрат. В 3 ГИ доля опухолевых клеток в тканевом фрагменте составила 35-65%, при этом, были обнаружены десмопластические изменения в ткани с выраженным гистиоцитарным компонентом, очагами некроза, более очаговым ростом рассеянных в ткани опухолевых клеток, паттерны роста атипичных клеток были представлены преимущественно микропапиллярными структурами.
Заключение: Для планирования HRD-тестирования целесообразно определение в тканевом фрагменте опухоли доли опухолевых клеток более 40% площади среза, а также объемной плотности некроза, выраженность десмопласти-ческих изменений и паттернов роста опухоли. Актуальным для корректного HRD-тестирования является не только достаточный объем опухоли и качественная в соответствии с требованиями подготовка тканевого материала, но и оценка сопутствующих тканевых изменений в опухоли, которые даже при достаточном объеме тканевого материала могут косвенно снижать качество исследуемого объема материала.
ОЦЕНКА ВНУТРИЛАБОРАТОРНОЙ ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ ПОДСЧЕТА МИТОЗОВ ПРИ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ НА ПЛАТФОРМЕ ONECELL
И.М. Тележникова, Е.И. Шурыгина, Я.А. Кадырова, Н.С. Карнаухов, Г.Р. Сетдикова
Место работы: ГБУЗ «Московский клинический научный центр им. А. С. Логинова ДЗМ», Москва, Россия Эл. почта: i.telezhnikova@inbox.ru
Цель: Оценить внутрилабораторную воспроизводимость подсчета митозов (МП) при раке молочной железы (РМЖ). Материалы и методы: Проведено экспериментальное исследование, выполненное на материале от 10 пациентов, проходивших лечение в МКНЦ им. А.С. Логинова
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
том/vol. 13 #3s1 • 2023
РОССИЙСКИЙ Willi НШОШЕСКШ 11 Vil ШГРЕСС 2DZ3 АЛ I II
Морфология опухолей
по поводу РМЖ в 2022 году. Материалом исследования послужили готовые гистологические стеклопрепараты операционного материала. Стеклопрепараты были оцифрованы на приборе 3DHISTECH при увеличении х40. Была произведена загрузка слайдов на телемедицинскую платформу для патоморфологических лабораторий OneCell. Для каждого слайда посредством инструментов разметки выбрано 10 полей зрения площадью 0,264 mm2. Для анализа внутриисследовательской воспроизводимости было случайным образом выбрано 10 полей зрения и аугментировано. Финальная выборка составила 110 полей зрения. Оценку провели 3 патолога специализирующиеся на проблеме РМЖ, независимо друг отдруга. Были выделены категории точечной разметки (1-mitosis_ yes, 2-mitosis_maybe). Оценены среднее отклонение между врачами и коэффициенты сходимости по категориям. Проведен анализ сопоставимости оценки каждого патолога при аугментировании слайдов. Оценивалось отклонение в общей митотической градации опухоли. Статистический анализ полученных данных проводился на языке программирования Python с использованием библиотек Pandas и Numpy, подсчет проводился в среде Visual Studio Code.
Результаты: Категории МП определялись как2 в 224 точках (32,8%) по разметке патолога 1, по разметке 2 — 345 (35,9%), по разметке 3 — 130 (44,3%). Среднее отклонение ± МП между патологами по коэффициенту сходимости составило 0,66 (0,55 ± 0,78). Общее абсолютное отклонение по категориям на инвертированных аугментированных слайдах составило 0,7 для разметчика 1, 1 для разметчика 2 и 0,65 для разметчика 3. У 6/10 пациентов изменилась градация опухоли при патоморфо-логической разметке 2, при этом завышение градации статистически значимо отличалось (было выше), чем занижение (p < 0,001).
Заключение: Уровень конкордантности при подсчете митозов между патологами был низким, на инвертированных аугментированных слайдах также был низким. Несмотря на невысокую межисследовательскую воспроизводимость при оценке митотической активности, этот признак опухоли сохраняет важное прогностическое значение, целесообразно предпринять усилия по внедрению методов повышения эффективности подсчета митозов. Использование цифровых инструментов уже на данном этапе представляется адекватным решением. Авторы считают целесообразным проводить обучение подсчету митозов с использованием телемедицинских платформ, что позволит повысить воспроизводимость и точность оценки.
Место работы: ФГБОУВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород, Россия
Эл. почта: danirin@yandex.ru
Цель: Изучить возможную роль формирования структур «клетка в клетке» при обеспечении лекарственной устойчивости опухолевых клеток. Материалы и методы:
• Клеточные линии колоректального рака человека (CaCo-2, НТ29, НСТ116 и резистентные к оксалиплатину линии HCT116).
• Мыши линии Nude (подкожные ксенографты).
• МТТ-тест.
• Иммуногистохмимический анализ.
• Трансмиссивная электронная микроскопия (Morgagni 268D (FEI).
• Лазерная конфокальная микроскопия (LSM880, Carl Zeiss, Германия).
Результаты: Морфологический анализ клеточных культур колоректального рака выявил и [способность к формированию, так называемых, структур «клетка в клетке» (cell-in-cell, CIC) [1,2]. Анализ динамики образования CIC показал наибольшую активность у линии CaCo-2 (18% от общего числа клеток). Эти же клетки характеризовались наибольшей лекарственной устойчивостью in vitro к препаратам оксалиплатин и иринотекан и способностью формировать данные структуры при воздействии препаратов. Присутствие одной живой клетки внутри другой было подтверждено с помощью электронной микроскопии и конфокальной микроскопии с витальными красителями с получением серии изображений по глубине сканирования. При развитии резистентности к препарату оксалиплатин наблюдалось увеличение числа структур «клетка в клетке» в клеточных линиях с исходно низким количеством CIC.
Заключение: Полученные данные свидетельствуют о том, что формирование морфологических структур «клетка в клетке» является механизмом ухода опухоли от лекарственного воздействия. Дальнейшее изучение механизмов их формирования открывает возможности для повышения эффективности лекарственной терапии новообразований. Работа выполнена в рамках государственного задания Минздрава РФ «Морфологические структуры «клетка в клетке» как прогностический критерий прогрессиро-вания онкологических заболеваний».
«ИГРА В ПРЯТКИ» - НОВЫЙ СПОСОБ УХОДА ОПУХОЛИ ОТ ЛЕКАРСТВЕННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ
И.Н. Дружкова
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том/vol. 13 #3s1 • 2023
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
