CC BY
9
Российский
онкологический
конгресс
Экспериментальная онкология
ферации оценивалось в режиме «реального времени» системой RTCA iCELLIgence (ACEA Biosciences) и методом проточной цитометрии по анализу фаз клеточного цикла, окраской PI фиксированных образцов. Результаты: Исследуемые ИПК достоверно (р < 0,05) увеличивали уровень апоптоза и некроза в культурах про-лиферирующих опухолевых клеток, клеточная гибель возрастала пропорционально концентрации пептидов в дозах от 10 до 40 мкМ, и составляла от 62,4%± 5,8% до 85,3%± 6,7 % в зависимости от структуры ИПК и клеточной линии. После 24 часового воздействия на клетки ИПК апоптоз составлял от 29,7 %± 3,8 % до 76,1 %± 8,3%, также в образцах наблюдалось достоверное снижение уровня экспрессии Bcl-2. Было обнаружено, что наибольший ци-тотоксический и проапоптотический эффекты оказывали последовательности ИПК, имеющие в структуре несколько молекул изолейцина.
Анализ антипролиферативных свойств ИПК показал, что при увеличении концентрации пептидов до 20 мкМ наблюдается полная остановка процессов пролиферации, причем большинство клеток находится в Gl-фазе клеточного цикла, т. е. блокируется переход G1-S (основная точка воздействия CDK6). Также отмечено снижение экспрессии pRb (в 1,8-2 раза по сравнению с контрольными значениями), что подтверждает специфичность цитостатического воздействия. Т. о. было показано, что пептидные последовательности, полученные с помощью методов математического моделирования, проявляют выраженные свойства ингибиторов CDK6.
Заключение: Разработанные пептидные конструкции оказывают выраженные специфические цитотоксический и цитостатический эффекты на опухолевые клетки и могут являться потенциальными кандидатами для дальнейшей разработки противоопухолевых препаратов. Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 20-015-00068/20.
ОЦЕНКА ПЕРСПЕКТИВНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ВНУТРИКОСТНОЙ ИННОКУЛЯЦИИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК МЕЛАНОМЫ МЫШИ B16/F10 ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЙ В ЯДЕРНОЙ МЕДИЦИНЕ
Авторы: А.В. Смирнова1,2, П.О. Варакса1, Е.Ю. Григорьева1, Ю. С. Лагодзинская1, Ю.А. Финогенова1, Е.А. Калабина3, А. А. Ли-пенгольц \4
Место работы: 1. ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва; 2. ГБУЗ «МКНЦ им. А. С. Логинова» ДЗМ, Москва; 3. ФИБХ им. академиков М. М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Пущино; 4. НИЯУ «МИФИ», Москва Эл. почта: smirn-ova@mail.ru
Введение: Доклинические исследования радиофармацевтических препаратов и методов радиотерапии опухолевых заболеваний требуют создания нового типа моделей in vivo.
Перспективным могут стать модели внутрикостного типа инокуляции опухолевой суспензии клеток, охарактеризованных с точки зрения радиочувствительности. Модель такого типа может быть использована и как фантомная, и как модель для оценки биологической эффективности. Цель исследования: Оценить динамику роста опухолевого узла B16/F10 у мышей C57Bl6/j на 8, 10, 21 и 28 сутки после инокуляции опухолевого материала клеток меланомы мышей B16 /F10 в костомозговой канал большой берцовой кости.
Материалы и методы: Наркотизированным мышам линии C57Bl/6j (n = 24) в диафиз большой берцовой кости ино-кулировали культуральную суспензию клеток меланомы B16/F10 в объеме 0,02 мл с 2 тыс. клеток с 30 % Матригеля. Динамику роста узла оценивали с 1 до 28 дня методом последовательных измерений в 3 взаимно-перпендикулярных плоскостях: длина, ширина и высота узла. В дальнейшем рассчитывали абсолютный объем опухолевого образования. Контроль метастатических поражений проводили методом компьютерной томографии с последующей верификацией при вскрытии.
Результаты: На пятые сутки после введения узел определялся визуально и формировался под кожей в виде тесто-ватой структуры с четкой границей между тканями области голени и маклока у 73,3% животных. К 8 суткам узел определялся визуально и пальпаторно у всех 100%. Динамика изменения размера опухолевого узла была определена на 8, 21 и 28 сутки, и была следующей: 191,95 ± 26,20 мм3, 661,54 ± 576,61 мм3, и 3602,08 ± 2755,94 мм3 соответственно. Для определения интенсивности опухолевой прогрессии использовали метод макроскопической оценки состояния трупного материала, который показал: наличие у всех 100% животных метастатических узлов как рядом с опухолью, так на отдалении от нее, поражения легких (100%) и селезенке (23,81%), трупы животных были кахексичными, подкожно-жировая и висцеральная жировая клетчатка полностью отсутствовала. Кости таза у 4,76 % мышей не определялись из-за прорастания опухоли в малый таз с последующим лизисом костных структур. Заключение: Инокуляция клеток хорошо переносилась животными, опухолевые изменения костной структуры были видны к 14 дню, что совпадало с выходом опухолевых масс в мягкие ткани. Методами классической гистологии планируется уточнение динамики роста и развития метастатических узлов в паренхиматозных органах при описанном типе перевивки.
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том / vol. 10 № 3s1 • 2020
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
