CC BY
0
ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ
Онкогинекология
Цель: Оценить наличие и структуру послеоперационных осложнений в зависимости от объема лимфаденэктомии. Материалы и методы: На базе Челябинского областного клинического центра онкологии и ядерной медицины за период с января 2022 года по апрель 2023 года исследованы 25 пациенток в возрасте от 33 от 78 лет с диагнозом: рак вульвы IB стадия. На догоспитальном этапе всем больным проведена магнитно-резонансная томография (МРТ) малого таза. Всем больным выполнена вульвэкто-мия, разделение по группам было в зависимости отуровня ЛАЭ. На основании критериев включения и исключения сформированы 3 группы исследования. В первую группу включено 7 пациенток с размером опухоли от 2-4 см с латеральным расположением опухоли, с отсутствием по данным обследования признаков метастазирования. Всем проведена биопсия сторожевого лимфоузла (ЛУ) сТехнецием. Во вторую группу включено 8 пациенток с размером опухоли до 4 см с центральным расположением без признаков поражения ЛУ. Всем пациенткам выполнена ЛАЭ 2 уровня. В третью группу включено 10 пациенток с размером опухоли до 4 см, с увеличенными паховыми ЛУ по данным МРТ малого таза, всем больным проведена классическая пахово-бедренная ЛАЭ. Во всех группах выполнена вульв-эктомия с реконструктивно-пластическим компонентом. Результаты: После проведенного хирургического лечения у пациенток 1 группы метастатического поражения паховых ЛУ не выявлено. В2 группе у1 (12,5%) пациентки диагностирован метастаз в паховый ЛУ без экстранодального роста. Данной пациентке выполнено повторное хирургическое лечение в объеме классической пахово-бедренной ЛАЭ. В 3 группе у 2 (20%) пациенток диагностированы метастазы в паховые ЛУ с распространением за капсулу. Осложнений после выполнения ЛАЭ 1 и2уровня нив одном случае не зарегистрировано. Среднее время пребывания в стационаре — 2-5дней. В третьей группе пациенток при выполнении классической ЛАЭ осложнения зарегистрированы у 7 (70%) в раннем послеоперационном периоде: лимфедема — 5 (50%), лимфорея — 7 (70%), инфекция области хирургического вмешательства — 2 (20%). В позднем послеоперационном периоде ещеу1 (10%) пациентки диагностировано рожистое воспаление. У всех пациенток первой и второй группы за период наблюдения признаков прогрессирования и рецидива не выявлено. У1 (10%) пациентки 3 группы с метастатическим поражением пахового ЛУ диагностированы метастазы в легкие и тазовые ЛУ. Разработан алгоритм по выбору уровня ЛАЭ при РВ в зависимости от размера опухоли, ее расположения и инвазии. Заключение: С учетом существенно высокого процента осложнений при выполнении пахово-бедренной ЛАЭ разработка модифицированной ЛАЭ и новой классификации по уровню ЛАЭ является крайне актуальной и вынужденно необходимой.
ОТ МЕТАБОЛОМНОГО ПРОФИЛЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ К МАЛОИНВАЗИВНЫМ ТРАНСКРИПТОМНЫМ МАРКЕРАМ РАКА ЯИЧНИКА
Д.С. Кутилин1, М.Р. Цандекова2, О.Н. Гуськова1, Н.В. Порханова2
Место работы: 1. ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону, Россия; 2. ГБУЗ «Клинический онкологический диспансер № 1» Минздрава Краснодарского края, Краснодар, Россия
Эл. почта: k.denees@yandex.ru
Цель: Метаболомное профилирование методом ультра-высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии (УВЭЖХ-МС) позволяет получить информацию обо всех низкомолекулярных метаболитах в биологических жидкостях больных раком яичников (РЯ), отражающих протекающие в организме процессы. А выявленные метаболиты могут стать потенциальными маркерами заболевания. Однако, метод УВЭЖХ-МС доступен не во всех учреждениях здравоохранения. Соответственно, интерес исследователей в последние годы был направлен на изучение генетических, эпигенетических и транскрип-томных маркеров РЯ. В случае последних (а именно ми-кроРНК) достигнуты существенные результаты, но ни один из этих маркеров так и не вошел в клиническую практику. Поэтому целью исследования стало выявление новых не инвазивных молекулярных маркеров РЯ с использованием омиксных технологий (метаболомного профилирования, биоинформационного анализа и транскриптом-ного профилирования).
Материалы и методы: Работа выполнена на 60 пациентках с РЯ и 35 условно здоровых добровольцах (контрольная группа). Для анализа собиралась первая утренняя моча, которая обрабатывалась по стандартному протоколу для метаболомного анализа. Разделение метаболитов проводили на хроматографе Vanquish Flex UHPLC System, сопряженном с масс-спектрометром Orbitrap Exploris 480. Идентификацию метаболитов проводили в ПО Compound Discoverer Software. Поиск генов-регуляторов метаболитов и микроРНК регуляторов генов осуществляли с использованием метода машинного обучения Random forest. РНК выделяли с помощью набора RNeasy Plus Universal Kits. Уровень транскриптов микроРНК в моче определяли метод ПЦР-РВ. Для оценки различий использовали критерий Манна-Уитни с поправкой Бонферрони. Результаты: Методом УВЭЖХ-МС в моче обследуемых было идентифицировано 438 метаболитов. У больных РЯ 26 соединений имели аномальную концентрацию по сравнению с контрольной группой (жирные кислоты, ацилкар-нитины, фосфолипиды, аминокислоты и их производных, производные азотистых оснований и стероиды). Методом Random forest были установлены взаимосвязи метаболит-ген регулятор (47 генов) и метаболит-микроРНК
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том/vol. 13 #3s1 • 2023
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
РОССИЙСКИЙ Willi НШОШЕСКШ 11VII ШГРЕСС 2D23 АЛ I II
Онкогинекология
регулятор (613 микроРНК). Выявленные микроРНК были валидированы методом ПЦР-РВ. Обнаружены изменения уровня микроРНК miR-33b-5p, miR-423-5p, miR-6843-3p, miR-4668-3p, miR-30c-5p, miR-6743-5p, miR-4742-5p, miR-1207-5p и miR-17-5p в моче пациенток с РЯ относительно контрольной группы.
Заключение: С использованием метаболомного и тран-скриптомного профилирования в моче больных РЯ выявлен аномальный уровень микроРНК miR-33b-5p, miR-423-5p, miR-6843-3p, miR-4668-3p, miR-30c-5p, miR-6743-5p, miR-4742-5p, miR-1207-5p и miR-17-5p. Эти микроРНК имеют потенциал в качестве неинвазивных маркеров РЯ.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОМПЛЕКСНОГО ЛЕЧЕНИЯ ЦЕРВИКАЛЬНЫХ ИНТРАЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ НЕОПЛАЗИЙ, ПРЕИНВАЗИВНОГО И МИКРОИНВАЗИВНОГО РАКА ШЕЙКИ МАТКИ С ОЦЕНКОЙ МОЛЕКУЛЯРНО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ НА СИСТЕМНОМ И ЛОКАЛЬНОМ УРОВНЯХ
П.И. Ковчур, О.И. Курмышкина, Т.О. Волкова
Место работы: ФГБОУВПО «Петрозаводский государственный университет», Петрозаводск, Россия Эл. почта: pkovchur@mail.ru
Недостаточная эффективность стандартных методов лечения рака шейки матки (РШМ) связана с малоизученными механизмами формирования воспалительного микроокружения, системой «контрольных иммунных точек», внутриклеточных сенсоров врожденного иммунитета, иммуно-супрессорных и проангиогенных цитокинов при развитии преинвазивного и микроинвазивного РШМ. Цель исследования: Оценить влияние иммунотерапии цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN/cr in situ) и микроинвазивного (IA1) РШМ соценкой молекуляр-но-иммунологических показателей, выделенных из образцов опухолевой ткани и периферической крови пациенток с CIN1-2, CIN2, CIN3/cr in situ и IA1 РШМ. Материалы и методы: Проведен анализ частоты CD4+/ CD8+периферической крови, общего количества CD25+, FoxP3+, CD4+CD25+, CD4+CD25high и CD4+FoxP3+лимфоцитов, соценкой концентрации TGFp в сыворотке, экспрессии CD95 и уровня апоптоза в Т-клетках в 3 группах. 1 группа (n = 145) — пациентки с осложненным эктропионом, кондиломатозом и лейкоплакиями шейки матки, где выделили 2 подгруппы: а) подгруппа с ВПЧ (n = 63) и б) подгруппа без ВПЧ (n = 82). 2 группа (n = 32) — с CIN1-2, CIN2 степени с ВПЧ в 90,6% (29) случаев. 3 группа (n = 120) — с CIN3 (n = 75) и IA1 (n = 45) РШМ (ДНК ВПЧ в 90,4% и 96,7% случаев соответственно). Контроль — 30 здоровых женщин без патологии ш/матки и ВПЧ. Всем пациентам с ВПЧ в 3 группах 1 этапом проводилось хирургическое лече-
ние, 2 этапом — курс «Аллокина-альфа» (гистидил-гли-цил-валил-серил-глицил-гистидил-глицил-глутаминил-гистидил-глицил-валил-гистидил-глицин) по 1,0 мг 6 раз через день, подкожно. Оценка эффективности лечения шейки матки проводилась с помощью ПЦР-контроля ВПЧ, цитологического и кольпоскопического исследований через 3 месяца с начала лечения. Иммунологические показатели сравнивали с аналогичными показателями здоровых женщин (контроль), выполненными на проточном цитометре MACSQuant Analyzer (Miltenyi Biotec, Германия). Содержание TGFbl в плазме крови больных и контрольной группы оценивалось методом иммуноферментного анализа с использованием набора Platinum ELISA ("eBioscience", США). Определение активности каспаз-3, -6, -8 и -9-спек-трофлуориметрическим методом с использованием AFC-меченных тетрапептидных субстратов ("BioRad", США). Экспрессия мРНК каспаз оценивалась методом ПЦР в режиме реального времени. Для иммунофенотипирования опухоль-инфильтрирующих лимфоцитов (ОИЛ) образцы ткани подвергались ферментативной диссоциации с последующей проточной цитофлуориметрией клеточной суспензии и оценки экспрессии ключевых маркеров ЛА и ЭМП: VEGFR3/FLT4, c-Met/HGFR, транскрипционных факторов мезенхимального фенотипа (SLUG и EpCAM). Обследовано CIN1 (n = 7), С^3/рак in situ (n = 12), микроинвазивный рак IA1 (n = 7) и морфологически нормальный эпителий шейки матки (контроль, n = 5). Результат выражался в процентах, характеризующих наличие в крови клеток, типируемых по маркерам PD1 и TIM3, либо PD1 и LAG3 в общей популяции CD3+CD8+Т-лимфоцитов.
Результаты: В периферической крови у пациентов с CIN3 и IA1 РШМ показана высокая частота CD4+CD25+ и CD4+CD25high лимфоцитов (p < 0,001) и увеличение CD4+CD25+FoxP3+ клеток среди CD4-положительных лимфоцитов (p < 0,01). Численность CD8+CD25+ лимфоцитов в образцах крови больных CIN3 и1А1РШМ выше, чем в контроле (p < 0,05). Частота CD25+FoxP3+ клеток в популяции CD8+лимфоцитов увеличивалась при CIN3 и IA1 РШМ и доля CD8+CD25+FoxP3+и CD8+CD25+CD127low/neg клеток (p < 0,05), повышение концентрации белка TGFßl (p < 0,01). Показано увеличение численности в периферической крови CD95+Т-клеток за счет CD4+CD95+ (p < 0,05) и снижение (%) CD8+CD95+ клеток (p > 0,05) при формировании инвазивного рака. Изучено функциональное состояние лимфоцитов, обусловленное уровнем совместной экспрессии PD1/PDL1, TIM3 и LAG3 и принадлежностью к определенной субпопуляции Т-клеток. При сравнении уровня экспрессии (в % окрашенных клеток) PD1 и PDL1 в общих популяциях CD4 и CD8 ЛПК значимо в группе больных, и более выражено для CD3+CD8+T-лимфоцитов. При CIN3 количество клеток с фенотипом CD3+CD8+PD1+TIM3+и CD3+CD8+PD1 + LAG3+в каждом из вариантов не превышал 5% от общей популяции CD3+CD8+Т-лимфоцитов. Напротив, при IA1 РШМ количество таких клеток в каждом из указанных случаев более 5% (p < 0,05). В составе иммунного микроокружения
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том/vol. 13 #3s1 • 2023
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
