CC BY
4
ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ
Онкогинекология
МИКРООКРУЖЕНИЕ ОПУХОЛИ -ОСНОВНОЙ ФАКТОР СТИМУЛЯЦИИ ПРОГРЕССИИ ПРИ МИКРОИНВАЗИВНОМ РАКЕ ШЕЙКИ МАТКИ
П.И. Ковчур12, О.В. Курмышкина1, И. В. Хидишян2, Т.О. Волкова1
Место работы: 1. ФГБОУ ВПО «Петрозаводский государственный университет», Петрозаводск, Россия; 2. ГБУЗ «Республиканский онкологический диспансер», Петрозаводск, Россия Эл. почта: pkovchur@mail.ru
Одной из наиболее актуальных задач онкогинекологии является изучение пусковых факторов и молекулярных механизмов индукции инвазивного роста при развитии рака шейки матки (РШМ). Для опухолевых клеток эпителиальной принадлежности активация ангиогенеза/ лимфангио-генеза (ЛА) и эпителиально-мезенхимального перехода (ЭМП) является специфичным показателем злокачественной трансформации. Недостаточная эффективность стандартных методов лечения РШМ, связана с механизмами формирования воспалительного микроокружения, системы «контрольных иммунных точек», внутриклеточных сенсоров врожденного иммунитета, иммуносупрессорных и проангиогенных цитокинов при развитии преинвазив-ного и микроинвазивного РШМ, которые мало изучены. Цель работы: оценить роль различных популяций иммунных клеток в создании условий для перехода CIN3/cr in situ в IA1 РШМ. Изучить паттерн экспрессии иммунных контрольных точек (ИКТ) PD1 (CD279), PD-L1 (CD274 / B7-H1), TIM3 (CD366) и LAG3 (CD223) в основных популяциях Т-лим-фоцитов, выделенных из образцов опухолевой ткани и периферической крови пациенток с CIN3/cr in situ и IA1 РШМ. Материал и методы: Проведен анализ изменений частоты CD4 +/CD8 + периферической крови, Т-рег, NKregs параллельно с оценкой концентрации TGFp в сыворотке, экспрессии CD95 и уровня апоптоза в Т-клетках у 72 пациентов (37 с CIN3 и 35 — IA1 РШМ) с ВПЧ в 100 %. Контроль — 30 здоровых женщин без патологии ш / матки и ВПЧ. Анализ экспрессии ИКТ проводился методом проточной цитометрии с использованием моноклональных антител (BioLegend, MiLtenyi Biotec) и комбинации флуоро-форов. Исследовали общее количество CD25 + , FoxP3 + , CD4 + CD25 + , CD4 + CD25 high и CD4 + FoxP3 + лимфоцитов. Популяцию Treg CD4 определяли путем анализа двух комбинаций Treg-маркеров: CD4 + CD25 + / high CD127 Low/- и CD4 + CD25 + FoxP3 + . Для иммунофенотипирования опухоль-инфильтрирующих лимфоцитов (ОИЛ) образцы ткани подвергались ферментативной диссоциации с последующей проточной цито-флуориметрией клеточной суспензии и оценки экспрессии ключевых маркеров ЛА и ЭМП: VEGFR3/FLT4, c-Met/HGFR, транскрипционных факторов мезенхимального фенотипа (SLUG и EpCAM). Обследовано CIN1 (n = 7), CIN3/рак in situ (n = 12), микроинвазивный рак IA1 (n = 7) и морфологически нормальный эпителий шейки матки (контроль, n = 5). Ре-
зультат выражался в процентах, характеризующих наличие в крови клеток, типируемых по маркерам PD1 и TIM3, либо PD1 и LAG3 в общей популяции CD3 + CD8 + Т-лимфоцитов. Результаты и обсуждение. На системном уровне у пациентов с CIN3 и IA1 РШМ показана высокая частота CD4 + CD25 + и CD4 + CD25 high лимфоцитов (p < 0,001) и увеличение CD4 + CD25 + FoxP3 + клеток среди CD4-по-ложительных лимфоцитов (p < 0,01). Численность CD8 + CD25 + лимфоцитов в образцах крови больных CIN3 и 1А1РШМ выше, чем в контроле (p < 0,05). Частота CD25 + FoxP3 + клеток в популяции CD8 + лимфоцитов увеличивалась при CIN3 и IA1 РШМ и доля CD8 + CD25 + F oxP3 + и CD8 + CD25 + CD127low/neg клеток, в сравнении с контролем (p < 0,05), и соответственно выявлено повышение концентрации белка TGFp1 (p < 0,01). Таким образом, на этапе CIN3 шейки матки возникают системные изменения численности CD4 + и CD8 + клеток с Treg-фено-типом. Показано увеличение численности в периферической крови CD95 + Т-клеток за счет CD4 + CD95 + (p < 0,05) и снижение (%) CD8 + CD95 + клеток (p > 0,05) при формировании инвазивного рака. Численность Т-лимфоцитов, связывающих Annexin V, было выше в группе больных CIN3/IA1 (p < 0,01), что согласуется с результатами нашего исследования (2014г). Показано, что функциональное состояние лимфоцитов обусловлено уровнем совместной экспрессии PD1/PDL1, TIM3 и LAG3, принадлежностью к определенной субпопуляции Т-клеток. При сравнении уровня экспрессии (в % окрашенных клеток) PD1 и PDL1 в общих популяциях CD4 и CD8 ЛПК значимо в группе больных, и более выражено для CD3 + CD8 + Т-лим-фоцитов. Так, при CIN3 количество клеток с фенотипом CD3 + CD8 + PD1 + TIM3 + и CD3 + CD8 + PD1 + LAG3 + в каждом из вариантов не превышал 5% от общей популяции CD3 + CD8 + Т-лимфоцитов. Напротив, при IA1 РШМ количество таких клеток в каждом из указанных случаев более 5%.
На локальном уровне — В составе иммунного микроокружения была выделена популяция CD4 (+) и CD8 (+) ОИЛ, для которых оценивался паттерн PD-1 /-L1, TIM3, LAG3. При рассмотрении популяций CD4 и CD8 Т-клеток в образцах CIN3 и ^РШМ характерен более высокий процент клеток, экспрессирующих PD1/PDL1, TIM3 и LAG3 (p < 0,01). При этом подавляющая доля ОИЛ были положительны по CD25. Выявлено увеличение активированных Трег в ОИЛ и увеличение CD8 + FOXP3 + CD25 + Т-клеток, экспрессирующих PD1 + и TIM3 + . Аналогичная тенденция наблюдалась для CD25 + CD127Low/ neg Т-клеток. Показано, что эти изменения в составе ОИЛ параллельны соответствующими изменениями Treg-клеток в периферической крови при переходе от CIN3 к IA1 РШМ, что является дифференциальным признаком инвазивного РШМ. Для неиммунного компонента микроокружения изучен паттерн коэкспрессии спектра генов, контролирующих ключевые точки сигнальных путей ЛА и ЭМП — рецепторы (VEGFR3, c-Met), транскрипционные факторы мезенхимального фенотипа SLUG и EpCAM. Показано, что общее
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том / vol. 12 № 3s1 • 2022
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
российский жж w» ш а
ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ Y У \ж I КОНГРЕСС-2022 /\/\ V I
Онкогинекология
количество панцитокератина СК (+) клеток в СР45-отри-цательной подгруппе увеличивалось от CIN1 к Cr in situ и далее 1А1РШМ (p < 0,05). Напротив количество клеток EpCAM (+) увеличено в образцах CIN1 (p < 0,05) с последующими незначительными изменениями (p > 0,05). Выявлено, что количество клеток, экспрессирующих VEGFR3, MET незначительно среди CD45-отрицательных клеток подгруппы контроля и CIN1, а при CIN3 и 1А1-увеличение (p < 0,05). При этом разница между CIN3 и IA1 достоверна только для MET (p < 0,05). Относительное количество клеток транскрипционного фактора SLUG (+) показало усиление экспрессии при CIN1, с пиком при CIN3 (p < 0,05). Затем, при IA1 РШМ — экспрессия снижалась, но оставалась достоверно выше контроля. При этом экспрессия SLUG (+) обнаружена в значительной части клеток CD45 (-) EpCAM (+) в очагах CIN1-3 и заметно меньшее количество клеток CD45 (-) CK (+), положительно окрашенных на SLUG на всех исследованных образцах.
Выводы: Полученные результаты обосновывают взаимосвязь между локальным иммунным профилем и специфическим паттерном экспрессии регуляторов ЛА, ЭМП и инвазии, что определяет необходимость проведения комплексного анализа иммунного, воспалительного и ан-гиогенного профиля опухоли при разработке и прогнозировании эффективности стратегий комбинированной терапии инвазивного РШМ.
НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ РАКОМ ШЕЙКИ МАТКИ В ОМСКОЙ ОБЛАСТИ
З.Б. Тасова
Место работы: ФГБОУ ВО Омский государственный медицинский университет Минздрава России, Омск, Россия
Эл. почта: ztasova@yandex.ru
Цель: Оценить некоторые показатели заболеваемости раком шейки матки (РШМ) среди жительниц Омской области. Материалы и методы: На основе массива данных канцер-регистра Бюджетного учреждения здравоохранения Омской области «Клинический онкологический диспансер» (БУЗОО «КОД») применены альтернативный и временной анализ, рассчитан параметрический критерий оценки. Стандартизованный показатель рассчитан прямым методом на основе мирового стандарта распределения по возрасту, сведения о численности населения предоставлены БУЗОО «Медицинский информационно-аналитический центр». Анализируемый период был ограничен 2011-2021 гг.
Результаты: Омская область входит в состав Сибирского Федерального округа, общая площадь региона 141,1 тыс. кв. км, в его составе 32 муниципальных района и 6 городов, включая областной центр — г. Омск. Районные центры расположены на разном удалении от г. Омска — от 42 км
до 538 км Основным учреждением, осуществляющим медицинское обслуживание пациенток с раком шейки матки, является БУЗОО «КОД». В Омской области в 2021 году удельный вес РШМ в структуре женской онкологической заболеваемости составил 4,3 %, занимая 6-е место после РМЖ (22,3 %), новообразований кожи (с меланомой, 14,2%), тела матки (7,9 %), ободочной кишки 6,6%), опухолей бронхолегочной системы (4,8 %). Оценивая динамику стандартизованных показателей, установлено, что в регионе на протяжении всего изучаемого периода наблюдается слабая тенденция к нарастанию первичной заболеваемости с ежегодным темпом прироста 0,64 % (2021 г. — 18,6 на 100 тыс.), на ближайшую перспективу рост заболеваемости сохранится. При отсутствии других причин смерти у женщин до достижения ими 75 лет кумулятивный риск развития ЗНО шейки матки в 2021 году составляет 11,12 %, за исследуемый период показатель находился в пределах 11,12-18,1%. При оценке связи между уровнем заболеваемости и удалением от областного центра установлена прямая средней силы корреляционная зависимость (0,33 ± 0,02 (р < 0,05). Анализ заболеваемости по возрасту показал, что почти половина заболевших жительниц Омской области относится к группе лиц фертильного возраста (2021 г. — 53,2%), что подтверждает сложившуюся в последние десятилетия тенденцию к «омоложению» онкологической заболеваемости. Особое значение в плане социальной значимости (в отношении течения заболевания и продолжительности жизни онкологических больных) имеет своевременное выявление опухолевых процессов на 1-11 стадиях процесса. Результаты исследования показали, что в Омском регионе за изучаемый период произошло увеличение удельного веса случаев своевременного выявления рака шейки матки с 45,6 % до 62,0 % (р < 0,05), среднегодовой темп прироста составил 2,2 %. В целом по стране произошли аналогичные изменения в сторону роста обнаружения опухоли на ранней стадии (2011 г. — 62,0, 2011 г. — 64,7%) (р < 0,05), но процесс протекает менее интенсивно (темп прироста 8,78%, в среднем за год — 0,79 %). Заключение: Анализ первичной заболеваемости РШМ среди жительниц области за 11-летний период выявил умеренную тенденцию к росту заболеваемости. Сохраняется многолетняя направленность к возрастанию числа случаев выявления заболевания на ранних стадиях, что благоприятно сказывается, как на прогнозе заболевания, так и на восстановлении трудоспособности пациенток. Высокий удельный вес опухолей шейки матки в репродуктивном возрасте указывает на активизацию и высокое качество профилактических осмотров женщин как в женских консультациях, так и в смотровых кабинетах медицинских организаций, особенно с учетом визуальной локализации опухолевого процесса.
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том / vol. 12 № 3s1 • 2022
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
