Особливості жовчно-кислотного спектра еритроцитарної маси в щурів при експериментальному медикаментозному гепатиті Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК 619:615:577.1:616-003.269:636

Грищенко В.А., д.вет.н., професор, Томчук В.А., к.б.н., доцент, Литвиненко О.М., астрант1

Нацюнальний утверситет бюресурав I природокористування Украгни,

м. Кигв

ОСОБЛИВОСТ1 ЖОВЧНО-КИСЛОТНОГО СПЕКТРА ЕРИТРОЦИТАРНО1 МАСИ В ЩУР1В ПРИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМУ МЕДИКАМЕНТОЗНОМУ ГЕПАТИТ

Анотац1я. Дослгджено жоечно-кислотний спектр еритроцитарног маси у щур1в при моделювант медикаментозного гепатиту. Встановлено тльтст змти р1вня жовчних кислот у еритроцитартй мас1, що свгдчить про розвиток холестазу, зниження синтетичног та кон 'югуючог функцт печтки.

Ключовi слова: медикаментозний гепатит, жовчт кислоти, еритроцитарна маса, щури.

Вступ. Продукщя жовчi е одшею з головних функцш печшки. Жовч виробляеться печшкою постшно. Вона мютить широкий спектр оргашчних i неорганiчних сполук. З органiчних сполук жовчi близько 60 % припадае на жовчнi кислоти. Жовчнi кислоти (ЖК) - це амфiпатичнi сполуки, яю здатнi утворювати мiцели з гщрофшьною поверхнею назовнi та гщрофобною поверхнею всередину. Гiдрофобнi ЖК ввдграють важливу роль у травленнi (емульгащя жирiв, стимуляцiя панкреатично! лiпази, утворення мщел iз жирних кислот тощо), стимулюють вихiд у жовч холестеролу та фосфолшвдв, знижують синтез а-штерферону гепатоцитами. Гiдрофiльнi ЖК також здшснюють травний процес, але при цьому знижують кишкову абсорбцiю холестеролу, його синтез у гепатоцитах та надходження в жовч, стимулюють синтез а-штерферону. Оптимальне спiввiдношення гiдрофiльних та гщрофобних ЖК забезпечуе нормальний перебiг процеЫв травлення, а також здоровий стан печшки [1, 2].

ЖК подшяють на первинш та вториннi. Первинш ЖК синтезуються в печiнцi з холестеролу, кон'югуються з глiцином чи таурином i надходять у складi жовчi до кишечнику, де без змш всмоктуються частково шляхом дифузи та, переважно, за рахунок активного транспорту у дистальному вiддiлi клубово! кишки, повертаючись до печiнки. До них належать холева та хенодезоксихолева кислоти. Вторинш ЖК перетворюються в кишечнику з первинних тд дiею ферменив мiкрофлори кишечнику. Це таю як: дезоксихолева i лiтохолева кислоти. Вони теж всмоктуються у кишечнику та надходять до печшки. Всмоктавшись, ЖК потрапляють в портальний кровооб^, швидко захоплюються гепатоцитами, де знову тддаються кон'югаци, а потiм

1 Науковий кер1вник - д.вет.н., професор Грищенко В.А. Грищенко В.А., Томчук В.А., Литвиненко О.М., 2009

29

секретуються у складi жовч1 Мехашзм ентерогепатично1 циркуляци забезпечуе зберiгання ЖК в органiзмi. 1нтерес до вивчення жовчно-кислотного складу бюлопчних субстанцiй пояснюеться 1х важливою бюлопчною роллю, а також частим розвитком ускладнень, що проявляеться при змш 1х концентраци [3, 4,

5].

Бiльшiсть уражень гепатобшарно1 системи, незалежно вiд чинникiв, призводять до значних змiн секреци жовчi, що ускладнюеться пошкодженням дрiбних жовчних ходiв. Розлади жовчовидшьно1 функци печiнки супроводжуються деструктивними змшами клiтинних мембран гепатоцитiв [6,

7].

Метою ще1 роботи було дослщити особливостi жовчно-кислотного спектра еритроцитарно! маси в щурiв при моделюванш медикаментозного гепатиту.

Матер1али 1 методи. В експеримент використовували безпорiдних бiлих щурiв-самцiв з масою тiла 200 - 220 г, з яких було сформовано двi дослщш групи по десять голiв у кожнiй. Медикаментозну форму гепатиту викликали за розробленою нами бiологiчною моделлю [8] шляхом перорального застосування препарату "Диклофенак" у дозi 12,5 мг/кг маси тша, один раз на добу, впродовж двох тижшв. У I груш знаходились тварини без лжування. До контрольное' групи вiднесено iнтактних тварин, яких утримували на стандартному ращош вiварiю з пероральним введенням !м е^валентно1 кiлькостi фiзiологiчного розчину. На закшченш дослiду щурiв декапiтували тд легким ефiрним наркозом. Експерименти проводилися з дотриманням вимог Конвенци Ради Свропи щодо захисту тварин.

Жовчш кислоти роздiляли за допомогою методу тонкошарово1 хроматографа з подальшою кшьккною оцiнкою окремих складових на стандартних пластинах фiрми «Сшуфол» (Чехiя) за методикою [9]. Екстрагування жовчних кислот проводили при знижених температурах сумшшю етанолу з ацетоном у стввщношенш 1 : 3 та хроматографiчному 1'х роздшенш у гомогеннiй загальнiй системi розчинниюв для вiльних та кон'югованих жовчних кислот, яка складаеться з амшового ефiру оцтово1 кислоти, толуолу, бутанолу, оцтово1 кислоти i води в об'емному стввщношенш 3 : 1 : 1 : 3 : 1. Денситометрична оцшка вмкту жовчних кислот здшснювалася пiсля фарбування комплексним барвником (15 мл оцтово1 льодяно1 кислоти, 1 г фосфорномолiбденовоl кислоти, 1 мл концентровано1 Ырчано1 кислоти та 5 мл 50 %-го водного розчину трихлороцтово1 кислоти).

Результати дослщжень обробляли загальноприйнятими методами варiацiйноl статистики [10].

Результати досл1дження жовчно-кислотного спектра еритроцитарно1 маси у щурiв I групи (дiаграма) свiдчать про вiрогiдне зростання рiвня таурохолево1 (ТХК), холево1 (ХК) i сумарно1 фракци хенодезоксихолево1 + дезоксихолево1 (ХДХК + ДХК) кислот вiдповiдно на 22,5, 28,6 i 59,1 % та тенденщю до пiдвищення - сумарно1 фракци таурохенодезоксихолево1 + тауродезоксихолево1 кислот, що може вказувати на порушення холеретично1

30

функци печшки. Тенденщя до зниження piBra глжохолево! (ГХК) i сумарно! фракци глкохенодезоксихолево! + глкодезоксихолево! (ГХДХК + ГДХК) кислот може свщчити про знижену бюсинтетичну та кон'югуючу функци печiнки [5, 7].

Концентрафя жовчних кислот в еритроцитах пiдqослiдних щурiв зарiзних cnoco6iB корекцп (n=10)

1

eg 0,8 -£ 0,6Л 0,4 -5 0,2 -0 -

ТХК ТХДХК + ГХК ГХДХК + ХК ХДХК + ТДХК ГДХК ДХК

жовчшкислоти

Висновок. Отже, результати дослiдження жовчно-кислотного спектра еритроцитарно! маси в щуpiв за умов медикаментозного гепатиту свщчать про розвиток холестазу, зниження синтетично! та кон'югуючо! функцш печiнки.

Л1тература

1. Шерлок Ш. Заболевания печени и желчных путей: практическое руководство [для врачей] / Ш. Шерлок, Дули Дж. - М.: Гэотар-Мед, 1999. -С. 29 - 32, 250 - 255, 275 - 280, 440 - 470.

2. Regulation of sterol 27-hydroxylase (S27-H) and the acidic pathway of bile acid synthesis / Vlahcevic Z.R., Stravitz R.T., Heuman D.M. // XIV International Bile Acids Meeting. Bile Acids in Hepatobiliart Diseases - Basic Research and Clinical Application. Freiburg (Germany), 1996. - 11 р.

3. Щербинша М.Б., Закревська О.В. Функщональний холестаз як провщний фактор формування гепатобшарно! патологи та можливост його медикаментозное' корекцп //Методичш рекомендаци - Кшв, 2006. - 21 с.

4. Щербинша М.Б., Гладун В.М. КлЫчш аспекти застосування препарату гепабене в практищ лжаря-штершста //Методичш рекомендаци -Кшв, 2006. - 22 с.

5. Болезни печени и желчевыводящих путей: [руководство для врачей / под ред. В.Т. Ивашкина]. - М.: ООО «Издат. дом «М-Вести», 2002. - 416 с.

6. Никитин И.Г. Лекарственные поражения печени: Болезни печени и желчевыводящих путей [руководство для врачей] / И.Г. Никитин, Г.И. Сторожаков, А.О. Буеверов - [2-е изд., испр. и доп.] - М.: ООО «Издат. дом «М-Вести», 2005. - С. 217 - 223.

31

□Контроль □I група

*

7. Грищенко В.А. Особливост жовчно-кислотного спектра MixypoBoi' жовчi та дуоденального вмюту в мишей при медикаментозному гепатит i застосуванш корегуючо! терапи / В.А. Грищенко, О.М. Литвиненко // Укр. бюхЫ. журн. - 2007. - № 4. - С. 97 - 101.

8. Моделювання медикаментозного гепатиту в лабораторних щурiв: матерiали IV мiжнародноl науково! конференцп студентiв та астранпв ["Молодь i поступ бюлогп"'] (Львiв, 7-10 квiтня 2008 р.) / О.М. Литвиненко, В.А. Грищенко - Львiв, 2008. - С. 432 - 433.

9. А. с. 441106614 СССр, МКИ J 01 N 33/50. Способ определения желчных кислот в биологической жидкости / С.П. Весельский, П.С. Ляшенко, И.А. Лук'яненко. - № 1624322; заявл. 25.01.88; опубл. 30.01.91, Бюл. № 4. -2 с.

10. Кучеренко М.£. Сучасш методи бiохiмiчних дослщжень / М.£. Кучеренко, Ю.Д. Бабенюк., В.М. Войцщький. - К.: Фiтосоцiоцентр, 2001. - 412 с.

Summary

FEATURES OF THE IS CHOLIK-ACID SPECTRUM OF MASS OF RED CORPUSCLES FOR RATS AT EXPERIMENTAL MEDICAMENTOUS

HEPATITIS

Investigational cholik-acid spectrum in mass of red corpuscles for rats of medicinal hepatitis. The quantitative changes of level of bilious acids are set in mass of red corpuscles for rats, patients with, medicinal hepatitis, which testifies to development of cholestasia, decline of synthetic and conjugative functions of liver.

Key words: a medicamentous hepatites, cholik-acid, mass of red corpuscles,

rats.

Стаття надшшла до редакцИ 9.09.2009

32