CC BY
9
УДК 615.011+615.362.076.:577.115
Грищенко В.А., доктор ветеринарних наук, професор, Литвиненко О.М., астрант © E-mail:[email protected] Нацюнальний агарний утверситет, кафедра бюхгмп тварин, якост11 безпеки с.-г. продукцп 1м. акад. М. Ф. Гулого, м. Кигв, Украгна
ВПЛИВ ФОСФОЛ1П1ДОВМ1СНИХ ПРЕПАРАТ1В НА Л1П1ДНИЙ СПЕКТР ПЕЧ1НКИ ЩУР1В ПРИ МЕДИКАМЕНТОЗНОМУ ГЕПАТИТ
Дослгджено особливост1 ктьтсних змт показнитв лгтдного спектра печтки у щур1в при медикаментозному гепатит1. За умов самореабттацп оргатзму тварин спостер1гаеться зниження у печгнцг р1вня як загальних лгпгдгв, так I б1льшост1 лтдних фракцш, що, ймовгрно, обумовлено розладами гх екзогенного надходження та ендогенного синтезу, а також ргзким тдвищенням ¡нтенсивност1 процеав лтопероксидацИ. Змти лгтдного складу печшки можливо корегувати шляхом включення в терапевтичну схему препарат1в репаративног дИ, зокрема фосфолтдовмгсних засобгв - бюлоггчно активног добавки ЕЬР-МБ та препарату «Есенщале-форте».
Ключовi слова: фосфолтди, медикаментозний гепатит, лтдний спектр, корегувальна тератя, щури, печтка.
Вступ. Печшка посщае центральне мшце в обмш речовин оргашзму i трансформаци вах клаав нутрieнтiв екзогенного походження. Вона бере участь в обмш бшюв, лшвдв, вуглеводiв, тгменпв, ферменив, гормошв, в^амшв. Лшщний обмш в органiзмi тварин тюно пов'язаний з функщональним станом печшки, в якш здшснюеться синтез та утилiзацiя як простих, так i складних лiпiдiв, деяких лiполiтичних ферментiв, холестеролу (ХС), стеро1дних гормонiв, у тому чи^ утворення промiжних продуктiв метаболiзму - кетонових тiл [1, 2,
3].
Лiпiди вiдiграють ключову роль у структурно-функщональнш оргашзацп клiтин i регуляцп 1х метаболiзму. Передусiм, вони е важливим компонентом бiологiчних мембран, де переважно представлеш фосфолiпiдами (ФЛ) - фосфатидилхолшом. Як головний компонент кл^инних мембран, ФЛ iзолюють кл^ину i завдяки гiдрофобним властивостям забезпечують формування градiенту iонiв i мембранного потенщалу.
Останнiм часом у практичнш гепатологи всебiчно вивчаються рiзнi аспекти прояву клшчно! ефективностi фосфолiпiдовмiсних препараив, особливо 1х протективна i репаративна дп у вiдношеннi мембранних структур уражених гепатоцитiв, в яких синтезуеться основна маса ФЛ [4, 5]. Отже, функщонування мембранних систем залежить вщ цiлiсностi 1х ФЛ-структур. Вс метаболiчнi процеси в клiтинах печшки вщбуваються за участю мембранних систем. Численш експериментальнi та клiнiчнi результати
© Грищенко В. А., Литвиненко О.М., 2008
54
тдтверджують, що терапевтичне застосування ФЛ виявляе не лише захисну, але й регенеративну дш на бiологiчнi мембрани гепатоцитiв [6].
Метою ще1 роботи було дослщити особливостi кiлькiсних i якiсних змш лiпiдного складу гомогенату печiнки при моделюванш медикаментозного гепатиту, а також порiвняти корегувальну ефективнiсть препаратiв на основi ФЛ i3 со! ("Есенщале-форте") i молока ((бiологiчно активна добавка (БАД) FLP-MD)).
Матер1али i методи. Для проведення експериментальних дослщжень використовували берзпорiдних щурiв-самцiв з масою тiла 230 - 250 г, з яких було сформовано чотири дослвдш групи: I, II, III i контрольну. Тривалiсть дослiду становила 65 дiб. Медикаментозну форму токсичного гепатиту iз супутнiми ознаками гастроентериту викликали за розробленою нами бюлопчною моделлю [7] шляхом перорального застосування препарату "Диклофенак", що входить до групи НПЗП, у дозi 12,5 мг/кг маси тша, один раз на добу, впродовж двох тижшв. Шсля чого щурам I групи вводили препарат "Есенщале-форте" в дозi 7,1 мг/кг маси тша, а тваринам II групи - розроблену нами БАД FLP-MD репаративно! дп в дозi 13,5 мг/кг маси тша. БАД FLP-MD - це сумш рiзних класiв ФЛ (80 % фосфатидилхолш, сфiнгомiелiн, фосфатидилетаноламiн), ненасичених жирних кислот (лшолева, лiноленова, оле!нова) та природних антиоксидантiв - в^амшв А i Е [8]. У III груш знаходились тварини, яких пщдавали самореабштаци (без лiкування). До контрольно! групи вщносились iнтактнi тварини.
Екстракщю лiпiдiв iз гомогенатiв зразюв печiнки проводили методом I. Folch et al. [9]. ЛП-спектр дослщжували методом тонкошарово! хроматографа [10] на стандартних плаивках фiрми «Олуфол» (Чехiя). Для роздiлення загальних лiпiдiв (ЗЛ) на класи використовували таку систему розчинниюв: петролейний ефiр - дiетиловий ефiр - оцтова кислота (90 : 70 : 1). Окремi класи лшвдв iдентифiкували з використанням вщомих маркерiв фiрм «Sigma» (США) i «Reanal» (Угорщина). Кiлькiсне визначення шдивщуальних лiпiдних фракцiй здiйснювали спектрофотометрично, застосовуючи калiбрувальнi графiки !хшх маркерiв, на спектрофотометрi СФ-46.
Отриманий цифровий матерiал оброблений статистично за допомогою комп'ютерно! програми з визначенням середньо! арифметично! (М), статистично! помилки середньо! арифметично! (m), вiрогiднiсть рiзницi (р) мiж середнiми арифметичними двох варiацiйних рядiв за критерiем вiрогiдностi (t) i за таблицями Стьюдента.
Результати дослiдження. У результат проведених дослiджень встановлено, що в щурiв III групи (самореабiлiтацiя) вщбуваеться зниження у паренхiмi печiнки вмшту ЗЛ (на 22,9 %), за рахунок таких фракцiй: естерифiкованого холестеролу (ЕХС), вiльних жирних кислот (ВЖК) i триацилглiцеролiв (ТАГ), вiдповiдно на 46,1, 28,1 i 34,8 % порiвняно з контролем, а також спостер^аеться тенденцiя до зниження рiвня ФЛ та ХС (табл. 1). Зменшення вмiсту ЗЛ може бути пов'язано, з одного боку, з порушенням перетравлювання, всмоктування та засвоення жирiв, обумовленого
55
ураженням тонкого вщдшу кишечнику, а з шшого - розладами ендогенного синтезу лшвдв при токсичному ураженш травного каналу й печшки.
При застосуванш препарату "Есенщале-форте" спостерiгаeться нормалiзацiя рiвня ЗЛ i окремих лiпiдних фракцiй, що, ймовiрно, е наслiдком покращення засвоення екзогенних лiпiдiв у кишечнику та штенсивного !х синтезу в гепатоцитах. Спостер^аеться тенденцiя до вiдновлення процесiв естерифжаци ХС, що, ймовiрно, пояснюеться покращенням ферментативно! функцп печiнки.
При ткуванш БАД БЬР-МО виявляеться тенденцiя до тдвищення вмiсту ЗЛ та вiрогiдне - рiвня ФЛ на 22,49 %, а також зростання рiвня ЕХС на 28,3 %, що може свщчити про виражене стимулювання компонентами БАД БЬР-МО ферментативно! функци печiнки. Зменшення при цьому рiвня ВЖК (на 26,4 %), можливо, пов'язано з використанням !х для бiосинтезу ФЛ, ТАГ та естерифкаци ХС.
Таблиця 1.
Лшщний спектр печiнки в щур1в при медикаментозному гепатит 1
за рiзних способ1в корекцп, мг% (М ± т, п = 6).
Пок аз- ники Контроль Iгрупа II група III група
ЗЛ 4444,51 ± 318,12 4744,7 ± 401,82 5323,2 ± 378,64 3427,39 ± 396,11
ФЛ 3239,79 ± 210,37 3610,64 ± 292,96 4033,27 ± У * 267,87 2612,43 ± 299,31
ХС 260,24 ± 29,08 270,81 ± 20,49 246,07 ± 13,83 209,73 ± 17,99
ЕХС 130,08 ± 12,70 103,73 ± 9,2 166,83* ± 8,04 70,17± У * 6,06
ВЖК 61,69 ± 4,94 57,14 ± 5,77 45,38 ± 6,85 44,33 ± У ф 3,80
ТАГ 752,71 ± 61,03 702,38 ± 73,40 831,65 ± 82,05 490,73*± 68,95
Примита. * Даш в1ропдш пор1вняно з контролем, Р < 0,05.
Висновки. Отже, моделювання медикаментозного гепатиту супроводжуеться суттевими розладами кшьюсних характеристик лшщного спектра печiнки. За умов самореабштацп в щурiв спостерiгаеться зниження у печшщ як рiвня загальних лшвдв, так i бiльшостi лiпiдних фракцш, що обумовлено розладами екзогенного надходження та ендогенного синтезу лшвдв за !! токсичного ураження. Застосування в якост засобiв корегувально! терапi!
56
препараив на 0CH0Bi ФЛ рослинного i тваринного походження дае рiзний терапевтичний ефект. При цьому, краще виражене вiдновлення лшщного спектра печiнки вiдмiчаеться при введенш в органiзм щурiв БАД FLP-MD на основi ФЛ молока.
Л1тература:
1. Мельничук ДО., Грищенко В. А. Показники лшщного i фосфолiпiдного спектрiв плазми кровi за репаративно! терапп при неонатальнiй ентеропатологп телят //Укр. бiохiм. журн. - 2005. - №1, т. 77. - С. 89 - 95.
2. Никитин Ю.П., Курилович Г.С. Печень и липидный обмен. -Новосибирск: Из-во "Наука", 1985. - С. 86 - 93.
3. Передерш В.Г., Хмелевський Ю.В., Конопльова Л.Ф. та ш. Клшчна ощнка бiохiмiчних показниюв при захворюваннях внутрiшнiх органiв
- К.: „Здоров'я", 1993. - 192 с.
4. Степанов Ю.М., Филиппова А.Ю. Место "Эссенциале фоте Н" в терапии неалкогольных стеатогепатитов //Сучасна гастроентерологiя. - 2006. -№ 6 (32). - С. 32 - 38.
5. Васьковский В. Е. Липиды. //Соросовский образовательный журнал. - 1997. - № 3. - С. 32 - 37.
6. Кунц Э., Гундерманн К.-Й., Шнайдер Э. «Эссенциальные» фосфолипиды в гепатологии //Терапевтический архив. - 1994. - Т.66, № 2. -С. 66 - 72.
7. Терещенко С.В., Литвиненко О.М., Грищенко В.А. Способи моделювання гепатиту у лабораторних тварин // В кн.: конф. проф.-викл. складу, наук. ствр. i астранив НН1 ветеринарно! медицини та якост i безпеки продукци тваринництва. - К.: НАУ, 2006. - С.114.
8. Пат. 78306 Укра!на, МК1 А 61К 35/20. Ветеринарна бюлопчно активна добавка та споаб репаративно! терапп при диспепси новонароджених телят / Мельничук Д.О., Грищенко В.А. - № 20041108957; Заявл. 02.11.2004; Опубл. 15.03.2007, Бюл. № 3. - 2 с.
9. Folch J., Lees M., Sloane-Stanley C. A rapid method for isolation and purification from animal tissues total lipid //J. Biosi. Rep. - 1984. - 4, № 7. - P. 581 - 587.
10. Петровский В.И. и др. Экстракция, разделение и количественное определение липидных фракций сыворотки крови //Лабор. дело. - 1986. - № 6.
- С. 339 - 341.
Summary V.A. Gryshchenko, O.N. Lytvynenko National Agrarian University, the Cabinet of Ministers of Ukraine, Kiev, Ukraine
LIPID'S SPECTRUM OF LIVER OF RATS AT MEDICAMENTOUS HEPATITIS AND USE OF FACILITIES OF KORRECTING THERAPIES
It is investigated features of quantitative changes of indicators lipid's spectrum of a liver at rats at a medicamentous hepatitis. So, in organism self-rehabilitation animals, reduction in a level liver as the general lipids, and the more
57
lipid's fractions is established, that, can be caused their infringement exogenous hits and endogenous synthesis, and also sharp increase of intensity of processes lipoperoxydation. Changes lipid's composition liver structure can be corrected by inclusion in the medical therapy of preparations reparation actions, especially phospholipids facilities preparations - biologically active addition of FLP-MD and a preparation "Essentsiale-forte".
Keywords: phospholipids, a medicamentous hepatitis, lipid's spectrum, korrecting therapies, rats, a liver.
Cmammx nadiumna do peda^ii 18.03.2008
58
