CC BY
25
ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИОННЫХ РАБОТ
УДК 616-006
А.М. САВРИЛОВА1, И.С. МАРТЫНКЕВИЧ2, Л.Б. ПОЛУШКИНА2, О.Ю. ВИНОГРАДОВА3, А.В. КОСТЕРИНА4, М.А. КУНСТ1, А.В. БАГАУТДИНОВ1
1Республиканская клиническая больница МЗ РТ, г. Казань
Российский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, г. Санкт Петербург 3Городская клиническая больница имени С.П. Боткина, г. Москва "Казанский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Казань
Особенности течения Ph-негативных миелопролиферативных новообразований с различными драйверными мутациями у пациентов Республики Татарстан
Контактная информация:
Саврилова Алсу Мухарямовна — врач-гематолог консультативной поликлиники
Адрес: 420064, г. Казань, Оренбургский тракт, д. 138, тел. +7-905-312-63-09, e-mail: [email protected]
Ведущей причиной патогенеза Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний (МПЗ) считается активация JAKSTAT сигнального пути. Иногда это обусловлено наличием мутации JAK2 V617F или редкими мутациями генов MPL, CALR, либо доказать наличие этих мутаций не удается, что называется тройной негативный статус (triple negative). В статье приведена частота встречаемости и влияние драйверных (JAK2V617F, MPL, CALR) мутаций генов на особенности течения, прогноз и результаты терапии у пациентов с Ph-негативными миелопролиферативными новообразованиями в Республике Татарстан. Обследованы 128 пациентов с Ph-негативными МПН. Наиболее часто выявлялась JAK2V617F мутация, наихудшая выживаемость при тройном негативном статусе, терапия интерфероном показала лучшие результаты по сравнению с гидракарбамидом.
Ключевые слова: Ph-негативные миелопролиферативные заболевания, JAK2V617F, MPL, CALR, тройные негативные, интерферон, гидроксикарбамид.
(Для цитирования: Саврилова А.М., Мартынкевич И.С., Полушкина Л.Б., Виноградова О.Ю., Костерина А.В., Кунст М.А., Багаутдинов А.В. Особенности течения Ph-негативных миелопролиферативных новообразований с различными драйверными мутациями у пациентов Республики Татарстан. Практическая медицина. 2019, С. 94-99) DOI:10.32000/2072-2019-6-94-99
А.М. SAVRILOVA1, I.S. МАРТУ1ЧКЕУ1СН2, L.B. POLUSHKINA2, О.Уи. VINOGRADOVA3, А.У. KOSTERINA4, М.А. KUNST1, А. V. BAGAUTDINOV1
Republic Clinical Hospital of the Ministry of Healthcare of the Republic of Tatarstan, Kazan Scientific Research Institute of Hematology and Transfusion, Saint- Petersburg 3City Clinical Hospital named after S. P. Botkin, Moscow
"Kazan State Medical University of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation, Kazan
Features of Ph-negative myeloproliferative neoplasms with different driver mutations in patients in the Republic of Tatarstan
Contact:
Savrilova A.M. — hematologist
Address: 138 Orenburgskiy Trakt, 420064, tel. +7-905-312-63-09, e-mail: [email protected]
Activation of JAK-STAT signaling pathway is the leading cause in pathogenesis of Ph-negative myeloproliferative disorders. In some cases JAK2 V617F mutation or less common MPL and CALR mutations revealed. Triple negative status occurs if no mutation
is confirmed. The article shows incidence and influence of driver mutations (JAK2V617F, MPL, CALR) on clinical picture, prognosis and therapy results in patients with Ph-negative myeloproliferative neoplasms in the Republic of Tatarstan. The research included 128 patients. The most common was JAK2V617F mutation. Triple negative patients showed the worst survival rate. Interferon therapy had advantage in comparison to hydroxycarbamide.
Key words: Ph-negative MPN, JAK2V617F, MPL, CALR, triple negative status, interferon, hydroxycarbamide.
(For citation: Savrilova А.M., Martynkevich I.S., Polushkina L.B., Vinogradova О.Yu., Kosterina А.V., Kunst IVIA, Bagautdinov А.V. Features of Ph-negative myeloproliferative neoplasms with different driver mutations in patients in the Republic of Tatarstan. Practical medicine. 2019, P. 94-99)
Р1>негативные миелопролиферативные новообразования (МПН) — это заболевания клоновой природы, которые возникли на уровне стволовой кроветворной клетки. Для Р1п-негативных МПН характерна пролиферация одной или более клеточной линии миелопоэза в костном мозге с признаками сохранной терминальной дифференцировки, которые сопровождаются изменением показателей периферической крови.
В соответствии с классификацией ВОЗ 2016 г. к миелопролиферативным неоплазиям относятся семь нозологических форм [1]. Выделяют хронический миелоидный лейкоз (ХМЛ), при котором присутствует свой уникальный маркер — филадельфийская хромосома (Р1п-хромосома) и заболевания, при которых не определяется данная филадельфийская хромосома: истинная полицитемия (ИП), первичный миелофиброз (ПМФ), эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ) и хроническое миелопролифе-ративное заболевание, неклассифицируемое. Они охватывают более 98% больных Р1п-негативными МПН [2, 3].
Одним из основных моментов патогенеза во всей группе Р1п-негативных МПН, не ассоциированных с BCR-ABL, считается активация ^К^ТАТ сигнального пути, обусловленного наличием мутации ]АК2 V617F, либо более редкими мутациями генов MPL, CALR и т.д. [4].
Открытая в 2005 г., мутация V617F в гене ]АК2, произвела переворот в развитии понимания биологических и клинических особенностей Р1п-негативных МПН. Наличие данной мутации приводит к независимой активации ]АК^ТАТ сигнального пути, которая в свою очередь приводит к неконтролируемой пролиферации клеток гемопоэза. Практически у всех пациентов с ИП выявляются мутации гена ]АК2: в 96% случаев мутация (14
экзон) и в 2% случаев мутация в 12 экзоне гена ]АК2 [5, 6]. У пациентов с ЭТ встречается примерно в 55% наблюдений и присутствует примерно в 45-
68% случаев при ПМФ [5, 7, 8, 9]. Вместе с тем, мутация в 12 экзоне гена JAK2 практически не встречается при ЭТ и ПМФ [7]. Однако возникновение ЭТ и ПМФ без мутации JAK2V617F оставалось загадкой и представляло особый интерес для исследователей, которые пытались объяснить этот механизм. В 2006 году догадки ученых о наличии у JAK2-отрицательных пациентов с ЭТ и ПМФ клональ-ного гранулоцитопоэза подтвердились. Группой исследователей Pikman et al. [10] были получены очень убедительные доказательства, подтверждающие активацию JAK-STAT сигнального пути у ^К2-отрицательных пациентов при наличии перестроек в гене рецептора тромбопоэтина (MPL) [15, 64, 70]. А в 2013 году несколько исследовательских групп: австро-итальянская (Klampfl et al.) [11] и английская (Nangalia et al.) [12] выявили и описали различные варианты соматических мутаций в гене кальретикулина (CALR) у ^К2-отрицательных и MPL-отрицательных пациентах с ЭТ и ПМФ. Все выявленные генетические перестройки были представлены транслокациями и делециями в 9-м экзоне гена, кодирующего белок кальретикулин (CALR).
Благодаря всем этим научным изысканиям, патогенез Ph-негативных миелопролиферативных новообразований получил доказанную молекулярно- генетическую верификацию в большинстве случаев. Это позволило экспертам внести их в диагностические критерии Ph-негативных МПН.
Но, тем не менее, сохраняется категория пациентов, у которых не выявлены основные маркеры клональности: JAK2, MPL и CALR. Эти пациенты получили в англоязычной литературе название triple-negative - тройные негативные (ТН). Доля ТН больных составляет от 10 до 15% среди всех пациентов с Ph-негативными миелопролиферативными неоплазиями [13].
Для исследователей по-прежнему представляет интерес, как же влияет наличие той или иной драй-верной мутации, а также их отсутствие, на особенности течения, прогноз и на результаты терапии различных нозологических форм Ph-негативных МПН. Полученные данные позволят уже на этапе первичной диагностики стратифицировать пациентов по группам риска и позволят определить правильную тактику лечения клиницистам.
Цель работы — определение частоты встречаемости и влияние драйверных (JAK2V617F, MPL, CALR) мутаций генов на особенности течения, прогноз и результаты терапии у пациентов с Ph-негативными миелопролиферативными новообразованиями у больных Республики Татарстан.
Материал и методы. В исследование включены 128 пациентов с Ph-негативными МПН, наблюдающиеся в ГАУЗ «Республиканская клиническая больница МЗ РТ», а группа сравнения — это пациенты с Ph-негативными МПН, наблюдаемые в городе Санкт-Петербург. Среди 128 пациентов с Ph-негативными МПН — 51 мужчина (39,8 %) и
-CM L-. .--fr t-A ._-<D t(fl ^ ■ -тог: го ■ - oj тг ^t ■ - <n .. £ ЗПЗ^ Женщин j п - ц О 32
s Г-3 X Ф £ ) лет 1ИНЫ ют; 2 s ) лет ЧИН1 лет; нщш ) лет жчш ) лет - н 3 Щ 0 ^
Ф * <2 ¥ о >4ß Ф * £1 ?00 ■ - о л 00
X Ф Ii э i-"
sä Ц
□ Женщины ■ Мужчины
Рисунок 1. Распределение пациентов по ген-дерно-возрастному соотношению ( n = 128)
Figure. 1. Distribution of patients by gender and age (n = 128)
личия мутации в гене JAK2V617F, при отрицательных значениях — мутаций в генах MPL(515 кодон) и CALR(9 экзон).
Результаты
Наиболее часто встречаемой драйверной мутацией оказалась ^АК2 +) — 80, 5% (п = 103); CALR-мутация (CALR+) выявлена в 14, 1% (п = 18), причем тип 1 в 61,1% (п= 11), а тип 2 — 38, 8% (п=7); MPL-мутация — (MPL +) в 1.6% (п=2), тройной негативный (тН) статус отмечен в 3, 9% случаев (п=5). Данные представлены на рисунке 2.
На момент диагностики заболевания чаще всего отмечались следующие жалобы: слабость — 70, 3% (п=90); спленомегалия — 45,3% (п=58); проявления эритромелалгии — 18, 0% (п= 23); аквагенный зуд — 14, 8% (п = 19); головные боли и головокружения — 17, 2% (п=22); похудение — 7, 8% (п = 10); у 8,6 % (п = 11) пациентов в дебюте заболевания клинические проявления не были отмечены.
На этапе первичной диагностики оценены демографические характеристики и показатели общего анализа крови в зависимости от молекулярно-гене-тического статуса. Данные представлены в таблице 1 и 2.
По результатам проведенного анализа было отмечено отсутствие статистически значимых тендерных различий (р=0,730); также не выявлены различия по возрасту (р=0,730).
При сравнении данных гемограммы было выявлено, что у женщин максимальный уровень гемоглобина зафиксирован в группе пациентов с
Таблица 1. Гендерно-возрастная характеристика групп с различными соматическими мутаци-
ями
Table 1. Gender and age characteristics of groups with various somatic mutations
Исследуемый показатель JAK2 + (n = 103) CALR+ MPL (n = 2) TN (n=5)
CALR1+ (n = 11) CALR2+ (n=7)
Возраст, лет, среднее значение (95% д.и) 54, 9 51, 1 52, 4 53, 5 54,8
Женщины/мужчины, П (%) 64/39 ( 62, %/ 37, 8% 7/4 (63,6%/ 36, 4% 3/4 (42, 9%/ 57, 1% 1/1 50. 5%/ 50. 0% 2/3 40,0%/ 60,0%
Таблица 2. Показатели гемограммы в группах пациентов с различным молекулярно-генети-ческим фенотипом
Table 2. Hemogram values in groups of patients with various molecular-genetic phenotypes
Исследуемый показатель среднее значение. (95% д.и) JAK2 + ( n = 103) CALR+ MPL ( n = 2) ТН ( n = 5)
CALR1+ ( n = 11) CALR2+ ( n=7)
Гемог, г/л женщины/ мужчины 146,0±3, 7 (138,7; 153.3) 151,3±4,5 (142,0; 160,5 109,4±7, 9 (90,2;128,7) 140,3±6, 9 (118,4; 162,1 121,3±6,9 (91,7;150,9) 113,5±12.6 73,5; 153,5 103 137 122,5±15,5 112,3±14, 0 52.2; 172.4
Лейкоциты *109/л 13,5±9, 8 (11, 5; 15, 5) 9, 01±7, 5 (7,3; 10,7) 10, 3±1, 8 (5, 8; 14, 8) 8,1 ±1, 5 38,5±10,6 (8,9; 68,1)
Тромбоциты, * 109/л 644±327 (579; 709) 883±206 (423; 1342) 1098±198 (611; 1584) 1226±573 216±111 (93; 525)
Эритроциты *109/л 5,38±0, 11 (5,15; 5, 6) 4, 14±0, 21 (3,66; 4. 26) 3, 94±0, 31 (3,18; 4, 7) 4, 02± 0, 33 3,91±0, 25 (3,21; 4, 62)
Рисунок 2. Частота выявления драйверных мутаций у пациентов с Ph-негативными МПН (n = 128)
Figure 2. Incidence of driver mutations in patients with Ph-negative myeloproliferative neoplasms (n=128)
77 женщин (60,2 %). Средний возраст пациентов — 56,0 лет (мин — 22 года; макс — 81 год). Диагностика патологии у пациентов основывалась на критериях ВОЗ 2016 г. [1].
Всем пациентам проводили клинический анализ крови, с подсчетом лейкоформулы и тромбоцитов (методом по ФОНИО), а также цитогенетическое исследование костного мозга и гистологическую оценку трепанобиоптата. Обязательным исследованием был молекулярно-генетический поиск на-
Таблица 3. Выраженность клинической картины симптоматики в группах Ph-негативных МПН с различным молекулярно-генетическим фенотипом
Table 3. Clinical picture expression in groups of patients with Ph-negative myeloproliferative neoplasms with various molecular-genetic phenotypes
Симптомы заболевания, n(%) JAK2+ ( n=103) CALR+ MPL ( n = 2) TN ( n = 5)
CALR1+ ( n = 11) CALR2+ ( n = 7)
Спленомегалия 51 (49,5) 5 (45,5) 4 (57,1) 0 (0,0) 1 (20,0)
Похудание 9 (8,7) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (20,0)
Аквагенный зуд 18 (17,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (20,0)
Эритромелалгия 17 (16,5) 1 (9,1) 3 (42, 9) 0 (0,0) 2 (40, 0)
Слабость 75 (72, 8) 5 (45,5) 6 (85,7) 1(50,0) 3 (60,0)
^К2+ - 146, 0 ±3, 7 г/л, что статистически достоверно превышало величину уровня гемоглобина в группе пациентов с CALR1+(р=0, 010). Достоверных отличий между другими группами не выявлено ввиду их малочисленности.
У мужчин имело место тенденция к более высокому уровню гемоглобина в группах с ]АК2+ и CALR1+мутациями, однако достоверных отличий не было, в том числе, и из-за малочисленности пациентов в других группах.
Максимальное значение уровня лейкоцитов выявлено в группе пациентов с ТН статусом — 38,5*109/л. Показатели этой группы статистически достоверно превышали показатели четырех других групп с р<0, 01.
Медиана уровня тромбоцитов существенно превышала норму во всех группах, кроме группы с отсутствием соматической мутации. Медиана уровня тромбоцитов в последней, статистически достоверно отличалась от таковой в других группах (р<0,05). Наиболее высокий уровень наблюдался в группе больных с мутацией cALR2+. Достоверно отличие показателя этой группы наблюдалась также в сравнении с ]АК2+ (р=0,030).
Максимальное значение уровня эритроцитов было выявлено в группе пациентов с ^К2+ - 5,38±0.11*109/л. Показатели этой группы статистически достоверно превышают показатели четырех других групп (р<0, 05).
Наиболее выраженная клиническая симптоматика отмечена у пациентов в группе с
]АК2+мутацией. Однако статистически значимые различия с другими группами выявить не удалось. Данные представлены в таблице 3.
Исследование кариотипа проведено у 68 больных. Нормальный кариотип выявлен у 62 пациентов (83,8%), аномалии кариотипа у 6 пациентов (8,1%): ПМФ — 3 случая, 1 случай с ЭТ, 2 у пациента с ИП.
При гистологическом исследовании костного мозга на этапе диагностики были выявлены изменения, характерные для ИП в 55 % (п=70); характерные для ЭТ в 19 % (п=25); характерные для ПМФ в 26 % (п=33) случаях.
Наиболее грозные осложнения Р1п-негативных МПН — тромботические и геморрагические проявления. Проанализирована частота таких осложнений у пациентов, имеющих соматические мутации и при их отсутствии.
Тромботические и геморрагические осложнения зарегистрированы у 53 (41%) больных. У остальных 75 пациентов (59%) осложнений не наблюдали. Тромбозы имели место у 28 (22%) пациентов.
Основная часть тромботических осложнений выявлялась в группе пациентов, носителей мутации в гене ОАК2+) — 24 случая (23,3%).
В остальных группах наблюдались единичные случаи тромбозов, в группе носителей CALR2+ таковых не было. Данные представлены на рисунке 3.
Геморрагические осложнения в нашей группе были редки - всего 4 (3%) случаев- CALR1 типа — 1 случай (9% от всех CALR+), — 1 слу-
Таблица 4. Частота встречаемости тромботических и геморрагических осложнений Table 4. Incidence of thrombotic and hemorrhagic complications
Осложнения n(%) JAK2+ CALR+ MPL ( n=2) TN ( n = 5)
( n = 103) CALR1+ ( n = 11) CALR2+ ( n = 7)
Геморрагические осложнения 1 (1,0) 1 (9,1) 0 (0,0) 0 (0,0) 2 (40,0)
Тромбозы 24 (23,3) 2 (18,2) 0 (0,0) 1 (50,0) 1 (20,0)
Без тромбозов 75 (72,8) 8(72,7) 7 (100,0) 1 (50,0) 1 (20,0)
Осложнения беременности 3 (2,9) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (20,0)
Рисунок 3. Распределение пациентов с тром-ботическими осложнениями по наличию соматических мутаций
Figure 3. Distribution of patients with thrombotic complications by the presence of somatic mutations
чай (1% от всех JAK2+); у пациентов с тройным негативным статусом — 2 случая (40 % от всех, не имеющих соматические мутации). В группах пациентов носителей CALR2+ и MPL (MPL+) такие осложнения не выявлены. Данные представлены на рисунке 4.
Полученные результаты свидетельствуют об ассоциации мутации в гене JAK2V617F (JAK2+) с более высоким риском развития тромботических осложнений. Ни одного случая тромбоза либо геморрагических проявлений не было зарегистрировано у CALR2+ пациентов.
Проанализирована общая выживаемость в группах — носителях мутаций в генах JAK2V617F, CALR+ и MPL+, а также при ТН статусе. Показатели выживаемости в группе ТН статистически достоверно ниже показателей выживаемости в остальных группах больных (p<0, 001). Медиана выживаемости в группе ТН — 7.5 месяцев. В других группах медиана не достигнута.
Особый интерес для клинициста — это результаты терапии. Для определения возможности достижения молекулярного ответа, отдельно проанализирована эффективность терапии у 28 пациентов JAK2+ группы. Оценена динамика аллельной нагрузки JAK2V617F мутантного гена с момента от диагностики заболевания и по истечению 12 месяцев терапии. Из 28 пациентов — 20 с ИП, 6 с ЭТ, 2 с ПМФ. В соответствии с Национальными клиническими рекомендациями [14, 15] часть пациентов получала терапию гидроксикарбамидом в дозе 10 мг/кг в сутки (рекомендуемая доза составляет от 10-30 мг/кг в сутки, а другие — интерферон-аль-
Рисунок 3. Распределение пациентов с тром-ботическими осложнениями по наличию соматических мутаций
Figure 3. Distribution of patients with thrombotic complications by the presence of somatic mutations
фа в дозе 3000000 ЕД 3 раза в неделю. Всем пациентам оценена аллельная нагрузка JAK2V617F на этапе диагностики и затем через 12 месяцев от терапии. Данные по показателям аллельной нагрузки JAK2V617F представлены в виде таблице 5.
Анализ динамики аллельной нагрузки показал статистически значимую динамику только в группе, получавших интерферон альфа (р=0,014), в группе, получавших гидроксикарбамид, статистически значимых данных не выявлено (р=0,242).
Также, одной из задач проводимого исследования, была оценка частоты встречаемости драйвер-ных мутаций у больных с Ph-негативными МПН в Республике Татарстан и пациентов, наблюдающихся в городе Санкт-Петербург. Данные представлены в таблице 6.
JAK2+ выявлена в 80% случаев среди больных Республике Татарстан и в 68% случаев в городе Санкт-Петербург, данное различие было достоверным. Различий встречаемости остальных соматических мутаций не выявлено. Этот факт несомненно требует внимания и дальнейшего изучения.
Основные выводы:
1. У пациентов Республики Татарстан с Ph-негативными миелопролиферативными неопла-зиями достоверно чаще встречается мутация гена JAK2V617F (р=0,007).
2.Больные c различными драйверными мутациями имеют особенности клинической картины при диагностике:
— значимо выше уровень тромбоцитов (р=0.03) у пациентов с мутацией в гене CALR2+ и ниже уро-
Таблица 5. Уровень аллельной нагрузки в зависимости от терапии Table 5. Level of allelic load depending on therapy
Исследуемый показатель, % JAK2V617F, в дебюте JAK2V617F, через 12 месяцев
Интерферонотерапия, (n = 15) 39, 78% 24, 61%
Гидроксикарбамид , (n=13) 42, 78% 34, 99%
Таблица 6. Частота встречаемости соматических мутаций в Республике Татарстан и городе Санкт-Петербург
Table 6. Incidence of somatic mutations in the Republic of Tatarstan and in Saint Petersburg
Регион JAK2+ CALR+ MPL TN Всего
n (%) CALR1+ CALR2+
Республика Татарстан 103 (80,5) 11 (8,6) 7 (5,5) 2 (1,6) 5 (3,9) 128 (100,0)
Санкт-Петербург 237 (67,7) 29 (8,3) 29 (8,3) 9 (2,6) 46 (13,1) 350 (100,0)
Р 0,007 0,917 0,305 0,522 0,004
вень эритроцитов (р<0.05) у больных всех исследуемых групп в сравнении с больными с мутацией JAK2V617F;
— более высокий уровень лейкоцитов (р<0.01), низкий уровень тромбоцитов (р<0.05) при тройном негативном статусе в сравнениями со всеми другими группами.
3. Показатели общей выживаемости значимо ниже (р<0.01) в группе пациентов с тройным негативным статусом, при сравнении с другими группами.
4. Интерферонотерапия у пациентов с мутацией JAK2V617F имеет значимые преимущества для снижения аллельной нагрузки в сравнении с терапией гидроксикарбамидом (р=0,014)
ЛИТЕРАТУРА
1. Arber D.A., Orazi A., Hasserjian R. et al. The 2016 revision to the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia // Blood. — 2016. — Vol. 127, № 20. — P. 2391-2405.
2. Rollison D.E., Howlader N., Smith M.T. et al. Epidemiology of myelodysplastic syndromes and chronic myeloproliferative disorders in the United States, 2001-2004, using data from the NAACCR and SEER programs // Blood. — 2008. — Vol. 112, №1. — P. 45-52.
3. Tefferi F. The history of myeloproliferative disorders: before and after Dameshek // Leykemia. — 2008. — № 22. — P. 3-13.
4. Vannucchi A.M., P. Guglielmelli P. Molecular pathophysiology of Philadelphia-negative myeloproliferative disorders: beyond JAK2 and MPL mutations // Haematologica. — 2008. — Vol. 93, № 7. — P. 972-976.
5. Vannucchi A.M., Antonioli E., Guglielmelli P., Pardanani A., Tefferi A. Clinical correlates of JAK2V617F presence or allele burden in myeloproliferative neoplasms: A critical reappraisal // Leukemia. — 2008. — № 22. — P. 1299-1307.
6. Pardanani A., Lasho T.L., Finke C., Hanson C.A., Tefferi A. Prevalence and clinicopathologic correlates of JAK2 exon 12 mutations in JAK2V617F-negative polycythemia vera // Leukemia. — 2007. — № 21. — P. 1960-1963.
7. Tefferi A. Pathogenesis of myelofibrosis with myeloid metaplasia // J Clin Oncol. — 2005. — № 23(33). — P. 8520-30.
8. Tefferi A., Thiele J., Orazi A. et al. Proposals and rationale for revision of the World Health Organization diagnostic criteria for polycythemia vera, essential thrombocythemia, and primary myelofibrosis: Recommendations from an ad hoc international expert panel // Blood. — 2007. — № 110. — P. 1092-1097.
9. Campbell P.J., Scott L.M., Baxter E.J., Bench A.J., Green A.R., Erber W.N. Methods for the detection of the JAK2 V617F mutation in human myeloproliferative disorders // Methods Mol Med. — 2006. — № 125. — P. 253-264.
10. Pikman Y., Lee H.H., Mercher T. et al. MPLW515L is a novel somatic activating mutation in myelofibrosis with myeloid metaplasia // PLOS Medicine. — 2006. — Vol. 3, №7. — P. 270.
11. Klampfl, T., Gisslinger H., Harutyunyan A.S. et al. Somatic Mutations of Calreticulin in Myeloproliferative Neoplasms // The New England Journal of Medicine. — 2013. — Vol. 369, № 25. — P. 2391-2405.
12. Nangalia, J., Massie C.E., Baxter E.J. et al. Somatic CALR mutations in myeloproliferative neoplasms with nonmutated JAK2 // American Journal of Hematology. — 2014. — Vol. 89, № 8. — P. 2392-2405.
13. Langabeer S.E., Andrikovics S., Asp J. et al. Molecular diagnostics of myeloproliferative neoplasms // European Journal of Hematology. — 2015. — Vol. 95, № 47 — P. 270-279.
14. Меликян А.Л., Туркина А.Г., Абдулкадыров К.М., Зарицкий А.Ю. и др. Клинические рекомендации по диагностики и терапии Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний (истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитемия, первичный миело-фиброз). — М., 2014. — 81 с.
15. Абдулкадыров К.М., Шуваев В.А., Мартынкевич И.С. Ми-елопролиферативные новообразования. — Москва: Литтерра, 2016. — 304 с.
