CC BY
25
REFERENCES
1 Герасимчук М.Р., Заець Л.М. Пат. 71009 УкраУна, МПК (2012.01) А61В 1/00, А61В 5/08 (2006.01). Cnoci6 дiаmостики гострого легеневого ушкодженне при розлитому перитонiтi у rnypiB // u 201200810; заевл. 26.01.2012 ; опубл. 25.06.2012, Бял. № 12.
2 Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимическим исследованием и лабораторной диагностике // 3-е изд. - М. :
МЕДпресс-информ, 2009. - 896 с.
3 Карiмов 1.З. Окисна модифта^е бшшв i перекисне окисленне лт^в у розвитку метаболiчноí iнтоксикацií при патологи
// Лаб. дiагностика. - 2005. - № 1 (31). - С. 7-12.
4 Сипливый В.А., Конь Е.В., Евтушенко Д.В. Использование лейкоцитарных индексов дле прогнозирование исхода
перитонита // Кл^чна хiрургiе. - 2009. - № 919. - C. 21-26.
5 Abraham E., Carmody A., Shenkar R., Arcaroli J. Neutrophils as early immunologic effectors in hemorrhage- or endotoxemia-
induced acute lung injury // Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol Biol. - 2000. - Biol. - № 279. - P. 1137-1145.
6 Gerasymchuk M.R. Neutrophile sequestration role in the initiation of lung injury in rats with acute peritonitis // Folia Medica
Cassoviensia. - 2011. - Tom. 66, № 1, Suppl. 1. - P. 150-153.
7 Lomas-Neira J., Chun-Shiang Chung, Perl M. [et al.] Role of alveolar macrophage and migrating neutrophils in hemorrhage
induced priming for ALI subsequent to septic challenge // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. - 2006. - № 290. - P. L51-L58.
8 McElroy M.C., Kasper M. The use of alveolar epithelial type I cell-selective markers to investigate lung injury and repair // Eur.
Respir. J. - 2004. - № 24. - Р. 664-673.
9 Oliveira-Junior I.S., Brunialti M.K.C., Koh I.H.J. [et al.] Effect of pentoxifylline on lung inflammation and gas exchange in a sepsis-
induced acute lung injury model // Brazilian Journal of Medical and Biological Research. - 2006. - № 39. - Р. 1455-1463.
10 Zhao Jian [et al.] Supperssion of perfluorosobutylene inducted ALI by pretreatment with pyrrolidine dithiocarbamate // J.
Occup. Health. - 2007. - № 49. - Р. 95-103.
М.Р. ГЕРАСЫМЧУК, Л.М. ЗАЯЦ, В.В. ЧЕРКАСОВА
РОЛЬ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ И НЕЙТРОФИЛОВ В МЕХАНИЗМАХ ОСТРОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ ЛЕГКИХ
ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПЕРИТОНИТЕ
Резюме: Исследование было проведено на 78 самцах белых крыс линии Вистар (180-230 г), разделенных на 3 группы. Первае группа состоела из 58 крыс с экспериментальным острым разлитым перитонитом (ОРП), 2-е группа - контрольнае, с внутрибряшинно введением раствора 0,9% NaCl (n=10) и 3-е - интактнае группа (n=10). ОРП был воспроизведен путем внутрибряшинной инъекции 10% каловой суспензии. Мы проанализировали общее количество лейкоцитов, Wet/Dry индексы легких, данные оксидантных и антиоксидантных систем, эндогенной интоксикации, световой и электронной микроскопии. Образцы крови и легочной ткани забирали на 1, 12, 24 и 48 ч после индукции ОРП.
Установлено, что ОРП на фоне прогрессируящей эндогенной интоксикации сопровождаетсе потенцированием процессов липидной и белковой пероксидации и угнетением антиоксидантной защиты до 24 ч с последуящим истощением после первых суток эксперимента. Наиболее информативным маркером развитие острого легочного повреждение евлеетсе коэффициент легочной регулеции по лейкоцитами. Последний характеризуете ростом с начала эксперимента, указывает на повышеннуя лейкоцитарнуя секвестрация в легких, которае подтверждена морфологическими исследованиеми, даже на фоне лейкопении и сопровождалась легочным повреждением.
Ключевые слова: острое повреждение легких, перитонит, эндогеннае интоксикацие, нейтрофилы.
УДК 612.017.1:616.33-002.44: 616.831.45: 616-008.63
В.В. ГНАТЮК, Н.Н. КОНОНЕНКО
Национальный фармацевтический университет, кафедра патологической физиологии, г. Харьков, Украина.
ОСОБЕННОСТИ СИНТЕЗА ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК У КРЫС С ГАСТРАЛЬНЫМИ ЯЗВАМИ ПРИ СВЕТОВОМ ДЕСИНХРОНОЗЕ
В работе представлены результаты экспериментального изучения особенностей синтеза иммунокомпетентных клеток у крыс при сочетанному воздействии на организм круглосуточного освещения и язвенного повреждения слизистой оболочки желудка. В ходе эксперимента были изучены показатели клеточного иммунитета, активность дегидрогеназ в лимфоцитах крови крыс. Установлено, что воздействие круглосуточного освещения приводит к развитию светового десинхроноза со снижением уровня мелатонина в крови и изменениям в синтезе иммунокомпетентных клеток, которые характеризуются повышением количества синтеза субпопуляций Т-лимфоцитов с активацией В-звена иммунитета. При воздействии комплекса факторов (десинхроноз и язва) ведущими остаются изменения, связанные с круглосуточным освещением. Ключевые слова: иммунная система, гастральная язва, десинхроноз, мелатонин.
Жизнедеетельность организма можно представить как четко скоординированнуя систему биологических ритмов, начинав от субклеточного и до организменного уровней. Даннае система постоенно корректируетсе изменениеми, происходещими как в организме, так и во внешней среде. Именно способность адекватно отвечать на различные эндогенные и экзогенные воздействие путем перестройки биоритмов характеризует стабильность организма человека и его здоровье. Многочисленным исследованием установлено, что мелатонин - гормон эпифиза, евлеетсе универсальным синхронизатором эндогенных биологических ритмов и их адаптогеном. Следовательно, нарушение, как количественной продукции мелатонина, так и ее ритма, на фоне нарушенного режима освещение, может стать пусковым механизмом, приводещим к возникновения десинхроноза, за которым следует возникновение различных органических патологий, в частности езвенной болезни *3+.
Иммуннае система также относитсе к одним из важнейших адаптационных механизмов. Экзогенные и эндогенные факторы всегда вызываят изменение в клеточных или гуморальных звеньех иммунитета. В то же време иммуннае система подчинеетсе принципу ритмичности протекание биологических процессов. Мелатонин способен оказывать двойственное влиение на функция иммунной системы, угнетае или стимулируе ее. Присутствие рецепторов к мелатонину определено на мембранах человеческих лимфоцитов, нейтрофилов, а также лейкоцитах, нейтрофилах и иммунокомпетентных клетках тимуса и селезенки различных лабораторных животных, в частности Т-лимфоцитах (хелперах) костного мозга крыс *4+. На основании вышесказанного, можно предположить, что нарушение нормальных биоритмов организма - десинхроноз, может оказывать влиение на чувствительность и резистентность иммунной системы, приводить к изменения как количественных, так и качественных характеристик иммунокомпетентных клеток.
Поэтому целью нашего исследование стало изучение особенностей синтеза иммунокомпетентных клеток у крыс при сочетанном влиении на организм экзогенного фактора - круглосуточного освещение и эндогенного -езвенного повреждение слизистой оболочки желудка.
Материалы и методы. Исследование проведены на 40
половозрелых крысах-самцах массой 200,0 - 220,0 г,
распределенных на 4 группы (по 10 в каждой): I -
интактный контроль - крысы, которые находились в
условиех естественного светового режима (8.00-20.00 -
свет, 20.00-8.00 - темнота), II - животные с езвенным
повреждением желудка, III - десинхроноз - крысы,
которые в течение 14 дней находились в условиех
круглосуточного освещение *1+, IV - десинхроноз+езва -
животные, пребываящие в условиех круглосуточного
освещение (14 дней) и которым, начинае со 2-го дне
эксперимента, моделировали гастральнуя езву.
Моделирование езвы проводили путем ежедневного
перорального введение в течение 12 дней смеси из 10%
раствора консервированной медицинской желчи (1 мл
на 100 г массы), индометацина (3 мг/кг) и
ацетилсалициловой кислоты (100 мг/кг) *9+.
Оценка состоение иммунной системы основывалась на
определении содержание Т- и В-лимфоцитов и их
субпопулеций в крови животных по общепринетой
методике в иммуноферментном анализе (ИФА) с
использованием диагностических наборов на основе
моноклональных антител против антигенов: CD3 (Т-
лимфоцитов), CD4 (Т-хелперов), CD8 (Т-супрессоров), CD19,
CD22, CD72 (В-лимфоцитов) («МедБиоСпектр», Россие) *7+.
Активность дегидрогеназ в лимфоцитах крови определели
методом Р.П. Нарциссова с использованием пара-
нитротетразолий-фиолетового и количественно выражали
средним числом гранул формазина в одной клетке *6+.
Статистическуя обработку результатов проводили,
применее t-критерий Стьядента *5+. Дле определение
статистических различий использовали стандартный
пакет программ «Statistica 6».
Результаты исследований и их обсуждение. В ходе
проведенных экспериментов были установлены
достоверные иммунологические и биохимические
сдвиги как у животных с десинхронозом, так и у крыс с
езвенным поражением желудка. При этом сочетанное
воздействие экзогенного (круглосуточное освещение) и
эндогенного (езвенное повреждение слизистой
оболочки желудка (СОЖ)) факторов, приводило к
значительным изменением состоении
в
иммунокомпетентных клеток.
Согласно полученным результатам у животных II (езва ) и III (десинхроноз) групп было обнаружено достоверное
снижение количества лейкоцитов периферической крови (5,67±0,24-10' г/л и 6,56±0,6940 в сравнении с контролем 8,45±0,67-10 9 г/л, р<0,05) с достоверным снижением на 50-60% количества Т-лимфоцитов у
Таблица 1 - Показатели клеточного и гуморального иммунитета у
животных II (езва) и Ill (десинхроноз). При этом реакцие субпопулеций лимфоцитов - Т-хелперов и Т-супрессоров - на действие круглосуточного освещение и езвенное повреждение СОЖ была различной (таблица 1).
с езвой на фоне десинхроноза (X±Sx> n=10)
Экспериментальные группы Т-лимфоциты, •10 9/л Т-хелперы, •109/л Т-супрессоры, •10 9/л СD4/СD8 В-лимфоциты, •10 9г/л
I - интактный контроль 3,26±0,8 2,81±0,6 0,41±0,04 6,9±0,7 0,68±0,04
II - езва 1,42±0,2* 1,38±0,07* 0,56±0,05* 2,7±0,5* 0,56±0,03*
III - десинхроноз 1,30±0,2* 4,62±0,5* 0,22±0,07* 20,8±2,2* 0,82±0,04*
IV - десинхроноз + езва 1,32±0,3 4,4±0,03 */** 0,26±0,05 */** 16,7±1,8 */** 0,80±0,03 */**
|римечание: *- p<0,05 по отношения к контроля; '"- p<0,05 по отношения к езве.
В группе с езвой желудка определелись снижение в 2 раза количества Т-хелперов и в 1,2 раза В-лимфоцитов, при этом количество Т-супрессоров возрастало на 36%. Изменение в количестве Т-хелперов и Т-супрессоров приводили к снижения иммунорегулеторного индекса (СD4/СD8) в 2,5 раза, что подтверждает наличие реакции иммунной системы на развитие в организме деструктивного процесса (езва) и характеризует начало борьбы с ним.
Показатели синтеза иммунокомпетеных клеток при десинхронозе отличались от таковых при езве желудка и имели противоположнуя направленность: количество Т-хелперов повышалось в 1,6 раза, В-лимфоцитов - в 1,2 раза, иммунорегулеторный индекс - в 3 раза по отношения к контроля, количество Т-супрессоров снижалось на 47%. Повышение числа СD4 при десинхронозе позволеет предположить, что при этом возникает ТЬ|-2 тип иммунного ответа, который характеризуете стимулецией В-клеток и развитием гуморального вида иммунного ответа *8+. Полученные под влиением круглосуточного освещение изменение иммунологических показателей
подтверждаят наличие биоритмологической
зависимости синтеза дифференцировки
иммунокомпетентных клеток, а значит и зависимость от снижение уровне мелатонина в крови, которое, согласно
данным литературы *3+, характерно дле светового десинхроноза.
При сочетанном влиении на организм экспериментальных животных десинхроноза и езвы (IV гр.) количество Т-хелперов в 1,6 раза превышало показатели контрольных животных и в 3 раза показатели крыс с езвой, при этом отличие с группой с десинхронозом были недостоверны. Такае же тенденцие сохранелась и по другим показателем. Полученные результаты позволеят сделать вывод о ведущей роли нарушений биоритмов и секреции мелатонина в развитии иммунного ответа.
Следуящей частья нашего эксперимента было определение активности сукцинатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы в лимфоцитах крови крыс, как показателей аэробного окисление ацетил-КоА в цикле Кребса и клячевого фермента пентозофосфатного пути окисление глякозы (СДГ) и интенсивности анаэробного гликолиза (ЛДГ) *2+.
Определено, что раздельное и сочетанное воздействие круглосуточного освещение езвы оказало
существенное влиение на содержание СДГ в лимфоцитах крови крыс (рис. 1). При этом наблядалось снижение активности ЛДГ при световом десинхронозе и сочетанном десинхронозе с езвой, с недостоверным повышением уровне ЛДГ у животных с езвой (рис.2).
контроль язва десинхроноз десинхроноз+язва
Рисунок 1 - Значение активности сукцинатдегидрогеназы в лимфоцитах крови крыс при сочетанном
воздействии факторов
