CC BY
20
L.N. MASLOV, S.YU. TSYBULNIKOV
Federal State Budgetary Institution «Research Institute for Cardiology» of Siberian Branch under the Russian Academy of Medical Sciences, Tomsk, Russia
USING CANNABINOID RECEPTOR AGONISTS FOR PROPHYLAXIS AND THERAPY OF ISCHEMIC
REPERFUSION INJURY OF HEART
Resume: It was established that cannabinoid HU-210 can be used for prophylaxis and therapy of ischemic reperfusion injury of heart. Endogenous cannabinoids are not involved in the regulation of cardiac tolerance to impact of ischemia and reperfusion in nanve rats. Intracellular signaling mechanism of cardioprotective effect of HU-210 is mediated via Katp channel opening and protein kinase C activation.
УДК 615.243:616.33-002.44:615.451.16:665.335.82:577.352.24
А.А. МИНАЕВА, Н.Н. КОНОНЕНКО
Национальный фармацевтический университет, кафедра патологической физиологии, г. Харьков, Украина
ВЛИЯНИЕ НАНОЭМУЛЬСИИ ЛИПОСОМ С ПОЛИФЕНОЛАМИ ВИНОГРАДНЫХ СЕМЯН НА СОСТОЯНИЕ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ
ГАСТРАЛЬНОЙ ЯЗВЕ
При гастральной язве изменялись структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов, что выражалось в повышении их агрегационной активности, снижении пероксидной резистентности и способности к деформации. Механизм указанных нарушений заключается в активизации процессов перекисного окисления липидов в мембранах эритроцитов, сопровождавшегося повышением содержания лизофосфатидилхолина и снижением фосфатидилхолина и сфингомиелина в эритроцитарных мембранах. Приём наноэмульсии липосом с полифенолами виноградных семян при гастральной язве приводил к нормализации фосфолипидного состава мембран эритроцитов, в частности, к повышению уровня сфингомиелина- самого трудноокисляемого фосфолипида, что способствовало стабилизации мембран и увеличению перекисной резистентности эритроцитов.
Ключевые слова: липосомы, экспериментальная гастральная язва, эритроциты, перекисное окисление липидов, фосфолипиды.
Резистентность слизистой оболочки желудка (СОЖ) в значительной мере зависит от регионарного кровотока, умеренное снижение которого сопровождаете определенными нарушениеми защитного барьера. О важной роли кровоснабжение в поддержании целостности СОЖ свидетельствует тот факт, что ее езвенное поражение возникает преимущественно в тех зонах желудка, где уровень кровотока невелик *1+. Нареду с нарушением функции желудка в патогенезе езвенной болезни играят роль нарушение микроциркулеции, гипоксие СОЖ и последуящае активацие катаболических процессов, проевлеящаесе прежде всего нарушением энергообразуящих белково-синтетических процессов и усилением пероксидации фосфолипидных, клеточных и сосудистых мембран, что в конечном итоге приводит к нарушения резистентности слизистой оболочки гастродуоденальной зоны *3+. Чрезмернае активацие процессов перекисного окисление липидов (ПОЛ) в клетках покровно-емочного эпителие, угнетаящае резистентность слизистой оболочки гастродуоденальной зоны, евлеетсе важным моментом в патогенезе езвенной болезни. В то же време, нарушение функционального состоение эритроцитов играет важнуя роль в изменении реологических и коагулеционных свойств крови при многих заболеваниех *4+. Однако данных литературы,
касаящихсе структурно-функционального состоение и фосфолипидного состава мембран эритроцитов при езвенной болезни желудка, в современной литературе мы не встретили.
В Национальном фармацевтическом университете на кафедре биологической химии создан новый нанопрепарат виде липосомальной формы,
содержащей полифенолы виноградных семен. В настоещее време липосомы евлеятсе одним из наиболее активно используемых средств в клинике дле доставки экзогенных веществ к пораженным клеткам больного. Основным преимуществом липосом перед другими средствами доставки евлеетсе их сходство с природными мембранами клеток по химическому составу, поскольку главным компонентом мембран живых клеток евлеятсе фосфолипиды. Липосомы позитивно изменеят фармакодинамические фармакокинетические параметры лекарств, что делает и их более биодоступными, а, следовательно, более активными, чем традиционные формы *7+. Поэтому целью нашей работы стало изучение влиение наноэмульсии липосом с полифенолами виноградных семен (НЛПВС) на показатели, которые определеят физические параметры движение крови в капиллерах при экспериментальной езве желудка.
Материал и методы исследования. Эксперименты проведены на 40 белых нелинейных крысах разного пола массой 180-220 г, распределенных в 4 группы (по 10 крыс в каждой): I- интактный контроль; II- контрольнае патологие (крысы с экспериментальным езвенным поражением желудка без лечение); III- крысы с гастральной езвой, которым 1 раз в сутки в течение 14 дней с 1-го дне эксперимента вводили НЛПВС внутрижелудочно в дозе 90 мг/кг из расчета концентрации полифенолов; IV- крысы с езвенными поражениеми желудка, которым внутрижелудочно вводили препарат сравнение- альтан- в дозе 1,0 мг/кг 1 раз в сутки в течение 14 дней. азву желудка вызывали путем ежедневного перорального введение в течение 12 дней смеси из 10% раствора консервированной медицинской желчи (1 мл на 100 г массы), индометацина (3 мг/кг) и ацетилсалициловой кислоты (100 мг/кг) *8+. Эвтаназия во всех сериех эксперимента проводили на 15-ый день. НЛПВС получали в лабораторных условиех по методике, опубликованной ранее *2+. Дле изучение фосфолипидного состава мембран эритроцитов сначала отделели липиднуя фракция методом Фолча *9+. Дле разделение ФЛ на отдельные фракции использовали метод тонкослойной хроматографии на силикагеле. ФЛ разделели в тонком слое силикагеле r использованием системы
растворителей хлороформ/метанол/леденае уксуснае кислота/вода (60:50:1:4). Эту систему использовали дле разделение фосфатидилэтаноламина (ФЭА),
фосфатидилсерина (ФС), фосфатидилхолина (ФХ) и сфингомиелина (СФМ). Оценку структурно-функционального состоение мембран эритроцитов проводили путем определение пероксидной резистентности эритроцитов (ПРЭ) по методу F. Lager, деформируемость эритроцитов - по
модифицированному методу C.Tannert и W.Lux, относительнуя везкость эритроцитов- по методу А.Ф. Пироговой в модификации М.А. Котовщиковой и З.Д. Федоровой *6+.
Статистическуя обработку результатов проводили, применее t-критерий Стьядента *5+. Дле определение статистических различий использовали стандартный пакет программ "Statistica 6".
Результаты исследования и их обсуждение. Результаты опытов показали, что у крыс с езвами активацие процессов ПОЛ в эритроцитах сопровождалась изменением гемореологических показателей: снижением способности эритроцитов деформироватьсе в 1,5 раза, увеличением относительной везкости эритроцитарной суспензии в 1,8 раза по сравнения с интактной группой (таблица).
Таблица - Структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов при экспериментальной езве желудка (Х±Sx> п=10)
по отношения к альтану
й группе; **- p<0,05 по отношения к контрольной
патологии; ***- p<0,
Уменьшение деформируемости эритроцитов
обусловлено тем, что эритроциты становились более ригидными и могли вызвать окклязия капиллерного русла, таким образом, повышае везкость крови, что приводило к изменением в системе микроциркулеции в целом. По данным литературы, увеличение везкости крови приводит к ухудшения кровоснабжение, вызывает нарушение обменных процессов, перфузии газов в тканех, развитие трофических расстройств в лябом органе *4+, и СОЖ не евлеетсе исклячением. В группе животных, леченных НЛПВС, деформируемость эритроцитов практически приравнивалась к интактным
животным, в то време как в группе, получавшей альтан, способность эритроцитов деформироватьсе была в 1,3 раза ниже интактного контроле. Относительнае везкость эритроцитарной суспензии у крыс, леченных НЛПВС и альтаном, по сравнения с контрольной патологией уменьшилась в 1,4 и 1,25 раза соответственно, что способствовало улучшения кровоснабжение соответственно, ускорения процессов регенерации. В и, возникновении гемореологических расстройств важнуя роль играят также изменение агрегационной способности эритроцитов. В норме агрегация эритроцитов предупреждает сила их электростатического
отталкиваниё. Агрегаты формируятсё за счет образованиё мостиков из фибриногена, грубодисперсных белков, высокомолекулёрных
декстранов *6+. У животных с ёзвой желудка обнаружено повышение агрегации эритроцитов в 2 раза относительно интактного контролё. Повышение агрегационной способности эритроцитов приводило к увеличения вёзкости крови, микроциркулёторному блоку и гипоксии тканей. Агрегациё эритроцитов в группе животных, получавших НЛПВС, уменьшалась в 1,5 раза, что посредством снижениё вёзкости крови способствовало обогащения тканей кислородом, препётствуё ПОЛ.
При изучении фосфолипидного состава мембран эритроцитов при ёзве желудка установлено, что содержание ФХ снижалось на 48% относительно интактных животных. Нарёду с этим, повышалсё уровень содержаниё лизофосфатидилхолина (ЛФХ) на 50%, очевидно, в результате активации фосфолипазы А2, котораё катализирует процесс деацилированиё ФХ. Это сопровождалось выходом значительного количества ЛФХ и неэтерифицированный жирных кислот полиенового рёда (арахидоновой и др.-предшественников в синтезе простагландинов), интенсивно вступаящих в реакции
свободнорадикального окислениё. С другой стороны, при ёзве желудка нарушалось ацилирование ЛФХ в ФХ, что приводило к повышения содержаниё ЛФХ и снижения ФХ в мембранах эритроцитов; и происходило нарушение динамического равновесиё между процессами деацилированиё и реацилированиё, повреждаящее мембраны клеток. Истощение ФХ в мембранах эритроцитов приводит к нарушения взаимодействиё между ФХ и антиоксидантами, следствием чего ёвлёетсё активациё ПОЛ. В группе животных, леченных НЛПВС, уровень ФХ повышалсё в 2 раза (на 47%) в сравнении с контрольной патологией и отличалсё от такового в группе интактных животных лишь на 2%. Уровень ФХ животных, получавших альтан, был на 8% ниже интактной группы. Одновременно у контрольных животных снижалсё уровень ФЭА в эритроцитарных мембранах на 26%, что свёзано с активизацией реакций ПОЛ, при гастральной ёзве пероксидации более всего подлежат ФХ и ФЭА. В группе животных, получавших НЛПВС, уровень ФЭА превышал уровень ФЭА группы контрольной патологии на 16%, приравниваёсь к интактной, в то времё как альтан- на 12%. Уровень ФС в группе контрольной патологии превышал интактный контроль в 2 раза, свидетельствуё об усилении процессов мембранодеструкции. В группе животных, леченных НЛПВС, содержание ФС в мембранах эритроцитов снижалось на 40%, что свидетельствует об их стабилизации и предотвращения липопероксидации. в то времё как в группе крыс, получавших альтан, уровень ФС снизилсё на 22%.
Нами отмечено уменьшение уровнё одного из трудноокислёемых ФЛ, который играет существеннуя роль в структуре липидного биослоё клеточных биомембран- СФМ- на 13% относительно интактного контролё. СФМ характеризуетсё наименьшей
ненасыщенностья жирных кислот, входещих в его состав, по сравнения с ФХ и еще больше с ФЭА и ФС и, следовательно, имеет наибольшуя устойчивость к ПОЛ. В свези с этим, снижение его уровне свидетельствовало о глубокой дестабилизации мембран эритроцитов и срыве защитно-приспособительных реакций. это
подтверждалось снижением ПРЭ в группе контрольной патологии в 3,5 раза по сравнения с контролем. Введение НЛПВС крысам с гастральными езвами способствовало повышения ПРЭ в 3 раза по сравнения с контрольной патологией, что способствовало стабилизации мембран эритроцитов, а уровень СФМ в этой группе на 16% выше, чем в группе контрольной патологии. При этом активность НЛПВС в отношении данных показателей превышала действие препарата сравнение. Так, альтан повышал ПРЭ в 2,3 раза, а уровень СФМ- на 12% относительно животных с гастральной езвой.
Таким образом, при гастральной езве изменелись структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов, что выражалось в повышении их агрегационной активности, снижении пероксидной резистентности и способности к деформации. Механизм указанных нарушений заклячаетсе в активизации процессов ПОЛ в мембранах эритроцитов, сопровождавшегосе повышением содержание ЛФХ и снижением ФХ и СФМ в эритроцитарных мембранах. Наличие выраженной взаимосвези между нарушениеми функций эритроцитов, обеспечиваящих реологические свойства крови, и активностья ПОЛ позволеет рассматривать перекисьгенерируящие процессы при езве желудка как один из механизмов развитие гемореологических нарушений и нарушений микроциркулеции в слизистой оболочке гастродуоденальной зоне. Введение при экспериментальной гастральной езве НЛПВС привело к снижения везкости крови за счет повышение ригидности эритроцитов, что приводило к ускорения процессов регенерации вследствие улучшение кровоснабжение; снижение агрегационной способности эритроцитов способствовало обогащения тканей кислородом, препетствуе процессам ПОЛ. Фосфолипидный состав мембран эритроцитов после применение НЛПВС практически приравнивалсе к интактной группе: нормализацие содержание ФХ и ЛФХ приводила к восстановления динамического равновесие между процессами деацилирование и реацилирование, препетствуе активации ПОЛ; об этом же свидетельствует повышение уровне ФЭА, наиболее подвергаящегосе пероксидации, и СФМ, самого трудноокислеемого ФЛ. Уровень ФС значительно повышалсе, способствуе стабилизации мембран. При этом ПРЭ возросла в 3 раза в сравнении с контрольной патологией. Исходе из полученных результатов, можно судить о высокой антиоксидантной активности НЛПВС, предотвращаящей процессы липопероксидации мембран эритроцитов, а также способствуящей улучшения микроциркулеции и регенерации пораженных клеток при
экспериментальной гастральной езве. Также НЛПВС превосходит препарат сравнение- альтан.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Авраменко А. А. азвеннаё болезнь (очерки клинической патофизиологии) / А. А. Авраменко, А. И. Гоженко, В. С. Гойдык. - Одесса: ООО «РА «АРТ-В», 2008. - 304 с.
2 Загайко А. Л. Бiодоступнiсть i антиоксидантна активнiсть полiфенолiв з нааннё винограду у вiльному виглèдi та у складi фiтосом / А. Л. Загайко, В. П. Филимоненко, О. А. Крастьнтова та ш. // Мед. xiMiè. - 2011. - Т. 13, №3(48). - С. 109-112.
3 Ивашкин В. Т. Лечение èзвенной болезни: новый век - новые достижениè - новые вопросы / В. Т. Ивашкин, Т. Н. Лапина // Болезни органов пищеварениè. - 2002. - Т.4, № 1. - С. 20-24.
4 Калинин А. В. азвеннаè болезнь: от патогенеза к лечения / А. В. Калинин // Фарматека. - 2002. - № 9 (60). - С. 64-73.
5 Методи кл^чних та експериментальних дослщжень в медицин / *Л. В. Беркало, О.В. Бобович, Н.О. Боброва та ш.+; за ред. 1.П. Кайдашева. - Полтава, 2003. - 320 с.
6 Момот А. П. Принципы, методы и средства лабораторной диагностики патологии гемостаза на современном этапе / А. П. Момот // Лаб. диагностика. - 2004. - №2. - С. 52-70.
7 Сейфулла Р. Д. Фармакологиè липосомальных препаратов (в эксперименте и клинике) / Р. Д. Сейфулла. - Москва: Глобус Континенталь, 2010. - 241 с.
8 аковлюва Л. В. Експериментальне вивченнè нових противиразкових препара^в / Л. В. аковлюва, Г. В. Оболенцева, Л. П. Брязпнова // Докл^чы дослiдженнè лтарських засобiв: метод. рек.; за ред. чл.-кор. АМН УкраУни О. В. Стефанова. - К.: Авщена, 2001. - С. 321- 333.
9 Folch J. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues / J. Folch, V. Less, G. H. Slean Stanley // J. Biol. Chem. - 1957. - Vol. 226, № 2. - P. 494-509.
A. MINAIEVA, N. KONONENKO
AN INFLUENCE OF THE NANOEMULSION OF LIPOSOMES WITH GRAPE SEED POLYPHENOLS ON THE STRUCTURAL AND FUNCTIONAL PROPERTIES OF ERYTHROCYTE MEMBRANES IN EXPERIMENTAL GASTRIC ULCER
Resume: In the experimental gastric ulcer the structural and functional properties of the membranes of red blood cells have changed. It was expressed by increase of aggregation activity and reducing of the ability to peroxide resistance and to deformation. The mechanism of these disorders is an activation of lipid peroxidation in erythrocyte membranes that is associated with increase of lysophosphatidylcholine and decrease of phosphatidylcholine and sphingomyelin in erythrocyte membranes. Taking the nanoemulsion of liposomes with polyphenols of grape seeds in gastric ulcer caused normalization of phospholipid composition of erythrocyte membranes, in particular the increased level of sphingomyelin, the most difficult oxidizable phospholipid, which contributed to the stabilization of membranes and increase the peroxide resistance of erythrocytes. Keywords: liposomes, experimental gastric ulcer, erythrocytes, lipid peroxidation, phospholipids.
UDC 616.831-005.1/.379-008.64-07
Ф.А. МИНДУБАЕВА, С. Б. ЖАУТИКОВА, И. А. КАДЫРОВА
Карагандинский государственный медицинский университет, кафедра физиологии и кафедра
патологической физиологии
ПРИМЕНЕНИЕ МАТЕМАТИЧЕСКОЙ МОДЕЛИ В ПРОГНОЗИРОВАНИИ ОСТРЫХ НАРУШЕНИЙ
МОЗГОВОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ
Инсульт представляет собой многофакторное заболевание. Одни факторы риска определяют предрасположенность, а другие запускают механизм ее развития. В статье приведен материал по математическому моделированию вероятности возникновения инсульта в зависимости от исследованных параметров. Модель разрабатывалась методом логистической регрессии. Полученные уравнения позволили определять вероятность наступления инсульта. Первая производная от вероятности по каждому из факторов риска позволила определить скорость нарастания вероятности. Это положение является новым.
Ключевые слова: инсульт, факторы риска, уравнение регрессии, вероятность
Актуальность. Острое нарушение мозгового кровообращение евлеетсе не только медицинской, но и социальной проблемой. Высокий процент летальности и инвалидизации при цереброваскулерных заболеваниех привел к понимания того, что инсульт, как и хроническуя ишемия головного мозга легче предупредить, чем лечить, поэтому в настоещее време большое внимание уделеетсе вопросам профилактики*1+. Инсульт представлеет собой многофакторное заболевание. Одни факторы риска определеят предрасположенность, а другие запускаят механизм ее развитие *4+. Комбинации факторов
