CC BY
5
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ
экспрессии микроРНК может быть проведен с помощью стандартных лабораторных методик.
Цель исследования: проанализировать особенности профилирования микроРНК и определить уровни экспрессии специфичных микроРНК в образцах сывороток и нефробиоптатах реципиентов почки, определить возможности использования микроРНК в качестве маркеров сохранности донорского органа, течения посттрансплантационного периода и адекватности проводимой иммуносупрессивной терапии.
Объект исследования: планируется проведение обследования реципиентов почки, прооперированных в ПСПбГМУ им. И.П.Павлова и ГБУ СПб НИИ СП им. И.И.Джанелидзе.
Методы исследования: биоинформационный анализ, ПЦР в реальном времени, ИФА.
Результаты. По результатам обзора научной литературы и баз данных MiRBase, TargetScan, MiRanda
определены наиболее перспективные микроРНК-кан-дидаты: микроРНК-10, микроРНК-15, микроРНК-20, микроРНК-21, микроРНК-142, микроРНК-146, микроРНК-155, микроРНК-223. На основании результатов комплексного исследования выбранных микроРНК-кандидатов планируется создать мультиплексную диагностическую панель специфических микроРНК для мониторинга состояния пациентов трансплантационных центров методом ПЦР в реальном времени.
Выводы. Таким образом, данные о ключевой роли микроРНК в физиологических и патофизиологических процессах, различие уровней экспрессии микроРНК, специфичное для определённых тканей и органов позволяют рассматривать возможность их применения в качестве неинвазивных молекулярно-генетических маркеров течения посттрансплантационного периода.
Реутова Н.В., Малышев М.М.
ОПЫТ РАБОТЫ ГОРОДСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ ИММУНОГЕНЕТИКИ И СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗА 10 ЛЕТ
Санкт-Петербургский Научно-Исследовательский институт скорой помощи имени И.И.Джанелидзе, г. Санкт-Петербург
Городская лаборатория иммуногенетики и серологической диагностики создана около 30 лет назад в соответствии с распоряжением Комитета по здравоохранению Администрации Санкт-Петербурга с целью обеспечения высококвалифицированного иммунологического обследования доноров и реципиентов органных трансплантатов и повышения эффективности трансплантаций. За эти годы поменялся режим и объем работы лаборатории, но цели и задачи остались прежними. Это формирование единого городского «Листа ожидания» (ЛО) потенциальных реципиентов органного трансплантата, обеспечение планового и экстренного подбора иммунологически совместимых пар «донор-реципиент» и посттрансплантационный мониторинг развития иммунологического отторжения трансплантата. Начиная с 2010 года, лаборатория работает в соответствие со стандартами Европейской Федерации Иммуногенетиков.
За последние 10 лет значительно расширился ЛО, так как в него добавились новые центры трансплантации. На сегодняшний день, ЛО составляют около 300 реципиентов, ожидающих трансплантации почки, сердца, печени, легкого и поджелудочной железы. Все пациенты имеют идентификационный номер, чтобы позволяет учитывать их время нахождения в ЛО. Повысилось точность типирования HLA-генов в связи с тем, что лаборатория полностью перешла на молекулярное типирование. Определение дотрансплантаци-онного уровня HLA-сенсибилизации у реципиентов осуществляется как с помощью лимфоцитотоксиче-ского теста, как базового метода, так и более чувствительного иммуноферментного анализа, что с учетом ежегодного трёхкратного обследования образцов лимфоцитов составляет 55 тысяч анализов в год.
Тщательный анализ спектра антител у сенсибилизированных пациентов и его учет при подборе донора позволяет минимизировать риск острого отторжения и дать шанс на успешную трансплантацию больным, которые обладают наибольшим риском развития острого отторжения трансплантата: это реципиенты для повторной трансплантации (составляют 14% ЛО] и пациенты с высоким уровнем сенсибилизации (составляют 20% ЛО]. Из них 15% имеют комплемен-тсвязывающие цитотоксические антитела.
Лаборатория обеспечивает плановый подбор ги-стосовместимых доноров для родственной трансплантации почки. По результатам исследований за 10 лет проведено более 200 подборов пар донор-реципиент и выполнено более 60 родственных трансплантаций. Лаборатория также работает в режиме круглосуточного дежурства, обеспечивая экстренный подбор доноров для неродственной органной трансплантации. Разработан алгоритм подбора кандидатов на трансплантацию в соответствии с критериями отбора доноров и ургентности состояния реципиентов. За последние 10 лет в г. Санкт-Петербург было обследовано около 800 потенциальных доноров органного трансплантата и были проведены трансплантации печени более 400 реципиентам, почки - 370 рец., сердца - 160 рец., легкое - 6 рец. и 1 трансплантация поджелудочной железы. Приблизительно 20% предполагаемых доноров «бракуются» по причине обнаружения маркеров гемотрансмиссивных инфекций (осуществляется автоматизированным методом с помощью прибора ARCHITECT I 2000].
Было проведено 17 повторных трансплантаций почки, из них у 1-го пациента это была третья трансплантация. Улучшился подбор донора, имеющего с
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVII, № 3, 2021
реципиентом минимальное количество расхождений по HLA-антигенам, что значительно снизило риск отторжения трансплантата, а учет специфической направленности предсуществующих HLA-антител реципиента позволил увеличить процент пересадки органов высокосенсибилизированным пациентам. За 10 лет более 30 таких пациентов получили органный трансплантат, из них в 75% случаев уровень сенсибилизации составил более 80%.
Также лаборатория проводит посттрансплантационный мониторинг выработки донор-специфических HLA-антител двумя методами, что позволяет эффективно корректировать иммуносупрессию и увеличивать сроки нормального функционирования транс-
плантата. Примерно в 3% случаев в год у пациентов обнаруживаются HLA-антитела после трансплантации почки и только у 1% - донор-специфические, которые обуславливали гуморальное отторжение трансплантата. За 10 лет не более 10% пациентов вернулись на гемодиализ после трансплантации почки и 18% больных умерло после трансплантации сердца и легкого. В лаборатории также проводится освоение новых инновационных технологий, применяемых в работе, и разработка дополнительных методик для усовершенствования перекрестной пробы на индивидуальную совместимость и выявления гуморального отторжения у пациентов в самые ранние сроки.
Романенко Н.А., Алборов А.А., Розанова О.Е., Юрьев, Е.Ю. Шилова Е.Р., Глазанова Т.В.,
Волошин С.В.
ИССЛЕДОВАНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЦИТОКИНОВ ВОСПАЛЕНИЯ ПРИ АНЕМИИ У БОЛЬНЫХ КОЛОРЕКТАЛЬНЫМ РАКОМ С МЕТАСТАЗАМИ В ПЕЧЕНЬ
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург
Введение. Цитокины воспаления играют важную роль в иммунном ответе организма на опухоль и воспаление. Предполагается, что их повышенная экспрессия не только подавляет рост опухоли, но приводит к анемии, как ранее было продемонстрировано на когорте больных злокачественными заболеваниями лимфатической ткани.
Цель исследования. Сравнить содержание про-воспалительных цитокинов у больных колорек-тальным раком (КРР) с метастатическим поражением печени с анемией и у доноров.
Материалы и методы. В исследование включены: 1] группа - пациенты с КРР с метастатическим поражением печени после 4-6 курсов противоопухолевой химиотерапии с анемией (НЬ 87,6±1,3 г/л; п=29) в возрасте 41-79 лет (Ме=61 год]; 2] группа -здоровые лица (НЬ >120 г/л; п=18) в возрасте от 24 до 50 лет (Ме=37 лет] - контрольная группа. В сыворотке крови исследовано содержание фактора некроза опухоли-а (ФНО-а), интерлейкина-1р (ИЛ-1Р], интерлейкина-6 (ИЛ-6). Методом корреляционного анализа предпринята попытка выявить связь между уровнем гемоглобина и содержанием цитокинов.
Результаты. В ходе исследования выявлено, что ФНО-а у исследуемых пациентов (п=29) составлял
2,6±0,4 пг/мл (0,2-7,3 пг/мл], в группе сравнения (п=18) - 2,3±0,5 пг/мл (0,1-8,2 пг/мл], что статистически не различалось (р=0,61]. Аналогично не выявлено существенной разницы содержания и двух других цитокинов: ИЛ-1Р у больных КРР констатирован на уровне 1,9±0,7 пг/мл (0,3-18,2 пг/мл], в группе сравнения - 1,0±0,4 пг/мл (0,1-6,4 пг/мл; р=0,31]; ИЛ-6 у больных - 8,8±2,0 пг/мл (0,4-41,1 пг/ мл], в группе сравнения - 14,5±2,6 пг/мл (0,2-28,8 пг/мл; р>0,09]. Важно отметить, что в последующем всем больным для коррекции анемии назначался эритропоэтин альфа и положительный ответ, в виде повышения гемоглобина на >10 г/л, был получен у 27 из 29 исследуемых пациентов с КРР (93,1%].
Вывод. Таким образом, в результате проведенного исследования мы пришли к заключению, что у больных КРР с метастазами в печень после завершения программной химиотерапии содержание про-воспалительных цитокинов хоть и незначительно выше, чем в контрольной группе, но статистические различия отсутствуют. Однако следует отметить тот факт, что экспрессия цитокинов воспаления была невелика, что могло быть ассоциировано с выраженным эффектом корригирующей терапии эри-тропоэтином.
Сатыбалдиева-Назаретян А.Б., Карабаев Б.Б.
ВНЕШНЯЯ ОЦЕНКА КАЧЕСТВА (ВОК) И ВНУТРЕННИЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА (ВКК)
В СКРИНИНГЕ ДОНОРСКОЙ КРОВИ НА ГТИ
Республиканский центр крови МЗ КР, Бишкек
Контроль качества лабораторных исследований для скрининга гемотрансмиссивных инфекций (ГТИ] предполагает регулярное осуществление
системы мероприятий для выявления и предотвращения недопустимых ошибок, которые могут иметь место в процессе выполнения исследований.
