CC BY
12
УДК 616.28-008. 14-092.4
Науменко О.М., Деева Ю.В., Васильев О.В., Небор 1.Я.
ОПТИМ1ЗАЦ1Я Л1КУВАЛЬНО1 ТАКТИКИ В УМОВАХ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНО1 СЕНСОНЕВРАЛЬНО1 ПРИ ГЛУХУВАТОСТ1 СУДИННОГО ^ЕНЕЗУ
Нацiональний медичний ушверситет iменi О.О.Богомольця, м. КиТв
В робот! досл'джено вплив препарату з групи антиоксидант'т (янтарна кислота) у поеднанн з препаратом групи глюкокортико'Уд'т (дексаметазон) на в'дновлення слуху у тварин в умовах змоде-льовано'У сенсоневральноУ приглухуватост/ (СНП) судинного Генеза. Отриманi результати св'д-чать, що поеднання цих груп препарат'т е ефективним в лкуванн експериментально'У СНП судинного Генезу.
Ключов1 слова: модель гостроТ сенсоневральна приглухуватють, експериментальна сенсоневральна приглухуватють, отоакустична ем1с1я, лкування сенсоневральноТ приглухуватють
Робота е фрагментом науково-дослiдноi' тематики кафедри оториноларингологи' «Розробка нових методiв дiагностики, ль кування та профлактики захворювань вуха та верхнiх дихальних шляхiв», № державноГреестрацп 0198Ш03083.
За даними л^ератури, захворюванють на се-нсоневральну приглухуватють (СНП) реестру-еться в межах вщ 2 до 20 випадмв на 100 000 населення на рк [1,2]. Мехаызми виникнення гостроТ СНП досить рiзноманiтнi. Серед них видн ляють найбтьш поширен фактори, а саме: по-рушення кровооб^у, вiруснi шфекцп, вплив де-яких груп препара^в та автоiмуннi чинники [2,3]. СНП може виникнути в будь-якому вщ^ але час-тiше вражае па^енпв вiд 43 до 53 рош [1,2,3]. lноземнi автори показали, що у па^енпв, хворих на СНП, посмертне пстолопчне дослiдження завитка часто демонструе ознаки хрошчного ше-мiчного ушкодження [5,6,8]. Оскiльки при гострш СНП судинного Генезу втрата слуху здебтьшого вiдбуваеться раптово, ми припустили, що кохле-арна iшемiя е найбiльш iмовiрною причиною виникнення даних порушень [6]. Виходячи з цього, розроблена нами тваринна модель з розвитком кохлеарноТ iшемiТ у монгольських пщанок (Meriones unguiculatus) дозволяе вивчити розви-ток СНП судинного Генезу та можливостi ТТ ефе-ктивного лiкування.
е декiлька теорш, якi пояснюють позитивний механiзм дм антиоксидантiв на вiдновлення структур спiрального органа пiсля виникнення кохлеарноТ шемп [7,8]. Вiдомо, що при шемп видiляються вiльнi радикали, такi як супероксид та оксид азоту (N0), як iндукують деструкцiю клiтинноТ стшки. Декiлька дослiджень показали, що пюля iшемiТ спiрального органа в експериме-нтi в його структурах пщвищуеться вмiст вiльних радикалiв, що посилюе каскад деструктивних реакцш та в подальшому призводить до незво-ротноТ загибелi волоскових клiтин [9,10]. Антиок-сиданти блокують ланцюгову реакцiю видтення вiльних радикалiв з утворенням Тх малоактивних форм. При цьому зменшуеться вплив окислюва-льних процесiв на структури стрального органа i активуеться вщновлення функцiТ волоскових клн тин [8,9,10]. В нашому експериментi у якост ан-тиоксиданта ми обрали янтарну кислоту.
КортикостероТди е найбiльш поширеними препаратами для лiкування гостроТ СНП у свт [2,3]. Численн кл^чы дослiдження показали, що кортикостероТди полтшують слух, впливаючи на
рiзнi фiзiологiчнi процеси, в тому числi iмунну вн дповiдь, реакцiю на стрес, запалення, катабо-лiзм бiлкiв та вуглеводний обмш [2,3].
В нашому експеримент ми дослiдили ефект кортикостероТ^в та препаратiв з групи антиок-сидантiв на зменшення iшемiТ в структурах сш-рального органа шсля моделювання гостроТ СНП судинного Генезу.
Мета дослiдження
Дослiдити ефективнiсть використання глюко-кортикостероТдiв та антиоксидантiв в лкуванш гостроТ СНП судинного Генезу в експериментi.
Матерiали та методи дослщження
У дослiдженнi ми використовували 24 монгольських пiщанок (Meriones unguiculatus) 12 ти-жнiв життя, вагою 70-90г, зi змодельованою по-передньо СНП судинного генезу.
Експериментальне дослщження було проведено згщно 26 статт Закону УкраТни про захист тварин вщ насильства (№3447-^, 21.02.2006) i европейськоТ конвенцiТ про захист хребетних тварин, що використовуються в експеримента-льних дослщженнях ^^Ьоигд, 1986, №12-1).
Результати змiн слуховоТ функцiТ дослщжу-вали за допомогою отоакустичноТ емiсiТ на частот продуктiв спотворення (ПСОАЕ) за допомогою комп'ютерноТ системи «Нейроаудю», з по-дальшою Тх оцiнкою.
Особливютю вказаного типу ПСОАЕ е одно-часна подача двох тональних стимулiв f1 i f2 при Тх стввщношенш: f1<f2 i f2/f1=1,22. Автоматично проводився аналiз отриманоТ вщповд на частотах вiд 1,0 до 10,0 кГц. З врахуванням техшчних можливостей приладу, iнтенсивнiсть парних стимулiв на частотах вiд 1 до 2 кГц становила 66-67 дБ УЗД, а на бтьш високих частотах ко-ливалась в дiапазонi 64-65 дБ УЗД. Дослщження проводилось з кроком 4 вимiрювання на октаву. Даш накопичувались протягом 180 сек. Аналiзу-вались лише таю показники ОАЕ, ампл^уда яких за шкалою була вище за рiвень шуму на данш частой на 5 дБ [1,2,3].
Вам пщанкам була змодельована СНП судинного Генезу шляхом двостороннього л^уван-
Актуальн проблеми сучасно! медицини
ня вертебральноТ артерiT протягом 20 хвилин за допомогою мiкроклiпс. Пiсля пiдтвердження роз-витку гостроТ СНП, шляхом объективно!' аудю-метрiT, пiщанки були розподтеш на 3 групи.
Група А налiчувала 10 тварин, яким було проведено лкування за допомогою штраперито-неального введення розчину дексаметазону (1мг/кг) та фiзiологiчного розчину 0,9% (1мл/кг).
Група В включала 10 тварин, яким вводився штраперитонеально дексаметазон (1мл/кг) та препарат з групи антиоксидан^в - янтарна кислота (1мл/кг).
Пiщанки групи С складали контрольну групу з 4 тварин, яким вводився штраперитонеально фн зюлопчний розчин (2мл/кг).
Результати дослiдження та !х обговорення
Моделювання СНП судинного ^енезу. Твари-нам перед моделюванням була проведена анес-тезiя шляхом штраперитонеально!' ш'екцп 0,1мл розчину Калiпсол (кетамш) та 0,01мл розчину Седазин (ксилазин гщрохлорид) [5,6,7]. Розра-хунок дози препара^в проводився згiдно шстру-кцп, враховуючи середню вагу пiщанки 70-80г. Використовуючи хiрургiчний стереомiкроскоп всiм тщанкам були видiленi та лiгованi вертеб-ральнi артерп на термiн 20 хв. (мал.1) за допомогою мкрокптав (мал.2).
Мал.1. Видлена та лгована вертебральна артерия з обох сторiн за допомогою мкроклпс (Мюю Serrefine).
Мал. 2. МкроклПси (МСго Serrefine) для лгування артерй, розмiром 6x1 мм.
Мал. 3. Результати ОАЕ на частот/ продукта спотворення п1сля проведения експерименту.
Диаграмма продукта искажения (Правое ухо)
Диаграмма продукта искажения (Левое ухо)
4 000 6 000
Частота Р2, Гц
-5 -10 -15 -20
\ \
4 000 6 000
Частота Р2, Гц
Прод/ктискажения-*— Шум
Продукт искажения -
Шум
Р2, Гц Р1гдБ дБ ПИ, дБ Шум, дБ С/ш, дБ ОАЭ
1000 65,6 55,9 -9,48 -9,79 0,3 X
1429 65,0 55,3 -13,65 -10,00 -3,7 X
2000 65,0 55,2 -1,83 -8,97 7Д ^
2857 65,7 55,9 -18,67 -10,00 -8,7 X
4000 66,6 56,4 -17,25 -10,00 "7,2 X
5714 66,8 55,0 -21,78 -10,00 -11,8 X
8000 62,4 52,7 -12,11 -10,00 -2,1 X
га, Гц П, дБ Р2, дБ ПИ, дБ Шум, дБ С/ш, дБ ОАЭ
1000 64,2 54,3 17,53 10,39 7Д у/
1429 64,8 54,4 -7,11 -2,33 -4,8 X
2000 65,2 54,5 -17,92 -2,29 -15,6 X
2857 64,9 55,1 -17,41 -10,00 -7,4 X
4000 64,2 45,6 -20,66 -10,00 -10,7 X
5714 55,9 52,3 -10,35 -9,55 -0,8 X
8000 61,3 57,0 -19,23 -10,00 -9,2 X
Зареестровано вiдсутнють вiдповiдi волоскових кл':тин, що свiдчить про порушення слуху у тварин.
Попршення слуху у тварин та розвиток змо-дельовано' в експеримент СНП пщтверджува-лося за допомогою ПСОАЕ. Як видно з даних (мал.3), у тварин всiх груп зi змодельованою СНП визначались суттeвi змiни спiввiдношення сигнал/шум. Вони полягали у зменшенн стввщ-ношення сигнал/шум на рiзних частотах вiд 1,3+0,15дБ до 4,78+1,1, що свiдчить про вщсут-нiсть вiдгуку волоскових кттин у тварин зi змо-дельованою СНП.
Лкування в експериментi. Введення препара-тв з метою лiкування змодельованоТ сНп про-водилося протягом 10 дыв пiсля пiдтвердження порушення слуху у пщдослщних тварин в експе-риментк Для введення використовувалися од-норазовi стерильнi iнсулiновi шприци (об'ем 1мл). Терашя проводилася без попередньоТ се-даци тварин, препарати вводилися штраперито-неально.
У якостi лкувально''' терапп використовувалися препарати з групи глюкокортикостеро'Тфв (де-ксаметазон), антиоксидантiв (янтарна кислота) та, для контролю, розчин 0,9 % №С1. Кожна доза препаратв вводилася окремо по 1мл в шприц (по 2 уколи кожен день).
В подальшому реестрац1я показниш ПСОАЕ
Диаграмма продукта искажения (Правое ухо)
8 6
ш 4
£ 2
ё п
г:
£ -4 -6 -8
-10
» Продукгискэкения-А— Шум
проводилася в усiх групах тварин на 10 день вщ початку лкувально'Т терапп.
На 10й день у 6 пiщанок з 10 в групи А було зафксовано збтьшення спiввiдношення сигнал/шум на рiзних частотах вiд 3,8+0,2дБ до 4,93+0,8 дБ починаючи з частоти 2кГц (мал.5). У 9 тварин з 10 групи В сшввщношення сигнал/шум на рiзних частотах становило вщ 4,0±1,1дБ до 5,2±0,6 дБ (мал.6). В групi С показ-ники залишилися в межах попередых результа-тiв - 1,3+0,15дБ до 4,78+1,1дБ. Цi дан свiдчать про об'ективне покращення вщпов^д волоскових клiтин внутрiшнього вуха у пщдослщних тварин з групи А, яким вводився препарат дексаметазон та групи В, яким вводився дексаметазон та препарат з групи антиоксидантв (янтарна кислота), у порiвняннi з контролем. При чому показники ПСОАЕ групи В свщчать про значно кращий ефект вщ лкування, у порiвняннi з групою А.
У пщанок з групи С лише у одше''' тварини була зареестрована вщповщь на низьких частотах у правому вуск
2 000 4 000 6 000 8 000
Частота Р2, Гц
• Продуктискажения-А— Шум
2 000 4 ............I
Частота F2 Гц
Р2, Гц П, ДБ Р2, ДБ ПИ, дБ Шум, дБ С/ш, ДБ ОАЭ
1000 64,1 56,7 -7,67 -4,24 -3,4 X
1429 65,0 57,1 1,93 -8,51 10,4
2000 65,4 56,8 га со -9,84 18,8
2657 64,8 57,1 -0,59 -9,75 9,2
4000 63,9 57,0 6,26 -5,72 12,0
5714 63,7 57,1 -0,76 -8,53 7,8 X
8000 62,2 48,1 -5,46 -4,02 "1,4 X
Р2, Гц П, дБ Р2, ДБ ПИ, дБ Шум, дБ С/ш, дБ ОАЭ
1000 64,6 58,3 4,76 7,69 -2,9 X
1429 64,4 58,7 8,11 1,81 6,3
2000 64,8 55,3 12,22 1,20 11,0
2857 62,9 55,8 11,83 1,95 9,9
4000 67,4 59,4 -4,67 -6,11 1,4 X
5714 68,7 55,8 9,91 9,19 0,7 X
8000 61,8 48,7 -8,33 -6,87 -1,5 X
Мал. 5. Результати ПСОАЕ у тварин з групи А на 10 день лкування. Зареестровано вдповд на 1000 - 5000 Гц, що св!дчить про в1дновлення слуху у тварин переважно на низьких частотах.
АктуальН проблеми сучасно! медицины
Мал. 6. Результати ПСОАЕ у тварин з групи В на 10 день лкування. ВШм'чаеться вдповдь як на низьких, так i на високих частотах, що св!дчить про повне в!днов лення слуху
Висновки
Л1кування препаратом з групи антиоксиданпв (янтарна кислота) у поеднанш з препаратом групи глюкокортикоТд1в (дексаметазон) показав кращ1 результати по вщновленню слуху у тварин в експерименп, пор1вняно з введенням ттьки глюкокортикоТд1в та контрольною групою. Це дае нам шдстави вважати, що поеднання цих груп препарат1в е ефективним в л1куванн1 експериме-нтально!' СНП судинного ^енезу.
Перспективи подальших досл1джень
В данш статт1 нами було дослщжено ефекти-вн1сть л1кування гостро!' СНП судинного ^енеза препаратом з групи антиоксиданпв (янтарна кислота) у поеднанш з препаратом групи глюкоко-ртикоТд1в (дексаметазон). Отриман1 результати подтвердили, що розроблена нами модель СНП судинного ^енезу робить можливим вивчення ефективност д1Т р1зних груп препарат1в на л1ку-вання ц1еТ патологи.
Л1тература
1. М1т1н Ю.В. Визначення стану внутр1шньолаб1ринтного тиску при сенсоневральнш приглухуватост1 за даними отоакустично'т' ем1-сп / Ю.В. М1т1н, Ю.В. Деева // Журн. Вушних, носових I горлових хвороб. — 2002. - № 3 - С 54.
10.
Шидловська Т.В. Загальш принципи дiагностики i лiкування хворих з сенсонев-ральною приглухуватiстю / Т.В. Шидловс-кая, Т.А. Шидловська // Журн. вушних, носових i горлових хвороб. — 2005. — №4. — С. 2—17.
Шидловська Т.В. Андрейченко C.B. Експериментальне дослн дження комплексно!' дм шуму i рентгешвського опромiнення на перекiсне окиснення лшщв та активнiсть антиоксидантних фе-рментiв головного мозку у щурiв / Т.В. Шидловська, М.С. Козак, И.О. Постригам, М.О. Демченко, C.B. Андрейченко // Журн. вушних, носових i горлових хвороб. — 2004. — № З. — С. 9—12. Hakuba N. Efflux of glutamate into the perilymph of the cochlea following transient ischemia in the gerbil. / N. Hakuba, K. Gyo, N. Yanagihara, A. Mitani, K. Kataoka // Neurosci Lett. — 1997. — V.230. — P. 69-71.
Koga K. Transient cochlear ischemia causes delayed cell death in the organ of Corti: an experimental study in gerbils. / Koga K, Hakuba N, Watanabe F, Shudou M, Nakagawa T, Gyo K. // J Comp Neurol — 2003. — V.456. — P. 105-111.
Morizane I. Transient cochlear ischemia and its effects on the stria vascularis. / I. Morizane, N. Hakuba, Y. Shimizu, Y. Shinomori, K. Fujita, T. Yoshida [et al.] // Neuroreport — 2005 — V.16. — P.799-802.
Fujita K. Ginsenoside Rb1 protects against damage to the spiral ganglion cells after cochlear ischemia. / K. Fujita, N. Hakuba, R. Hata, I. Morizane, T. Yoshida, M. Shudou [et al.] // Neurosci Lett. — 2007. — V.415. — P. 113-117.
Hata R. Differential vulnerability in the hindbrain neurons and local cerebral blood flow during bilateral vertebral occlusion in gerbils. / R. Hata, M. Matsumoto, T. Hatakeyama, T. Ohtsuki, N. Handa, M. Niinobe // Neuroscience — 1993. — V.56. - P.423-439. Tabuchi K. Glucocorticoids and dehydroepiandrosterone sulfate ameliorate ischemia-induced injury of the cochlea. / K. Tabuchi, K. Oikawa, I. Uemaetomari, S. Tsuji, T. Wada, A. Hara // Hear Res. — 2003. — V.180. - P. 51-56.
Xiao L, Qi A, Chen Y. Cultured embryonic hippocampal neurons deficient in glucocorticoid (GC) receptor: a novel model for studying nongenomic effects of GC in the neural system. / L. Xiao, A. Qi, Y. Chen // Endocrinology. — 2005. — V.146. - P. 4036-4041.
2
3
4
5
6
7
8
9
Реферат
ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕБНОЙ ТАКТИКИ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ СЕНСОНЕВРАЛЬНОЙ ТУГОУХОСТИ СОСУДИСТОГО ГЕНЕЗА
Науменко А.Н., Деева Ю.В., Васильев А.В., Небор И.Я.
Ключевые слова: острая сенсоневральная тугоухость, отоакустическая эмиссия, лечение тугоухости.
В работе исследовались эффективность лечение острой сенсоневральной тугоухости (СНТ) сосудистого генеза с помощью препаратов группы глюкокортикоидов и антиоксидантов в экспериментальных условиях. Песчанкам со смоделированной СНТ после подтверждения нарушений вводились препараты с группы глюкокортикоидов и антиоксидантов. По данным отоакустической эмиссии продуктов искажения, лечение острой СНТ сосудистого генеза в сочетании этих двух групп препаратов является более эффективным по сравнению с введением только глюкокортикоидов и контрольной группой.
Summary
OPTIMIZATION IN THERAPEUTIC APPROCH FOR MANAGING OF EXPERIMENTAL SENSORINEURAL HEARING LOSS OF VASCULAR GENESIS
Naumenko A.N., Deeva Yu.V., Vasiliev AV, Nebore I.Ya.
Key words: acute sensorineural hearing loss, otoacoustic emission, treatment of deafness.
The efficacy of the treatment of acute sensorineural hearing loss (SNHL) of vascular genesis by medications of the group of glucocorticoids and antioxidants under experimental conditions was studied. Mongolian gerbils with simulated SNHL after confirming the disorders were administered glucocorticoids and antioxidants. According to the data of otoacoustic emission of the products of distortion, the treatment of acute SNHL of vascular genesis by the combination of these two groups of drugs is more effective in comparison with the introduction of only glucocorticoidsv in the control group.
УДК [616.24-099:547.533]-073.175-092.9:612.661. Рыкова Ю.А., Шупер В.А.
ХАРАКТЕРИСТИКА ДИНАМИКИ МАССЫ ЛЁГКИХ КРЫС РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА ПОД ИНГАЛЯЦИОННЫМ ВОЗДЕЙСТВИЕМ НА ДЫХАТЕЛЬНУЮ СИСТЕМУ ТОЛУОЛА
Харьковский национальный медицинский университет
Исследована динамика показателей массы лёгких крыс после длительного ингаляционного воздействия на организм толуола. Экспериментальное исследование проведено на 60 белых беспородных крысах-самцах, возрастом 12 недель и весом 130-150г. Животные были разделены на две группы. Первую составили интактные животные. Во вторую группу вошли животные, которые ежедневно на протяжении двух месяцев в установке для ингаляционного введения веществ получали ингаляции толуола с единоразовой экспозицией 4 часа. Ингаляционное введение толуола моделировали с 8 часов утра до 13.00 (по 5 часов ежедневно) на протяжении 60 дней. Выявлено достоверное снижение массы органов в соответствии с интактными животными. Снижение массы в правом лёгком более выражено, чем в левом. Максимальное снижение приходится на первые сутки, к 60 суткам снижение отмечается менее значительное.
Ключевые слова: легкие, масса, толуола, крысы.
Данная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований Харьковского национального медицинского университета МОЗ Украины (ХНМУ) и является составной частью научно-исследовательской темы кафедры анатомии человека «Морфологические особенности органов и систем тела человека на этапах онтогенеза», № государственной регистрации 0114и004149.
В условиях производства, где широко используются пластические массы, отмечается поступление в организм тоскических веществ, которые проникают через дыхательные пути, желудочно-кишечный тракт, кожные покровы. При изучении условий труда рабочих в учреждениях по производству лака, красок, клея, резины, пластмассы, мебели, тканей и др. было отмечено повышение ПДК паров эпоксидных смол в десятки раз.
Механизм устойчивости организма к неблагоприятным факторам окружающей среды является одним из актуальнейших вопросов биологической науки [1,2]. Среди различных компо-
нентов, загрязняющих окружающую среду, выделяют химические агенты, такие как эпихлор-гидрин, толуол, бензол, ксилол, стирол [3,4].
Наибольший интерес представляет изучение длительного влияния факторов, загрязняющих окружающую среду, на дыхательную систему, поскольку именно легкие участвуют в процессе газообмена, выполняют метаболическую, секреторную, терморегуляторную, барьерную, экскреторную и другие функции, участвуя в поддержании гомеостаза организма [5,6].
Цель исследования
Заключалась в определении динамики массы
