CC BY
32
УДК 619:612,01.17
Фотша Г.А., к.вет.н., доцент © E-mail: [email protected]
Сумсъкий нащональний аграрнийутеерситет, м. Сумы, Украта
ВПЗНАЧЕННЯ ТОКСИЧНОСТ1 ПРЕПАРАТУ "Б1-ДЕЗ" ДЛЯ ДЕ31НФЕКЦ11ПТАХ1ВНИЧИХ OB'CKTIB
Вишукування новых, високоефективних 3aco6ie для дезтфекци, профыактики та лжування в даний час особливо актуалъне на тл1 еколог1чних зм1н навколишнъого середовища. Створення новых 3aco6ie для дезтфекци тваринницъких об'ектгв та транспорту для i'x перевезення е актуальным. У зв'язку з цим метою дослгдженъ булорозробити новый дезтфшуючий препарат та вивчити його токсичтстъ на лабораторных тваринах.
Робота виконуваласъ в умовах лабораторИ "Ветеринарна фармащя" факультету ветеринарног медицины Сумсъкого нацюналъного аграрного утверситету. Було розроблено пропис препарату "Ei-дез" для дезтфекци, котрии як ДР включае ПГМГ-г1дрохлорид i триамт та допом1жш речовини: кокам1допротл бетат i глутамтову кислоту який вгдргзняетъся тим, що дана фармацевтична комбтащя забезпечуе миинии ефект та ушверсалъно широкий спектр бактерицидног та спороцидног dii щодо быъшост1 грампозитивних i грамнегативних бактерт. Визначення токсичност1 препарату проводили на лабораторних тваринах (мишах, щурах, кролях та мурчаках). Доведено, що препарат "Ei-дез" зггдно з показниками класифшаци токсичност1 (ГОСТ 12.1.007-76) належитъ до IV класу небезпеки, тобто до малонебезпечних сполук, а за ДОСТ 12.1.07 - do III класу небезпечност1 речовин i може застосовуватися для дезтфекциоб'ектгв птах1вництва.
Ключов1 слова: дезтфекщя, "Ei-дез", Murni, кpoлi, мурчаки, щури, пташники.
УДК 619:612,01.17
Фотина Г.А., к.вет.н., доцент Сумской национальный аграрныйуниверситет
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТА "БИ-ДЕЗ" ДЛЯ ДЕЗИНФЕКЦИИ ПТИЦЕВОДЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ.
Изыскание новых, высокоэффективных средств для дезинфекции, профилактики и лечения в настоящее время особенно актуально на фоне экологических изменений окружающей среды. Создание нових средств для дезинфекции животноводческих объектов и транспорта для их перевозки является актуальным. В связи с этим целью исследований было разработать
©ФотшаГ.А., 2014
340
новый дезинфицирующий препарат и изучить его токсичность на лабораторних животных. Работа выполнялась в условиях лаборатории "Ветеринарная фармация" факультета ветеринарной медицины Сумского национального аграрного университета. Была разработана пропись препарата "Би-дез" для дезинфекции, который в качестве ДР включает ПГМГ -гидрохлорид и триамин и вспомогательные вещества: кокамидопропилбетаин и глутаминовую кислоту отличающийся тем, что даная фармацевтическая комбинация обеспечивает моющий эффект и универсально широкий спектр бактерицидно и спороцидного действия для большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий. Определение токсичности препарата проводили на лабораторних животных (мышах, крысах, кроликах и морских свинках). Доказано, что препарат "Би-дез" согласно показателей классификации токсичности (ГОСТ 12.1.007-76) относится к IV классу опасности, т.е. к мало опасным соединеним, а по ГОСТ 12.1.07 - к III классу опасности веществ и может применяться для дезинфекции объектов птицеводства.
Ключевые слова: дезинфекция, "Би-дез", мыши, кролики, морские свинки, крысы, птичники.
UDC 619:612,01.17
Fotina G. A. PhD. associate professor Sumy national agrarian university
DEFINITION TOXIC DRUGS"BI-DES" FOR DISIFECTION POULTRY
OBJECTS
Research of new, highly effective disinfectants, prevention and treatments currently particularly relevant for environmental background environmental changes. Creation of new means for disinfection livestock objects and transport for their transportation is the actual. In this regard the purpose of researches was to develop the new disinfectant and study its toxicity on the laboratory animals. Work was performed in the conditions of laboratory of "Veterinary pharmacy" at faculty of veterinary medicine, Sumy national agrarian university. It was developed recipe of "Be-des" for disinfection, which has as active substanceHGMH - hydrochloride and triamine, and excipients: cocamidopropylbetaine and glutamic acid, it is characterized in t the pharmaceutical combination provides cleaning effect and a wide range of universally bactericidal and sporicidal actions for most Gram positive and Gram negative bacteria. Determination of toxicity of a preparation carried out on laboratory animals (mice, rats, rabbits and guinea pigs). It is proved that a preparation "Be-des according to classification indicators of toxicity (GOST 12.1.007-76) belongs to the IV hazard class - few of dangerous compounds and can be used for poultry objects.
Key words: disinfection, "Bi-des", mice, rabbits, guinea pigs, rat, poultry.
341
Актуальнкть теми. Пошук нових, високоефективних засоб1в для дезшфекци, профшактики та л1кування в даний час особливо актуальный на тл1 еколопчних змш навколишнього середовища. Створення нових засоб1в для дезшфекци тваринницьких об'ект1в та транспортних засоб1в для перевезення тварин I продукци тваринництва е актуальним [1, 2, 3]. Анал1з в1тчизняно! л1тератури показуе, що останшм часом в нашш кра!ш актив1зуеться процес створення нових ефективних дезшф1куючих засоб1в та технологш 1х застосування. Вщповщно до м1жнародних правил нов1 високоефективш, еколопчно безпечш ветеринарш засоби I рацюнальш технолог!! дезшфекци повинш вщповщати наведеним нижче вимогам, тобто бути ефективними, безпечними, а яюсть препарат1в вщповщати загальноприйнятим нормам. Препарат повинен мати постшний склад при стабшьност1 вЫх компонента, а його ф1зико-х1м1чш та бююнетичш властивост1 незмшш в умовах застосування. В останш роки до дезшфекцшних препарата пред'являють особлив! вимоги з метою запоб1гання забруднення навколишнього середовища та безпеки для людини I тварин. Важлива й така яюсть, як зручшсть I простота застосування [4, 5]. Кр1м того, ця проблема мае велике значения в умовах застосування бактерюлопчних засоб1в м1жнародного тероризму, оскшьки комплекс проти бактерюлопчного захисту обов'язково повинен включати дезшфекцшш заходи, без чого не може устшно проводитися лжвщащя таких наслщюв [6].
У зв'язку з цим метою наших дослщжень було розробити новий дезшф1куючий препарат та вивчити його токсичшсть на лабораторних тваринах.
Матер1али та методи. Робота виконувалась в умовах лаборатори "Ветеринарна фармащя" факультету ветеринарно! медицини Сумського нацюнального аграрного ушверситету. Ми розробили пропис препарату "Бь дез" для дезшфекци, котрий як ДР мютить ПГМГ-гщрохлорид, триамш та допом1жш речовини: кокамщопропш беташ I глутамшовукислоту, який вщр1зняеться тим, що дана фармацевтична комбшащя забезпечуе мийний ефект та ушверсально широкий спектр бактерицидно! та спороцидно! дп щодо бшьшост1 грампозитивних I грамнегативних бактерш.
Для токсиколопчного дослщження препарату використовували здорових бших щур1в-самщв I бших щур1в-самок масою тща 180-200 г 6-мюячного в1ку. Витримували лабораторних тварин вщповщно дшчим "Саштарним правилам по будов1, обладнанню та утримуванню експериментально-бюлопчних кшшк (в1варив)" на ушфжованш д1етг При цьому !х годували в фксований час. При вивченш гостро! токсичност1 за тваринами спостер1гали щоденно, вщзначали загальний стан, особливост1 поведшки, тонус скелетних м'яз1в, реакцш на тактильш, больов1, звуков! I св1тлов1 подразники, частоту I глибину дихальних рух1в, ритм серцевих скорочень, стан волосяного I шюряного покриву, забарвлення слизових оболонок, розм1р зшищ, положения хвоста, кшькють I консистенцш фекалш, чистоту сечовипускання та забарвлення сеч1, споживання корму I води, визначення маси тща.
342
Результата дослщжень. У процеЫ спостереження за тваринами, дш "Бь дезу" оцшювали за такими функцюнальними показниками: поведшков1 реакци: рухова актившсть (за швидюстю I силою рух1в, здатшстю тварини залишатися у однш поз1), збудливкть (за ступором або насторожешстю тварини, проявом незвичайних р1зких I швидких рух1в голови або тулуба), реактившсть (за реакщею тварини на змшу навколишнього оточення: перемщення на вщкритий стш), агресившсть (за поведшкою м1ж самцями, реакци на дотик при проведенш стандартних маншуляцш); нервово-м'язов1: тремор, судоми, атакс1я, рефлекси, положения т1ла у звичайн1й поз1 I п1сля надання йому незручно!, хвостова реакц1я Штрауба (за ступенем п1дйому хвоста), реакц1я на дотик (за штенсившстю позбавлення тварини вщ легкого погладжування тгла з трьох стор1н), сила хватки (за силою хапального опору тварини на гратах); вегетативш: розм1р з1ниц1 (за площею, зайнятою з1ницею), сал1вац1я (за волопстю I зрошенням слиною ротово! порожнини), температура т1ла, кол1р шк1ри (за штенсивност1 забарвлення п1дошовно! поверхн1 передшх лап, вух), темп дихання (за частотою дихальних рух1в в 1 хв. у стан1 спокою).
Анал1з показник1в таблиць 1 та 2 показуе, що токсичний вплив препарату "Бьдез" кл1н1чно проявлявся майже р1внозначно, як на самцях, так I на самках. Середньосмертельна доза препарату для щур1в-самок склала 1000,0 ± 35,0 мг / кг маси т1ла, самц1в - 1033,0 ± 34,3 мг / кг.
Отже, за класиф1кац1ею токсичност1 К. К. Сидорова препарат при введенш у шлунок можна в1днести до IV класу, а за ДОСТ 12.1.07.76 - до III класу небезпечност1 речовин.
Таблиця 1
Визначення гостро'1 токсичност1 "Б1-дез" на щурах-самках
Показники Доза препарату, мг/кг
800 900 1000 1100 1200
Загальна к^льк^сть тварин, гол. 6 6 6 6 6
Зних:
вижило, гол. 6 4 4 1 0
загинуло, гол. (%) 0 2 (33,3) 2 (33,3) 5 (83,3) 6 (100)
Ъ 1,0 2,0 3,5 5,5
Б 100 100 100 100 100
БЪ 100 200 350 550
Таблиця 2 Вираження гостро1токсичност1 "Б1-дез" на щурах-самцях
Показники Доза препарату, мг/кг
800 900 1000 1100 1200
Загальна к^льк^сть тварин, гол. 6 6 6 6 6
3 них:
вижило, гол. 6 5 4 2 0
загинуло, гол. (%) 0 1 (16,6) 2 (33,3) 4 (66,7) 6 (100)
Ъ 0,5 1,5 3,0 5,0
Б 100 100 100 100 100
БЪ 50 150 300 500
343
Спостереженням за тваринами ми встановили, що через 1-3 години теля перорального введения препарату в субтоксичнш доз1 у лабораторних тварин вщзначали задишку \ пригшчення центрально! нервово! системи. Бшьшкть з них гинула впродовж першо! доби. Подальше спостереження за тваринами, що вижили, свщчили, що 1х рухова реакщя була пригшчена впродовж наступних 24-72 год. (табл. 3).
Кр1м того, в пщдослщних щур1в виявляли виражене зниження рухово! активное^, збудженост1, реактивное^ та агресивност1, розлади руху, знижену реакцш на дотик \ больов1 подразнення, силу хватки, а також зменшення частоти дихання. За патолого-анатом1чного розтину загиблих тварин установили наступне: стшки черевно! порожнини гладенью, блискуч1, дещо зволожеш; поверхня печшки гладенька \ блискуча, злегка гшеремшована; пар1ентальна та вюцеральна плевра також гладенью, блискуч1, випот1в та спайок не виявлено; легенева тканина рожева, гшеремшована, без потовщень, еластична; навколосерцева сумка \ серце без змш. Проте спостер1галось розширення коронарних судин, венозних синуав та переповнення !х кров'ю; шальш судини головного мозку розширеш, що характерно для гшоксичного стану.
Таблиця 3
Вплив субтоксичноУдози препарату "Б1-дез" при оральному введенш на _загальш функщональш показники дослщних щ>|мв_
Показники
Час спостереження, год.
24
72
Реакцп в поведанщ: рухова актившеть збуджешеть реактившеть агресивтсть_
-2 -2 -3 -1
Нервово-м'язова реакцп: тремор
судоми при хода
реакщя на больов1 подразнення
сила хватки
0 -3 -2 -2
0 -3 -1 -1
0 -1 -1
0
Вегетативш реакцп: розм1р зшищ частота дихання стан шерстяного покриву кол1р слизових оболонок шльшеть фекальних мае консистенщя фекальних мае частота сечовидшення кол1р сеч1
частота скорочення серця
без змш спов1льнена скуйовджене синюшш
незначне зб1льшення нашврщка незначно зб1льшена без змш без змш
Примгтки: 0 - ефект ввдеутнш; "-" - гальмування ефекту
Враховуючи, що препарат вводили в шлунок зондом, особливу увагу придщяли на можливкть макроскотчних змш даного органа. В результат!
344
6
вщм1чали мехашчне розтягування стшок шлунку та прилегло! частиии тонкого кишечнику. Товстий кишечник був без органолептичних змш. Вмкт шлунку \ тонкого кишечнику являло собою тнисту мутну рщину. Слизова оболонка цього фрагменту кишечнику мала матовий бархатистий р1зновид, складчастють звичайно виражена. Подальш1 спостереження на протяз1 2-х тижшв за тваринами яю вижили, показали, що у них мали мюце ознаки штоксикацп (скупчешсть, загальне пригшчення, тремор м'яз1в). Проте, за використання препарату в субтоксичнш доз1 таю симптоми отруення лабораторних тварин зникали уже через 48-72 години.
Аплшащя 1 % розчину препарату у крол1в викликала тшьки ледве помяну гшеремш, яка зникала через 24 години. У 0,5% концентрацп препарат викликав незначну гшеремш кон'юнктиви. Аналопчш розчини щкого натру та карболово! кислоти у дослвднш груш крол1в викликали отки. За визначення показника кумуляци на курчатах встановлено, що курчата дослщно! групи загинули на другу добу дослщу. Сумарна доза препарату "Бьдез" склала 1630500 мг / кг маси тварини. Коефщент кумуляци становив 6,8 (показник "смертельний ефект").
Отримаш даш свщчать про те, що препарат слабо кумулюеться в оргашзм1 птищ, крол1в та щур1в. При дослщженш можливо! подразнюючо! чи пошкоджуючо! дп на шк1ру \ розвиток контактного неалерпчного дерматиту встановлено, що одноразова апшкацш препарату "Б1-дез" на неуражеш шк1рш покриви спини бших щур1в в максимально значимш рекомендованш концентрацп робочих розчишв (2 %), не викликала ознак подразнення шк1ри. Нерозведений концентрат препарату викликав подразнення вщ незначного до пом1рного (2-3 бали). Одноразова аплшацш його на 2/3 поверхш шюри хвоста бших щур1в, не призводила до розвитку шюрних реакцш. Щоденне, впродовж 30 д1б, занурення хвост1в щур1в в 5 % розчин препарату "Бьдез" викликав збшьшення об'ему хвоста та збшьшення кшькоси лейкоцит1в у кровг Суттевих змш бюх1м1чних показник1в в сироватщ кров1 не виявлено.
Таким чином, одноразова д1я препарату на непошкоджеш дшянки шюрного покриву не викликала подразнення шюри, але можна констатувати, що тривалий щоденний ешкутанний вплив високо! концентрацп (5%) розчину препарату "Бьдез", який у 2,5 раза перевищуе максимально рекомендовану концентрацш, спричиняв загальну резорбтивну дш. 1нстилящя 50 мкл (1-2 крапл1) препарату в нативному вигляд1 у нижнш кон'юнктивальний звщ ока крол1в, супроводжувався вираженим птозом, сльозотечею, ш'екщею судин. Вказаш ознаки подразнення слизово! оболонки зникали на наступну добу теля введения. 1нстилящя робочих розчишв (1,5-2%) препарату супроводжувалась незначним птозом \ сльозотечею, що зникали впродовж 5-10 хв. Пщ час наступного дослщження цшсносл слизових оболонок за допомогою шпаринково! лампи за попереднього суправ1тального забарвлення 2 % розчином флюоресцешу, оргашчних порушень на них не виявлено. За визначення гшерчутливост1 уповшьненого типу з'ясовано, що розчини препарату "Б1-дез" мали пом1рну сенсибшзуючу актившсть, про що свщчить
345
достов1рне пщвищення показника ТОЛС у тварин пщдослщних груп пор1вняно з контролем.
За шгаляцшного надходження в оргашзм мурчаюв препарат на 15-ту добу викликав розвиток ГСТ (гшерчутливост! сповщьненого типу). Р1вень середньо! специф1чно! агломераци лейкоциив (РСАЛ) кров! тварин пщдослщно! групи в 1,5 раза перевищував такий в контроле але середньогрупова величина РСАЛ в пщдослщнш грут пор1вняно з контрольною достов1рно не в1др1знялась. Визначення шгаляцшно! токсичност! також проводили на мурчаках (п=20). Перед тим як !х розмютити, дв1 кл1тки були продезшфжоваш препаратом "Бь дез" у концентраци 2 %. Вщразу теля цього в кожнш з них були розмщеш по 5 тварин (дослщш групи). Дв1 шш1 кл1тки не були оброблеш препаратом \ розмщеш в шшш к1мнат1 з 5 морськими свинками в кожнш з них (контроль). За тваринами спостер1гали впродовж 14 д1б \ в1дзначали в1дхилення показник1в ф1зюлопчного стану в1д норми. Анал1з отриманих результат1в досл1дження показав, що "Бьдез" у концентрац11 2 % не викликае загибел1 лабораторних тварин за шгаляцшного впливу. Проте на слизов1 оболонки очей \ ротово! порожнини препарат чинив подразнюючу д1ю впродовж 72 годин, теля чого стан здоров'я тварин в1дпов1дав ф1з1олог1чним показникам.
При визначенн1 подразнюючо! на шк1ру 2 % розчину препарату "Бь дез", який наносили на поверхню шк1ри досл1дних тварин (5 морських свинок та 8 крол1в) п1сля И деп1ляц11 з правого боку. На л1вий б1к тулуба наносили ф1з1олог1чний розчин - контроль. Облж реакц11 проводили через 1 \ 16 годин теля нанесения препарату до моменту зникнення реакцп. Вщзначали функцюнально-морфолопчш змши шк1ри, наявшеть еритеми. 1нтенсивн1сть набряку оц1нювали в балах за лшшкою Суворова. При обл1ку реакц11 шк1ри морських свинок на аплжацш 2 % розчину "Бьдез" установили, що через одну годину спостер1галася слабка еритема (рожевий тон шк1ри), при цьому товщина шк1ряно! складки була близько 3 мм, що в балах за лшшкою Суворова р1вняеться одинищ. Через 16 годин дщянки шк1ри були симетричш (досл1д \ контроль), змш зони апл1кац11 не спостер1гали. У процес1 обл1ку результат1в п1сля нанесения препарату на шюру крол1в установили, що препарат "Б1-дез" у концентраци 2 % не чинить на не! подразнюючо! дп.
За визначення подразнюючо! д!! препарату на слизов! оболонки у концентрац!! 2 %, його наносили на слизову оболонку правого ока кролям (4 голови) в к!лькост! 2 крапл! (0,1 см3), у л!ве око закапували стерильний ф!з!олог!чний розчин-контроль. Реакц!ю враховували п!сля нанесения, через годину ! щоденно до зникнення реакц!!. Кщькюну оц!нку зм!н проводили за системою А. Майда. У результат! дослщу встановлено, що п!сля нанесения препарату спостер!гали занепокоен!сть тварин, фиркання. Ф!зюлопчний стан очей був без змш. Через годину сумарна к!льк!сть змш становила 4 бали, через 24 ! 48 годин - 3 бали, а через 72 години патолопчш зм!ни слизово! оболонки очей були вщеутш. Спостереження за дослщними тваринами показали, що п!д час нанесения дезшфектанту шк!ра набувала св!тло-рожевого кольору, але вже за добу дослщш дщянки не вщр!знялися вщ контрольних, що дозволяе
346
констатувати вщсутшсть сенсибшзуючих властивостей препарату "Бьдез" в концентрацп, що на 50% вище вщсотка максимально рекомендованого робочого розчину (2 %) для проведения дезшвазп без присутност! тварин та в 6 раз1в вище вщ рекомендовано! концентрацп (0,5%) застосування в присутност! тварин.
Висновок. У результат! проведених дослщжень, керуючись показниками класиф!кац!! токсичност! згщно з ГОСТ 12.1.007-76, даний препарат належить до IV класу небезпеки, тобто до мало небезпечних сполук, а за ДОСТ 12.1.07 -до Ш класу небезпечност! речовин ! може застосовуватися для дезшфекци об'ект!в птах!вництва.
Перспективи подальших дослщжень. Вивчити в!рул!цидн! властивост! препарату "Бьдез".
Л1тература
1. Касс!ч В. Експериментальне випробування дез!нфектанту бровадез-плюс щодо збудник!в туберкульозу / В. Касач, Т. Фотша, Г. Фотша, В. Дзюба // Ветеринарна медицина Украши. - 2008. - №3. - С. 32-33.
2. Фотша Г.А. Визначення бактерицидних властивостей дез!нф!куючого препарату "Бровадез-плюс" / Г.А. Фот!на, А.В. Березовський // Проблеми зоо!нженер!! та ветеринарно! медицини: 36. наук. праць Харк!всько! ДЗВА. -Харк1в, 2007. - Вип.15 (40), 4.2, Т.1. - С. 91-95.
3. Гармаев, М.Ц. Дезинфицирующие свойства смеси О-метилфосфитов К-алкиламмония/ М.Ц. Гармаев // Ветеринарныйврач. - 2010. - № 2. - С.15-17.
4. Высоцкий А. Э. Методы токсикологической оценки нових дезинфицирующих химиопрепаратов, применяемых в ветеринарии / А.Э. Высоцкий // Науково-техшчний бюлетень 1нституту б!олог!! тварин ! ДНДК1 вет. препарат!в та кормових добавок. - Льв!в, 2007. - Вип. 8. - № 3, 4. -С. 344-352.
5. Волков Г.К., Поташова Л.Г. Проблемыветеринарнойсанитарии и зоогигиены на семейных фермах и личныхподворьях // Ветеринария. - 2007. -№ 4. - С. 3-5.
6. Гармаев, М.Ц.Дезинфицирующаяактивностьпрепарата"Формопав" / М.Ц. Гармаев // Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова. - 2010. - № 4. - С. 5-7.
Рецензент - д.вет.н., професор Гунчак В.М.
347
