CC BY
19
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVII, № 4, 2021
Габдулхакова А.Х., Минаева Н.В., Назарова Е.Л., Шерстнев Ф.С., Трегубова Е.В.,
Рыболовлева Т.Н.
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СВОБОДНОЙ ЦИРКУЛИРУЮЩЕЙ ДНК У ДОНОРОВ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
Введение. Свободная циркулирующая ДНК (сцДНК) представляет собой двухцепочечные низкомолекулярные молекулы геномной ДНК различной протяженности, не связанные с клетками и определяющиеся практически во всех жидкостях организма: плазме, сыворотке, моче, слюне и спинномозговой жидкости. У здоровых людей концентрация сцДНК в крови колеблется от 0 до 100 нг/мл. При некоторых патологических и физиологических состояниях (злокачественные новообразования, воспалительные процессы, травматические повреждения, физическая нагрузка, введение лекарственных препаратов и т. п.) содержание свободных (внеклеточных) нуклеиновых кислот повышается. Одним из таких факторов может быть введение человеческого гранулоцитарного колоние-стимулирующего фактора (Г-КСФ) донорам гемопоэ-тических стволовых клеток (ГСК). Открытие феномена нейтрофильных внеклеточных ловушек (NET) как особой сети, состоящей из сцДНК с интегрированным в нее содержимым гранул нейтрофилов, изменило существующие концепции иммунологии. Согласно литературным данным, Г-КСФ напрямую влияет на способность гранулоцитов высвобождать NET и стимулирует тромбообразование, что может оказывать влияние на систему кроветворения у доноров ГСК, приводить к появлению сцДНК в трансплантационном продукте и влиять на его характеристики.
Цель. Определить уровень общей свободной циркулирующей ДНК у доноров ГСК после стимуляции Г-КСФ.
Материалы и методы. Исследованы образцы пери-
ферической крови 42 доноров ГСК перед началом введения Г-КСФ и в день первого афереза клеток. Возраст обследованных колебался от 15 до 53 лет (медиана -32,5 года). Из них 24 (57%) мужчины и 18 (43%) женщин. Выделение сцДНК проводили из сыворотки периферической крови с помощью комплекта реагентов «SileksMagNA-Direct» (ООО «Силекс», Россия) на магнитных частицах. Концентрацию сцДНК определяли с помощью набора для количественной и качественной оценки геномной ДНК человека «QuantumDNA» (ЗАО Евроген, Россия). Статистическую значимость различий количественных показателей оценивали с помощью критерия Манна-Уитни. Достоверными считали различия при р<0,05.
Результаты. Медиана концентрации сцДНК доноров до введения Г-КСФ составила 2 (диапазон колебаний: от 0 до 12) нг/мл. Медиана содержания сцДНК, выделенной из крови, взятой в день первого афереза определена на уровне 12,5 (пределы концентрации: 2 - 69) нг/мл. Выявлено статистически значимое различие, касающееся увеличения пула сцДНК у доноров ГСК, индуцированного введением Г-КСФ (р<0,001).
Выводы. Показано, что мобилизация ГСК с помощью Г-КСФ сопряжена с ростом концентрации свободной внеклеточной ДНК у практически здоровых людей - доноров клеточного трансплантата. Данное исследование является пилотным и требует дальнейшей оценки определения содержания сцДНК в крови реципиентов Г-КСФ и клеточном трансплантате.
Гарифуллин А.Д. 12, Волошин С.В.1-3-4, Мартынкевич И.С.1, Бессмельцев С.С.1, Бакай М.П.1,
Клеина Е.В.1, Линников С.Ю.1
1Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург 2Санкт-Петербургский государственный университет, г. Санкт-Петербург
3Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И. Мечникова» Министерства Здравоохранения Российской Федерации, г. Санкт-Петербург
4Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова, г. Санкт-Петербург
ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НЕКРИОКОНСЕРВИРОВАННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПРИ АУТОЛОГИЧНОЙ
ТРАНСПЛАНТАЦИИ
Введение. Аутологичная трансплантация костного мозга/гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) является стандартом лечения «молодых» и «сохранных» пациентов с множественной миеломой (ММ). Проведение этого варианта лечения несколько ограничено в ряде регионов вследствие высокого потребления эко-
номических ресурсов и доступности криобанка. Мы провели ретроспективный анализ пациентов с ММ, которым выполнялась аутологичная трансплантация с использованием некриоконсервированных ГСК.
Материалы и методы. Проведено сравнение показателей жизнеспособности ГСК и эффективности
