CC BY
124
• легитимно дать возможность приобретать и использовать в практике судебной и клинической токсикологии автоматизированные системы иммуноанализа, позволяющие безопасно работать с потенциально инфицированным биоматериалом, в комплектацию которых входят калибраторы и контроли положительные (пробы, заведомо содержащие искомые психоактивные вещества, в том числе, относящиеся к контролируемым группам наркотиков), и реактивы для разных биологических матриц (крови, слюны), которые охарактеризованы возможностями перекрестных реакций.
I Исследование метильных производных органических соединений в биологических жидкостях методом ГХ/МС анализа равновесной парогазовой фазы
• Р. Р. Краснова, Е. П. Кириченко, Н. В. Коблова, Н. А. Крупина
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» МЗ МО (нач.— д.м.н., проф. В. А. Клевно) Аннотация: Доклад посвящен вопросу определения содержания этиленгликоля (ЭГ) и его метаболита гликолевой кислоты (ГК) в биологических жидкостях. Изучена статья Ilpo Rasanen et al. «Headspace in-tube extraction gas chromatography-mass spectrometry for the analysis of hydroxylic methyl-derivatized and volatile organic compounds in blood and urine». Метод позволяет обнаружить и количественно определить ЭГ и ГК с высокой чувствительностью в биологических пробах, даже взятых с задержкой.
Ключевые слова: этиленгликоль, метилирование, органические кислоты, дериватизация, диметилсульфат
HS / GC / MS method for the analysis the hydroxylic methyl-derivatized organic compounds in in biological fluids
• R. R. Krasnova, E. P. Kirichenko, N. V. Koblova, N. A. Krupina
Abstract: The report focuses on the headspace gas chromatography-mass spectrometry method for the analysis the hydroxylic methyl-derivatized organic compounds in blood and urine. After derivatization with dimethyl sulfate for ethylene glycol (EG), glycolic acid (GA), other hydroxylic compounds, and another samples underivatized volatile organic compounds on a porous layer, open tubular GC capillary column. The quantification was based on extracted ions. Keywords: ethylene glycol, methylation, organic acids, derivatized, dimethylsulfate.
ВВЕДЕНИЕ
Определение содержания летучих органических веществ в биологических объектах является наиболее распространенным видом анализа в судебной химии и токсикологии. Для этих целей используется газовая хроматография, позволяющая идентифицировать и количественно определять спирты и другие летучие вещества. Проблемы возникают при отравлениях техническими жидкостями, в состав которых входят гликоли. В пробах биологического происхождения помимо гликолей необходимо анализировать и их метаболиты - органические кислоты.
Токсичность самого неметаболизированного ЭГ относительно низка, угроза идет от его метаболитов. ГК вы-
зывает метаболический ацидоз, оказывает нефротокси-ческий эффект, обусловленный образованием оксалата кальция.
Метод позволяет одновременно идентифицировать и количественно определить нелетучие гликоли и их метаболиты (органические кислоты) после переведения их в летучие производные метилированием в виале.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Пробы крови (мочи) анализируются на этиленгликоль (ЭГ), гликолевую кислоту (ГК) и другие гидроксильные соединения после дериватизации в виале диметилсульфа-том (ДМС). Метилирование диметилсульфатом биопрбы в виале имеет предпочтение по сравнению с другими де-риватизирующими агентами, т.к. идет прямая деривати-зация водных проб. Идентификация и количественное определение проводится ГХ/МС методом анализа равновесной парогазовой фазы. Капиллярная колонка (СР-Рога PLOT Q-HP 25 м х 0, 32 мм, толщина пленки 10 мкм) дает возможность разделять, идентифицировать и количественно определять такие трудно хроматографируемые вещества, как гликоли и их эфиры, органические кислоты, фенол и даже - оксимасляную кислоту.
ВЫВОДЫ
Изучен рациональный эффективный метод анализа низко молекулярных мало летучих органических веществ в пробах крови, мочи. В судебно-химическом отделе ГБУЗ МО Бюро СМЭ внедрён этот метод на газовом хроматографе Маэстро с масс-селективным детектором AT 5975. Метод позволяет обнаружить и количественно определить этиленгликоль, гликолевую кислоту и другие гидроксильные органические соединения. Отмечены преимущества данного метода: высокая чувствительность и надежность определения.
I Определение массовой концентрации этанола в крови, моче и внутриглазной жидкости парофазным газохроматографическим методом с пламенно-ионизационным детектором на двух капиллярных колонках
• Н. А. Крупина, Е. П. Кириченко, Р. Р. Краснова
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» МЗ МО (нач.— д.м.н., проф. В. А. Клевно) Аннотация: Изучен и внедрен в практическую работу судебно-химического отдела ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» парофазный газохроматографиче-ский метод анализа крови, мочи, внутриглазной жидкости для одновременного определения этанола, метанола, ацетона, 1-пропанола, 2-пропанола, этилацетата, метилэтилкетона (МЭК) и обнаружения ацетальдегида. Ключевые слова: этанол, анализ, кровь, моча, внутриглазная жидкость
Quantitation of ethanol in the blood, urine, vitreous humor by HS-GC on two capillary columns
• R. R. Krasnova, E. P. Kirichenko, N. A. Krupina Abstract: Headspace gas chromatographic method of analysis of blood, urine, vitreous humor for the simultaneous determination of ethanol, methanol, acetone, 1-propanol, 2-propanol, ethyl acetate, methyl ethyl ketone and detection of acetaldehyde has been studied and put into practice of forensic chemistry
department Bureau of Forensic Medicine of Moscow region.
Keywords: ethanol, analysis, blood, urine, vitreous humour
ВВЕДЕНИЕ
Определение алкоголя в биопробах имеет большое значение в установлении причины смерти и влияния на поведение человека. Преимущественным объектом исследования является кровь. Однако, важное значение имеет исследование других жидкостей биологического происхождения, в том числе мочи и внутриглазной жидкости. Концентрация этанола в различных объектах важна также при установлении стадии резорбции и элиминации. Содержание алкоголя в пробах зависит от многих факторов, в том числе от времени, техники и места взятия проб, времени между смертью, аутопсией и анализом, диффузии, окружающих условий, присутствия микроорганизмов, состояния ферментативной системы, наличия углеводов в диете, условий хранения проб. Несмотря на большое число проводимых анализов по определению алкоголя в объектах биологического происхождения, этот вид анализа, по-прежнему, не является простым и требует внимательного изучения.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
В судебно-медицинской и химико-токсикологической практике за рубежом с целью определения содержания алкоголя (измерение массовой концентрации этанола) в крови и других объектах биологического происхождения используется газохроматографический метод анализа равновесного пара при помощи газового хроматографа с пламенно-ионизационным детектором (ПИД), укомплектованного автоматическим дозатором с применением газоплотного шприца с минимальной пробоподготов-кой. Метод позволяет одновременно идентифицировать и количественно определить не только алкоголь, но и другие летучие вещества без предварительного образования производных.
Метод включает работу двух хроматографов в одинаковых условиях с разными внутренними стандартами (1-пропанол - на одном и 2-бутанол - на другом). Каждый из хроматографов укомплектован двумя пламенно-ионизационными детекторами, двумя капиллярными колонками со специальной фирменной фазой «Agilent Technologies' для исследования алкоголя в крови DB-ALC-1(#125-9134) (30 м х 0,53 мм, толщина пленки 3 цт) и DB-ALC-2 (#125-9234) (30 м х 0,53 мм, толщина пленки 2 цт), соединенными через сплитер Graphpack divider Gerstel в единый инжектор. Автосамплер обеспечивает пропускную способность хроматографической системы со временем анализа тестовых веществ в пределах 5 мин. Результаты достоверны, исследование для обеих линий проводится сразу на двух разных колонках с различной элюирующей способностью, что повышает идентификационный эффект.
ВЫВОДЫ
Методика имеет преимущество по сравнению с алкил-нитритным методом возможностью обнаружения в пробах одновременно с алкоголем других летучих веществ при острых отравлениях, например, при вдыхании газов и легколетучих растворителей токсикоманами, при случайном или преднамеренном отравлении. Некоторые вещества метаболизируются, и их метаболиты можно идентифицировать в крови и моче (например, ацетальдегид).
Таким образом,
• на двух колонках получено полное разделение шести веществ;
• хорошая разрешающая способность позволяет разделять и идентифицировать основные низкомолекулярные летучие вещества. Проверено влияние 32 веществ. Установлено, что ацетон элюируется с ацетонитрилом, а МЭК с этилацетатом на колонке ОБ-АЬС-1, но на колонке ОБ-АЬС-2 все они разделяются; не установлено других веществ, элюирующихся с аналитами на обеих колонках;
• метод имеет преимущества по сравнению с забором парогазовой фазы после переведения в алкилнитриты и ввода в инжектор ручным способом;
• определение алкоголя в пробе одновременно в двух хроматографических системах обеспечивает надежность получаемого результата.
Проверка работы системы комплекса приборов в течение 3 месяцев показала увеличение суточной пропускной способности анализа проб для обнаружения, идентификации и определения содержания алкоголя в крови и других жидких средах организма.
Результаты, полученные с помощью газовых хроматографов, укомплектованных двумя колонками и двумя пламенно-ионизационными детекторами и соответствующей методологией, подтверждают, что эта система может успешно использоваться для анализа алкоголя в биожидкостях.
Преаналитический этап производства судебмо-химической экспертизы (исследования) биологических объектов живых лиц
• Н. А. Крупина, Р.Р. Краснова, В.В. Гайдичук
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» МЗ МО (нач.— д.м.н., проф. В. А. Клевно) Аннотация: Доклад посвящен рекомендациям по отбору биологического материала, его упаковке, хранению, доставке для проведения су-дебно-химических, химико-токсикологических исследований и судебно-химических экспертиз. Ключевые слова: преаналитический этап, судебно-химическая экспертиза, биологические объекты
Preanalytical stage of forensic chemical investigations of specimen of alive persons
• N. A. Krupina, R. R. Krasnova, V. V. Gaidichuk Abstract: The report focuses on the recommendation for specimen selection, sampling, storage of them for hospital toxicology, drugs of abuse testing in biological fluids, alcohol, drugs and driving cases, workplace drug testing.
Keywords: preanalytical stage, forensic laboratories, biological objects
ВВЕДЕНИЕ
Изучена литература и предложены правила забора, упаковки, направления, хранения, доставки из медицинских организаций Московской области биологического материала от живых лиц для проведения в ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» судебно-химических и химико-токсикологических исследований (СХ и ХТИ) и судебно-химиче-ских экспертиз (СХЭ) с целью определения алкоголя, летучих и технических жидкостей, наркотических средств, лекарственных, психотропных и других токсических веществ, карбоксигемоглобина.
