CC BY
37
I Величины пороговой концентрации в судебно-химическом и химико-токсикологическом анализе. Имеют ли они «абсолютное» значение?
• Р. Р. Краснова, Н. А. Крупина
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» МЗ МО (нач.— д.м.н., проф. В. А. Клевно) Аннотация: В докладе приведены сведения об опубликованных в зарУбежной литературе рекомендованных величинах пороговых концентраций токсикантов в судебно-химическом и химико-токсикологическом анализе. Ключевые слова: величины пороговых концентраций, судебная токсикология, алкоголь, наркотические средства и лекарственные вещества, управление транспортным средством
The threshold concentration in forensic chemical and toxicological analysis. Do they have "absolute" value ?
• R. R. Krasnova, N. A. Krupina Abstract: The report presents information from foreign literature about the recommended values of the threshold concentrations of toxicants for forensic toxicology.
Keywords: cut-off values, forensic toxicology, drugs and driving
ВВЕДЕНИЕ
Величины пороговых концентраций при исследовании на наличие наркотических средств и психотропных веществ, предварительными и подтверждающими методами представлены не только для мочи, но и для крови водителей транспортных средств. Показаны допустимые величины концентраций алкоголя в крови и выдыхаемом воздухе в различных странах, отношение концентрации в крови и выдыхаемом воздухе.
Представлены таблицы пороговых концентраций веществ и/или классов веществ, включенных и не включенных в программы по исследованию контролируемых веществ, в моче предварительными и подтверждающими методами для профессионального тестирования в США, Австралии / Новой Зеландии, Великобритании, странах Евросоюза. Дана Европейская концепция величин пороговых концентраций в моче для веществ, вызывающих зависимость для профессионального тестирования.
Первоначально величины пороговых концентрации были установлены NIDA (National Institute on Drug Abuse, США) только для 5 групп веществ, а не для бензодиазепи-нов, антидепрессантов и др. с целью избежать ложнополо-жительных результатов. Цель анализа - профессиональное тестирование и контроль за заключенными, и т.д.). Другие вещества не были рассмотрены для принятия величин пороговых концентраций.
Паскаль Кинц в 1999 году предложил величины пороговых концентраций и для анализа волос.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Законодательство и практический подход отличаются в разных странах при проведении исследований на алкоголь и лекарственные препараты:
• законы, учитывающие только ухудшение способности вождения (Норвегия, Дания, США);
• законы о нулевой толерантности (Германия, Бельгия, Швеция);
• законы, не основанные на связи со способностью управления транспортным средством, за исключением алкоголя.
Установление допустимых концепций направлено на снижение числа и тяжести дорожно-транспортных происшествий.
Касательно интерпретации результатов, наличие лекарств в моче не является доказательством причины ДТП или ухудшения способности управления транспортным средством. Только уровень лекарств в крови может иметь значение и может быть использован очень осторожно вместе с другой доступной информацией для окончательного заключения об ухудшении способности управления транспортным средством.
Значение величин пороговых концентраций должно быть понятным для пользователей (токсикологов, врачей - судебно-медицинских экспертов, судей, адвокатов, полицейских и др.), потому что неправильное использование может иметь драматические последствия. Следует иметь в виду, что биологические пробы могут быть легко загрязнены (фальсифицированы), что в иммуноанализе может привести как к ложно положительным результатам, так и к ложноотрицательным.
Особенно сложно интерпретировать величины пороговых концентраций в постмортальной токсикологии. В своей статье Robert Wennig. «Threshold values in Toxicology - useful or not?» обращает внимание, что философия этого термина должна быть правильно понята и эти величины должны применяться в реальных случаях лицами с достаточным опытом.
При принятии законодательных актов касательно токсикологии, использование величин пороговых концентраций должно производиться с большой осторожностью. Достижения в методологии, а именно уменьшение предела обнаружения для многих потенциально токсических веществ, за последние годы позволили обнаруживать химические вещества в концентрациях, не имеющих значения для токсикологии в многочисленных матрицах, что не должно приводить к переоткрытию или установлению воздействия химических веществ на поведение человека. Избежать этих последствий поможет внимательная интерпретация аналитических результатов квалифицированными специалистами. Этому вопросу должно уделяться особое внимание.
Очевидна связь величин пороговых концентраций со стандартами качества выполнения исследования, порядком проведения исследований, стандартными операционными процедурами, возможностью фальсификации (загрязнения) пробы, погрешностью методики, временем взятия пробы после инцидента, взаимодействием с другими веществами при комбинированном приеме. Важным моментом является соблюдение порядка проведения исследований и многочисленные меры обеспечения гарантии качества, включая преаналитическую фазу.
В заключение следует отметить, если пороговые величины рассматриваются в токсикологии, как рекомендательные величины, а не как «абсолютная истина», они могут быть очень полезны для интерпретации результатов исследования в клинических и судебных случаях (решениях).
ВЫВОДЫ
Своим сообщением мы хотим привлечь внимание
• к необходимости иметь рекомендательные величины для нашей страны для современных инструментальных методов;
• узаконить взятие для установления алкогольного и наркотического опьянения или влияния веществ на поведение человека при управлении транспортным средством при ДТП и совершении правонарушений помимо мочи - кровь и слюну;
• легитимно дать возможность приобретать и использовать в практике судебной и клинической токсикологии автоматизированные системы иммуноанализа, позволяющие безопасно работать с потенциально инфицированным биоматериалом, в комплектацию которых входят калибраторы и контроли положительные (пробы, заведомо содержащие искомые психоактивные вещества, в том числе, относящиеся к контролируемым группам наркотиков), и реактивы для разных биологических матриц (крови, слюны), которые охарактеризованы возможностями перекрестных реакций.
I Исследование метильных производных органических соединений в биологических жидкостях методом ГХ/МС анализа равновесной парогазовой фазы
• Р. Р. Краснова, Е. П. Кириченко, Н. В. Коблова, Н. А. Крупина
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» МЗ МО (нач.— д.м.н., проф. В. А. Клевно) Аннотация: Доклад посвящен вопросу определения содержания этиленгликоля (ЭГ) и его метаболита гликолевой кислоты (ГК) в биологических жидкостях. Изучена статья Ilpo Rasanen et al. «Headspace in-tube extraction gas chromatography-mass spectrometry for the analysis of hydroxylic methyl-derivatized and volatile organic compounds in blood and urine». Метод позволяет обнаружить и количественно определить ЭГ и ГК с высокой чувствительностью в биологических пробах, даже взятых с задержкой.
Ключевые слова: этиленгликоль, метилирование, органические кислоты, дериватизация, диметилсульфат
HS / GC / MS method for the analysis the hydroxylic methyl-derivatized organic compounds in in biological fluids
• R. R. Krasnova, E. P. Kirichenko, N. V. Koblova, N. A. Krupina
Abstract: The report focuses on the headspace gas chromatography-mass spectrometry method for the analysis the hydroxylic methyl-derivatized organic compounds in blood and urine. After derivatization with dimethyl sulfate for ethylene glycol (EG), glycolic acid (GA), other hydroxylic compounds, and another samples underivatized volatile organic compounds on a porous layer, open tubular GC capillary column. The quantification was based on extracted ions. Keywords: ethylene glycol, methylation, organic acids, derivatized, dimethylsulfate.
ВВЕДЕНИЕ
Определение содержания летучих органических веществ в биологических объектах является наиболее распространенным видом анализа в судебной химии и токсикологии. Для этих целей используется газовая хроматография, позволяющая идентифицировать и количественно определять спирты и другие летучие вещества. Проблемы возникают при отравлениях техническими жидкостями, в состав которых входят гликоли. В пробах биологического происхождения помимо гликолей необходимо анализировать и их метаболиты - органические кислоты.
Токсичность самого неметаболизированного ЭГ относительно низка, угроза идет от его метаболитов. ГК вы-
зывает метаболический ацидоз, оказывает нефротокси-ческий эффект, обусловленный образованием оксалата кальция.
Метод позволяет одновременно идентифицировать и количественно определить нелетучие гликоли и их метаболиты (органические кислоты) после переведения их в летучие производные метилированием в виале.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Пробы крови (мочи) анализируются на этиленгликоль (ЭГ), гликолевую кислоту (ГК) и другие гидроксильные соединения после дериватизации в виале диметилсульфа-том (ДМС). Метилирование диметилсульфатом биопрбы в виале имеет предпочтение по сравнению с другими де-риватизирующими агентами, т.к. идет прямая деривати-зация водных проб. Идентификация и количественное определение проводится ГХ/МС методом анализа равновесной парогазовой фазы. Капиллярная колонка (СР-Рога PLOT Q-HP 25 м х 0, 32 мм, толщина пленки 10 мкм) дает возможность разделять, идентифицировать и количественно определять такие трудно хроматографируемые вещества, как гликоли и их эфиры, органические кислоты, фенол и даже - оксимасляную кислоту.
ВЫВОДЫ
Изучен рациональный эффективный метод анализа низко молекулярных мало летучих органических веществ в пробах крови, мочи. В судебно-химическом отделе ГБУЗ МО Бюро СМЭ внедрён этот метод на газовом хроматографе Маэстро с масс-селективным детектором AT 5975. Метод позволяет обнаружить и количественно определить этиленгликоль, гликолевую кислоту и другие гидроксильные органические соединения. Отмечены преимущества данного метода: высокая чувствительность и надежность определения.
I Определение массовой концентрации этанола в крови, моче и внутриглазной жидкости парофазным газохроматографическим методом с пламенно-ионизационным детектором на двух капиллярных колонках
• Н. А. Крупина, Е. П. Кириченко, Р. Р. Краснова
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» МЗ МО (нач.— д.м.н., проф. В. А. Клевно) Аннотация: Изучен и внедрен в практическую работу судебно-химического отдела ГБУЗ МО «Бюро СМЭ» парофазный газохроматографиче-ский метод анализа крови, мочи, внутриглазной жидкости для одновременного определения этанола, метанола, ацетона, 1-пропанола, 2-пропанола, этилацетата, метилэтилкетона (МЭК) и обнаружения ацетальдегида. Ключевые слова: этанол, анализ, кровь, моча, внутриглазная жидкость
Quantitation of ethanol in the blood, urine, vitreous humor by HS-GC on two capillary columns
• R. R. Krasnova, E. P. Kirichenko, N. A. Krupina Abstract: Headspace gas chromatographic method of analysis of blood, urine, vitreous humor for the simultaneous determination of ethanol, methanol, acetone, 1-propanol, 2-propanol, ethyl acetate, methyl ethyl ketone and detection of acetaldehyde has been studied and put into practice of forensic chemistry
