CC BY
4
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVII, № 4, 2021
ми в лечебно-профилактических учреждениях ФМБА России (общепопуляционные) для оценки состояния здоровья спортсменов во время проведения УМО (РИ ФМБА), были выявлены отличия как в ширине, так и в минимальных значениях РИ (у мужчин: min РИ ФМБА 132 г/л, min рассчитанных РИ 123,5 г/л; у женщин: min РИ ФМБА 120 г/л, min рассчитанных РИ 113 г/л). Минимальная ширина РИ содержания гемоглобина как у спортсменов мужского, так и женского пола наблюдается в возрастном диапазоне 14-15 лет (у мальчиков 125,62 - 165,07 г/л, у девочек 111,63 - 147,16 г/л). Минимальные значения РИ содержания железа в сыворотке крови у спортсменов обоих полов приходится на возраст 14-15 лет (у мальчиков 7,4 мкмоль/л по сравнению с 11,6 мкмоль/л РИ ФМБА, у девочек 5,9
мкмоль/л по сравнению с 9 мкмоль/л). С увеличением возраста спортсменов верхняя граница РИ содержания железа увеличивается как у спортсменов мужского, так и женского пола.
Выводы. Рассчитанные на многотысячной выборке спортсменов РИ концентрации гемоглобина и сывороточного железа отличаются от общепопуляционных РИ как по ширине, так и по минимальным и максимальным значениям. Применение данных адаптированных РИ показателей крови позволит врачам специалистом по спортивной медицине уже на ранних этапах идентифицировать анемические состояния и предпринять своевременно меры по коррекции выявляемых отклонений в состоянии здоровья спортсмена.
Гурьянова М.А., Шухов О.А., Капранов Н.М., Давыдова Ю.О., Никифорова К.А., Челышева Е.Ю., Быкова А.В., Петрова А.Н., Немченко И.С., Гальцева И.В., Туркина А.Г.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава Российской Федерации, г. Москва
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ CD26+ ЛЕЙКОЗНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК У ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМ МИЕЛОИДНЫМ ЛЕЙКОЗОМ
Введение. Лейкозные стволовые клетки (ЛСК) при хроническом миелолейкозе (ХМЛ) находятся в CD34+CD38-/Lin- фракции лейкозного клона. Зарубежными исследователями было выявлено, что у 100% пациентов с ХМЛ на ЛСК обнаруживается экспрессия CD26+, которая не выявляется на нормальных гемо-поэтических стволовых клетках и лишь в единичных случаях обнаруживается на ЛСК при других гематологических заболеваниях. В течение последних лет зарубежными авторами активно исследуется роль CD26+ ЛСК в диагностике ХМЛ, в оценке минимальной остаточной болезни на фоне терапии ингибиторами ти-розинкиназ (ИТК), а также изучается значение CD26+ ЛСК в качестве прогностического маркера перед отменой терапии ИТК для длительности ремиссии без лечения (РБЛ).
Цель. Оценить концентрацию CD26+ ЛСК в периферической крови (ПК) и костном мозге (КМ) у пациентов в дебюте ХМЛ, на разных этапах терапии ИТК и определить взаимосвязь концентрации CD26+ ЛСК с достижением оптимального ответа на терапию ИТК.
Материалы и методы. CD26+ ЛСК в ПК и КМ выявлялись при помощи наборов моноклональных антител анти^26-РЕ, CD45-APC-Cy7, CD34-APC и CD38-FITC. Анализ проводился на проточном цитометре CytoFlex (Beckman Coulter). С августа 2020 по сентябрь 2021 года обследовано 169 пациентов. У пациентов с ХМЛ с длительностью терапии ИТК менее 12 месяцев (мес.) забор образцов (ПК/КМ) проводился в момент диагностики (n=40/24), через 3 мес. (n=25/7), 6 мес. (n=18/1), 9 мес. (n=5/0) и 12 мес. (n=11/1) терапии. У пациентов с длительностью терапии ИТК более 12 мес. и уровнем BCR-ABL>0,01% (n=14) забор ПК выполнялся однократно. Пациенты с ХМЛ с глубоким МО были разделены на 2 группы: пациенты, получающие терапию ИТК, и пациенты в РБЛ. В первой группе у пациентов выполнялся забор ПК (n=45) и КМ (n=18),
во второй группе - только ПК (п=24). В контрольную группу были включены пациенты с другими гематологическими заболеваниями (п=14): ПМФ (п=2), ОМЛ (п=2), Ph+ОМЛ (п=1), Ph+ОЛЛ (п=1), ХММЛ (п=4), МДС/ МПЗ с гиперэозинофилией (п=1), ЭТ (п=1), ХМЛ с атипичными типами транскрипта BCR-ABL (п=2).
Результаты. CD26+ ЛСК в ПК и КМ были обнаружены у всех пациентов в дебюте ХМЛ. Медиана(абс.) (Ме) CD26+ ЛСК в ПК составила 29,3/мкл (0-345,7), в КМ — 48,2/мкл (0,5-426,8). Через 3 мес. терапии CD26+ ЛСК были выявлены в КМ только у 1/6 пациента. На сроках терапии ИТК 6, 9 и 12 мес. ни у кого из пациентов СD26+ ЛСК не были выявлены ни в ПК, ни в КМ. В группе пациентов без глубокого МО с длительностью терапии ИТК >12 мес. CD26+ ЛСК были обнаружены у 4/6 (67%) пациентов с BCR-ABL>1% и резистентностью к нескольким линиям терапии ИТК. Ме CD26+ ЛСК составила 0,12/мкл (0,05-0,2). У пациентов с ХМЛ с глубоким МО, как получавших терапию ИТК, так и в РБЛ, ни в ПК, ни в КМ не были обнаружены CD26+ ЛСК. В контрольной группе CD26+ ЛСК в ПК были выявлены у 5/14 (36%) пациентов со следующими заболеваниями: Ph+ ОЛЛ и ХМЛ с BCR-ABL р190, ПМФ, ХММЛ и МДС/МПЗ с гиперэозинофилией. Установлена прямая корреляция между концентрацией CD26+ ЛСК в ПК у больных ХМЛ в дебюте заболевания и числом лейкоцитов (г=0.5588, р=0.0006), а также между концентрацией CD26+ ЛСК в ПК и МО на терапии иматинибом через 3 мес. (г=0.77, р <0.0001). Ме CD26+ ЛСК в группе пациентов с уровнем BCR-ABL <10% и BCR-ABL >10% через 3 мес. терапии составила 21,2/мкл (0,4 - 457) и 118,7/мкл (12,5 - 1029,4), соответственно (р=0.04).
Выводы. Подтверждено, что у 100% пациентов с ХМЛ в дебюте заболевания в ПК и в КМ, выявляются CD34+CD38-CD26+ ЛСК. Однако, по нашим данным, CD26+ ЛСК обнаруживаются в ПК у 36% пациентов и с другими гематологических заболеваниями. Установ-
II научно-практическая конференция молодых ученых «Актуальные проблемы гематологии и трансфузиологии»
Санкт-Петербург 18-19 ноября 2021 г.
лено, что у пациентов на ранних сроках терапии ИТК, при определяемом уровне BCR-ABL, и у пациентов с глубоким МО с неопределяемым уровнем транскрипта, CD26+ ЛСК не детектируются, что противоречит результатам зарубежных исследований. Выявлено, что у пациентов с оптимальным ответом через 3 месяца терапии ИТК, концентрация CD26+ ЛСК в ПК в дебюте
заболевания была достоверно ниже, чем у пациентов без оптимального ответа на лечение (р<0.0001). Планируется продолжение исследования динамики CD26+ ЛСК на фоне терапии ИТК и дальнейшее изучение роли CD26+ ЛСК в достижении оптимального ответа на лечение.
Загарских А.Н., Бутина Е.В.
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров
АССОЦИАЦИЯ HLA-ГЕНОВ С НЕЭФФЕКТИВНЫМИ ПОПЫТКАМИ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ
Введение. Антигены лейкоцитов человека (^А) - наиболее полиморфные локусы в человеческом геноме, которые относятся к генам иммунного ответа, определяя направление процессов, протекающих в системе иммунитета. Кроме участия генов HLA в предрасположенности к развитию иммуноопосредованных заболеваний, связанных с системой иммунитета (инфекционных, онкологических и аутоиммунных), их полиморфизм играет важную роль в гестационном процессе.
В последнее время при лечении бесплодия большие надежды возлагаются на использование вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), в частности, экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Несмотря на эффективность этого метода, примерно у 30% супругов регистрируются повторные неэффективные циклы ЭКО. Кроме того, до настоящего времени не существует однозначного мнения относительно участия генов системы HLA в удачных или неудачных процедурах искусственного оплодотворения.
Цель. Изучить частоту встречаемости генов HLA класса II у женщин и мужчин из супружеских пар с неэффективными попытками экстракорпорального оплодотворения.
Материалы и методы. Типирование генов HLA класса II выполнено у 272 супружеских пар с неэффективными попытками ЭКО и инсеминациями спермой мужа (ИСМ). Главными условиями отбора супругов для исследования явились первичные или повторные им-плантационные потери после применения ВРТ: 1 группа - 1 неудачное ЭКО (п=92); 2 группа - 2 неудачных ЭКО (п=58); 3 группа - 3 и более неудачных ЭКО (п=79); 4 группа - неэффективные ИСМ (п=43); в группу сравнения включены женщины и мужчины из супружеских пар с одной и более успешно завершенными процедурами ЭКО (п=32). Типирование аллельных вариантов генов системы HLA класса II ^В1*, DQA1*, DQB1*) осуществляли методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с наборами для мо-лекулярно-генетического тестирования «HLA-DRB1», «НЬА^А1», «НЬА^В1» («ДНК-Технология», Россия).
Результаты. У женщин с 2 неэффективными циклами ЭКО статистически чаще обнаружен аллель DQA1*01:02 (41,4% и 18,8% в группе сравнения; х2=4,8; р<0,05). Кроме того, в этой группе женщин наблюдалась тенденция к снижению частоты встречаемости варианта гена DQA1*01:01, близкая к статистически значимой (29,3% и 50,0%; х2=3,8; р<0,05). У женщин с тремя и более неэффективными циклами ЭКО отмечалась тенденция к уменьшению распространенности аллеля DQA1*01:03 (8,3% и 21,9%; х2=3,5; р<0,05). У мужчин из супружеских пар с одной, двумя, тремя и более неудачными попытками ЭКО достоверно реже, чем в группе сравнения регистрировался вариант гена DQA1*05:01 (40,2%, 39,7%, 44,3% и 71,9%; х2=9,5, Х2=8,6, х2=7,0; р<0,05, соответственно), статистически чаще - аллель DQA1*01:01 (29,3%, 32,8%, 29,1% и 9,4%; х2=5,2, х2=6,1, х2=4,9; р<0,05, соответственно). У мужчин с одной неудачной попыткой ЭКО обнаружено увеличение частоты встречаемости специфичности DQB1*05:01 (29,3% и 9,4%; х2=5,2; р<0,05), а с неэффективными ИСМ - снижение DRB1*11 (9,3% и 28,1%; х2=4,5; р<0,05) и DQA1*05:01 (41,9% и 71,9%, х2=6,7; р<0,05). В последней из групп зафиксирована тенденция к уменьшению выявляемости DQB1*02:01, близкая к достоверной (27,9% и 50,0%; х2=3,8; р<0,05). При проведении сравнительной оценки наличия общих специфичностей HLA класса II у супружеских пар было установлено, что достоверных различий в частоте распределения гомологичных аллелей у супругов с неудачными попытками ЭКО и ИСМ и в группе сравнения не установлено (х2<3,84; р>0,05).
Выводы. Таким образом, распределение генов системы HLA класса II у супружеских пар с неэффективными попытками ЭКО и ИСМ имеет существенные различия с теми супругами, у которых эти процедуры заканчивались беременностью и родами. Наличие у супругов общих аллелей системы HLA класса II не влияет на эффективность ВРТ, поэтому основное внимание перед проведением процедуры ЭКО необходимо уделять специфичности антигенов HLA у супружеских пар.
