CC BY
10
II научно-практическая конференция молодых ученых «Актуальные проблемы гематологии и трансфузиологии»
аутоТГСК у 78 пациентов. Все пациенты получали стандартные программы терапии и находились в ремиссии. Режимом кондиционирования для проведения аутоТГСК выбрана стандартная терапия мелфа-ланом (MEL200). В зависимости от способа хранения ГСК пациенты соотнесены в группу не-КРИО - без кри-оконсервирования (п = 35), группу КРИО - с криокон-сервированием (п = 43). Продукт афереза ГСК в группе не-КРИО хранился при температуре от +4 до +6 °С в присутствии многокомпонентного раствора антикоагулянта на основе цитрата натрия сроком до 3 суток. Для группы КРИО аферезный продукт криоконсерви-ровали в присутствии диметилсульфоксида (ДМСО) и хранили при сверхнизких температурах в условиях криобанка. Жизнеспособность ГСК оценивалась дважды (после афереза и непосредственно перед реинфу-зией) по количеству CD34+ и 7AAD- клеток, а также колониеобразующей способности (КОС) ГСК.
Результаты. Не было достоверных различий в количестве CD34+ клеток х 106/кг, в уровне 7AAD- клеток, в показателях общей КОС. Однако, отмечена достоверная разница в проценте утраты CD34+ клеток от момента афереза до момента реинфузии, что вероятнее всего обусловлено воздействием факторов внешнего окружения. Типичные для инфузий криокон-сервированных с ДМСО ГСК явления отсутствовали в группе не-КРИО. У 29 из 43 пациентов контрольной
Санкт-Петербург 18-19 ноября 2021 г.
группы КРИО (67,4%) при проведении реинфузии ГСК были отмечены реакции характерные для ДМСО Аналогичные проявления в группе не-КРИО закономерно полностью отсутствовали. У всех пациентов было констатировано полноценное восстановление кроветворения при выписке из стационара. Восстановление нейтрофилов было достигнуто на 11-й (диапазон 9-14) и тромбоцитов на 12-й день (диапазон 8-19) в группе не-КРИО, на 10-й (диапазон 8-14) и 12-й (диапазон 8-20) день в группе КРИО. Проведение трансплантации ГСК позволило увеличить количество полных ответов, МОБ-негативных ответов и уменьшить величину опухолевой нагрузки.
Выводы. Метод хранения ГСК без криоконсерви-рования не уступает традиционному методу с ДМСО. Безопасность АТГСК при ММ с применением некрио-консервированных ГСК подтверждается отсутствием побочных эффектов ДМСО, аналогичными сроками восстановления гемопоэза, низкой потребностью в заместительной гемокомпонентной терапии и частотой развития большинства посттрансплантационных осложнений. Применение некриоконсервированных ГСК делает аутотрансплантацию при ММ более доступной, в том числе, в лечебных учреждениях, не имеющих в своей структуре криобанка.
Гришина Ж.В., Ядгаров М.Я., Базанович С.А., Павлова А.А.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный научно-клинический центр спортивной медицины и реабилитации Федерального медико-биологического агентства», г. Москва
РЕФЕРЕНТНЫЕ ИНТЕРВАЛЫ УРОВНЯ ГЕМОГЛОБИНА И СЫВОРОТОЧНОГО ЖЕЛЕЗА В КРОВИ ПРОФЕССИОНАЛЬНЫХ СПОРТСМЕНОВ
Введение. Для достижения высоких спортивных результатов необходимо поддержание адекватной интенсивности аэробных физических нагрузок и высокого уровня кислородтранспортной функции крови. Для своевременного выявления отклонений в показателях кислородтранспортной системы крови и ранней диагностики анемических состояний у профессиональных спортсменов врачу важно ориентироваться на референтные интервалы (РИ) показателей крови, адаптированные для спортсменов, с учетом пола, возраста и спортивной специализации. По данным наблюдений, именно в рамках углубленного медицинского обследования (УМО) спортсменов сборных команд России впервые выявляются отклонения в обмене железа.
Цель. Рассчитать референтные интервалы показателей концентрации гемоглобина и содержания сывороточного железа на выборке профессиональных спортсменов разного пола и возраста.
Материалы и методы. Были обследованы спортсмены - члены спортивных Сборных команд России в возрасте от 16 до 38 лет шести групп видов спорта: циклических, скоростно-силовых, сложно-координационных, игровых и единоборств, включающих 40 спортивных дисциплин. Общее количество обследованных спортсменов - 5245, из них 3167 спортсменов мужского и 2078 женского пола. Спортивная квалификация обследованных спортсменов: 396 человек име-
ли различные спортивные разряды, 2178 являлись кандидатами в Мастера спорта (КМС), 2671 спортсмен имел квалификацию Мастер спорта (МС) и выше.
При расчете РИ анализируемых параметров крови были исключены результаты обследования спортсменов, не допущенных к учебно-тренировочному процессу по итогам прохождения УМО по состоянию здоровья. Исследования проводились на базе ФГБУ ГНЦ ФМБЦ им. А.И. Бурназяна и ФГБУ ФНКЦСМ ФМБА России. Параметры крови измерялись с помощью полуавтоматического биохимического анализатора BioSystems BTS-350. Взятие крови проводилось утром натощак.
С использованием критерия Колмогорова-Смирнова с поправкой Лилиефорса и критерия Шапиро-Уилка, оценивался тип распределения данных. В дальнейшем проводилась элиминация статистических выбросов с использованием критерия Шовене и метода Тьюки. В случае соответствия данных нормальному закону распределения применялся стандартных подход к построению РИ на основе t-критерия Стьюдента, в противном случае доверительный интервал рассчитывался для логнормального распределения с расчётом коэффициента разности.
Результаты. В результате сравнительного анализа рассчитанных РИ концентрации гемоглобина у спортсменов разного возраста и пола с РИ, приняты-
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVII, № 4, 2021
ми в лечебно-профилактических учреждениях ФМБА России (общепопуляционные) для оценки состояния здоровья спортсменов во время проведения УМО (РИ ФМБА), были выявлены отличия как в ширине, так и в минимальных значениях РИ (у мужчин: min РИ ФМБА 132 г/л, min рассчитанных РИ 123,5 г/л; у женщин: min РИ ФМБА 120 г/л, min рассчитанных РИ 113 г/л). Минимальная ширина РИ содержания гемоглобина как у спортсменов мужского, так и женского пола наблюдается в возрастном диапазоне 14-15 лет (у мальчиков 125,62 - 165,07 г/л, у девочек 111,63 - 147,16 г/л). Минимальные значения РИ содержания железа в сыворотке крови у спортсменов обоих полов приходится на возраст 14-15 лет (у мальчиков 7,4 мкмоль/л по сравнению с 11,6 мкмоль/л РИ ФМБА, у девочек 5,9
мкмоль/л по сравнению с 9 мкмоль/л). С увеличением возраста спортсменов верхняя граница РИ содержания железа увеличивается как у спортсменов мужского, так и женского пола.
Выводы. Рассчитанные на многотысячной выборке спортсменов РИ концентрации гемоглобина и сывороточного железа отличаются от общепопуляционных РИ как по ширине, так и по минимальным и максимальным значениям. Применение данных адаптированных РИ показателей крови позволит врачам специалистом по спортивной медицине уже на ранних этапах идентифицировать анемические состояния и предпринять своевременно меры по коррекции выявляемых отклонений в состоянии здоровья спортсмена.
Гурьянова М.А., Шухов О.А., Капранов Н.М., Давыдова Ю.О., Никифорова К.А., Челышева Е.Ю., Быкова А.В., Петрова А.Н., Немченко И.С., Гальцева И.В., Туркина А.Г.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава Российской Федерации, г. Москва
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ CD26+ ЛЕЙКОЗНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК У ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМ МИЕЛОИДНЫМ ЛЕЙКОЗОМ
Введение. Лейкозные стволовые клетки (ЛСК) при хроническом миелолейкозе (ХМЛ) находятся в CD34+CD38-/Lin- фракции лейкозного клона. Зарубежными исследователями было выявлено, что у 100% пациентов с ХМЛ на ЛСК обнаруживается экспрессия CD26+, которая не выявляется на нормальных гемо-поэтических стволовых клетках и лишь в единичных случаях обнаруживается на ЛСК при других гематологических заболеваниях. В течение последних лет зарубежными авторами активно исследуется роль CD26+ ЛСК в диагностике ХМЛ, в оценке минимальной остаточной болезни на фоне терапии ингибиторами ти-розинкиназ (ИТК), а также изучается значение CD26+ ЛСК в качестве прогностического маркера перед отменой терапии ИТК для длительности ремиссии без лечения (РБЛ).
Цель. Оценить концентрацию CD26+ ЛСК в периферической крови (ПК) и костном мозге (КМ) у пациентов в дебюте ХМЛ, на разных этапах терапии ИТК и определить взаимосвязь концентрации CD26+ ЛСК с достижением оптимального ответа на терапию ИТК.
Материалы и методы. CD26+ ЛСК в ПК и КМ выявлялись при помощи наборов моноклональных антител анти^26-РЕ, CD45-APC-Cy7, CD34-APC и CD38-FITC. Анализ проводился на проточном цитометре CytoFlex (Beckman Coulter). С августа 2020 по сентябрь 2021 года обследовано 169 пациентов. У пациентов с ХМЛ с длительностью терапии ИТК менее 12 месяцев (мес.) забор образцов (ПК/КМ) проводился в момент диагностики (n=40/24), через 3 мес. (n=25/7), 6 мес. (n=18/1), 9 мес. (n=5/0) и 12 мес. (n=11/1) терапии. У пациентов с длительностью терапии ИТК более 12 мес. и уровнем BCR-ABL>0,01% (n=14) забор ПК выполнялся однократно. Пациенты с ХМЛ с глубоким МО были разделены на 2 группы: пациенты, получающие терапию ИТК, и пациенты в РБЛ. В первой группе у пациентов выполнялся забор ПК (n=45) и КМ (n=18),
во второй группе - только ПК (п=24). В контрольную группу были включены пациенты с другими гематологическими заболеваниями (п=14): ПМФ (п=2), ОМЛ (п=2), Ph+ОМЛ (п=1), Ph+ОЛЛ (п=1), ХММЛ (п=4), МДС/ МПЗ с гиперэозинофилией (п=1), ЭТ (п=1), ХМЛ с атипичными типами транскрипта BCR-ABL (п=2).
Результаты. CD26+ ЛСК в ПК и КМ были обнаружены у всех пациентов в дебюте ХМЛ. Медиана(абс.) (Ме) CD26+ ЛСК в ПК составила 29,3/мкл (0-345,7), в КМ — 48,2/мкл (0,5-426,8). Через 3 мес. терапии CD26+ ЛСК были выявлены в КМ только у 1/6 пациента. На сроках терапии ИТК 6, 9 и 12 мес. ни у кого из пациентов СD26+ ЛСК не были выявлены ни в ПК, ни в КМ. В группе пациентов без глубокого МО с длительностью терапии ИТК >12 мес. CD26+ ЛСК были обнаружены у 4/6 (67%) пациентов с BCR-ABL>1% и резистентностью к нескольким линиям терапии ИТК. Ме CD26+ ЛСК составила 0,12/мкл (0,05-0,2). У пациентов с ХМЛ с глубоким МО, как получавших терапию ИТК, так и в РБЛ, ни в ПК, ни в КМ не были обнаружены CD26+ ЛСК. В контрольной группе CD26+ ЛСК в ПК были выявлены у 5/14 (36%) пациентов со следующими заболеваниями: Ph+ ОЛЛ и ХМЛ с BCR-ABL р190, ПМФ, ХММЛ и МДС/МПЗ с гиперэозинофилией. Установлена прямая корреляция между концентрацией CD26+ ЛСК в ПК у больных ХМЛ в дебюте заболевания и числом лейкоцитов (г=0.5588, р=0.0006), а также между концентрацией CD26+ ЛСК в ПК и МО на терапии иматинибом через 3 мес. (г=0.77, р <0.0001). Ме CD26+ ЛСК в группе пациентов с уровнем BCR-ABL <10% и BCR-ABL >10% через 3 мес. терапии составила 21,2/мкл (0,4 - 457) и 118,7/мкл (12,5 - 1029,4), соответственно (р=0.04).
Выводы. Подтверждено, что у 100% пациентов с ХМЛ в дебюте заболевания в ПК и в КМ, выявляются CD34+CD38-CD26+ ЛСК. Однако, по нашим данным, CD26+ ЛСК обнаруживаются в ПК у 36% пациентов и с другими гематологических заболеваниями. Установ-
