CC BY
8
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
емость этой мутации была статистически значимо больше, чем среди пациентов в возрасте 50 и менее лет, р=0,032. Различия по частоте встречаемости мутации V617F между подгруппами мужчин и женщин не выявлены. Также не выявлены какие-либо клинически значимые различия по лабораторным показателям в зависимости от мутационного статуса.
У пациентов из группы ЭТ мутация |ЛК2 V617F сопровождала 66,7 % случаев. Группа |ЛК-положительных пациентов с ЭТ характеризовалась большей медианой возраста (р=0,050) и существенно не отличалась по другим изучаемым показателям от пациентов, не имевших данной мутации. Кроме мутации V617F в данной группе были выявлены мутации гена CALR с частотой 16,7 % — у 5 мужчин и 13 женщин. В зависимости от наличия мутаций CALR также не выявлено заметных различий по клинико-лабораторным показателям между пациентами, за исключением возраста. У пациентов с мутациями СЛЬ^ медиана возраста была на 11 лет меньше (р=0,030).
В группе ИМ мутация |ЛК2 V617F присутствовала в 66,4 % случаев. Медиана возраста у пациентов с мутацией |ЛК2 составила 64 года, а у пациентов без указанной мутации — 60,0 лет, р=0,011. Мутации гена CALR выявлены у 14 пациентов (11,8 %). Средний возраст пациентов с мутациями CALR (медиана 53 лет) был значимо меньше возраста пациентов без данных мутаций (63 года), р=0,025. Мутация МРЬ W515L, которая выявлена только в этой группе, сопровождала 6 случаев ИМ (5,0 %). Не выявлено статистически значимых различий в частоте определения мутации |ЛК2, CALR и MPL у пациентов разного пола. В группе пациентов с ИМ мутация |ЛК2 была сопряжена с большим ко-
личеством эритроцитов и уровнем гемоглобина — в 1,28 и 1,32 раза, p<0,001 и p<0,001 соответственно, в сопоставлении с пациентами без данной мутации, у которых медиана количества эритроцитов 3,4 х 1012/л и уровень гемоглобина 96,2 г/л были снижены относительно значений нормы. Также были выявлены статистически значимые различия в отношении количества лейкоцитов (p=0,001), тромбоцитов (p=0,003) и уровня ЛДГ (p=0,035): у пациентов с мутацией количество лейкоцитов и тромбоцитов было соответственно в 1,45 раза и в 2,27 раз больше (медиана 11,2 х 109/л и 501,0 х 109/л), а содержание ЛДГ — в 1,48 раз меньше (медиана 327,0 Ед/л), чем у |ЛК2-отрицательных пациентов. В данной группе уровень ЛДГ в плазме крови |ЛК2-положительных пациентов (медиана 327 Ед/л) был в 2,1 раз ниже, чем у пациентов с мутациями CALR (медиана 687,5 Ед/л, p=0,011) и в 1,96 раз ниже, чем у MPL-положительных пациентов (медиана 641,5 Ед/л, p=0,015), но значимо не отличался от такового у пациентов без мутаций (p=0,967). Среди пациентов с ИМ мутация MPL в 100 % случаев была сопряжена со спленомегалией, что в 5,0 раз чаще, чем у пациентов без каких-либо мутаций (p=0,001), в 2,82 раз чаще, чем у пациентов с мутацией JAK2 (p=0,003), и в 2 раза чаще, чем при наличии мутаций CALR (p=0,052).
Выводы. Соматические мутации генов JAK2 (V617F), CALR (del и ins) и MPL (W515L и W515K) в качестве маркеров клональной миелопролиферации позволяют верифицировать диагноз у 94,7 % пациентов с ИП, 79,7 % пациентов с ЭТ и 83,2 % пациентов с ИМ. Мутационный статус имеет наиболее выраженное клиническое значение в группе пациентов с ИМ.
С. Ю. Смирнова, Ю. В. Сидорова, Н. В. Рыжикова, Н. Г. Чернова, Е. Н. Паровичникова, А. Б. Судариков
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский медицинский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
ОДНОВРЕМЕННОЕ ВЫЯВЛЕНИЕ Т- И ВКЛЕТОЧНОЙ КЛОНАЛЬНОСТИ, КЛОНАЛЬНАЯ ГЕТЕРОГЕННОСТЬ У ПАЦИЕНТОВ С ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ И У ЗДОРОВЫХ ЛИЦ
Введение. Одновременное выявление Ти В-клеточной клональности, клональная гетерогенность при лимфомах, клональная экспансия Т-лимфоцитов как следствие иммунного, аутоиммунного процесса, сокращения
нормального поликлонального лимфоцитар-ного разнообразия является диагностической проблемой, решений которой в доступной на сегодняшний день литературе не представлено.
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
Цель. Изучить клональную гетерогенность у пациентов с лимфопролиферативными заболевания и клональность при отсутствии признаков опухоли.
Материалы и методы. Ретроспективный анализ данных клональности проведен у 2182 пациентов. Проспективный анализ — у 102 пациентов. Клональные реаранжировки выявляли с помощью метода ПЦР по протоколу ВЮМЕО-2 и последующим проведением фраг-ментного анализа. Селекция лимфоцитов крови проводилась при помощи магнитных частиц.
Результаты. По данным ретроспективного анализа — одновременное выявление В- и Т-клеточной клональности (четкие клональные пики и клональные пики на поли-клональном фоне — сомнительная монокло-нальная картина) отмечено у 121 из 2182 пациентов. В-клеточная клональность не выявлена ни в одном из случаев Т-клеточных лимфом и в 97% случаев ассоциирована с В-клеточной лимфомой (пациенты с АИТЛ исключены). Т-клеточная клональность, напротив, выявлена в 21% случаев В-клеточных лимфом. Среди всех неходжкинских лимфом выявление Т-клеточной клональности только в 17% случаев ассоциировано с Т-клеточной лимфомой. В единичных случаях одновременное выявление В- и Т-клональности может свидетельствовать о наличии нескольких опухолей (композитной лимфомы).
Клональная гетерогенность — наличие различных по длине в парах нуклеотидов клональ-ных продуктов в различных органах и тканях у одного пациента была отмечена нами при исследовании пациентов с ангиоиммунобласт-
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
ной Т-клеточной лимфомой (АИТЛ). У 76 % (20 из 26) больных клональные продукты полностью или частично отличались от выявленных в материале лимфатического узла. После выполнения селекции на СЭ4 и СЭ8 лимфоциты, показано, что часть клональных Т-лимфоцитов принадлежит к СЭ8+ популяции лимфоцитов и не имеет отношения к опухоли. В группе здоровых доноров и добровольцев у 35,5 % (18 из 62) человек в крови определялось преобладание одной или нескольких популяций Т-лимфоцитов. Разделив их на СБ8+ популяцию и СЭ8- популяции, мы показали, что у 10 из 12 обследованных доноров в СЭ8+ популяции лимфоцитов обнаружены моноклональные реаранжировки генов ТСЯ (п=7), сомнительные моноклональные реаранжировки (п=1) или олигоклональные реаранжировки (п=2). Если в общей популяции был выявлен доминирующий пик, то он же доминировал в СЭ8+ популяции. При этом у большинства обследованных (у 8 из 12) оставшаяся популяция клеток (СЭ8-) была поликлональной.
Выводы. Таким образом, В-клеточная клональность является более важным диагностическим критерием наличия В-клеточной лимфомы, в отличие от Т-клеточной клональности, при диагностике Т-клеточной лимфомы. СЭ8+ лимфоциты, имеющие клонально перестроенные гены ТСЯ, могут персистировать в течение длительного времени и выявляются не только при аутоиммунных заболеваниях, неопухолевых гематологических заболеваниях, но и у пациентов с лимфомами и у здоровых лиц и не имеют отношения к опухоли.
Т. Н. Субботина1,2, А. А. Карнюшка1, И. Е. Маслюкова1
1 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Сибирский федеральный университет», г. Красноярск
2 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный Сибирский научно-клинический центр Федерального медико-биологического агентства России», г. Красноярск
АНАЛИЗ УРОВНЯ АЛЛЕЛЬНОИ НАГРУЗКИ СОМАТИЧЕСКОМ МУТАЦИЕИ С. 1849 G>T (V617F) В ГЕНЕ JAK2 С ПОМОЩЬЮ ПРОГРАММНОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ
«MINOR VARIANT FINDER»
Введение. Соматические мутации в опухолевых клетках могут служить диагностическими и прогностическими маркерами, а также определять чувствительность к противораковым препаратам. Известно, что при использовании метода Сэнгера для анализа соматических му-
таций существуют проблемы, связанные как с количественной оценкой уровня присутствия мутантного аллеля (что важно при онкогема-тологических патологиях), так и с интерпретацией результатов в образцах ДНК с уровнем нагрузки мутантным аллелем менее 15-20 %.
