CC BY
36
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
компьютере типа IBM PC/AT с использованием стандартной программы «Microsoft Office Excel» и пакета прикладных программ статистической программы «Statistica 6.0 for Windows», SAS v.9.3. Для оценки продолжительности жизни в зависимости от генотипа полиморфных локу-сов генов был проведен анализ выживаемости методом Каплана — Мейера.
Результаты. При изучении уровня экспрессии генов ABCG2 и hOCTl в лейкоцитах периферической крови больных ХМЛ с полным молекулярным ответом (ПМО), резистентных к терапии ИТК, и здоровых лиц обнаружено достоверное повышение уровня экспрессии гена ABCG2 только в группе пациентов с ПМО (р=0,036). Что касается экспрессии гена hOCTl, то статистически значимые различия выявлены между контрольной группой и больными с ПМО (р=0,037), контролем и резистентными к терапии пациентами (р=0,014). Сравнение распределения частот аллелей и генотипов полиморфного варианта rs683369 в гене
hOCT1 показало, что генотип *С*С достоверно чаще выявлялся у пациентов с эффективным ответом на лечение — в 75,00 % случаев по сравнению с больными, резистентными к лечению — 53,57% (х2=3,94, р=0,04, 0И=0,38). Частота встречаемости генотипа *С*в была почти в два раза выше у больных ХМЛ, резистентных к терапии — 42,86 %, по сравнению с группой больных с эффективным ответом на лечение ИТК — 21,88 % (х2=3,92, р=0,04, ОЯ=2,67).
Выводы. Повышение уровня экспрессии генов-переносчиков лекарственных препаратов у больных ХМЛ свидетельствует об их участии в метаболизме ИТК и влиянии на эффективность ответа на лечение. Анализ общей выживаемости пациентов в зависимости от генотипа полиморфных локусов генов ЬОСТ1 и АВС02 показал, что наиболее значимым и благоприятным для прогноза являлся генотип СС полиморфного локуса Г8683369 гена ИйО^, что является важным прогностическим критерием оценки исходов ХМЛ.
Ю. В. Сидорова1, Н. Г. Чернова1, В. Р. Городецкий2. Н. В. Рыжикова1, Е. Е. Никулина1, Т. Н. Моисеева1, В. Н. Двирнык1, А. Б. Судариков1
1Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр
гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
2Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт ревматологии имени В. А. Насоновой», г. Москва
ТОЧЕЧНЫЕ МУТАЦИИ ГЕНОВ STAT3 И STAT5B ПРИ ТКЛЕТОЧНОМ ЛЕЙКОЗЕ ИЗ БОЛЬШИХ ГРАНУЛИРОВАННЫХ ЛИМФОЦИТОВ
Введение. Применение современных методов лабораторной диагностики, таких, как проточная цитометрия и ПЦР-исследование реаранжировок генов Т-клеточных рецепторов, не всегда позволяет разграничить Т-клеточный лейкоз из больших гранулярных лимфоцитов (Т-ЛБГЛ) и реактивный БГЛ-лимфоцитоз при неопухолевых заболеваниях. Примерно в трети случаев Т-ЛБГЛ обнаруживают точечные соматические мутации STAT3 или STAT5B. Доказано, что точечные мутации S^-доменов STAT3 и STAT5B — это активирующие мутации, которые обеспечивают сигналы выживания и роста опухолевых клеток и значимы для патогенеза Т-ЛБГЛ. В настоящее время выявление данных мутаций считается специфичным для Т-ЛБГЛ, так как доказывает наличие патологического клона.
Цель. Оценить спектр мутаций генов STAT3 и STAT5B при Т-ЛБГЛ, а также значимость опре-
деления данных мутаций для диагностики Т-ЛБГЛ.
Материалы и методы. В работу включены пациенты с Т-ЛБГЛ (п 49) и хроническими лимфопролиферативными заболеваниями из ЫК клеток (п=11), наблюдавшиеся в «Ноци-ональном медицинском исследовательском центре» Министерства здравоохранения Российской Федерации с 2010 по 2019 гг. А также 57 пациентов, наблюдавшихся в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Научно-исследовательский институт ревматологии имени В. А. Насоновой» с 2009 по 2019 гг., с диагнозом Т-ЛБГЛ и сопутствующим ревматоидным артритом. В контрольную группу (п=32) включены пациенты с различными заболеваниями, в том числе МДС, которые сопровождались БГЛ-лимфоцитозом и потребовали дифференциальной диагностики с Т-ЛБГЛ. Оценку точечных мутаций
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
генов STAT3 и STAT5B проводили при помощи аллель-специфичной ПЦР на приборе Step One Real-Time PCR (Applied Biosystems, USA). Определяли следующие мутации, характерные для Т-ЛБГЛ: c.1919A>T; c.1940A>T; c.1982A>T; c.1981G>T; c.1981G>C; c.1981G>A гена STAT3 (соответствующие аминокислотным заменам p. Y640F; p. N647I; p. D661V; p. D661Y; p. D661H; p. D661N) и c.1924A>C (p. N642H) гена STAT5B.
Результаты. У 33 % пациентов с Т-ЛБГЛ (35 из 106) были выявлены точечные соматические мутации STAT3 или STAT5B. Мутация p. Y640F обнаружена у 19 пациентов, p. D661Y у 11 пациентов, p. N647I у 2 пациентов, p. D661V у 1 пациента, p. D661H у 1 пациента, p. N642H у 1 пациента. У пациентов с сочетанием Т-ЛБГЛ и ревматоидного артрита частота выявления мутаций была незначительно выше (35,1 % против 30,6 %). У 18 % (у 2 из 11) пациентов
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
с хроническими лимфопролиферативными заболеваниями из ЫК клеток были обнаружены мутации STAT3 и STAT5B: р. Y640F р. Ы642Н, соответственно. В группе контроля точечных соматических мутаций STAT3 и STAT5B не выявлено.
Выводы. Выявление точечных соматических мутаций генов STAT3 и STAT5B у больных Т-клеточным лейкозом из больших гранулярных лимфоцитов и хроническим лимфопро-лиферативным заболеванием из ЫК клеток и отсутствие их в контрольной группе свидетельствует о значимости определения данных мутаций при проведении дифференциальной диагностики между реактивным и опухолевым БЛГ-лимфоцитозом. Спектр выявленных на нашей выборке больных точечных мутаций STAT3 и STAT5B совпадает с описанным в литературе для других выборок.
А. Е. Силин, Д. К. Новик, В. Н. Мартинков, В. В. Кошкевич, И. Б. Тропашко, А. А. Силина
Государственное учреждение «Республиканский научно-практический центр радиационной медицины и экологии человека», г. Гомель, Республика Беларусь
МОЛЕКУЛЯРНОГЕНЕТИЧЕСКАЯ И КЛИНИКОЛАБОРАТОРНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПАЦИЕНТОВ С РИ-НЕГАТИВНЫМИ ХРОНИЧЕСКИМИ МИЕЛОПРОЛИФЕТАРИВНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ
Введение. Наиболее распространенными среди Ph-негативных (BCR-ABL1-негативных) хронических миелопролиферативных заболеваний (ХМПЗ) являются истинная полиците-мия (ИП), эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ) и идиопатический миелофиброз (ИМ).
Основная проблема в диагностике ХМПЗ до недавнего времени заключалась в отсутствии точного метода подтверждения клонального характера заболевания с целью дифференциации от реактивных эритроцитозов и тромбоци-тозов. В последние годы для диагностики ХМПЗ стали применяться молекулярно-генетические маркеры клональной миелопролиферации. Наиболее значимыми из них являются соматические мутации генов JAK2 (V617F), CALR (del и ins) и MPL (W515L и W515K). Диагностическая значимость этих маркеров для каждой из форм ХМПЗ различна. Интерес также представляет зависимость клинико-лабораторных показателей пациентов от мутационного статуса при каждой из форм ХМПЗ.
Цель. Дать оценку распространенности и клинической значимости соматических му-
таций генов JAK2, CALR и MPL в группах пациентов с ИП, ЭТ и ИМ.
Материалы и методы. В исследование были включены 359 пациентов, проходивших обследование в ГУ «РНПЦ РМ и ЭЧ» в период 20142018 гг. Группы исследования составили 132 пациента с диагнозом «Истинная полицитемия» с медианой возраста 62,5 года, 108 пациентов с диагнозом «Эссенциальная тромбоцитемия» — 60,5 лет и 119 пациентов с диагнозом «Идиопатический миелофиброз» — 62 года. Материалом для исследования являлись образцы ДНК, выделенные из цельной венозной крови. Мутацию V617F гена JAK2 и мутации W515L и W515K гена MPL анализировали методом ARMS-PCR. Мутации del/ins (тип 1 и тип 2) гена CALR анализировали методом ПЦР с использованием двух праймеров, фланкирующих 9 экзон. Детекция продуктов ПЦР осуществлялась электрофоретически в агарозном геле с окраской бромистым этидием.
Результаты. В группе ИП был выявлен только один тип мутации — V617F JAK2 с частотой 94,7 %. Среди пациентов старше 50 лет встреча-
