CC BY
7
rebral cortex to 0.06 mg/m3. A concentration of 0,04 mg/m3 proved to inefficient. A chronic 24-hour poisoning with alphamethylstyrol vapours of albino rats for a period of three months showed concentrations of 0.05 mg/m3 to be ineffective. A modern synthetic rubber production plant is the source of atmospheric pollution with alphamethylstyrol to a distance of 4000 m (the maximum single concentration — 0,04 mg/m3).
A concentration of alphamethylstyrol vapours amounting to 0.05 mg/ni is recommended as the maximum permissible single and average daily concentration for the atmospheric air.
УДК 614.777:576.858.5]:628.163
ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЕ ВОДЫ, СОДЕРЖАЩЕЙ АДЕНОВИРУСЫ
А. П. Ильницкий
Кафедра коммунальной гигиены I Московского медицинского института им. И. М. Сеченова и лаборатория этиологии и патогенеза респираторных вирусных инфекций Института вирусологии им. Д. И. Ивановского АМН СССР
Согласно современным представлениям, около 10 видов вирусных заболеваний могут распространяться водным путем. К их числу относятся аденовирусы, первые штаммы которых были выделены Роу с сотрудниками в 1953 г. Сейчас они насчитывают 30 серотипов. Ведущим механизмом передачи аденовирусных инфекций должен быть признан воздушно-капельный. В литературе обсуждалась возможность распространения водным путем лишь 2 заболеваний, вызываемых аденовирусом, а именно адено-фаринго-конъюнктивальной лихорадки (ЛФКЛ) и эпидемического кератоконъюнктивита (ЭКК). Этиологически оба заболевания чаще всего связаны с 3, 4, 7 и 8-м серотипами аденовирусов.
В работах многих авторов (Bell с сотрудниками; Cockburn с сотрудниками; Ormsby и Aitchison; Forsell с сотрудниками и др.) указывается на связь вспышек АФКЛ с купанием в бассейнах. Наличие такой зависимости устанавливалось эпидемиологически.
Более противоречивы данные, свидетельствующие о возможности водного пути распространения ЭКК. Если С. Chang и Н. Chang прямо указывают на связь ЭКК с пользованием бассейнами, то Thydeson это отвергает. Заслуживают внимания сведения о выделении аденовирусов с фекальными массами (Р. С. Дрейзин и В. М. Жданов; Bell с сотрудниками, и др.), а также об обнаружении аденовирусов в сточных водах (Kjelfen с сотрудниками; Chang, и др.).
В нашей работе были использованы аденовирусы человека 3, 4 и 7а типов, аденовирусы обезьян типов М2 (штамм Гл-138), Мз (штамм Г-132) и М< (штамм JI-1), выделенные М. А. Костюковым, аденовирусы обезьян типов М2 и М4, полученные лабораторией этиологии и патогенеза респираторных вирусных инфекций Института вирусологии от д-ра Хьюбнера (США), а также кишечная палочка (штамм № 675). Наличие активного вируса и его количественное содержание в воде мы определяли по цитопатогенно-му действию, заражая каждым разведением вируса (по 0,2 мл) культуру перевиваемых клеток HeLa в 4 пробирках. При бактериальном заражении воды применяли 24-часовую культуру кишечной палочки. Окончательный учет результатов при культивировании вирусов производили на 21—28-й день, при культивировании бактерий после хлорирования -— через 24 часа, а после озонирования — через 48 часов.
Во всех экспериментах использовали автоклавированную водопроводную воду с pH 7,3—7,4. Температура воды в опытах по хлорированию была в пределах 17—23°, в опытах по озонированию — в пределах 14—16°.
Предварительные опыты с аденовирусами 3, 4 и 7а типов показали, что в зависимости от условий выживаемость их колебалась от 13 до 130 дней и более; это свидетельствует о значительной стойкости аденовирусов к воздействию неблагоприятных факторов внешней среды.
Опыты по изучению сравнительной хлороустойчивости аденовирусов человека и обезьян указанных выше типов проведены при разведе-
нии 1 : 103. Концентрация вирусов была равна 3,2- 103—5- 103 1\Х1ХъЫМл > хлорпоглощаемость вирусной взвеси составляла 0,5—1,1 мг/л.
Порядок проведения опытов был следующий. К 90 мл автоклави-рованной водопроводной воды, содержащей хлор, добавляли 10 мл вирусной взвеси в физиологическом растворе до конечного разведения 1:103 (в других опытах 1:104). Все колбы тщательно взбалтывали. Срок контакта равнялся 30 мин., а при изучении динамики инактивации— 10, 20 и 30 мин. Для контроля отбирали пробы воды объемом 2 мл, дехлорировали их гипосульфитом и подвергали вирусологическому исследованию. В оставшемся объеме определяли остаточный хлор. Активный хлор анализировали йодометрическим методом по стандартной методике.
Результаты были обработаны статистически по методу Рида — Менча (получены 50% эффективные дозы остаточного хлора — ЕД 50 мг!л) и по методу Литчфилда — ^илкоксона (величины остаточно-ю хлора, соответствующие ЕД5о, ЕД99 и ЕД99,9Э).
Эксперименты показали выраженное вирулицидное действие хлора на аденовирусы. Результаты опытов, обработанные по методу Литчфилда— Уилкоксона, представлены в табл. 1.
Таблица 1
Сравнительная хлороустойчивость аденовирусов в воде (разведение 1 : 103)
о.® е« * Ч ш к "ее а . 8 О н х х £4
а) к .9 Остаточный хлор (в мгл). ОЦ1 ее о™ 2 "е сО»1 3 8<=
Серотип Штамм • '" 1Г5 о о = * я соответствующий ЕД „ (Р = 0,05) X .X 14 И! я X »■-£& И
К 1
Аденови- 3 Эталонный 3,5 0,46 (0,36 — 0,59) 0,69 0,84
русы че- 7а » 3,7 0,61 (0,53 — 0,71) 0,89 1,07
ловека
м, Г-132 3,5 0,58 (0,52 — 0,64) 0,93 1,13
Аденовирусы обезьян1, м4 Из лаборатории
м2 д-ра Хьюбнера 3,7 0,50 (4,31 —5,80) 0,93 1,19
м4 м, То же Л-1 3.7 1.8 0,32 (0,26 — 0,39) 0,4 —0,52 0,65 0,84
Гл-138 3.7 0,3 —0,42 — —
1 Опыты по хлорированию воды, содержащей аденовирусы обезьян, проведены совместно с М. А. Костюковым.
2 Указана величина остаточного хлора, дающая 100% инактивацию вирусов (по данным эксперимента).
Как явствует из табл. 1, наибольшей устойчивостью (практически одинаковой) обладают аденовирусы человека 7а типа и аденовирусы обезьян типа Мз, штамм Г-132. Аденовирусы человека 3-го типа, как и аденовирусы обезьян типа М2 из лаборатории д-ра Хьюбнера менее хлороустойчивы (различие статистически достоверно). Различие устойчивости аденовирусов обезьян типа М4, присланных д-ром Хьюбнером, при сравнении с хлороустойчивостью аденовирусов человека типа 7а оказалось статистически недостоверным.
Сравнительная хлороустойчивость аденовирусов, содержащихся в малых концентрациях, т. е. в условиях опыта, приближавшихся к практическим, изучалась нами в эксперименте с аденовирусами человека 3-го и 7а типов в разведении 1:104 (хлорпоглощаемость 0,05—0,6 мг/л. концентрация аденовирусов 3,2-102—5-Ю2 ТЦД 5о/ж.<)- Результаты ис-
1 ТЦД50 — тканевая цитопатогенная доза, вызывающая эффект на 50% пробирок
с культурой ткани.
следования приведены в табл. 2. Они говорят о том, что при таком разведении разница в хлороустойчивости аденовирусов человека 3 и 7а гипов не улавливается.
Таблица 2
Сравнительная хлороустойчнвость аденовирусов 3 и 7а типов в вод^(разведение 1 : 104)
Тип вируса Концентрация вируса В ТЦД50х, Остаточный хлор (в мг!л), соответствующий ЕД,0 (Р - 0,05) Остаточный хлор (в мг'л), соответствующий ЕД„„ (Р = 0,01) Остаточный хлор (в мг'л), соответствующий ЕД.,„!и| (Я = 0,001)
3 7а 2,5 2,7 0,24 (0,19 — 0,3 ) 0,26 (0,21 —0,32) 0,55 0,58 0,73 0,76
Это позволило в дальнейших экспериментах выбрать в качестве модельного штамма аденовирусы человека 7а типа.
Следующим этапом нашей работы было сравнительное изучение хлороустойчивости кишечной палочки и выбранного штамма аденовирусов. В этих экспериментах мы заражали воду одновременно кишечной палочкой и аденовирусами. После окончания срока контакта сначала отбирали пробу для вирусологических исследований, а затем — для бактериологического. Величину остаточного хлора определяли в отдельных колбах.
Предварительные опыты с Е. coli № 675 в концентрации 14 000— 22 000 микробных тел в 1 л и аденовирусами 7а типа в разведении 1:104 (концентрация вируса 3,2-Ю2—5-102 ТЦД50;мл) показали, что при таких концентрациях сравнива-
Таблица 3
Эффективность обеззараживания хлором водопроводной воды, содержащей Е. coli и аденовирусы 7а типа
Величина остаточного хлора (в мг'л) E.coli № 675 (14 000 - 22 000 микробных тел в 1 л) Аденовирусы 7а типа (разведение 1:10')
0,1 + + + + +
0,2—0,25 + + + 1 +
0,3 + + + * —
0,4 + + — — +
0,5 — — — 1 ~Г
0,6
емые штаммы обладают близкой хлороустойчиво-стью (табл. 3). Правда, при этом количество вируса превосходило концентрацию кишечной палочки примерно в 15—36 раз.
Однако ввиду разной чувствительности вирусологических и бактериологических методов исследования мы не сочли возможным сделать на основании этих опытов окончательный вывод о сравнительной хлороустойчивости аденовирусов и кишечной палочки.
Дальнейшие эксперименты были направлены на изучение динамики инактивации обоих штаммов при обеззараживании воды хлором. В опыт брали кишечную палочку и аденовирусы в примерно равных концентрациях (Е. coli № 675—lg микробных тел в 1 Л1л = 2,5; аденовирус 7а типа —lg 1\\1\ьо,мл =2,4—2,5). Как показали эти исследования, степень падения концентрации вируса была больше степени падения концентрации кишечной палочки (рис. 1). В обоих случаях после 30 мин. контакта активный вирус не обнаруживался, тогда как жизнеспособная кишечная палочка выделялась и после этого срока. Таким образом, будучи в примерно равной концентрации с кишечной палочкой, аденовирусы обладают, по-видимому, меньшей устойчивостью к хлору. Но так
Обозначения: здесь и далее знаком плюс показано наличие вируса или кишечной палочки; знаком минус — отсутствие вируса или кишечной палочки.
как в натурных условиях содержание Е. coli значительно выше содержания вирусов, при обеззараживании содержащей аденовирусы воды активным хлором кишечная палочка тем более сохраняет значение санитарно-показательного микроорганизма.
Известно, что озонирование как один из методов улучшения качества воды и средства ее обеззараживания находит все большее примене-• ние в практике. Этим в значи-
тельной степени объясняется целесообразность выяснения роли кишечной палочки как санитарно-показательного микроорганизма при обеззараживании озоном воды, зараженной аденовирусами. В связи с этим мы провели исследования с помощью озонирующей установки, разработанной в лаборатории катализа и газовой электрохимии Московского университета и модифицированной на кафедре коммунальной гигиены I Московского ордена Ленина медицинского института. Озонирование вирусно-бактериальной взвеси осуществляли добавлением заранее приготовленной озон-содержащей воды, которую готовили барботированием озо-но-кислородной смеси через О столб дистиллированной воды, охлажденной до 5—7°, в тече-67°0 ? ние 20—30 мин. во ^ Автоклавированную водо-^ проводную воду, содержащую | аденовирусы (7а тип) и ки-~9д? 1 шечную палочку (№ 675), раз-
98 | ливали (по 50 мл) в колбы
99 § объемом 100 мл с притертыми пробками. К взвеси добавляли озонсодержащую воду (10 мл). Через 2'/г, 5 и 10 мин. контакта отбирали пробы для вирусологических и бактериологических исследований. Параллельно в специально предназначенных для этого колбах, содержащих такое же количество вирусно-
бактериальной взвеси и озона, определяли остаточный озон. Активный озон исследовали йодометриче-ским методом.
Результаты экспериментов свидетельствуют о том (рис. 2), что озон обладает сильным вирулицидным действием, причем наибольшее снижение концентрации обоих исследованных штаммов происходит в в первые 2'/г мин. Степень падения концентрации штаммов, находящихся в примерно равной концентрации (в первом случае Е. coli № 675— lg микробных тел в 1 мл = 2,2; аденовирусы— lg ТЦД ъа/мл =2,6; во втором случае Е. coli — lg микробных тел в 1 мл = \,Ь, аденовирусы lg
ю 20
время ( 0 минутах.
Рис. 1. Динамика инактивации хлором аденовирусов и кишечной палочки.
Результаты I серии опытов: остаточный хлор 0,3 мг/л; 1 — кишечная палочка; 2 — аденовирусы; результаты II серии опытов: остаточный хлор 0,5 мг/л; 3— кишечная палочка; 4 — аденовирусы; стрелка — более не выделяли.
1' !>
-996 -931
г? 5 ю
время /в минутах)
Рис. 2. Динамика инактивации озоном аденовирусов и кишечной палочки. Результаты I серии опытов: I — кишечная палочка; 2—аденовирусы; результаты II серии опытов: 3 — кишечная палочка; 4 — аденовирусы; стрелка — более не выделяли.
ТЦД50/лд = 1,7), наглядно свидетельствует о большей озоноустойчиво-сти кишечной палочки. Следовательно, кишечная палочка может служить надежным показателем эффективности обеззараживания озоном воды, содержащей аденовирусы.
Сопоставление эффективности обеззараживающего действия хлора и озона на аденовирусы, основанное на наших наблюдениях, невозможно, так как эксперименты проводились нами в разное время и при различных условиях.
Выводы
1. Аденовирусы 3, 4 и 7а типов способны длительное время (более 10 дней) сохранять активность в нестерильной водопроводной воде и в пруду.
2. Хлор и озон обладают выраженным инактивирующим действием в отношении аденовирусов.
3. Группа аденовирусов с точки зрения их хлороустойчнвости неоднородна.
4. Кишечная палочка может служить показателем эффективности обеззараживания хлором и озоном воды, содержащей аденовирусы.
ЛИТЕРАТУРА
Дрейзин Р. С., Жданов В. М. Аденовирусные инфекции. М., 1962.— Bell J. A., Rowe W. P. et al„ I. A. M. A., 1955, v. 157, p. 1083.— Chang С. E„ Chang H. L., Shin. med. J., 1951, v. 69, p. 488. — С h a n g S. L., J. Am. Water Works Ass., 1961, v. 53, p. 288,— С о с k b u г n T. A. et al., Am. J. Hyg., 1956, v. 63, p. 250. — Forssell P. et al., Ann. Med. exp. Fenn., 1965, v. 34, p. 287,— К j e 11 e n L. et al., Acta paediat. (Uppsala), v. 46, p. 561,—Ormsby H. L., Aitchison W. S., Canad. med. Ass. J., 1955, v. 73, p. 864. — T h у g e s о n P., Am. J. Ophthal., 1957, v. 43, p. 98.
Поступила 21/IX 1965 r.
DECONTAMINATION OF WATER CONTAINING ADENOVIRUSES
A. P. Ilnitsky
It was demonstrated experimentally that adenoviruses are capable to retain their activity in artificially contaminated water for a long period of time. The author studied the inactivation with chlorine and ozone of adenoviruses present in water at different concentrations. The finding was that the B. coli retains its sanitary significance for disinfection of water contatining adenoviruses.
УДК 613.644
О ДЛИТЕЛЬНОМ ДЕЙСТВИИ ШУМА ДОПУСКАЕМЫХ ПАРАМЕТРОВ НА СЛУХ РАБОТАЮЩИХ
Л. И. Максимова, П. С. Кубланова, В. П. Майоров, К. А. Дмитриева Московский научно-исследовательский институт гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
Неблагоприятное действие на слух предельно допустимых параметров шума отмечалось многими авторами. Так, исследования, проведенные А. А. Аркадьевским, показали, что действие шума интенсивностью 100, 95, 85 и 75 дб с максимальной энергией на частотах соответственно 200, 600, 1250 и 4000 гц в течение 1 часа утомляет слух. Аналогичные экспериментальные данные получены С. В. Алексеевым. При длитель-
