Новые рН-чувствительные производные тиомочевины как диагностические и цитостатические препараты Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»



МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 43

Ю.С. Маклыгина1, Г.М. Юсубалиева2, В.М. Малинников1, О.О. Красновская1, Е.К. Белоглазкина1, И.Д. Романишкин1, Е.В. Ахлюстина3, А.В. Рябова1, Д.А. Скворцов1, А.В. Бачева1, Н.В. Зык1, А.Г. Мажуга12 3 В.П. Чехонин2, В.Б. Лощенов13 новыЕ рн-чувСГвительныЕ Производные спектрально-флуоресцентный метод тиомочЕвины как диагностические идентификации и цитостатические препараты оПУХолЬАССоЦиировАнныХ макрофагов Химический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова, ФГБУН ИОФ РАН, Москва, Россия; Москва, Россия; 2ФГБУ«НМИЦпсихиатрии и наркологии им. В.П. Сербского» 2НИТУ«МИСиС», Москва, Россия; Минздрава России, Москва, Россия; 3РХТУ им. Д.И. Менделеева, Москва, Россия 3Национальный исследовательский ядерный университет введение. В развитых странах по количеству смертель-«МИФИ», Москва, Россия ных исходов злокачественные новообразования в настоя-введение. Различие в метаболических процессах в клет- щее время занимают 2-е место. В последние десятилетия ках, которыми непосредственно связывается фотосенси- было разработано множество химиотерапевтических аген-билизатор (ФС), позволяет спектрально-флуоресцентными тов различных классов: комплексные соединения платины, методами по различию времени жизни флуоресценции ФС производные тетрациклина, аналоги нуклеотидов и другие. судить о степени его взаимодействия с клеточными ком- Применяемые на настоящий момент в клинической пра-понентами и идентифицировать тем самым тип клеток. ктике цитостатические препараты являются эффективны-Цель исследования. Выделить среди микроокружения ми средствами химиотерапии злокачественных новообра-опухоли опухольассоциированные макрофаги, которые зований, при этом, однако, обладают рядом серьезных являются привлекательными мишенями, в целях успеш- недостатков: неоптимальным фармакокинетическим про-ного использования потенциала нормальной иммунной филем, низкой селективностью по отношению к опухоле-системы для терапии. вым клеткам, высокой общей токсичностью. В связи материалы и методы. Для исследования кинетики фо- с этим ведется активная работа по созданию систем адрес-толюминесценции ФС был использован измерительный ной доставки цитотоксических препаратов в клетки злока-комплекс, основанный на стрик-камере с пикосекундным чественных новообразований. Таковыми являются проле-временным разрешением (15 пс) Hamamatsu C10627—13, карства — неактивные в среде организма производные сопряженный с полупроводниковым лазером Hamamatsu лекарственного препарата, под действием метаболических с длительностью импульса 67 пс и с длиной волны 633 нм. процессов переходящие в активную форму. Известно, Серия экспериментов была проведена на половозрелых что злокачественные новообразования обладают рядом самках крыс c массой тела 200 ± 10 г, у которых моделиро- особенностей. Так, межклеточное пространство опухоле-вали мультиформную глиобластому путем имплантации. вой ткани имеет рН = 6,2—7,0, в то время как в здоровых В качестве ФС в работе использовали 5-АЛК индуциро- тканях рН = 7,2—7,4. В связи с этим логичным шагом яв-ванный Пп IX в концентрации 100 мг/кг. ляется создание рН-чувствительных пролекарств на осно- результаты. В результате методом время-разрешенной ве известных химиотерапевтических агентов. спектроскопии было установлено 3 компоненты времени Цель исследования. Синтез рН-чувствительных диаг-жизни флуоресценции Пп IX в условиях in vivo с характер- ностических и терапевтических агентов на основе тиомо-ными средними значениями 6, 1 и 0,2 нс. Каждая из полу- чевины, а также изучение их биологической активности. ченных компонент времени жизни флуоресценции харак- материалы и методы. Структура синтезированных про-теризуются захватом ФС определенным типом клеток, изводных тиомочевины установлена методами спектроско-что связано с различием в их метаболизме и фагоцитозе. пии ЯМР 'Н, масс-спектрометрии высокого разрешения. Заключение. Таким образом, в перспективе при одноз- Спектры флуоресценции зарегистрированы с помощью начной идентификации различных типов клеток по вре- прибора Varian Cary Eclipse Fluorescence Spectrophotometer. мени жизни флуоресценции ФС, в том числе опухольас- результаты. В ходе работы был синтезирован ряд про-социированных макрофагов, планируется проведение изводных тиомочевины, способных к циклизации в слабоцелевой фотодинамической терапии, направленной на кислой среде. Одно из них представляло собой FRET-пару разрушение опухольассоциированного микроокружения, с Xex = 350 нм A,fl = 518 нм, распадающуюся в кислой среде защищающего клетки опухоли от нормального иммунного с изменением спектра флуоресценции. Методом флуори-ответа. метрии была подтверждена гипотеза о способности сте-Работа выполнена в ИОФ РАН в соответствии рически нагруженных производных тиомочевины к цик-с госзаданием П. 11. Тема № 01200953447Биомедицинская лизации в кислой среде, а также исследована кинетика физика (рук. В.Б. Лощенов). данного процесса. Были также получены ковалентные конъюгаты доксорубицина и паклитаксела с молекулой-предшественником антиконвульсивного препарата альбу-тоина, способные в кислой среде опухолевых клеток высвобождать оба терапевтических агента. Заключение. В результате работы были получены новые рН-чувствительные диагностические и терапевтические агенты на основе способных к циклизации производных тиомочевины. Данные соединения показали высокую

Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

44

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

эффективность in vitro и являются перспективными кандидатами для испытаний in vivo.

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (проект № 16-33-60166).

Е.В. Маркарова, Л.М. Когония, Г.А. Сташук, О.А. Королева ЭФФЕКТИВНОСТЬ АФАТИНИБА В 3-й ЛИНИИ ТЕРАПИИ АДЕНОКАРЦИНОМЫ ЛЕГКОГО С МУТАЦИЕЙ EGFR У 82-ЛЕТНЕй ПАЦИЕНТКИ

ГБУЗ МО «МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского», Москва, Россия

Цель исследования. Оценить эффективность назначения афатиниба у больной немелкоклеточным раком легкого при наличии в анамнезе 2 линий химиотерапии (ХТ).

Материалы и методы. За период 2016—2017 гг. наблюдались 13 пациентов: у всех больных имело место улучшение общего самочувствия и состояния на фоне проводимой терапии. Наиболее впечатляющий объективно регистрируемый эффект был получен у пациентки 1936 г. р., у которой на 1-м этапе был диагностирован бронхоальвеолярный рак легких с лимфогенным канцероматозом, метастатическим поражением левого надпочечника, печени и костей скелета, кахексией. Исследование на EGFR-мутацию на начальном этапе не проводилось. Без эффекта было проведено 2 курса паллиативной ХТ с использованием карбоплати-на + этопозида, затем проведено 2 курса паллиативной ХТ с использованием карбоплатина + алимпты. Также проводилась терапия с использованием бисфосфонатов (зомета) и таргетная терапия авастином (2 введения). Лишь при последующем молекулярно-генетическом исследовании была выявлена EGFR-мутация в 19-м экзоне и назначена таргетная терапия препаратом афатиниб в дозе 40 мг/сут.

Результаты. У пациентки 81 года с диагностированной аденокарциномой легких с мутацией EGFR, на фоне проводимой таргетной терапии EGFR, по результатом контрольного исследования (КТ органов грудной клетки и органов брюшной полости) через 6 мес от начала терапии наблюдалось уменьшение количества полиморфных очагов, зон альвеолярной инфильтрации в обоих легких и регресс дополнительного узлового образования в S6 нижней доли левого легкого, уменьшение количества и размеров очагов в печени. Субъективно — улучшение общего состояния и увеличение массы тела на 8 кг. Период наблюдения составляет 11 мес. Стабилизация достигнутого эффекта.

Заключение. Назначение афатиниба возможно даже пожилым пациентам при наличии EGFR-мутации и является эффективным лечением аденокарциномы легких.

М.А. Мартынова, И.М. Бушмакина, Н.А. Шуканова, М.М. Молчан ВЛИЯНИЕ НАНОЛИПОСОМАЛЬНОЙ ФОРМЫ ПАКЛИТАКСЕЛА НА ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ ЖЕНСКИХ РЕПРОДУКТИВНЫХ ОРГАНОВ Институт биофизики и клеточной инженерии НАН Беларуси, Минск, Беларусь

Введение. Паклитаксел занимает особое место среди эффективных противоопухолевых химиопрепаратов. Он

обладает высокой терапевтической активностью при лечении рака молочной железы (РМЖ), яичников, головы и шеи, а также успешно применяется в случае злокачественных новообразований, не поддающихся традиционной химиотерапии, таких как ранее обработанная лимфома, мелкоклеточные раковые заболевания легких, опухоли пищевода, желудочного эндометрия, мочевого пузыря и т. п. Однако паклитаксел имеет крайне низкую растворимость в воде, что затрудняет получение подходящей лекарственной формы. Используемые для инъекций растворы пакли-таксела обладают гипераллергенностью за счет комплексного растворителя, а само активное вещество вызывает подавление функции костного мозга, лейкопению, тром-боцитопению, анемию и другие виды токсичности, поэтому можно ожидать, что его липосомальная форма существенно снизит токсичность и аллергогенность препарата не в ущерб терапевтической эффективности, что, безусловно, является крайне актуальной задачей.

Цель исследования. Изучение влияния различных форм нанолипосомального паклитаксела на ферментативную активность клеток эпителиальной карциномы шейки матки человека HeLa и клеток РМЖ в первичной культуре.

Материалы и методы. Униламеллярные липосомы, содержащие паклитаксел, получали методом ультразвукового диспергирования с использованием зарядформирующих минорных компонентов. Первичную культуру РМЖ человека вели по разработанному нами ранее методу. Активность аце-тилхолинэстеразы в клетках HeLa и РМЖ определяли с использованием реактива Эллмана, белок в клеточной суспензии определяли по модифированному методу Лоури.

Результаты. Установлено, что незаряженные липосомы без паклитаксела (контроль) и включенный в такие липо-сомы препарат при сравнении с инъекционной формой паклитаксела действовали на ацетилхолинэстеразу клеток Не^ и клеток РМЖ в первичной культуре аналогично. Таким же образом влиял и положительно заряженный на-нолипосомальный паклитаксел при использовании в качестве зарядформирующего минорного компонента цетил-триметиламмоний бромида. Паклитаксел, включенный в положительно заряженные липосомы, где заряд формировали включением стеарилэтаноламида, незначительно (до 10 %) ингибировал активность ацетилхолинэстеразы опухолевых клеток. В то же время при инкубации клеток с паклитакселом, включенным в отрицательно заряженные липосомы, содержащие в качестве минорного компонента стеариновую кислоту, наблюдалось ингибирование активности ацетилхолинэстеразы клеток Не^ и РМЖ в первичной культуре до 30 %. При этом следует отметить, что инкубация клеток в течение уже 3 ч с такой формой нанолипосомального паклитаксела приводила к снижению жизнеспособности злокачественных клеток в 2 раза. Возможно, полученные результаты исследования обусловлены тем, что отрицательно заряженный нанолипосомальный пакли-таксел, как было показано нами ранее, наиболее эффективно инкорпорирует активное вещество и более стабилен.

Заключение. Паклитаксел, включенный в нанолипосо-мы с отрицательным зарядом, обладает наибольшим инги-бирующим влиянием на жизнеспособность и ферментативную активность опухолевых клеток.

Спецвыпуск / том 17 / 2018

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ