Новые лекарственные препараты Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

НОВЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ПРЕПАРАТЫ

Т. А. Абдылдаев1, С. Ш. Найзабекова , Н. М. Жанбасинова , С. М. Адекенов2

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ АРГЛАБИНА В ТЕРАПИИ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ

1 Национальный центр онкологии Кыргызской Республики, Бишкек 2Научно-производственный центр «Фитохимия» МОНРК, Караганда

Цель исследования. Изучение эффективности применения аргла-бина у больных раком шейки матки.

Материалы и методы. В исследование были включены 6 больных с впервые установленным диагнозом рака шейки матки ІІб-ІІІб стадий, из них 4 больных со ІІб стадией, 2 - с ІІІб стадией заболевания. Диагноз гистологически верифицирован, у всех 6 больных установлен плоскоклеточный неороговевающий рак. Возраст больных колебался от 31 до 57 лет (медиана 56,3 года).

Неоадъювантная химиотерапия проводилась по клиническому протоколу №1, разработанному в отделении противоопухолевой лекарственной терапии Национального центра онкологии с включением 5 фторурацила бООмг/м2 в 1-5-й дни, карбоплатина 450мг в/в капель-но - 6-й день. Препарат арглабин вводился в дозе 5 мг/кг веса внутривенно после окончания курса химиотерапии с 1-го по 7-й день. Из 6 больных 2 курса комбинированной терапии с арглабином получили 3 больных, соответственно остальные 3 - по 1 курсу. Эффективность проведенного лечения оценивалась по стандартным критериям ВОЗ с использованием клинических и ультразвуковых методов.

Результаты. Полной регрессии опухоли не наблюдали ни у одной пациентки, частичная регрессия достигнута у 5, стабилизация процесса у 1 больной, прогрессирования заболевания не отмечалось. При повторной биопсии опухоли шейки матки после 2 курсов комбинированной терапии лечебный патоморфоз опухоли отмечен у 2 больных.

Выводы. Включение в неоадъювантную химиотерапию препарата арглабин при раке шейки матки положительно влияет на непосредственные результаты лечения, потенциирует противоопухолевый эффект проводимой лекарственной терапии.

Н. А. Агзамова, С. К. Гойибова, Т. М. Фузаилова, З. М. Еникеева

ИЗУЧЕНИЕ РАДИОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ДЭКОЦИНА НА ОПУХОЛЕВОМ ШТАММЕ АКАТОЛ ПРИ ОДНОКРАТНОМ ПРИМЕНЕНИИ

Республиканский онкологический научный центр МЗ РУз, Ташкент

Задачи исследования. Поиск новых радиосенсибилизаторов и, тем более, радиосенсибилизаторов с противоопухолевым действием остается актуальным для теоретической и клинической онкологии. Дэкоцин -новый противоопухолевый препарат, в настоящее время внедряемый в практику здравоохранения. Изучение его радиомодифицирующей активности на интактных мышах показало, что он обладает способностью увеличивать действие облучения и обладает ФИД 0,75. В задачи исследования входило изучение радиосенсибилизирующей активности Дэ-коцина на животных с перевитым штаммом АКАТОЛ при однократном введении препарата за различное время до облучения.

Материалы и методы. Радио сенсибилизирующее действие Дэ-коцина изучалось на животных с перевитыми штаммами АКАТОЛ через 10 сут после инокуляции опухолей. Дэкоцин вводили в дозе 48 мг/кг (доза, вызывающая 50% противоопухолевый эффект при 1-кратном применении препарата), затем через определенное время (через 15 мин, 1; 6; 16 и 24 ч) животных каждой группы облучали на аппарате «ТНЕКАТКОЫ« с мощностью 112 с Гр/мин, источник Со60 в дозе равной 6 Гр, защищая животных свинцовыми пластинами со специальным отверстием. Животных забивали через 11 сут после окончания опыта, исследовали кровь и замеряли массу тела, опухоли и селезенки, исследовали иммунологический статус.

Результаты. Для установления оптимального времени введения препарата Дэкоцин перед облучением, препарат вводился в дозе 48 мг/кг за 15 мин, 1; 6; 16 и 24 ч до однократного облучения в дозе 6 Гр. Получен эффект торможения роста опухолей одного облучения -52,1 %, за 15 мин - 77,98 %, за 1 ч - 61,01 %, за 6 ч - 57,76 %, за 16 -90,25 % и за 24 ч 81,13 %. Изучение гематологических показателей показало не выраженное снижение гемоглобина во всех группах, но количество лейкоцитов, в зависимости от времени введения препарата до облучения было следующим: в контрольной группе опухолено-сителей - 4267, в группе с одним облучением - 1717, в группе, получившей Дэкоцин, - 2545; в группах, получивший Дэкоцин за 15 мин до облучения - 600, за 1ч - 2105, за 16 ч - 992, за 24 ч - 2147.

Выводы. Изучение влияния Дэкоцина на рост опухоли АКАТОЛ совместно с однократным облучением показало, что оптимальным временем введения препарата перед облучением является 16 и 24 ч.

Н. А. Агзамова, С. К. Гойибова, Т. М. Фузаилова, З. М. Еникеева

ИЗУЧЕНИЕ РАДИОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ДЭКОЦИНА НА РАЗЛИЧНЫХ ОПУХОЛЯХ ПРИ МНОГОКРАТНОМ ПРИМЕНЕНИИ

Республиканский онкологический научный центр МЗ РУз, Ташкент

Задачи исследования. Изучение влияния Дэкоцина на рост опухоли АКАТОЛ совместно с 1-кратным облучением показало, что оптимальным временем введения препарата перед облучением являются 16 и 24 ч. В задачи исследования входило изучение радиосенсибилизирующей активности Дэкоцина на животных с перевитыми штаммами АКАТОЛ, АКАТОН и Меланома В16 при многократном применении.

Материалы и методы. Радиосенсибилизирующее действие Дэ-коцина изучалось на животных с перевитыми штаммами АКАТОН, АКАТОЛ и меланома В16 через 2 и 10 сут после инокуляции опухолей. Опытным группам вводили Дэкоцин в дозе 48/4=12 мг/кг, затем через 16 ч животных облучали на аппарате «ТНЕКАТЯОК» мощностью 112 с Гр/мин, источник Со60 в дозе, равной 6 Гр, ежедневная доза, разбитая на 4 дня, - 1,5 Гр, защищая животных свинцовыми пластинами со специальным отверстием. Животных забивали не ранее, чем через 7 сут после окончания опыта, исследовали кровь и замеряли массу тела, опухоли и селезенки, исследовали иммунологический статус.

Результаты. Опухоли в зависимости от их вида по-разному реагируют на одну и ту же дозу облучения (% ТРО на АКАТОНе -

52,0 %, АКАТОЛе - 56,45 % и Меланоме - 73,8%), и препарата, однако сочетание препаратов с облучением дает более выраженный эффект торможения роста (80 % - АКАТОН, 80-96 % - АКАТОЛ и 9699 % - Меланома). Этот эффект вызван, по-видимому, способностью препарата накапливать клетки в фазе М+G2, что способствует дальнейшему повреждению их облучением.

Выводы. Изучение воздействия Дэкоцина совместно с облучением при 4-кратном введении показало, что препарат достаточно интенсивно увеличивает действие облучения у всех исследованных опухолей.

Д. А. Алиева, Л. И. Миркамалова, З. М. Еникеева ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ПОТЕНЦИАЛЬНОГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ПРЕПАРАТА К-48

Республиканский онкологический научный центр МЗ РУз, Ташкент

Задачи исследования. Изучение биологических свойств новых производных колхицина и колхамина, обладающих выраженной активностью и малой токсичностью, показало, что после проведенной терапии при внутрибрюшинном и пероральном применении некоторые из них увеличивали количество АОК. Нами это связано с их спо-

собностью к стимуляции КОЕс. Задачей исследования стало изучение иммуномодулирующей активности одного из них - К-48 (ЛД50 1440(в/бр), 9600(per 0s) мг/кг) после внутрибрюшинного (100 и 1мг/кг) и перорального (500 и 1 мг/кг) введения животным-опухоленосителям с перевивным штаммом АКАТОЛ.

Материалы и методы. Введение препарата начато через 48 ч после перевивки опухоли АКАТОЛ, 10 введений. В системе in vivo были изучены показатели иммунного статуса в циркулирующей крови животных в день забоя (на 8-й день после последней инъекции) согласно методическим рекомендациям Института иммунологии РФ. Также изучалась фагоцитарная активность нейтрофиллов по способности их фагоцитировать нейтральные частицы латекса. С помощью реакции торможения миграции лимфоцитов (РТМЛ) по микрокапиллярам (Л. И. Миркамалова, А. В. Маджидов, Р. М. Рузыбакиев и др.,1999) определяли спонтанную миграцию лейкоцитов периферической крови (СМ ПК), активность спонтанных цитокинов (СЦ), сФУМ и СФСМ, активность Т-лимфоцитов.

Результаты. После воздействия препарата К-48 (в/бр,100мг/кг, ТРО 96,2 %) выявлено его защитное действие на снижение регуляторных CD4 (Т-хелперы) и нарастание CD8 (Т-супрессоры), что обусловливает нормализацию показателей иммунорегуляторного индекса (ИРИ) до 1,42, которая ведет к усилению противоопухолевой защиты организма. Также отмечено повышение активности естественных факторов защиты организма. Введенный перорально в дозе 500 мг/кг К-48 способствует достоверному увеличение общих лимфоцитов, но снижению процента CD3. К-48 в дозе 1 мг/кг (per os, ТРО 44,7 %) способствует увеличению количества общих ИКК, субпопуляции CD3+, CD4+-клеток, а также нормализации соотношения CD4/ CD8 (ИРИ=1,71) с повышением количества CD16+, ФАН и СМЛ ПК, осуществляющих 1-ю линию противоопухолевой защиты; кроме того, повышается функциональная активность Т-лимфоцитов.

Вывод. Исследования К-48 показали его положительное воздействие на уровень и соотношение параметров иммунного статуса после проведенного лечения, при этом степень и направленность их зависит от дозы и способа введения препарата.

С. А. Беляев1, П. М. Бычковский1 , Т. Л. Юркштович1,

Ф. Н. Капуцкий1 , А. А. Кладиев2 ПРОЛОНГИРОВАННАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА ПРОСПИДИНА

1 НИИ физико-химических проблем Белгосуниверситета, Беларусь, Минск

2ООО Биотехнологическая компания ТНК, Москва

При лечении онкологических больных хирургические методы сочетают с лучевой и лекарственной терапией. В последние годы синтезировано множество противоопухолевых лекарственных препаратов, благодаря которым появилась возможность повысить эффективность лечения отдельных видов онкологических заболеваний, значительно продлить жизнь больных или даже обеспечить их полное выздоровление. Одним из таких препаратов является проспидин.

Согласно литературным источникам, он имеет малую токсичность, хорошо переносится больными, не действует угнетающе на кроветворение и, кроме того, имеет большую терапевтическую широту. Поэтому представляется целесообразным изучить возможность создания полимерной лекарственной формы пролонгированного действия монокарбоксилцеллюлоза (МКЦ)-проспидин. В связи с этим была изучена природа сорбционного взаимодействия проспидин-МКЦ.

Установлено, что процесс сорбции проспидина МКЦ из водных и водноорганических растворов описывается аналогом уравнения Лэнгмюра. Были рассчитаны константы сорбционного равновесия, предельной сорбционной емкости, коэффициенты межфазного равновесия и значения свободной энергии сорбции. Показано, что основной тип взаимодействия, который реализуется в системе МКЦ-проспидин, - ионный обмен, что подтверждается данными ИК-спектров и уменьшением значений рН равновесных растворов по сравнению с исходными.

Для первичной оценки возможности пролонгации действия про-спидина, иммобилизованного МКЦ, был изучен релиз проспидина из фазы МКЦ в физиологический раствор при температуре (310±1) К в статических условиях. Показано, что процесс высвобождения состоит

из 2 стадий: быстро протекающей начальной и медленно протекающей конечной, причем 1-я плавно переходит во 2-ю. Переход от начальной стадии в конечную продолжается приблизительно 200 мин и завершается высвобождением около 20 % насыщающего количества проспидина. 2-я стадия протекает медленно и практически с постоянной скоростью до полной биодеградации полимера, что обеспечивает постоянную «подпитку» проспидином пораженного органа и создает эффект пролонгированного действия.

Л. М. Борисова1, И. Ю. Кубасова1, М. П. Киселева1 ,

З. C. Смирнова1 Н. А. Санинеа, С. М. Алдошин2, Т. Н. Руднева2 ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ ТЕТРАНИТРОЗИЛЬНОГО КОМПЛЕКСА ЖЕЛЕЗА С ИМИДАЗОЛ-2-ИЛОМ

}ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва 2Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка

Введение. Нитрозильные комплексы железа с серосодержащими гетероциклическими лигандами являются синтетическими моделями нитрозильных биядерных [2Fe-2S] и моноядерных [1Fe-2S] протеинов, образующихся in vivo при действии эндогенного NO на активные центры железо-серных белков. Синтез, изучение физико-химических свойств и биологической активности этих соединений - аналогов биорезервуаров монооксида азота (NO) в клетках живых организмов важны как с точки зрения изучения механизмов действия NO, так и для создания нового поколения доноров NO с целью химиотерапии опухолей. Монооксид азота влияет на апоптоз опухолевых клеток, активность гена р53, новообразование сосудов и другие мишени. Эти свойства NO послужили основанием для изучения противоопухолевой активности соединений, генерирующих оксид азота.

Цель исследования. Оценить противоопухолевую активность биядерного тетранитрозильного комплекса железа, содержащего гетероциклический лиганд: 2-меркапто-имидазол - структурный аналог природных меркаптогистидинов.

Материалы и методы. Противоопухолевую активность соединения изучали на перевиваемых опухолях мышей: лимфолейкозе Р-388, аденокарциноме молочной железы Са-755 и меланоме В-16. Критериями эффективности служили: торможение роста опухоли (ТРО, %) и увеличение продолжительности жизни опытных животных по сравнению с контрольными (УПЖ, %). Соединение вводили внутрибрю-шинно в течение 5 дней в широком диапазоне доз.

Результаты. Показано, что соединение проявляет статистически значимый противоопухолевый эффект в дозах 10; 50 и 75 мг/кг на Са-755 (ТРО = 53 %, 55 % и 69 % соответственно) и меланоме В16 в тех же дозах (ТРО = 75 %, 49 % и 65 % соответственно). В то же время на меланоме В16 не выявлено прямой зависимости противоопухолевого эффекта соединения от дозы.

Выводы. Учитывая, что тетранитрозильный комплекс железа с имидазол-2-илом проявил статистически значимую противоопухолевую активность на Са-755 и меланоме В16, целесообразно продолжить изучение его терапевтической эффективности в отношении других перевиваемых опухолей.

Н. В. Бочкова, К. Ж. Мусулманбеков, В. Б. Сирота,

Е. В. Кострова, Н. Л. Целикова ПРИМЕНЕНИЕ АРГЛАБИНА КАК РАДИОМОДИФИКАТОРА ПРИ РАКЕ ЛЕГКОГО

Карагандинская государственная медицинская академия КГКП «Карагандинский областной онкологический центр», Казахстан, Караганда

Задачи исследования. Определить возможность применения арг-лабина при лучевой терапии (ЛТ) динамическим фракционированием дозы у больных раком легкого (РЛ).

Материалы и методы. Проанализированы результаты лечения 24 больных РЛ. Средний возраст их составил 58,4 лет, со 2-й стадией опухолевого процесса - 2 больных, с 3-й - 22. У всех больных - плоскоклеточный рак разной степени ороговения. Все пациенты получали ЛТ динамическим фракционированием: первые 3 дня РОД - 4 Гр 1 раз в день. Далее метод мультифракционирования: РОД - 1,2 Гр 2 раза в день с интервалом 4,5 ч 9 дней. На 1-м этапе лечения доза составляет СОДфиз=33,6, СОДэкв=36 Гр. Перед лучевым лечением за 40 мин до сеанса ежедневно вводили внутривенно 2%-ный раствор

43 НОВЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ПРЕПАРАТЫ

арглабина из расчета 185 мг/м2 10 дней. Через 10-12 дней указанный лось полное восстановление SCN-группы с образованием В12Н^Н2', курс повторяли. За 2 курса ЛТ к опухоли подводится СОДфиз=67,2 хотя и с малым выходом. Гр, что эквивалентно СОД=70 Гр. Общее количество внутривенных введений арглабина - 20. Суммарная доза препарата варьирует от И. С. Буренин, Н. И. Полянская, З. В. Кузьмина 5500 до 9000 мг. Непосредственный клинический эффект оценивали НОВЫЕ ПОДХОДЫ К КОМПЛЕКСНОЙ согласно рекомендациям ВОЗ. ЭНДОКРИНОтеРАПИИ РАКА Результаты. Из 22 больных РЛ, взятых на ЛТ с арглабином, пол- ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ный курс получили только 10. Остальным 12 пациентам пришлось ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва прекратить лечение из-за распада опухоли, выявления метастазов в Введение. В настоящее время консервативное лечение рака легкое или кости, появления кровохарканья. В группе больных, полу- предстательной железы обеспечивают следующие направления: чивших полный курс лечения, полный регресс опухоли был отмечен антигормоны, такие, как флутамид, аналоги гипоталамических ри-у 1 пациента, частичный - у 8, у 1 пациента отмечена стабилизация лизинг гормонов - супрефакт, золадекс, бузерелин, лейпролид, хи-процесса. Таким образом, положительный клинический эффект на- мио- и иммунотерапия. Большие надежды возлагаются на примене-блюдали у 9 больных. Ни у одного больного не оказалось лейкопе- ние антиоксидантов. Их существует большое количество, но до сих нии. Средний объем опухоли до лечения составил 253,6+1,8 см3, по- пор не найден препарат, значительно повышающий противоопухо-сле лечения - 78,6+1,0 см3. Необходимо отметить лучшую клиниче- левый эффект гормонального и химиотерапевтического воздейст-скую переносимость лучевого лечения при использовании арглабина. вия на опухоль. Со стабилизацией процесса живут 5 больных после лечения более 16 Задачи исследования. Сравнительное изучение противоопухоле-мес. Продолжающийся рост опухоли диагностировали у 2 пациентов вого действия такого антиоксиданта, как фуллерен-С6о (новая алло-через 4 и 12 мес, у 1 - через 1,5 мес наблюдали распад опухоли с кро- тропная форма углерода), и антиоксидантов, синтезированных из ми-вотечением, у 1 пациента через 8 мес метастазы в противоположное целия грибов - миколикопина, ликопина, фитофлуина, фитоина. легкое, 1 больной умер от прогрессирования через 5 мес. Материалы и методы. Исследование выполнено на крысах ли-Выводы. Возможно применение арглабина в монорежиме у боль- нии АСІ с перевитой аденокарциномой предстательной железы, опу-ных РЛ с целью улучшения переносимости ЛТ. Данное исследование холью, адекватной клинке по морфологии и реактивности на гормо-требует дальнейшего продолжения. нальные воздействия, а также на мышах линии С3 Н с перевитым раком молочной железы. Крысам с перевитой аденокарциномой В. А. Братцев1, р. А. Спрышкова2 Е. Ю. Колдаева2, предстательной железы вводили путем принудительного кормления Е. Ю. Григорьева2, Дж. Х. Моррис3, Д. Ф. Гейнз4 миколикопин и ликопин в дозе 2,5 мг/кг, еще одна группа крыс полу-СИНТЕЗ РОДАНДОДЕКАБОРАТА, чала фуллерен в дозе 100 мкг/кг в виде питья. Мыши с перевитым NA2Bl2HllSCN, — НОВОГО ЭФФЕКТИВНОГО раком молочной железы получали фитоин и фитофлуин тоже в дозе ПРЕПАРАТА 2,5 мг/кг. Эффективность этой дозы была ранее определена в наших ДЛЯ НЕЙТРОНОЗАХВАТНОЙ ТЕРАПИИ исследованиях. 1ГНЦГНИИХТЭОС, Москва Результаты. Установлено, что наиболее выраженным противо-Гу рОНЦ им. Н. Н. Блохина pАМН, Москва опухолевым действием обладает фуллерен и субстанция миколико-Стратклайдский унжерситет, Глазго, Велшобритания пина. Торможение роста аденокарциномы предстательной железы 4Висконсинский университет, Мэдисон, США составило в 1-м случае 75 %, во 2-м 70 %. Ликопин вызывал тормо-Найдено, что клозо-додекаборат-анион (Ві2Ні2-) претерпевает жение роста опухоли в пределах 40-50 %. Не оказывали противоопу-легкую реакцию р°данир°вания при комнатной температуре при дей- холевого действия на рак молочной железы фитоин и фитофлуин, ствии роданида калия (к^ и обычных химических окислителей, хотя в литературе имеются данные о таком эффекте. таких, кэк Н202 или К2Сг207, в среде рэзбэвленнои серной кислоты: Выводы. Полученные результаты и противоопухолевое действие 2 фуллеренэ и особенно миколикопинэ открывэют новые возможности разрэботкп схем лечения рэкэ предстательной железы, используя не + М=С-5_ ——»- + Н+ только известные схемы с применением энти- и аногормонов, но и создавая новые препараты. Весьма перспективно использование со-^ = единения, где будут представлены 2 активные молекулы: агонист Получаемый родандодекаборат выделен в виде тетраэтиламмо- люлиберина и антиоксидант нового поколения, «сшитых» в одном ниевой, цезиевой и натриевой солей и водного раствора натриевой препарате. Такое соединение уже получено и будет изучаться. соли №2В12Н^С^ испытан в биологических экспериментах на животных на безвредность и накопление в опухолях, которые показали в П. М. Бычковский1, Т. Л. Юркштович1, Ф. Н. Капуцкий1, 2 раза меньшую токсичность Na2B12H11SCN и в 3 раза большую сте- С. А. Беляев1, Д. А. Адамчик1, Е. А. Короткевич2, пень накопления в опухолях по сравнению с наилучшим известным Э. А. Жаврид 2, А. В. Ваккер2, А. Ф. Смеянович3, препаратом BSH. Ю. Г. Шанько3 Реакция роданирования не останавливается на стадии моно- ЦИСПЛАЦЕЛ — ЭФФЕКТИВНОЕ СРЕДСТВО родандодекабората и при избытке роданид-иона и окислителя проте- ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ кает далее с образованием 1,7- и 1,12-диродандодекабората. Оба изо- НОВООБРАЗОВАНИЙ ГОЛОВЫ И ШЕИ мера были выделены в виде их кристаллических тетраэтиламмоние- 1НИИ физико-химических проблем Белгосуниверситета, Минск, вых солей, и их строение было определено с помощью спектров 11В Беларусь ЯМР и рентгеноструктурного анализа выделенных монокристаллов: 2НИИ онкологии и медицинской радиологии им. Н, Н. Ачександрова, ,0 и 3рНПЦ неврологии и нейрохирургии М3 РБ, Минск, Беларусь к} уф Фармакологическое действие препарата обусловлено цитостати- ческим эффектом иммобилизованного на МКЦ цисплатина - одного м ш из наиболее перспективных препаратов для лечения саркомы мягких 6 о тканей, меланомы, злокачественных опухолей головы и шеи и осо-(ЕцК), 1,12-В, 2Н .¡.(ЗСІ'Ог (Е14Ы)21,7-В|2Н,0(8СК)2 с „ бенно нейроэпителиальных новообразовании головного мозга. Одна- По данным РОНЦ диродандодекаборат обладает большей токсич- к0 проницаемость цисплатина через гематоэнцефалитический барьер ностью и меньшей степенью накопления в опухолях по сравнению с 1 незначительна, поэтому при внутривенном введении препарата его и ВШ и не может быть препаратом для НЗТ. концентрация в ткани головного мозга не превышает 0,1 % общего Родандодекаборат устойчив к действию большинства сильных количества, что абсолютно недостаточно для достижения противо- расщепляющих реагентов. Единственной найденной возможностью опухолевого эффекта. Существующий метод стереотактической ин-была реакция В12Н1^СК2 с натрием в жидком аммиаке, где наблюда- фузии раствора цисплатина в ложе удаленной опухоли также не дает

№1/том 6/2007 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

существенного эффекта из-за быстрой диффузии цитостатика в лик-ворную систему, что снижает его противоопухолевое воздействие и приводит к развитию побочных эффектов. Эта проблема была решена путем включения цисплатина в состав МКЦ, продукта модификации целлюлозы, гемостатика, который применяется практически во всех видах хирургических, гинекологических, травматологических и других операциях. В организме МКЦ разрушается с образованием безвредных, нетоксичных растворимых низкомолекулярных фракций.

Доклинические испытания показали, что препарат Цисплацел не обладает выраженным нейротоксическим действием на интактную ткань головного мозга как в месте имплантации, так и на отдалении и полностью сохраняет цитостатические свойства исходного цисплати-на. Клинические испытания препарата Цисплацел были проведены на 37 больных с низкодифференцированными глиомами головного мозга (рТ2М(^э4 стадии опухоли). Они включали в себя хирургическое удаление опухоли в пределах неизменной мозговой ткани с имплантацией на стенки послеоперационной раны препарата Цисплацел с последующей лучевой терапией. Медиана выживаемости больных, которым была проведена локальная химиотерапия препаратом Цисп-лацел, составила 433 дня, что в 2 раза превышает этот показатель при стандартном комбинированном лечении (214 дней).

Полученные данные показывают эффективность применения препарата Цисплацел в лечении больных злокачественными новообразованиями головного мозга.

И. В. Высочин, Н. А. Оборотова, А. М. Козлов ОТБОР ЛЕКАРСТВЕННОГО ВЕЩЕСТВА ДЛЯ РАЗРАБОТКИ ПРОЛОНГИРОВАННОЙ СИСТЕМЫ ДОСТАВКИ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО СРЕДСТВА ДЛЯ ПРИЕМА ВНУТРЬ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Введение. Проблема пролонгирования терапевтического действия лекарственного вещества (ЛВ) впервые поставлена в 30-е гг. ХХ столетия при создании рациональных лекарственных форм инсулина и пенициллина. Было необходимо в организме больного создать эффективно действующую концентрацию ЛВ и поддерживать ее на терапевтическом уровне без резких колебаний в течение нескольких часов, дней и даже месяцев. Однако существуют ряд ограничений в создании пролонгированных лекарственных форм (ЛФ) некоторых препаратов, которые вытекают в основном из свойств самих ЛВ. Разработка эффективных пролонгированных ЛФ противоопухолевых препаратов лимитируется проявлениями их токсичности или побочным действием, что связано с механизмом цитотоксического действия потенциальных соединений. Особенности и вариабельность побочных эффектов противоопухолевых ЛВ, их химическая лабильность и сложность фармакокинетических и фармакодинамических эффектов осложняют проблему и требуют обоснованных методических подходов к вопросу выбора потенциального лекарственного препарата для разработки его пролонгированной ЛФ.

Цель исследования. Выбрать критерии для отбора противоопухолевых лекарственных веществ, позволяющих разработать на их основе пероральную пролонгированную лекарственную форму.

Материалы и методы. В работе использован метод критериального отбора. Репрезентативность лекарственного вещества определялась в баллах: 1 соответствует критерию, 0 не соответствует. Сумма баллов для каждого вещества определяла его пригодность для последующего использования.

Результаты. Проанализировано более 50 препаратов (по международному непатентованному наименованию), имеющих твердую лекарственную форму (таблетка и капсула) и зарегистрированных в Регистре лекарственных средств России.

Вывод. Критериями отбора являлись: 1) период полувыведения вещества меньше 8 ч; 2) суточная доза не более 500-700 мг; 3) большой терапевтический индекс; 4) быстрое всасывание при приеме внутрь; 5) хорошая растворимость в воде; 6) всасывание путем пассивного транспорта; 7) длительный фармакологический эффект в течение курсового приема. В результате отобрали 5 следующих препаратов, соответствующих этим критериям: темозоломид, хлорамбуцил, прокарбазин, кальция фолинат, сарколизин.

Р. О. Гагуа, Г. А. Тевзадзе, М. В. Заридзе КЛИНИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА АРГЛАБИН В КОМБИНАЦИИ С ПОЛИХИМИОТЕРАПИЕЙ ПРИ МЕСТНОРАСПРОСТРАНЕННОМ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Национальный центр онкологии им. А. Р. Гвамичава МЗ Республики Грузия, Тбилиси

Введение. Полихимиотерапия играет важную роль в лечении рака молочной железы. Исходя из этого, актуально усиление ее лечебного эффекта и снижение постхимиотерапевтической токсичности. В этом отношении интерес представляет оригинальный казахстанский препарат арглабин.

Цель исследования. 1. Изучение эффективности препарата арг-лабин в комбинации с неоадъювантной химиотерапией при местнораспространенном раке молочной железы. 2. Изучение способности арглабина нивелировать токсическое действие химиопрепаратов.

Материалы и методы. Клинические исследования проведены 53 больным с местнораспространенным раком молочной железы Тз^; Т4Ко_зМо - III стадии, лечившимся в Национальном центре онкологии им. А. Р. Гвамичава МЗ Грузии (г. Тбилиси). Возраст больных колебался от 30 до 65 лет. Пациентки были разделены на 2 группы:1-я (контрольная) группа - 25 пациенток, которым проводилась неоадъ-ювантная химиотерапия по схеме САБ (цисплатин + адриабластин +

5-фторурацил); 2-я группа - 25 пациенток, которым проводилась неоадъювантная химиотерапия по схеме САБ+арглабин. Арглабин вводился внутривенно из расчета 5 мг/кг или 185 мг/м2 ежедневно в течение 15 дней.

Результаты. По результатам проведенной клинической апробации наблюдалось улучшение состояния пациенток в группе, получавшей арглабин в процессе лечения. При этом не отмечалось постхимио-терапевтической гематологической и гастроэнтерологической токсичности.

Л. Г. Деженкова1, О. Ю. Сусова2, В. А. Глазунова2,

А. Е. Щекотихин1, А. А. Штиль2, М. Н. Преображенская1 НАФТОИНДОЛДИОНЫ - НОВЫЙ КЛАСС ИНГИБИТОРОВ ТОПОИЗОМЕРАЗЫ I

!ГУ НИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе РАМН, Москва

2ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Введение. Поиск ингибиторов топоизомеразы I - одно из современных направлений создания мишень-специфических противоопухолевых средств. Ранее нами были разработаны методы синтеза потенциальных ДНК-лигандов на основе нафто[2,3-/]индол-5,10-диона - аналога антрациклинонов, показана их высокая антипроли-феративная активность и установлено, что некоторые производные этого класса вызывают гибель опухолевых клеток с различными механизмами резистентности. Поскольку связывание низкомолекулярных лигандов с ДНК может нарушать функцию ферментов, обеспечивающих оптимальную конформацию ДНК для матричных синтезов, представляется важным изучить способность производных нафто[2,3-/]индол-5,10-диона ингибировать активность топоизомеразы I.

Цель исследования. Поиск ингибиторов топоизомеразы I в ряду производных нафто[2,3-/]индол-5,10-диона.

Материалы и методы. Ингибирование активности топоизо-меразы I определялась по способности новых соединений задерживать релаксацию сверхспирализованной ДНК топоизомеразой I. То-поизомеры разделяли электрофорезом в 1%-ном агарозном геле. Цитотоксичность соединений изучали в МТТ-тесте.

Результаты. Изучение ряда 4,11-дигидроксинафто[2,3-/]индол-5,10-дионов, содержащих в положении 3 фармакофорные группы, показало, что в цитотоксических концентрациях эти соединения ингибируют активность топоизомеразы I. Так, 3-аминоэтил- и 3-диметиламинометил-производные 4,11-дигидроксинафто[2,3-]индол-5,10-диона в концентрациях 2-5 мкМ ингибируют релаксацию сверхспирализованной ДНК, в то время, как контрольный препарат камптотецин вызывал указанный эффект лишь в концентрациях > 10 мкМ.

Выводы. Полученные результаты показывают, что производные нафто[2,3-/]индол-5,10-диона способны ингибировать актив-

ность топоизомеразы I. Эта способность отличает производные наф-то[2,3-/]индол-5, 10-диона от антрациклиновых антибиотиков и обусловливает перспективность соединений исследуемого класса как противоопухолевых агентов.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ №06-03-

32233_а.

А. Н. Жабаева1, Е. А. Осип1, Х. И. Итжанова1,

Б. А. Сагиндыкова2, С. М. Адекенов1 РАЗРАБОТКА ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ АРГЛАБИНА В КАПСУЛАХ

1 Научно-производственный центр «Фитохимия» МОНРК, Караганда

2Южно-Казахстанская государственная медицинская академия МЗ РК, Шымкент

Введение. Фармакологические исследования арглабина установили его иммуномодулирующее и противовоспалительные свойства, что определило, в свою очередь, задачу по разработке кислотоустойчивой лекарственной формы для перорального введения арглабина.

Цель исследования. Разработка технологии получения лекарственной формы арглабина в кишечнорастворимых капсулах.

Материалы и методы. Исходя из терапевтической дозы арглаби-на с иммуномодулирующим эффектом - 5 мг/кг и его суточной дозы в клинических условиях - 60 мг, кишечнорастворимые капсулы № 2 наполняли гранулами, полученными смешиванием измельченных и просеянных арглабина и вспомогательных веществ, увлажнением 5%-ным крахмальным клейстером, 2%-ным раствором натрия альгината, водой очищенной, продавливанием через сито № 30, высушиванием в сушильном шкафу при температуре 45-50 °С, вторичным просеиванием через сито № 20, опудриванием скользящими веществами: кальция стеаратом, аэросилом, тальком.

Результаты. С учетом фармакологических свойств арглабина нами разработаны модельные смеси, составы которых представлены в таблице.

Составы модельных смесей капсул арглабина

Наименование ингредиентов Количество ингредиентов модели на 1 капсулу, г

1 2 3

Арглабин 0,03 0,03 0,03

Лактоза 0,1147 0,1448 0,1207

Микрокристаллическая целлюлоза 0,0519 - 0,0303

Крахмал 0,0024 - -

Поливинилпирролидон - 0,017 -

Натрия альгинат - 0,0042 -

Альгиновая кислота - - 0,017

Кальция стеарат 0,01 0,002 -

Аэросил - 0,002 -

Тальк - - 0,002

Определены физико-химические свойства модельных смесей капсул арглабина.

Получены опытные партии арглабина в кишечнорастворимых капсулах для фармакологических исследований.

В. П. Жердев1, С. М. Адекенов2, А. К. Сариев1,

Г. Б. Колыванов1, А. А. Литвин1 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОКИНЕТИКИ И БИОТРАНСФОРМАЦИИ АРГЛАБИНА

1ГУ НИИ фармакологии им. В. В. Закусова РАМН, Москва 2Научно-производственный центр «Фитохимия»

МОН РК, Караганда

Введение. Изучение механизма действия оригинального противоопухолевого препарата арглабин, а также результаты химической модификации молекулы природного сесквитерпенового лактона (1) -действующего вещества данного средства послужили предпосылкой для исследования в эксперименте его фармакокинетики и биотрансформации.

Цель исследования. Изучение фармакокинетики и биотрансформации оригинального противоопухолевого препарата арглабин с использованием его лекарственной формы - лиофилизированного гидрохлорида диметиламиноарглабина (2), природного арглабина (1), его диметиламинопроизводного (3), диэтилфосфоната арглабина (4) и диоксиарглабина (5).

Материалы и методы. Эксперименты выполнены согласно методическим указаниям по проведению доклинических исследовании фармакокинетики фармакологических веществ и лекарственных средств. Исследование проведено на 190 белых крысах-самцах (масса тела 200±20 г). Методики экстракции из биоматериала и количественного анализа исследуемых веществ разработаны нами впервые.

(1) (2): Я=-М(СН3)2 (5)

НС1

(3): Я=-К(СНз)2

(4): Я=-Р (ОСН2СН3)2

II

О

Результаты. Разработаны высокочувствительные селективные методики определения арглабина нативного (1), диметиламиноаргла-бина (3), диэтилфосфоната арглабина (4) и диоксиарглабина (5) в биологических средах (плазма крови, гомогенат печени, моча) с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии. Установлено, что после однократного внутрибрюшинного введения лиофили-зированного арглабина в плазме крови, гомогенатах печени и суточной моче крыс регистрируется диметиламиноарглабин (3) и арглабин нативный (1). Предполагаемые метаболиты арглабина - лиофилизи-рованного (2) - диэтилфосфоната арглабина (4) и диоксиарглабина (5) в анализируемых образцах не обнаружены. Арглабин нативный (1) и диметиламиноарглабин (3) относятся к группе «короткоживущих» соединений, о чем свидетельствуют значения периодов полувыведе-ния из организма животных. Для арглабина нативного (1) и димети-ламиноарглабина (3) выявлена дозозависимая фармакокинетика.

Е. Н. Карева, И. С. Левина, Н. Д. Гаспарян, А. Е. Маняхина,

О. С. Горенкова

СИНТЕТИЧЕСКИЕ АНАЛОГИ ПРОГЕСТИНОВ (ПЕНТАРАНЫ) СЕЛЕКТИВНО СВЯЗЫВАЮТСЯ С РЕЦЕПТОРАМИ ПРОГЕСТЕРОНА ПАТОЛОГИЧЕСКИ ИЗМЕНЕННОГО ЭНДОМЕТРИЯ

Российский государственный медицинский университет, Москва ИОХ им. Зелинского РАН, Москва МОНИИАГ, Москва

Задачи исследования. Поиск соединений, направленно действующих на гиперпластически измененный эндометрий, с помощью исследования связывающих свойств прегна-Э’-пентаранов с цитозольными рецепторов прогестерона (РП).

Материалы и методы. В ходе работы использованы ткани эндометрия, полученные при гистероскопии и диагностическом выскабливании: железисто-фиброзные полипы (ЖФП, п=12), железистокистозная (ЖКГ, п=25) и атипическая (АГ, п=12) формы гиперплазий эндометрия, аденокарциномы разной степени дифференцировки (АК, в целом п=32). Цитозольная фракция получена ульрацентрифугиро-ванием (105000 §), уровень РП и относительная связывающая активность (КБА%о) определены радиолигандным методом с использованием [3Н]-прогестерона «Ате^Ьат».

Результаты. Путем скрининга 9 производных прегна-Э’-пентаранов выявлены 2 соединения 16а,17а-циклогексано-5а-прегнан-3,20-дион (I) и 16а,17а-циклогексенопрогестерон (II), обладающие уникальными свойствами: практически не взаимодействуя с РП нормальной ткани эндометрия, они проявляют высокую связывающую активность к РП при гиперплазиях. КБА% (I) соответство-

вали в ЖФП - 2,3; ЖКГ - 50,0; АГ - 20,0; АК - 100,0; КБА% II - в ЖФП, ЖКГ и АК высокой степени дифференцировки - 0,0; АК умеренной степени дифференцировки - 32,0; АК низкой степени диффе-ренцировки - 33,0 %. При этом соединение (I) в опытах на экспериментальных животных и изучении сократительной активности полосок беременного миометрия человека проявило антипрогестагенную, а соединение (II) - прогестагенную активность. Следовательно, соединение (I) может оказаться потенциально полезным в терапии про-гестерон-зависимых гиперплазий, тогда как соединение (II) - в терапии эстрадиол-зависимых процессов.

Выводы. Найдены новые синтетические аналоги прогестинов, связывающиеся исключительно с РП патологически измененной ткани эндометрия. Использование подобных перспективных препаратов позволит избежать проявления системных побочных эффектов гормонотерапии.

Т. И. Клочкова, М. Я. Шашкина, И. Р. Просалкова, А. В. Сергеев

ЭКСТРАКТ СОЛОДКИ СУХОЙ ЛИОФИЛИЗИРОВАННЫЙ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Корень солодки и препараты из него широко применяются в медицинской практике в качестве отхаркивающих, противовоспалительных, противоязвенных средств. Корень солодки содержит различные биологически активные вещества (БАВ) (лакуразид, флаво-ноиды, слизистые и др.), а также глицирризиновую кислоту (ГК), содержание которой не менее 6 %. ГК по химической структуре -тритерпеноид, имеющий кетогруппу в 11 положении. В состав ГК входят 2 молекулы глюкуроновой кислоты, которые обусловливают её антитоксические свойства. Глюкуроновая кислота в нормальных условиях жизнедеятельности образуется в печени для защиты организма от токсических эндогенных и экзогенных соединений. При избыточной интоксикации организма возникает её дефицит. В фармацевтической практике основным способом получения сухого экстракта солодки (ЭС) является сушка с использованием термической обработки экстракта (распылительная сушка). Для повышения качества ЭС и сохранения в нём термолабильных БАВ разработан метод его сублимационной сушки. ЭС получали обычной экстракцией. Стандартизацию ЭС проводили по показателям ФСП 42-239002. Одним из основных элементов стандартизации ЭС является определение содержания в нём ГК. Определение содержания ГК в ЭС проводили спектрофотометрическим методом в соответствии с общепринятой методикой (ФСП 42-2390-02). Относительная ошибка определения составила ± 2 %. Содержание ГК в экстракте, полученном с помощью лиофилизации, находилось в пределах 20-25 %. Остальные показатели (описание, подлинность, потеря в массе при высушивании, содержание тяжёлых металлов, микробиологическая чистота) находились в пределах нормы и соответствовали требованиям ФСП.

Содержание глицирризиновой кислоты в различных препаратах солодки____________________________________________________

Наименование препарата из солодки Содержание глицирризиновой кислоты, %

Корни солодки Не менее 6,0

Сухой экстракт солодки Не менее 17,0

Экстракт корня солодки густой Не менее 14,0

Экстракт солодки лиофилизированный От 20,0 до 25,0

Сравнительный анализ содержания ГК в различных препаратах солодки (см. таблицу) показал, что ЭС, полученный с использованием сублимационной сушки, сохраняет в себе больше БАВ по сравнению с традиционными препаратами. Экспериментальными исследованиями установлено, что лиофилизированный ЭС обладает антиоксидан-ными, иммуномодулирующими, антитоксическими свойствами.

Е. Ю. Колдаева1, Е. Ю. Григорьева1, В. А. Братцев2, Дж. МорриС,А. С. Масько1, Г. И. Борисов4, \Р А. СпрышковсО1

ОСТРАЯ ТОКСИЧНОСТЬ И БИОРАСПРЕДЕЛЕНИЕ РОДАНОДОДЕКАБОРАТА НАТРИЯ -ПРЕПАРАТА ДЛЯ НЕЙТРОНОЗАХВАТНОЙ ТЕРАПИИ

]ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва 2ГНЦ ГНИИХТЭОС,

3Страстклайдский Университет, Великобритания 4ФГУ РНЦ «Курчатовский Институт», Москва

Цель исследования. Для выяснения возможности использования нового носителя 10В при нейтронозахватной терапии (НЗТ) изучали токсикологические характеристики и биораспределение в организме мышей с привитой меланомой В16 роданододекабората натрия (1).

Материалы и методы. Исследование проводили на здоровых мышах-самцах С57ВІ/6 массой 20-22 г. Для токсикологического исследования 1 вводили внутрибрюшинно в 0,2 мл физиологического раствора. Вводимые дозы варьировали от 47 до 306 мг 10В/ 1 кг массы тела. За животными наблюдали в течение 1 мес. Павших мышей вскрывали, оценивали выраженные изменения кожных покровов и внутренних органов. Выживших животных взвешивали, оценивали их общее состояние и поведение. Определяли значения максимально переносимой дозы (МПД), абсолютно смертельной дозы (LDlоо) и по методу Кербера рассчитывали средне смертельную дозу (LD5о). Для изучения биораспределения водный раствор, содержащий 10В из расчета 150 мг /1 кг массы тела, внутрибрюшинно вводили животным на 11-й день после трансплантации опухолевых клеток. Животных дека-питировали через 1; 3; 6; 12; 24 и 48 ч после введения. Забирали опухоль, кожу, мышцы, почки, печень, легкие, сердце. Содержание 10В определяли методом нейтронорадиационного анализа на реакторе ИР-8 РНЦ «Курчатовский институт».

Результаты. При введении сублетальных доз не наблюдали видимых отклонений в состоянии и поведении животных. При введении летальных доз смерть наступала не ранее, чем через 24 ч. Визуализированных изменений внутренних органов не обнаруживали. Выжившие животные не имели признаков хронического отравления. LD5о составляла 236,25мг 10В / 1 кг массы тела. МПД была равна 135 мг10В/1 кг массы тела. Максимум концентрации 10В в опухоли достигался через 1 ч после введения и был равен 47,4 мкг /1 г ткани. Оптимальный градиент содержания 10В между опухолью и прилежащими тканями достигался к 24 ч после введения: в опухоли определяли 15,9 мкг 10В на 1 г ткани, в коже, мышцах и крови - в 1,7; 5,5; 3,4 раза меньше.

Выводы. Таким образом, 1 в сравнении с используемым в Японии, США и Европе В8Н (10В-меркаптододекаборатом натрия) менее токсичен (МПД, LDlоо и LD5о в 2 раза превышают таковые для В8Н), а по степени накопления в опухоли в 3 раза превосходит В8Н.

Н. П. Коновалова

АНТИОКСИДАНТ-СОДЕРЖАЩИЕ ГИБРИДНЫЕ ПРЕПАРАТЫ В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ ОПУХОЛЕЙ

Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка

Работы по созданию новых противоопухолевых средств направлены на получение таких препаратов, которые при максимальном ингибировании роста опухолевых клеток минимально повреждали бы нормальные клетки и ткани организма. В этом плане значительный интерес представляет использование антиоксидантов для снижения общетоксических эффектов цитостатиков.

В работе представлены данные об исследование молекул - гибридов, объединяющих цитостатики и антиоксиданты различной структуры.

Введение в структуру противоопухолевых препаратов нитро-ксильных радикалов, являющихся мощными антиоксидантами, приводит к значительному изменению их фармакологических свойств, что показано не только в эксперименте, но и в клинических условиях. В частности, значительно снижается или отсутствует проявление серьезных побочных эффектов противоопухолевых цитостатиков. Так, при клиническом исследовании разработанного в ИПХФ РАН препарата Рубоксил (нитроксильное производное Даунорубицина) было показано отсутствие кардиотоксичности и алопеции.

Показан также значительный синергизм противоопухолевого действия цисплатина и его нитроксильного производного.

Нитроксильные производные цисплатина обладают определенным модулирующим эффектом на развитие лекарственной резистентности опухолей. Введение этих соединений повышает чувствительность к терапии лейкемии Р388 с фенотипом множественной лекарственной устойчивости.

Исследована противоопухолевая активность гибридных молекул, где в качестве антиоксиданта были использованы структуры, являющиеся донорами монооксида азота.

Подобные гибридные молекулы проявляют более высокий анти-метастатический эффект, чем исходные цитостатики, и являются менее токсичными.

Впервые показана возможность использования фуллеренов, обладающих антиокислительной активностью, как модуляторов противоопухолевого действия циклофосфана, адриамицина и других цитоста-тиков.

Показана перспективность создания для онкологических целей гибридных молекул, содержащих донор оксида азота и нестероидный противовоспалительный препарат.

С. Н. Корякин, С. Е. Ульяненко, А. А. Лычагин ОЦЕНКА КОЭФФИЦИЕНТА БИОЛОГИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ БОРСОДЕРЖАЩИХ СОЕДИНЕНИЙ

ГУ Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск

В радиотерапии важным критерием при планировании лучевого воздействия является относительная биологическая эффективность (ОБЭ). При борнейтронозахватной терапии (БНЗТ) ОБЭ продуктов реакции 10В(п,а)^ точно не установлена, однако по литературным данным она не превышает 8 и находится в пределах от 2 до 6. Рядом исследовательских групп показана различная биологическая эффективность реакции 10Б(п,а,у)^ для борсодержащих соединений, для которых концентрация бора в опухоли на момент проведения БНЗТ была одинаковой. В связи с этим при расчете поглощенной дозы при БНЗТ вместо ОБЭ используют более корректное понятие «биологическая эффективность соединения» (БЭС). Этот коэффициент учитывает комбинацию радиобиологических свойств частиц, образующихся из БНЗ реакции, и вероятности попадания этих частиц в чувствительную клеточную мишень. При этом последняя будет зависеть от геометрического расположения бора относительно мишени. На коэффициент БЭС могут влиять способ введения соединения, характер накопления бора в ткани и клетке, доза за фракцию, а также размер клеточного ядра. Поэтому необходимо, чтобы экспериментальные условия определения значения БЭС были как можно ближе к клинической схеме проведения БНЗТ.

Изучение биологической эффективности 2 борсодержащих соединений BSH и БРА, применяемых в клинической практике БНЗТ, выявили значительные отличия их действия на биологические ткани. На основании исследований на модельных опухолях принято считать, что для БРА и BSH БЭС составляет 3,8 и 2 для опухолей головного мозга, 1,3 и 0,3-0,5 для головного мозга, 2,5 и 0,8 для кожи соответственно. Оценка коэффициента БЭС представляет значительные трудности, так как требует изучения как внутритканевого, так и внутриклеточного распределения бора, которое носит индивидуальный характер.

В МРНЦ РАМН ведутся исследования по оценке БЭС на основании использования радиоактивной метки 131! борсодержащих соединений как на организменном, так и на клеточном уровне. В качестве модели используются мыши с имплантированной под кожу бедра меланомой В16. Полученные результаты позволяют определить концентрацию бора в опухоли и окружающих тканях, а также рассчитать индивидуальную поглощенную дозу в зоне нейтронного воздействия, то есть проводить индивидуальное планирование нейтронозахватной терапии.

Т. М. Кулинич, В. К. Боженко, Е. И. Филясова ИССЛЕДОВАНИЕ ЦИТОСТАТИЧЕСКИХ И ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ХИМЕРНЫХ ПЕПТИДОВ,

ВКЛЮЧАЮЩИХ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ Р16ШК4А И Р21С1Р/К1Р

ФГУ РНЦРР Росздрава, Москва

Цель исследования. Изучение изменения цитотоксических и ци-тостатических свойств химерных петидов, содержащих фрагменты

ингибиторов циклиновых киназ P16INK4a и P21CIP/KIP в зависимости от структуры и положения пептидного вектора.

Материалы и методы. Было исследовано 6 химерных интернали-зуемых пептидов (p16-Antp (1,2,3), Antp-p16, Tat-p16 и Tat-p21). Данные пептиды отличаются по структуре интернализуемой последовательности (Tat, Antp), по ее местоположению в последовательности пептида (N- или C-конец для пептидов Antp-p16 и p16-Antp) и по функциональной последовательности активного центра (p16INK4a является ингибитором киназ циклина D, p21CIP/KIP - ингибитором всех циклиновых киназ). Эффекты исследовались на синхронизованных и несинхронизованных культурах клеток человека 293, A549, MCF-7, Raji, Jurkat, а также на мононуклеарной фракции нормальных лейкоцитов крови человека. Для синхронизации клеток в G0/G1-фазе клеточного цикла использовали метод сывороточного голодания или инкубацию с гидроксимочевиной в концентрации 1 мМ. Для синхронизации в G2/M-фазе клеточного цикла использовали таксол в концентрации 100 нМ. Клетки фиксировали, окрашивали пропидий йодидом и анализировали на проточном цитометре DAKO Galaxy. Апоптоз оценивали как субдиплоидный пик при окраске фиксированных образцов с пропидием йодидом (PI) или при двойной окраске-AnnexinV-PI.

Результаты. Цитотоксическое и цито статическое действие химерных пептидов наблюдалось в образцах со всеми пептидами по сравнению с контролем, независимо от типа синхронизации и структуры пептида. При исследовании концентрационной зависимости цитотоксического действия химерных пептидов было обнаружено, что в концентрации до 5 мкМ пептиды практически не влияют на клетки, а свыше 40 мкМ наблюдается довольно резкий скачок в увеличении количества апоптотических частиц до максимального уровня в 80 % всего количества клеток. Было показано, что наиболее сильным цитотоксическим действием обладает пептид Antp-p16 с транспортной последовательностью Antp, расположенной на N-конце. Остальные пептиды располагались по возрастанию эффективности в такой последовательности: Tat-p16, p16-Antp, Tat-p21. При синхронизации отсутствием сыворотки наблюдали задержку в G0/G1-фазе клеточного цикла и задержку максимума G2/M-фазы по сравнению с контролем на 3^ ч, вызванную действием пептидов. При синхронизации с гидроксимочевиной для всех пептидов получили задержку S-фазы и увеличение ее длительности. При синхронизации таксолом для пептида Antp-p16 наблюдали задержку в фазе G0/G1, а различия в фазах S и G2/M по сравнению с контролем были минимальны. Для пептида Tat-p21 получили задержку в G1- и S- фазах и не получили достоверных отличий от контроля для G2/M-фазы.

Противоопухолевый эффект был подтвержден в исследованиях in vivo на перевивной модели рака молочной железы у мышей линии BLRB. При этом наблюдалось замедление роста опухоли при подкожном введении химерного пептида Tat-p21 на 30 %.

Выводы. Цитотоксические и цитостатические свойства выше у пептидов, содержащих последовательность из белка p16INK4a в сочетании с транспортной последовательностью из белка Anten-napedia, расположенной на его N-конце. Таким образом, структура и положение пептидного вектора существенно влияют на биологическую активность химерных пептидов, что необходимо учитывать при конструировании потенциальных противоопухолевых препаратов.

О. И. Курбанова, Т. М. Фузаилова, Ш. Ш. Султанова,

А. И. Хасанов, З. М. Еникеева ИЗУЧЕНИЕ

ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА КОЛХИПРИТ

Республиканский онкологический научный центр МЗ РУз, Ташкент

Задачи исследования. Разнообразие форм онкологических заболеваний и быстро возникающая устойчивость к препаратам диктует необходимость расширения арсенала противоопухолевых препаратов, воздействующих на опухоли. Мы изучаем соединение, полученное синтезом азотистого аналога иприта с колхицином, названное колхи-прит (К-20). Высокая активность К-20 показана на всех 60 опухолевых линиях человека в Национальном институте рака США (NCI). В задачи исследования входило изучение противоопухолевой активности колхиприта на штаммах КСУ, саркома 45, АКАТОЛ, АКАТОН,

саркома 180, асцитная карцинома Эрлиха и меланома В16 при внут-рибрюшинном введении.

Материалы и методы. Приведенные данные по изучению активности колхиприта определялись общепринятым методом по рекомендациям (Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США. / под ред. Софьиной З. П., Сыркина А. Б. и др. - М.: Медицина, 1980), когда препарат вводится ежедневно 10 раз в МПДш. Лечение начинается через 48 ч при воздействии на опухоли мышей и через 3—4 сут в случае КСУ и саркомы 45.

Результаты. Препарат колхиприт апробирован нами при внутри-брюшинном введении на 7 экспериментальных опухолевых штаммах. Влияние этого вещества на опухоли было наиболее выраженным на АКАТОНе — 90, 55%, где при его применении в МПД наблюдалось значительное количество рассосавшихся опухолей. На АКЭ СПЖ было равно 175,53 %. Также высокий противоопухолевый эффект препарат показал на опухоли АКАТОЛ, где в зависимости от дозы %ТРО был равен 85,65 % (4 мг/кг) и 79,55 % (3 мг/кг). На штаммах саркома 45 и карциносаркома Уокера препарат проявил активность более 60%. На штаммах саркома 180, меланома В16 активность препарата не была высокой, однако он был более активен, чем исходный колхицин и известный в онкологии колхамин.

Выводы. Выявлен выраженный противоопухолевый эффект кол-хиприта, который на 3 штаммах опухолей превышает 70 %, что позволяет считать его перспективным противоопухолевым препаратом. Судя по данным in vitro, он может обладать в клинике широким спектром противоопухолевого действия.

М. В. Лисовский, А. П. Жданов, К. Ю. Жижин, Н. Т. Кузнецов НОВЫЙ МЕТОД ПОЛУЧЕНИЯ БОРСОДЕРЖАЩИХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ДЛЯ БНЗТ

Институт общей и неорганической химии им. Н. С. Курнакова РАН, Москва

Для успешной реализации борнейтронозахватной терапии раковых опухолей (БНЗТ) необходимо осуществить направленный синтез веществ, которые способны избирательно доставлять в клетки злокачественных опухолей терапевтическое количество бора—10, обеспечивать его оптимальное микрораспределение и оставаться в клетках в течение необходимого для облучения периода времени. В настоящее время отсутствуют прямые методы присоединения биологически активных транспортных групп к высшим кластерам бора [B„Hn]2 (n = 10, 12). Поэтому возникает необходимость разработки новых методов присоединения биологически активных транспортных групп к различным функциональным производным клозо-боратных анионов [BnHn]2 (n = 10, 12).

Нами разработан новый метод получения ковалентных борсодержащих биологически активных производных на основе нитрилиевых замещенных клозо-боратных анионов [BnH(n.i)(N=C—CH3)] (n = 10, 12) и биологически активных веществ, имеющих в своем составе свободную гидроксо- или амино-группу.

При взаимодействии анионов [BnH(n.i)(N=C—CH3)] (n = 10, 12) с нуклеофилами (аминами, спиртами) в мягких условиях и с количественным выходом образуются производные нуклеофильного присоединения (AdN) по следующей схеме:

[BHh-i)(N=C—CH3)] + RmXHk ^ [BnHn-1)(NH=C(CH3)XR)], n = 10, 12;

X=N, R=H, Aik, m = 1, 2; k=3—m; X = O, R=H, Aik, m=0, 1; k=2—m.

Синтезированы, выделены и охарактеризованы различными методами производные, содержащие в своем составе в качестве биологически активной транспортной группы холестерин и холин. Полученные соединения обладают высокой гидролитической стабильностью, а натриевые соли — водорастворимостью и высоким содержанием бора. Следует отметить, что новые выделенные соединения относятся к принципиально новому, еще не изученному классу соединений (амидов и амидинов) для целей БНЗТ, однако в случае обнаружения низкой токсичности и высокой селективности данные производные могут быть рекомендованы для БНЗТ раковых опухолей.

О. М. Московцева, Т. Г. Щербатюк ОЦЕНКА ДЕЙСТВИЯ

СУКЦИНАТСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ НА СОСТОЯНИЕ ОРГАНИЗМА

СО ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛЬЮ

ГОУ ВПО НижГМА, Нижний Новгород

Задачи исследования. 1) Сравнить действие янтарной кислоты (ЯК), олигосахарида хитозана сукцината (ОхС) и олигосахарида хито-зана сукцинат-аскорбата (ОхСА) на рост опухоли и продолжительность жизни животных при введении данных препаратов до трансплантации экспериментальной опухоли; 2) Оценить влияние сукци-натсодержащих препаратов на состояние свободнорадикальных процессов, уровень эндогенной интоксикации организма животных-опухоленосителей, а также морфологическую структуру ткани печени и опухоли экспериментальных животных.

Материалы и методы. Исследования выполнены на 94 белых нелинейных крысах-самцах (массой 270±25 г) при использовании перевивной опухоли лимфосаркомы (ЛФС) Плисса, приобретенной в НИИ ЭДиТО РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН (г. Москва). Исследуемые препараты вводили с помощью зонда в желудок в виде раствора концентрацией 100 мг/кг веса (курс 7 дней). На 1-м этапе исследования препараты вводили до трансплантации опухоли; на 2-м - с 3-го и

6-го дней после трансплантации опухоли. Оценка результатов воздействий осуществлялась на следующий день после окончания манипуляций. В плазме крови оценивали уровень эндогенной интоксикации; интегральные показатели свободнорадикальной и общей антиок-сидантной активности методом индуцированной хемилюминесцен-ции; а также проводили морфологическое описание тканей печени и ЛФС Плисса с морфометрическим анализом.

Результаты. Введение ОхСА до трансплантации опухоли тормозит ее рост на 64 %, что способствует увеличению продолжительности жизни животных на 78 % (р<0,05). Применение ОхСА на ранних сроках роста опухоли восстанавливает свободнорадикальный баланс и достоверно снижает уровень эндогенной интоксикации (на 25 % и 26 % по сравнению с контролем) в плазме крови экспериментальных животных, а также приводит к увеличению числа нормальных (в 1,6 раза) и двуядерных (в 1,7 раза) гепатоцитов, снижает общее количество клеток ЛФС Плисса в результате увеличения количества дегенерирующих опухолевых клеток в 4,7 раза и уменьшения числа активных клеток опухоли на 47 % по сравнению с аналогичными показателями животных контрольной группы.

Выводы. Таким образом, введение препарата олигосахарид хито-зан сукцинат-аскорбата до перевивки ЛФС Плисса тормозит рост опухоли, что увеличивает продолжительность жизни животных, а на ранних сроках роста опухоли нормализует состояние организма и восстанавливает структуру ткани печени на фоне деструктивных изменений опухоли.

Ш. К. Мухамедаминов, Т. К Холиков, Д. Ф. Хакимова, Т. П. Агеева, З. Р. Сабирджанова, Р. Х. Усманов, З. М. Еникеева

ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ ДЭКОЦИНА -НОВОГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ПРЕПАРАТА, ПОЛУЧЕННОГО ИЗ КОЛХИЦИНА

Республиканский онкологический центр МЗ Республики Узбекистан, Ташкент

Задачи исследования. В задачи исследования входило изучение применения нового противоопухолевого препарата Дэкоцин больным 3-4-й стадий заболевания (более 70 больных с различными локализациями).

Материалы и методы. Для лечения рака кожи Дэкоцин применялся в виде 3-5%-ной мазевой формы (3%-ной - для лечения базальноклеточного и 4-5%-ной - плоскоклеточного рака), для лечения опухолей толстой кишки - 3-5%-ная мазь и суппозитории; вульвы, шейки матки - 1-2%-ная мазь и суппозитории. Лечение получали больные с морфологически верифицированным диагнозом, 3-4-й стадий заболевания, а также с раком in situ - вульвы и влагалища (более 70 больных с различными локализациями), которым назначали Дэко-цин в соответствующих концентрациях, как правило, 1 курс - 10 аппликаций Дэкоцина в 1 г.

Результаты. Среди больных, леченных мазью и суппозиториями Дэкоцина (рак шейки матки, влагалища, вульвы, прямой кишки), распад опухоли наступал после 3-5-кратного применения. 8-10-кратное смазывание базалиом приводит к выраженному (50%-ному) умень-

шению размеров опухоли. Имеются случаи улучшения состояния больных аденокарциномой кишечника (4-я стадия) и уменьшения размеров опухолей, а также случай 5-летней ремиссии (на сегодняшний день) у больной 3-й стадии (10 ежедневных 3%-ных суппозиторий Дэкоцина, затем облучение в количестве 33 Гр). Как правило, среди добровольцев большее количество больных раком кожи, ранее получавших различное лечение и резистентных к облучению. С другой стороны, совместное применение Дэкоцина и облучения дает высокий процент излечения, причем достаточно 5-кратных аппликаций Дэкоцина.

Выводы. Полученные данные указывают на высокую чувствительность к 2-5%-ной мази Дэкоцин рака кожи, а также других локализаций, причем он не вызывает лейкопении и депрессии иммунной системы у больных даже при длительном применении.

А. М. Раисова1, Е. С. Утеулиев1, Ж. С. Бейсеналинова2,

С. С. Альжанов2, С. М. Адекенов2 ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРЕПАРАТА АРГЛАБИН В ТЕРАПИИ ФОЛЛИКУЛЯРНЫХ АДЕНОМ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

1 НИИ кардиологии и внутренних болезней, Казахстан, Алматы 2Научно-производственный центр «Фитохимия», Казахстан, Караганда

Введение. В последнее десятилетие наряду с медикаментозной терапией добро качественных опухолей щитовидной железы врачи широко используют малоинвазивные методы лечения, включающие в себя интратуморальный путь введения различных препаратов в зависимости от морфологического строения узлового образования.

Цель исследования. Изучить эффективность препарата арглабин в терапии узлового зоба.

Материалы и методы. В исследование были включены 20 пациентов с цитологической картиной, характерной для фолликулярной аденомы щитовидной железы. Возраст больных от 18 до 63 лет. Гормональный статус больных - эутиреоз. Всем больным было проведено ультразвуковое исследование щитовидной железы, тонкоигольная биопсия под контролем УЗИ с последующим цитологическим исследованием по методу Папаниколау, определение функциональной активности щитовидной железы и гипофиза ИФА-методом (свТ3, свТ4, ТТГ, а/ТПО, а/ТГ), а также исследования иммунного статуса (клеточное звено: CD3, CD4 , CD8, CD16, ИРИ (иммунорегуляторный индекс), CD4/CD8; гуморальное звено: IgA, IgG, IgM). Было проведено интратуморальное введение препарата арглабин, растворенного в1,0 мл физиологического раствора NaCI. Курс лечения составлял 5 инъекций. Контроль эффективности проводится через 6 мес.

Результаты. У 3 больных (15 %) по данным УЗ-исследования уменьшения объема узлового образования не наблюдалось. 2 пациента (10 %) не явились на повторное исследование. У 15 больных (75 %) отмечалось уменьшение объема узлового образования на 1/3-1/2 объема. Что касается иммунного статуса, то во всех случаях отмечалось угнетение клеточного звена иммунитета, снижение общего количества CD4 и CD8 (%) лимфоцитов. После проведенного лечения у 17 больных (85 %) отмечалось улучшение показателей CD4 и CD8 (%).

Выводы. Таким образом, применение препарата арглабин в терапии доброкачественных узловых поражений щитовидной железы приводит не только к уменьшению узлового образования, но и к качественной иммунокоррекции организма в целом. Дальнейшее наблюдение продолжается.

Н. Т. Райхлин1, Ф. Ф. Бланко1, Е. В. Степанова1,

Л. А. Седакова1, Е. М. Трещалина1, А. М. Беркович2 ИЗУЧЕНИЕ АНТИАНГИОГЕННЫХ СВОЙСТВ НОВОГО ПРЕПАРАТА БУТАФОЛ

1 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва 2ООО «Лигфарм», Москва

Введение. Бутафол представляет собой многокомпонентную смесь веществ гуминовой природы, для которого ранее нами выявлена способность ингибировать процессы неоангиогенеза в опухоли, в том числе активность важнейшего регулятора ангиогенеза - фактора роста эндотелия сосудов VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor).

Цель исследования. Оценка влияния бутафола на состояние ангиогенеза в новообразованиях in vivo и in vitro.

Задачи исследования. 1) Определение размеров опухоли под влиянием бутафола; 2) Гистологическое и иммуногистохимическое (ИГХ) изучение ангиогенеза в опухоли под действием бутафола; 3) Изучение влияния бутафола на пролиферативную активность эндотелиальных клеток (ЭК) человека, способность их к миграции и образованию трубочко-подобных структур (ТПС).

Материалы и методы. Исследования in vivo проведены на мышах с п/к трансплантированной меланомой В16; in vitro - на культуре ЭК мыши SVEG-4-10, трансформированных вирусом SV40. При гистологическом исследовании опухоли оценивали число митозов, С помощью ИГХ исследования VEGF определяли плотность распределения сосудов, интенсивность реакции и число опухолевых клеток, содержащих VEGF. На культуре ЭК оценивали цитотоксичность бутафола, влияние на стимулированную bFGF пролиферативную активность, способность к миграции и образованию ТПС.

Результаты. Под влиянием бутафола опухоли уменьшаются в диаметре (от 3-4 см до 0,5-1,5 см). Снижается количество митозов (от 2-5 % до 1-3 %), индекс плотности распределения сосудов (от 2030 до 10-17), а также количество опухолевых клеток, содержащих VEGF, и интенсивность в них реакции (примерно в 1,5-2 раза). Бута-фол in vitro блокирует пролиферацию ЭК, полностью или частично (в зависимости от его концентрации), а также их миграцию и образование ТПС, но не оказывает цитотоксического действия.

Выводы. Установлено, что бутафол снижает уровень VEGF в клетках меланомы В16, подавляет образование и рост кровеносных сосудов в опухоли и таким образом ингибирует ее ангиогенез. Бута-фол ингибирует пролиферацию и миграционную способность эндотелиальных клеток мыши SVEG-4-10, трансформированных вирусом SV40. Полученные данные свидетельствуют о взаимосвязи противоопухолевого и антиангиогенного действия препарата.

A. Н. Савченко1, В. А. Ольшевская1, М. В. Мальшакова2,

О. Г. Иванов3, Д. В. Белых2, А. В. Кучин2, А. А. Штиль3,

B. Н. Калинин1

БОРИРОВАННЫЕ ПРИРОДНЫЕ ПОРФИРИНЫ И ХЛОРИНЫ КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ ПРОТИВОРАКОВЫЕ ПРЕПАРАТЫ

1 Институт элементоорганических соединений им. А. Н. Несмеянова РАН, Москва

2Институт химии Коми Научного центра УрО РАН, Сыктывкар 3ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Введение. Одно из направлений поиска противоопухолевых препаратов - использование полиэдрических соединений бора - карбо-ранов и соединений, способных накапливаться в быстро пролиферирующих тканях. Особый интерес представляют порфирины - макро-циклические молекулы, входящие в состав простетических групп ряда ферментов, участвующих в регуляции важных физиологических процессов. Относительно низкая токсичность пор-фиринов и их способность накапливаться преимущественно в злокачественных клетках - важные преимущества этих соединений для борнейтронзахватной и фотодинамической терапии.

Цель исследования. Разработка методов синтеза конъюгатов протогемина IX и хлорина е6 с анионным 1-карба-клозо-додекаборатным полиэдром (монокарбакарбораном) с целью оптимизации противоопухолевых характеристик карборанилпорфиринов и исследование биологической активности полученных веществ.

Результаты. Впервые получены конъюгаты цвиттер-ионного мо-нокарборанилзамещенного протогемина IX с метиловыми эфирами L-аминокислот (серина, валина, треонина, тирозина и фенилаланина), в которых аминокислоты L-ряда связаны со свободной карбоксильной группой порфирина амидной связью. Также изучено образование конъюгатов порфирина с оксазаборолидиновыми комплексами L-серина и L-треонина, в которых порфириновый макроцикл связан сложноэфирной связью с соответствующей L-аминокислотой и содержит свободные амино- и карбоксильные группы на периферии макроцикла. Разработаны методы синтеза конъюгатов хлорина е6 с 1-трифторметан-сульфонилметил-клозо-карборанилом и монокарбора-нилом цезия. Испытания на культурах клеток человека показали, что

синтезированные соединения водорастворимы и нетоксичны в концентрациях до 50 мкМ.

Выводы. Борированные производные протогемина, содержащие водорастворимый монокарбакарборан, обладают свойствами, необходимыми для создания противоопухолевых препаратов.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ №05-03-08155офи_а.

A. В. Сергеев, Т. А. Алиева, Ф. Ф. Бланко, С. А. Сасов,

Е. М. Трещалина, М. Я. Шашкина ИММУНОМОДУЛИРУЮЩАЯ

И ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ РАСТИТЕЛЬНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Введение. Полисахариды (ПС) широко распространены в растительном мире и обладают значительным спектром физиологической активности.

Цель исследования. Сравнительное изучение иммунотропной и противоопухолевой активности ПС, полученных из надземной части сабельника болотного (СБ), свербиги восточной (СВ), тагетеса гибридного (ТГ), Иван-чая (ИЧ).

Материалы и методы. ПС выделены из водных экстрактов растений после предварительной обработки сырья горячим 80%-ным этиловым спиртом. Выделение ПС проводили по методике, адаптированной для каждого отдельного объекта. Пролиферативную и цитолитическую активность лимфоцитов и Т-киллеров из смешанной культуры лимфоцитов (СКЛ) определяли по включению 3Н-тимидина в ДНК лимфобластов и по выделению 51Cr из клеток-мишений.

Результаты. Определен моносахаридный состав ПС из СБ и ТГ. По содержанию галактуроновых кислот (более 50 %) и по данным ИК-спектров ПС из СБ и ТГ относятся к классу пектинов. Среднемолекулярная масса ПС из СБ и ТГ равнялась 80 и 31,6 КД соответственно. Все ПС в широком диапазоне концентраций (0,1-10 мкг/мл) достоверно стимулировали пролиферативную активность лимфоцитов периферической крови онкологических больных. Все изученные ПС в оптимальной для каждого препарата концентрации стимулировали в 1,4-2,3 раза пролиферативный ответ спленоцитов мышей BALB/с, трансформированных Кон А или аллоантигенами в СКЛ, а также дополнительное образование Т-киллеров в СКЛ. В исследованиях по иммунофармакологии показано, что ПС из СБ, ТГ и Иван-чая при длительном (до 6 нед) введении мышам per os в дозе 10 и 100 мг/кг увеличивали в 1,5-2,5 раза дополнительное образование Т-киллеров в СКЛ. ПС из СБ, ТГ и СВ повышали пролиферативную активность спленоцитов и образование Т-киллеров в СКЛ у мышей со вторичным иммунодефицитом, индуцированным цитостатиком аро-нозой. ПС из СБ, ТГ и СВ при введении животным в дозах и режимах, вызывающих максимальную индукцию Т-киллеров, эффективно тормозили рост перевиваемой саркомы 180 у линейных мышей BALB/c и не влияли на рост опухолевых клеток у бестимусных животных (BALB/c nude). ПС из СБ, ТГ и СВ при длительном ежедневном введении мышам per os в дозе 0,05-0,1 г/кг тормозили на 80-90 % рост перевиваемой саркомы 180 и аденокарциномы молочной железы Са-755.

Выводы. Учитывая крайне низкую токсичность изученных растительных ПС и наличие у них иммуномодулирующих и противоопухолевых свойств, можно рассматривать их в качестве потенциальных средств для химиопрофилактики рака (Cancer Chemoprevention).

B. Б. Сирота1, А. Х. Досаханов1, Е. В. Кострова2,

Н. В. Бочкова2

РАДИОМОДИФИКАЦИЯ ПРИ ИНТЕНСИВНОЙ ЛУЧЕВОЙ ТЕРАПИИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

1 Карагандинская государственная медицинская академия, Казахстан, Караганда

2КГКП «Карагандинский областной онкологический центр», Казахстан, Караганда

Цель исследования. Сравнительная оценка радиомодифицирующего действия арглабина при интенсивной лучевой терапии (ИЛТ) больных раком молочной железы (РМЖ).

Материалы и методы. В исследование включены 128 больных РМЖ от 33 до 76 лет. С I стадией - 6 больных, со II - 141, с III - 31. Лечение больных РМЖ проводилось методом «слепой» рандомизации. Всем больным на I этапе проводилась предоперационная ИЛТ в режиме среднего фракционирования с дневным дроблением дозы. РОД 2 Гр подводилась дважды в день с интервалом 4-4,5 ч между фракциями до физической СОД 28-32 Гр за 8 дней. Эквивалентная СОД составила 42-45 Гр стандартного фракционирования (ВДФ - 65,6-75 ед., КРЭ - 1352-1475 ед.). На

II этапе выполнялась радикальная мастэктомия по Пейти или Маддену через 24-72 ч после облучения с последующей химиогормонотерапией. В 1-ю группу вошли 36 больных, получивших ИЛТ без радиомодификации. Во 2-ю группу включена 31 больная с ИЛТ с радиомодификацией арглабином. Арглабин вводился внутривенно из расчета 5мг/кг или 185 мг/м2 ежедневно утром за 15-20 мин до сеанса облучения. 3-я группа - 31 больная РМЖ с ИЛТ в сочетании с пероральным приемом капецитабина из расчета 1250 мг/кг дважды в день в течение 8 дней. 4-ю группу составили 30 больных, которым ИЛТ проведена на фоне трансдер-мальной (аппликационной) радиомодификации салфетками «ко-летекс» с 5-фторурацилом.

Результаты. При сравнении клинического эффекта ИЛТ не получено достоверной разницы между этими группами. Положительный клинический эффект наблюдался у 30,6±7,7 % пациенток в группе, получавших только ИЛТ, у 38,7±8,7 % больных, получавших ИЛТ с арглабином, у 25,8±7,9 % пациенток, получавших ЛТ с кселодой и у 33,3±8,6 % больных с ИЛТ с 5-ФУ. В 1-й группе больных объем опухоли уменьшился в 1,2 раза, во 2-й - в 1,9 раз, в 3-й и 4-й - в 1,5 раз. Патоморфоз опухоли Ш+ГУ степени в 1-й группе составил 11,1±5,2 %, во 2-й - 35,5±8,6 %, в 3-й - 19,4±7,1 % и 4-й - 33,3±8,6 %. Патоморфоз опухоли ИМУ степени при ИЛТ с 5-ФУ и арглабином достоверно превышает аналогичный показатель при ИЛТ без радиомодификации.

Выводы. При ИЛТ у больных РМЖ более выраженный радиомодифицирующий эффект выявлен при использовании арглабина, который проявился в большем регрессе самой опухоли и учащении выраженного (Ш+1У) постлучевого патоморфоза опухоли на 24,4 % по сравнению с ИЛТ без радиомодификации.

З. С. Смирнова, И. Ю. Кубасова, Л. М. Борисова,

М. П. Киселева, Т. Д. Миникер, И. Л. Плихтяк, С. Я. Мельник КОРРЕЛЯЦИЯ ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ И ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ В ОТНОШЕНИИ ЛЕЙКОЗОВ В РЯДУ 1Ч-ГЛИКОЗИЛИРОВАННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ИНДОЛО[2,3-А]КАРБАЗОЛА

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Введение. Установлено, что противоопухолевая активность N гликозилированных производных индоло[2,3-а]карбазола может быть обусловлена действием на одну или несколько мишеней, например, протеинкиназу С, топоизомеразы, циклинзависимую киназу CDK1, ДНК. Ранее было показано, что на силу и спектр цитотоксической активности в значительной мере влияет природа гликозидного остатка. Задачей настоящего исследования являлась оценка влияния заместителя у имидного азота ^гликозилированных производных индо-ло[2,3-а]карбазола на корреляцию цитотоксической и противоопухолевой активности в отношении лейкозов. Были изучены гликозиды АК-1006 и АМК-1054, имеющие одинаковые углеводные фрагменты а-Ь-арабинозы, но отличающиеся структурой агликона. Соединение АМК-1054 имеет заместитель у имидного азота - 2-(4-

морфолино)этил.

Материалы и методы. Данные о цитотоксической активности в отношении 6 клеточных линий лейкозов человека (ССКР-СЕМ, НЬ-60, К-562, МОЬК-4, КРМЬ8226, SR) были получены в Национальном институте рака США. Для оценки спектра цитотоксической активности учитывали !С5о<1,0х10'8 М. Противоопухолевую активность исследовали на лимфоцитарной лейкемии Р-388. Гликозиды вводили внутрибрюшинно, ежедневно в течение 5 дней в широком диапазоне доз от 10 до 125 мг/кг. Критерием эффективности служило увеличение продолжительности жизни опытных животных по сравнению с контрольными (УПЖ, %).

Результаты. Показано, что АК-1006 проявляет высокую цитоток-сическую активность на 2 из 6 (ССКР-СЕМ и SR), а АМК-1054 - на 4 из 6 (ССКР-СЕМ, HL-60, MOLN-4 и SR) клеточных линиях лейкозов человека. При изучении противоопухолевой активности в отношении Р-388 был выявлен более высокий терапевтический эффект соединения АМК-1054 по сравнению с АК-1006. АМК-1054 в терапевтической дозе 100 мг/кг вызывал УПЖ=119 %, а в дозе 125 мг/кг (= LDi6) УПЖ составляло 144 %, тогда как при действии на Р-388 АК-1006 в терапевтической дозе 40 мг/кг УПЖ=41 %, а в дозе 50 мг/кг (= LDi6) УПЖ было равно 85 %.

Выводы. Установлено, что имеется прямая корреляция между широтой спектра цитотоксической активности на клеточных линиях лейкозов человека и противоопухолевой эффективностью в отношении Р-388 N-гликозилированных производных индоло[2,3-а]- карба-зола с разными заместителями у имидного азота.

Л. И. Смирнова, А. П. Смирнова, Л. П. Сушинина,

С. В. Устинкина, Т. А. Сидорова,

Т. И. Солнцева, Г. К. Герасимова СИНТЕЗ И ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ФРАГМЕНТОВ ГАСТРИНА

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Цель исследования. Поиск новых соединений с высокой избирательностью противоопухолевого действия на опухоли желудочнокишечного тракта (ЖКТ), которые малочувствительны к современным противоопухолевым препаратам.

Открытие рецепторов гастрина в опухолях ЖКТ оправдывает направленный поиск высокоизбирательных соединений среди его аналогов.

Материалы и методы. Аналоги С-концевого гастрина синтезировали классическими методами пептидной химии. Для защиты а-аминогрупп на всех стадиях синтеза применяли трет-бутилоксикарбонильную группу. Карбоксильные группы С-концевых аминокислотных остатков фрагментов защищали этерификацией (метиловые эфиры). Для защиты реакционноспособных групп в боковых цепях трифункциональных аминокислот использовали бензильную защиту. Для удаления бензильных защитных групп боковых цепей тирозина и аспарагиновой кислоты использовали метод каталитического гидрогенолиза в присутствии палладиевой черни. Для очистки пептидов использовали колоночную хроматографию на силикагеле.

Цитотоксические свойства синтезированных соединений в диапазоне концентраций 4х10'4 - 5х10'5 М были изучены на клетках аденокарциномы кишечника человека линии НСТ-116, экспрессирующей рецепторы гастрина. Цитотоксическую активность соединений определяли МТТ-тестом. Критерием активности был индекс IC50 - концентрация соединений, вызывающая гибель 50 % клеток после 96 ч инкубации.

Результаты. Были получены 2 гептапептида с защищенными функциональными группами и цитотоксический аналог гастрина -октапептид, содержащий в своем составе п-ди(2-хлорэтил) аминофе-нилуксусную кислоту. После снятия защит получены и охарактеризованы 3 аналога гастрина со свободными функциональными группами, которые переданы для изучения цитотоксической активности. При максимально возможной концентрации веществ (5х10‘5 М) в экспериментах in vitro жизнеспособность клеток в присутствии цитотокси-ческого аналога гастрина снижалась на 40 %. В этих же условиях в присутствии двух нецитотоксических аналогов гастрина рост клеток замедлялся на 15 %.

Выводы. Полученные результаты являются основанием для дальнейших модификаций химической структуры С-концевых фрагментов гастрина и изучения их специфического связывания с рецепторами.

А. В. Т ришин1, Н. К. Ахматова2, Д. Н. Сухарев1,

Ф. В. Доненко2, С. Г. Зайчикова1 ВЛИЯНИЕ ЛЕКТИНОВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ ЦИТОТОКСИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ

!ММА им. И. М. Сеченова, Москва

2ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Введение. Лектины - сложные мультидоменовые белки с сахаросвязывающей активностью, которая обеспечивается карбогидрат-распознающим доменом. Лектины способны проявлять митогенную и иммуномодулирующую активность. В последние годы появились сведения о биологической активности лектинов гороха, клевера и других представителей бобовых.

Цель исследования. Изучение влияние лектинов растительного происхождения на цитотоксическую активность мононуклеаров периферической крови (МНПК) здоровых доноров.

Материалы и методы. МНПК выделяли из периферической крови 20 здоровых доноров. В работе использованы 10-кратные разведения фитогемагглютинина (ФГА) (ПанЭко, Россия),)и лек-тинов гороха (ЛГ),бобов (ЛБ) и различных сортов фасоли (ЛФ). ЛГ, ЛБ и ЛФ выделяли из плодов гороха методом аффинной хроматографии на сефадексе G-100. Клетки опухолевой линии К-562 (эритробластный лейкоз человека) и Со1о (колоректальный рак человека) культивировали в среде RPMI-1640 с добавлением глютамина, 5% фетальной сыворотки плодов крупного рогатого скота и гетамицина. Для выявления цитотоксической активности клеток использовали МТТ-тест). Цитотоксическую активность МНПК определяли на линии К-562.

Результаты. ФГА и ЛГ, ЛБ, ЛФ не оказывают прямого цитопато-генного действия в концентрациях 0,1-10,0 мг/мл на клетки линии К-562 и Со1о и МНПК. Однако инкубация МНПК с лектинами в диапазоне указанных выше концентраций вызывала значительное повышение их спонтанной цитотоксической активности по отношению к клеткам-мишеням К562 и Colo.

Вывод. Установлено, что лектины бобовых в концентрациях, не оказывающих непосредственного цитопатогенного действия на злокачественно трансформированные клетки, стимулируют спонтанную киллерную активность мононуклеарных клеток крови человека. Учитывая полученные данные, лектины бобовых могут рассматриваться как перспективный класс соединений для поиска новых лекарственных препаратов, обладающих иммуномодулирующей активностью.

А. В. Тришин1, Н. К. Ахматова2, Д. Н. Сухарев1,

Ф. В. Доненко2, С. Г. Зайчикова1 ВЛИЯНИЕ ЛЕКТИНОВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ

1ММА им. И. М. Сеченова, Москва

2ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Введение. К лектинам относятся белки, обладающие свойством обратимо и избирательно связывать углеводы, не вызывая их химического превращения. Публикации последних лет свидетельствуют о высоком содержании лектинов в семенах чины, гороха и некоторых других представителей рода бобовых.

Цель исследования. Изучение влияния гороха растительного происхождения на пролиферативную активность лимфоцитов периферической крови (МНПК) здоровых доноров.

Материалы и методы. МНПК выделяли по методу A. Boyum (1968) из стабилизированной периферической крови здоровых доноров. Жизнеспособность и функциональную активность лимфоцитов оценивали морфологическим методом - реакцией бласттрансформа-ции лимфоцитов (РБТЛ) традиционным способом (Н. Л. Самойлина, 1970). В работе использован диапазон концентраций от 5 до 20 мкг/мл фитогемагглютинина ФГА (ПанЭко, Россия), а также лекти-нов гороха (ЛГ) и бобов (ЛБ) и различных сортов фасоли (ЛФ). ЛГ, ЛБ и ЛФ выделяли из плодов гороха методом аффинной хроматографии на сефадексе G-100.

Результаты. При оценке пролиферативной активности морфологическим методом установлено, что процент содержания бластных форм при добавлении лектинов в диапазоне доз от 5,0 до 20, мкг/мл при 72-ч инкубации МНПК в несколько десятков раз превышал таковые в контрольных культурах. Это свидетельствует о том, что каждый из исследуемых лектинов проявлял собственный митогенный эффект. С увеличением дозировок ФГА постепенно увеличивалось

содержание бластных форм клеток в культуре, а также происходило закономерное возрастание индекса стимуляции (ИС). В диапазоне доз от 5,0 до 15,0 мкг/мл при инкубации МНК в присутствии ЛГ, ЛБ и ЛФ также увеличивалось содержание бластных клеток и индекс стимуляции аналогично возрастал.

Вывод. Лектины растительного происхождения, выделенные из плодов гороха и бобов, в низких концентрациях оказывают сходное с ФГА стимулирующее действие на пролиферативную активность лимфоцитов человека. Лектины бобовых могут быть использованы для целей адоптивной иммунотерапии злокачественных новообразований в качестве индукторов активации лимфоцитов.

И. И. Файнгольд1, Н. П. Коновалова1, Р. А. Котельникова1, Г. Н. Богданов1, Е. С. Фрог1, Д. В. Мищенко1,

Е. Н. Берсенева1, В. С. Романова2 АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ФУЛЛЕРЕНА С6о - МОДИФИКАТОРЫ БИОЛОГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ ПРИ ЦИТОСТАТИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ МЕТАСТАЗИРУЮЩИХ ОПУХОЛЕЙ

1 Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка 2Институт элементоорганического синтеза РАН, Москва

Введение. В мире уделяется большое внимание проблеме создания фармакологически активных соединений на основе фуллеренов, изучению физико-химических механизмов их биологического действия. Широкий спектр биологической активности производных фуллерена обусловлен уникальной структурой углеродного сфероида, его способностью переводить кислород в синглетное состояние, проявлять мем-бранотропные и антирадикальные свойства, противовирусную активность и цитотоксическое действие. Эти свойства являются основой для создания нового класса перспективных лекарственных препаратов.

Цель исследования. Изучение влияния аминокислотных производных фуллерена Сбо как модификаторов биологических реакций при терапии метастазирующих опухолей.

Материал и методы. В работе использовали АПФ: Сб0-Ь-РгоКО2, Сбо-Ь-Рго(Ш2)2. В качестве цитостатика применяли противоопухолевый антибиотик адриамицин (АДР). Препараты вводили внутрибрю-шинно в дозе 60 мг/кг, 50 мг/кг и 1 мг/кг соответственно для Сб0-Ь-РгоШ2, Сб0-Ь-Рго(Ш2)2 и АДР. Антиметастатическая активность АПФ и их комбинаций с АДР исследовалась на модели метастази-рующей солидной опухоли - карциноме Льюис у мышей линии BDFl. Противоопухолевый эффект оценивали по индексу ингибирования метастазов (ИИМ, %).

Результаты. Выявлено, что АПФ проникают через липидный бислой биологических мембран, являются эффективными ингибиторами пероксидного окисления липидов.

Установлена зависимость антиметастатической активности производных фуллерена от количества присоединенных N02 - групп. Показано, что Сб0-Ь-Рго^О2)2 в комбинации с АДР проявил наибольший терапевтический эффект - ИИМ равен 40%, в то время, как при действии Сбо-Ь-Рго N02 индекс ингибирования составил 28 %. При индивидуальной терапии адриамицином ИИМ соответствует 18 %.

Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о перспективности дальнейших исследований производных фуллерена Сбо как потенциальных противоопухолевых препаратов.

Исследования поддержаны грантами РФФИ.

Т. А. Федотчева1, З. С. Смирнова2, Г. С. Гриненко3, Л. Е. Голубовская4, В. М. Ржезников4, А. В. Семейкин1, Н. Л. Шимановский1

ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ НОВОГО ГЕСТАГЕНА БУТЕРОЛА

1 Российский государственный медицинский университет, Москва 2ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва 3ЦХЛС-ВНИХФИ, Москва 4ГУ ЭНЦРАМН, Москва

Введение. Гестагены нашли применение в онкологии при паллиативном лечении рецидивирующего и метастатического рака эндометрия или рака почки, а также при паллиативном лечении некоторых гормоночувствительных опухолей, включая распространенные фор-

мы рака молочной железы и карциномы предстательной железы. Новый гестаген Бутерол, в отличие от большинства гестагенных препаратов, не содержит в структуре Д4-3-кето-группировку и не обладает побочным андрогенным действием, вызывающим вирилизацию у женщин.

Цель исследования. Изучение противоопухолевой и хемосенсибилизирующей активностей Бутерола.

Материалы и методы. Для оценки противоопухолевой активности Бутерола использовали перевиваемый рак шейки матки РШМ-5 мышей СВА, чувствительный к прогестинам при ортотопической перевивке; для оценки хемосенсибилизирующей активности препарата сравнивали противоопухолевую активность винкристина при монотерапии с терапевтическим эффектом винкристина в комбинации с Бутеролом на мышах-самках линии DBA/2 с лимфолекозом Р-388, резистентным к винкристину.

Результаты. Бутерол при пероральном применении обладает противоопухолевой активностью, превосходящей эффект известного противоопухолевого гестагенного препарата Провера. Бутерол в дозе 1 мг/мышь тормозит рост опухоли РШМ-5 при ортотопической перевивке на 73 %, тогда как ацетат медроксипрогестерона, представляющий собой субстанцию препарата Провера, - на 55% (р<0,05).

Исследуемый препарат в дозе 50 мг/кг проявляет хемосенсибилизирующее действие, повышая цитостатический эффект винкристина на 16 % (р<0,001) и ингибируя в комбинации с винкристином рост Р-388 на 53 %.

Выводы. Бутерол обладает выраженным противоопухолевым действием и хемосенсибилизирующей активностью. Он может быть рекомендован для дальнейшего исследования в качестве перспективного противоопухолевого средства.

М. Я. Шашкина, А. В. Сергеев, Г. И. Кабацкая,

М. В. Максимова, И. Р. Просалкова, Т. В. Силаева РАЗРАБОТКА ПРЕПАРАТОВ ЛЕЧЕБНОПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ НА ОСНОВЕ ЧАГИ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Введение. Чага или березовый гриб - популярное средство профилактики и лечения желудочно-кишечных и других заболеваний, в т.ч. рака. Чага содержит целый спектр важных биологически активных веществ (БАВ): полифенольный хромогенный гуминоподобный комплекс (ХК) типа меланина (более 10 %), флавоноиды и другие полифенольные соединения, полисахариды, макро- и микроэлементы (до 15 %), лектины и пр. Уникальный химический состав чаги обусловливает широкий спектр фармакологической активности. Чага обладает антитоксическими и иммуномодулирующими свойствами, проявляет антиоксидантную и радиопротекторную активность, оказывает болеутоляющее и противовоспалительное действие, поэтому может применяться как самостоятельно, так и в комплексе с другими средствами профилактики и терапии. Известны 2 фармакопейных препарата чаги: бефунгин (полугустой экстракт с добавлением солей кобальта) и настойка чаги во флаконах, но они характеризуются неоднозначностью действия.

Цель исследования. Разработать новые дозированные, удобные для применения, препараты на основе сухого экстракта чаги (СЭЧ).

Материалы и методы. В качестве сырья использовали березовый гриб, соответствующий требованиям ГФ XI, который экстрагировали водой. СЭЧ получали методом распылительной сушки или лиофили-зацией с использованием традиционного фармоборудования.

Результаты. Процесс экстракции БАВ из гриба оптимизировали в зависимости от степени измельчения, температурных и временных параметров. Разработаны «щадящие» условия получения СЭЧ с максимально возможным сохранением лабильных БАВ. Масштабирование технологического процесса (ТП) проводили в условиях, приближенных к промышленным. Оптимизация ТП позволила получить СЭЧ с высоким выходом (25-35 % в расчете на исходное сырье) и содержанием ХК 40-60 %. Разработаны критерии и параметры стандартизации СЭЧ. На основе стандартизованного СЭЧ созданы 2 препарата чаговит: в форме твердых желатиновых капсул (ТЖК) и растворимого фитоэликсира (РФЭ) в разовых пакетах или банках с дозатором. Разработана и утверждена многоступенчатая схема производства каждой формы применительно к промышленным усло-

виям и нормативно-техническая документация. ТЖК и РФЭ содержат витамины С и группы В в дозах, удовлетворяющих суточные потребности в них. РФЭ дополнительно содержит экстракты солодки и шиповника. Лечебно-профилактическая эффективность препаратов подтверждена экспериментально и клинически в группах риска.

Выводы. В настоящее время чаговит выпускается отечественной промышленностью. (Свид. Гос. Рег. № 77.99.23,3 У 24.26.06 от 23.03.2006г.).

Н. К. Юркштович1, С. А. Беляев1, Н. В. Голуб1,

Т. Л. Юркштович1 , Ф. Н. Капуцкий1, Д. П. Веевник2 ПОЛУЧЕНИЕ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ТЕМОЗОЛОМИДА НА ОСНОВЕ ВЫСОКОЗАМЕЩЕННОГО ФОСФАТА ДЕКСТРАНА

1 НИИ физико-химических проблем Белгосуниверситета, Минск, Беларусь

2ЛПУ «9 клиническая больница», Минск, Беларусь

Биорассасывающийся полимер - темозоломид, представляющей собой гидрогель для локальной (местной) химиотерапии злокачественных образований головного мозга, обеспечивающей стабильность и эффект возрастания терапевтического действия темозоломида, длительное и равномерное высвобождение активного вещества из гидрогеля.

Благодаря удачному сочетанию физико-химических (наличие ионогенных групп, высокая степень набухания) и медикобиологических свойств (биосовместимость, нетоксичность, способность рассасываться в тканях организма без воспалительной реакции, относительная устойчивость в биологических средах) определенный интерес вызывает использование в качестве биорассасывающихся полимеров-носителей модифицированных полисахаридов. Одним из новых и перспективных полисахаридов является высокозамещенный фосфат декстрана (ВЗФД), представляющий собой ограниченно-набухающий гель.

В работе были изучены закономерности фосфорилирования дек-страна в системе H3PO4 / P2O5 / BU3PO4 / CCI4, получены фосфаты дек-страна с высокой степенью замещения и создание на его основе полимерной формы темозоломида. Установлены зависимости накопления фосфорнокислых групп от соотношения компонентов реакционной смеси и температуры, а также от времени проведения реакции. Изучено влияние количества фосфорнокислых групп ВЗФД на степени набухания. Разработана методика введения темозоломида (Temodal, Shering-Plough) в ВЗФД. Создана лекарственная форма ВЗФД - темозоломид.

Доклинические исследования выявили пролонгированный дозозависимый цитотоксический эффект полимерной формы темозоломида в течение 24 ч на глиальные клетки в культуре, выражающийся в ингибировании пролиферации клеток (в дозах: 375 мкг/мл, 137,5 мкг/мл) и цитодеструктивном действии препарата на клетки глиомы (использовались большие дозы препарата: 1500 мкг/мл, 750 мкг/мл). Максимально токсической дозы полимерной формы темозоломида (содержание препарата - 3 мг на 1мл геля) не выявлено, что предполагает отсутствие значимого общетоксического действия препарата на головной мозг и организм в целом.

Н. П. Яворская, И. С. Голубева, О. В. Горюнова О ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ N-РИБОЗИДА ИНДОЛО[2,3-А]- ПИРРОЛО[3,4-С]КАРБАЗОЛА

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Задачи исследования. Производные индоло[2,3-а]карбазолов представляют класс соединений широкого спектра биологического действия. В зависимости от конфигурации гетероцикла, в котором индолокарбазол является частью 5- или 6-членной гетероароматиче-ской системы, преобладает антимикробная, фунгицидная, противовоспалительная активность. Наиболее выраженным противоопухолевым действием обладают индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазолы, гли-козилированные по атому азота индола (I). На молекулярные механизмы противоопухолевого эффекта влияет и природа других заместителей в агликоне. Данная работа посвящена изучению проти-

воопухолевой активности нового вида производных индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазола на примере рибозида (II), в котором имид-ный атом азота агликона является одновременно азотом а-аминогруппы L-треонина и его солей: аммонийной (III) и с D-глюкозамином (IV).

X

Gly R

(I) Gly = углеводный остаток; R,X = заместители.

(II) Gly = рибозид; R = -СН3; X = -CH-COOH

I

СНз-СН(ОН)

Материалы и методы. Сравнительное исследование рибозида L-треонина индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазола (II) и его солей аммонийной (III) и с D-глюкозамином (IV) проводили на перевиваемых солидных моделях опухолевого роста мышей - раке шейки матки РШМ-5 и меланоме В16. Лечение начинали через 48 ч после прививки. Растворы препаратов готовили ex tempore и вводили внутрибрю-шинно. Критериями эффективности служили торможение роста опухоли (ТРО, %) и увеличение продолжительности жизни опытных животных (УПЖ, %) по сравнению с контролем.

Результаты. Все исследуемые соединения, введенные в терапевтической дозе 100 мг/кг в течение 5 дней с интервалом 24 ч, вызывают на РШМ-5 умеренный противоопухолевый эффект (ТРО 68-70 %), который сохраняется в пределах значений 55-60 % на 8-й день наблюдения для соединений (II, III) и до 12-го дня для соединения (IV), для которого УПЖ составило 35 %. На меланоме В16 наблюдается только непосредственный эффект после окончания лечения на уровне 70 % ТРО.

Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о перспективности поиска новых противоопухолевых агентов в ряду аминокислотных производных N-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазола.

Н. П. Яворская1, И. С. Голубева1, Д. В Овчинников2, \Е. Н. Глибин1

ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ СВОЙСТВА ПРОИЗВОДНЫХ КСАНТОНОВ С ФРАГМЕНТАМИ КРАУН СОЕДИНЕНИЙ

}ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

2Государственный технологический институт, Санкт-Петербург

Цель исследования. Выяснение влияния на противоопухолевую активность взаимного расположения катионоидного центра аза-15-краун 5 и интеркалирующих гетероциклов 9-ксантон-4-карбоновых кислот, так как природа катионоидного центра и его расположение относительно интер-калирующей структуры являются факторами, существенно влияющими как на противоопухолевые свойства, так и на токсичность.

Задачи исследования. Сравнительное изучение противоопухолевой активности 9-ксантон-4-карбоновых кислот, содержащих в амидных группах фрагменты аза-15-краун-5, разобщенные с хромофором спейсерами различной длины (глицин, бета аланин, гамма-аминомаслянная кислота, эпсилон-аминокапроновая кислота).

Материалы и методы: Исследования выполнены на перевиваемых солидных моделях опухолевого роста мышей - аденокарциноме молочной железы Са 755, раке шейки матки РШМ 5 и раке легкого Льюис (LLC) по стандартным методикам, принятым в РОНЦ. Лечение начинали через 48 ч после перевивки. Препараты готовили ex tempore. Критерием эффективности служили торможение роста опухоли (ТРО) и увеличение продолжительности жизни (УПЖ) мышей по сравнению с контролем.

Результаты. Изучаемые соединения в терапевтической дозе 50 мг/кг при 5-кратном ежедневном режиме проявляли на Са 755 небольшую противоопухолевую активность непосредственно после окончания лечения, в пределах 71-73, 69-7, 68-78, 58-86 % ТРО соответственно.

На модели РШМ 5 противоопухолевая активность после окончания лечения - в пределах 70-84 % ТРО, независимо от удаленности

катионоидного центра, с сохранением эффекта в пределах 40-65 % ТРО на 14-й день после окончания лечения.

На раке легкого LLC пограничный эффект (ТРО 52-68 %) сохраняется до 8-го дня в период наблюдения.

Выводы. 1. Удаление краун-фрагмента аза-15-краун 5 от хромофорной части молекулы (ксантона) остатками аминокислот не влияет на противоопухолевую активность и токсичность. 2. Производные 9-ксантон-4-карбоновой кислоты с аза-15-краун 5 фрагментом не показали преимущества перед производными с бензо-краун фрагментами.

С. П. Ярмоненко1, Н. Кухина2, В. В. Мещерикова1,

А. А. Вайнсон1

БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ПРЕПАРАТ ДН-1 КАК ИЗБИРАТЕЛЬНЫЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЙ РАДИОМОДИФИКАТОР

1 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва 2Клиника «ЛЕНОМ», Ришон Ле-Цион, Израиль

Изучено радиомодифицирующее действие нетоксичного препарата ДН-1 (гомогената галобактерий, способных расти при высоком содержании соли, например, в Мертвом море) в экспериментах на культурах клеток карциномы Эрлиха линии ELD, карциномы легких Льюис, меланомы В16 и нормальных клетках (полученных из эпителия кишечника эмбриона человека), а также на опухолях мышей, полученных из этих клеток.

В опытах in vitro показано, что при гамма-облучении клеток в дозе 7,5 Гр предварительное (за полчаса до облучения) добавление ДН-1 в концентрации 0,3-10 % гомогената избирательно усиливает лучевое поражение только опухолевых клеток. При этом гибель клеток ELD увеличивалась в 1,7 раза, клеток карциномы Льюис - в 1,5 раза и клеток меланомы В16 - в 1,2 раза, в то время, как лучевое поражение нормальных эпителиальных клеток не усиливалось.

В экспериментах in vivo растущие в мышце голени опухоли подвергали локальному гамма-облучению в дозах 20-25 Гр через 7-9 дней после прививки, когда диаметр голени достигал 8-10 мм. Оценивали разные режимы введения ДН-1. Чаще всего препарат начинали вводить перорально или внутрибрюшинно через 1-3 сут после прививки опухоли и продолжали введение 5 раз в нед в течение 3-4 нед. В части экспериментов оценивали эффект курсового введения ДН-1 после облучения, а также его 1-кратного применения за 1 ч перед облучением.

В результате, как и в опытах in vitro, установлено избирательное усиление вызванного облучением торможения роста опухолей при введении животным ДН-1, которое приводило и к возрастанию продолжительности их жизни. Лучевые реакции кожи в зоне облучения при этом не менялись.

Полученные данные об избирательном усилении радиационного поражения экспериментальных опухолей животных с помощью изу-

ченного бактериального препарата ДН-1 свидетельствуют о целесообразности изучения возможности его использования в лиофилизо-ванной форме и в случае сохранения эффективности в приготовлении его лекарственной формы. Такие исследования в настоящее время проводятся с участием специалистов соответствующего профиля.

И. В. Ярцева, Л. Г. Гатинская, Н. А. Дмитричева, Е. В. Игнатьева,

Н. А. Машалова, Б. С. Кикоть СТАНДАРТИЗАЦИЯ ТИОСЕНСА

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Тиосенс - комплексное соединение алюминия из класса тиофта-лоцианинов, полученное в ФГУП «ГНЦ «НИОПИК» и предназначенное для фотодинамической терапии опухолей. Задача настоящей работы - химико-фармацевтическая стандартизация тиосенса.

Тиосенс представляет собой кристаллический порошок темнозеленого цвета, практически не растворимый в воде и спирте этиловом, растворимый в хлороформе, диметилсульфоксиде и диметил-формамиде. Наличие порфиринового кольца в его молекуле подтверждается характерным электронным спектром поглощения в УФ- и видимой области. Тиосенс имеет также характеристический ИК-спектр. Присутствие алюминия в препарате подтверждается качественной реакцией с ализарином. р1% 0,003% хлорформно-спиртовых

1 см

растворов препарата, измеренный в наиболее интенсивном максимуме при 717±4 нм, находится в интервале 2200-2300. По данным ТСХ тиосенс не содержит специфических примесей, за исключением незначительных количеств одного из изомеров препарата. Показатель «потеря в массе при высушивании», измеренный при 125 °С, находится в интервале 0,2-1,8. Методом газо-жидкостной хроматографии показано, что тиосенс практически не содержит органических растворителей: хлороформа, гексана и толуола, используемых в его синтезе. Он не содержит также неорганических примесей, таких, как хлориды, сульфаты, тяжелые металлы, присутствие которых в препарате связано обычно со способом его получения.

Для прямого количественного определения тиосенса использован дающий надежные результаты метод, основанный на определении серы сожжением образца в токе кислорода по Шенигеру. Однако в случае тиосенса этот метод не специфичен в отношении исходного вещества -тетра-3-фенилтиофталоцианина алюминия хлорида. Для контроля за содержанием этого вещества вводится показатель «Содержание хлора», определяемый также сожжением образца в токе кислорода. Содержание основного действующего вещества в пересчете на высушенное вещество для всех проанализированных серий препарата составляло не менее

98,0 % при содержании хлора не более 0,4 %.

Работа поддержана Правительством г. Москвы. Авторы благодарят Г. Н. Ворожцова, Е. А. Лукьянца и В. М. Деркачеву за сотрудничество и предоставленные для исследования образцы тиосенса.