CC BY
39
шении практически одинаковое количество серы (12,94 и 12,70 % соответственно).
Для контроля за содержанием в тиосенсе тетра-3-фенилтиофта-лоцианина алюминия хлорида мы предложили дополнительно определять содержание хлора в исследуемых образцах тиосенса также сожжением в токе кислорода. Определение хлора в искусственно составленных модельных смесях, содержащих оба вещества в известных и разных соотношениях, показало, что в образцах серий тиосенса, где хлор определялся в количествах выше 0,5 %, со-
держание тетра-3-фенилтиофталоцианина алюминия хлорида составляло более 5,0 %.
Выводы. В результате проделанной работы было четко показано, что содержание в тиосенсе 0,5 % хлора является критическим, а также то, что этот параметр (содержание хлора) может служить критерием чистоты препарата.
Работа поддержана Правительством Москвы. Авторы благодарят Г. Н. Ворожцова, Е. А. Лукьянца и В. М. Деркачеву за сотрудничество и предоставленные для исследования образцы тиосенса.
ФИЗИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ВОЗДЕЙСТВИЯ
-о-
Н. В. Андронова1, Е. М. Трещалина1, Д. В. Филоненко1,
А. Л. Николаев2, В. Е. Божевольнов2, И. М. Трещалин1,
О. Л. Калия3, Г. Н. Ворожцов3
Влияние ультразвука и соиодииамической терапии на метастазирование
1 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва
2 МГУ им. М. В. Ломоносова, Москва
3 ФГУП ГНЦ «НИОПИК», Москва
Введение. Известно, что под влиянием локального ультразвукового воздействия (УЗ) происходит усиление цитотоксичности различных противоопухолевых агентов (сонодинамическое действие, СДТ) и химических веществ (соносенсибилизация). Нами показано существенное повреждение опухоли и ее сосудистого русла при СДТ с использованием адриабластина (Адр), карбоплатина (Карбо) и соносенсибилизатора терафтала (ТФ), что не исключает усиления гематогенного метастазирования.
Цель исследования. Изучение способности к метастазирова-нию меланомы В16 под влиянием УЗ и СДТ с использованием Адр, Карбо и ТФ.
Материал и методы. Мышам (п=8-10) БОр1 с развившейся внутримышечно меланомой В16 площадью более 1 см3 проводили терапию УЗ, Адр+Карбо, ТФ+УЗ и Адр+Карбо+ТФ+УЗ. УЗ на установке «УСДТ-м» выполняли в течение 10 мин с 2 полей под водой при температуре 36 °С, интенсивность на 1-е поле — 0,88 МГц (1,0 Вт/см2), на 2-е поле — 2,64 МГц (2,0 Вт/см2). Препараты вводили однократно до УЗ в разные сроки: Карбо и ТФ — в дозе 30 мг/кг в/в, Адр — в дозе 4 мг/кг в/в. Группа контроля — мыши с В16 без специфического воздействия. Лечение проводили на 7-е сутки после перевивки, на следующий день опухоли удаляли. В момент гибели первой мыши в контроле от метастазов всех мышей умерщвляли, выделяли и взвешивали легкие, после чего рассчитывали соотношение средней массы легких (тср) леченных и здоровых мышей (легочный коэффициент, ЛК). Показателем метастазирования был ЛК в группе контроля. Данные обрабатывали статистически, используя доверительные интервалы для средних сравниваемых величин по стандартному методу Стьюдента в модификации Р. Б. Стрелкова.
Результаты. У здоровых мышей тср составляла 172 мг, в группе контроля на 27 сут метастазирование в легкие — 100 %, тср=923 мг, ЛК=5,4. В группе УЗ метастазирование 100 %, тср=729 мг, ЛК=4,2. В группе Адр+Карбо метастазирование 100 %, тср=287 мг (р<0,05), ЛК=1,7. В группе ТФ+УЗ метастазирование 100 %, тср=783 мг, ЛК=4,6. В группе Адр+Карбо+ТФ+УЗ метастазирование 100 %, тср=196 мг (р<0,05), ЛК=1,1. Побочные эффекты при УЗ и СДТ проявлялись слабым кратковременным отеком лапки без гибели мышей.
Выводы. УЗ на установке «УСДТ-м» и СДТ с адриабластином, карбоплатином и терафталом не вызывает стимуляции метастазиро-вания в/м меланомы В16 в легкие (первичный узел удален) и хорошо переносится животными. В результате лечения масса легких с метастазами при комбинированной химиотерапии или СДТ с использованием терафтала достоверно уменьшалась в 3,2-4,7 раза.
Г. И. Борисов, Р. И. Кондратенко Полуэмпирическая оценка характеристик терапевтических пучков нейтронов для 10В-НЗТ
ФГУ РНЦ «Курчатовский институт», Москва
Для установления зависимостей между физическими характеристиками пучков нейтронов для 10Б-НЗТ ядерными и атомными данными и критериями, на основании которых проводятся расчеты, предлагается такая интегральная характеристика пространственных распределений потоков медленных нейтронов в облучаемом объекте, как эффективная масса. В ней происходит столько же ядерных реакций, сколько во всем облучаемом объекте, при этом число реакций в единичной массе постоянно и равно максимальному значению в облучаемом объекте. Эффективная масса — это экспериментально измеряемая величина.
Таблица 1
Фильтр са Бе+А1+8 юв
Эффективная масса, тэффмши, г 240 380 460
Фтеп.сюверхности^Ртеп .чикс ОТН. ЄД. 0,43 0,27 0,31
Средняя энергия, создаваемая одним нейтроном Еп, вычисляется по формуле:
^'НаН^,г,Н^г,Н^уД | | + ^Ы7)
Е=-
(1)
|Ч>ЦдЧ>
где обозначения физических величин соответствуют общепринятым в ядерной физике: к — концентрации элементов, — доля
поглощения энергии фотонов из реакции радиационного захвата нейтронов водородом, которая определяется значением тэфф. в соответствии с:
^у,Н Мэн.уД^ср.. ^СР-
с Ър
О • і ткани
Число тепловых нейтронов ТЯтепх и число промежуточных нейтронов Ипр , необходимое для создания поглощенной дозы й в облучаемом объекте, рассчитываются из выражений:
Ом
N..
N.
1,6Л06Е„ . "?■ 1 -р
щаа ; (5); (6)
№1/том 5/2006
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
где впР * О,35 — альбедо облучаемого объекта, 1,6^10 16 — переводной коэффициент кэВ в Дж.
Откуда дозовая характеристика или керма быстрых нейтронов (что далеко не одно то же) Qпp определяется уравнением:
Qnp.
3-1,6-10~16 K ■ Е„ (1
где К — отношение кермы быстрых нейтронов (по нашему мнению) к максимальному значению поглощенной дозы нейтронов в облучаемом объекте.
В приведенных ниже результатах расчетов облучаемый объект считается гомогенным, хотя это далеко не так, поскольку препарат накапливается преимущественно в клетках опухоли. Учитывая, что по данным табл. 1 ^теп.поверхности/Фтеп.,макс. = 0,43, К = 0,4. При этом предполагается, что суммарная поглощенная доза на поверхности равна максимальной дозе в облучаемом объекте, на долю дозы фотонного излучения приходится 0,15 от полной поглощенной дозы на поверхности. Далее г^а^тэфф-мин^ т,;фф=4тт.ми1и, при эт°м предполагается, что т^фф. слабо уменьшается с увеличением кдп
Таблица 2
Концентрация 10B,jfcjlo, ppm 0 15 30 60
Парциальный состав ядерных реакций, % Н —89 N—11 1()В —0 Н —76,7 N — 9,7 10В —13,6 Н —67,5 N — 8,5 10В —24,0 Н — 54,5 N — 7,0 10В —38,5
Парциальный состав поглощенной дозы, % Н —75,6 N — 24,4 10В —0 Н —33,5 N—10,8 10В — 55,7 Н —21,5 N — 6,9 10В —71,6 Н —12,5 N — 4,1 10В — 83,4
Средняя энергия, создаваемая одним нейтроном, 2іл кэВ 287 560 768 1064
Керма быстрых нейтронов, Qnp. > Гр-см2 5,5-10-13 10,6-КГ13 14,6-10-13 20,2-10-13
Рпр. (см_2-с-1) при МОЩНОСТИ поглощенной дозы 30 Гр/ч 1,9-109 1,0-109 7,2-10® 5,2-Ю8
А. В. Борсуков, Е. С. Коваленко, А. Н. Евдокимов Экспериментальное обоснование выбора режима электрохимического лизиса злокачественных опухолей
ПНИЛ «Ультразвуковые исследования и малоинвазивные технологии» Смоленской государственной медицинской академии Смоленский областной институт патологии
Цель исследования. 1. Разработать модель особенностей реакции опухолевой ткани во время электрохимического лизиса (ЭХЛ) в зависимости от параметров лизиса. 2. Проверить работоспособность модели в эксперименте.
Материал и методы. Было проведено 85 сеансов ЭХЛ 36 макропрепаратов опухолей желудочно-кишечного тракта, удаленных во время радикального хирургического лечения (недифференцированный рак — 7, низкодифференцированная аденокарцинома (АК) — 10, умереннодифференцированная АК — 14, высокодифференцированная АК — 1, плоскоклеточный рак — 1, коллоидный рак — 3). Используемые параметры режима ЭХЛ: сила тока — 50, 75, 90 мА, время воздействия — 20, 40 мин, расстояние между электродами — 10, 15 мм. Для проведения ЭХЛ был использован аппарат ЕСи-300 фирмы БОЕК^О. Математические модели, описывающие зависимость диаметра макроскопически измененной ткани вокруг электродов и диаметр зоны неизмененной ткани между электродами, были получены путем множественного регрессионного анализа. Для проверки работоспособности вышеуказанных моделей была привита перевиваемая опухоль РС-1 (альвеолярноклеточный рак) 5 белым беспородным крысам самцам с выполнением ЭХЛ через месяц. После
ЭХЛ была проведена немедленная визуальная и гистологическая оценка опухолевого узла, капсулы и окружающих тканей.
Результаты. Характер морфологических изменений опухолевой ткани при ЭХЛ представлен 4 степенями деструкции. На диаметр зоны деструктивно-измененной ткани вокруг электродов значимое влияние оказывает сила тока, однако влияния времени воздействия и расстояния между электродами выявлено не было. Проведение ЭХЛ опухолевых узлов с учетом полученных зависимостей приводит к некрозу 50 % ткани узла, остальные 50 % повреждений представлены выраженной деструкцией опухолевых тканей.
Выводы. 1. Варианты морфологических изменений опухолевой ткани после ЭХЛ оптимальны для оценки в виде 4 степеней деструкции. 2. Разработанные математические модели описывают 90-95 % выборочных данных. 3. Основным фактором, влияющим на эффект ЭХЛ, является сила тока. 4. Для экспериментального обоснования оптимального режима ЭХЛ опухолей необходима оценка отсроченных и отдаленных результатов ЭХЛ, проведенного с учетом выявленных зависимостей.
В. А. Братцев1, Дж. X. Моррис2, Э. Л. Гуркова1, П. А. Стороженко1
Синтез препарата BSH из 10B12H122- и производного тиомочевины [(NH2)2CS]22+. Получение лекарственной формы 10BSH для БНЗТ
1 ГНЦ ГНИИХТЭОС, Москва
2 Strathclyde University, Глазго, Великобритания
Лечение резистентных злокачественных опухолей, в особенности опухолей головного мозга, осуществляется методом нейтронозахватной терапии (НЗТ) с использованием борсодержащих препаратов. Наиболее эффективным является препарат BSH — 10В-меркап-тододекаборат натрия, используемый в НЗТ в США, Европе, Японии.
Цель работы — создание нового эффективного метода синтеза препарата BSH, отличающегося применением легкодоступных и дешевых исходных соединений серы, в данном случае — тиомочевины (NH2)CS.
По аналогии с роданом (NCS)2, который подобно галогенам Hal2 замещает атом водорода в додекаборате (В12Н122 ) с образованием родандодекабората B^H^SCN2 [1-3], мы изучили возможность
введения атома серы в додекаборат с помощью производного тиомо-чевины — дихлорида формамидиндисульфида [(H2N)2CS]2Cl2, который легко образуется при окислении тиомочевины бромом в разбавленной соляной кислоте:
К2В12Н12 + [(H2N)2CS]2Cl2------> KBi2HuSC(NH2)2 + (NH2)CS +
KCl.
Дикатион формамидиндисульфида при нагревании в солянокислом водном растворе реагирует с анионом додекабората с образованием внутренней тиурониевой соли KB12H11SC(NH2)2, содержащей B—S-связь.
При щелочном гидролизе тиурониевая группа дает меркапто-группу SH, связанную с бором, т. е. образуется меркаптододекаборат KBi2HnSC(NH2)2 + KOH-----------> K2B12H11SH + (NH2)CO,
который мы выделяли в виде цезиевой соли CS2B12H11SH и очищали перекристаллизацией из водного этанола.
В связи с тем, что для НЗТ необходим препарат, максимально обогащенный по 10В, все стадии его синтеза мы отработали с применением додекабората ^В^Н^2 , обогащенного по 10В на более чем 99 %. ^В^Н^^ , получаемый по приведенным выше реакциям в виде цезиевой соли, превращен в натриевую с помощью катионного обмена. Водный раствор натриевой соли Na210Вl2НllSH пропускали через бактериальный фильтр, расфасовывали по медицинским флаконам в расчетном количестве 200-300 мг Na210Вl2НllSH на флакон. Раствор подвергали лиофильной сушке. Полученную лекарственную форму препарата 10BSH стерилизовали термически (120 °С и 1 атм) и поставляли для обеспечения лабораторных и клинических испытаний НЗТ в ГУ РОНЦ РАМН (Москва) и Институт медрадиологии (Обнинск).
Литература
1. Brattsev V, Morris J. Proc. IMEBORON-9, Heidelberg, 1996. — Р. 167.
-о-
2. Brattsev V, Morris J. Advances in NCT // Elsevier. — 1997. — Vol. II. — P. 51-55.
3. Srebny H., Preetz W. // Z. anorg. allg. Chem. — 1984. — Vol. 513. — P. 7-14.
H. A. Кайдан, C. H. Корякин, C. E. Улъяненко, В. A. Ядровская
Целенаправленное изменение фармакокинетики меркаптододекабората натрия, меченного 131I, посредством воздействия вазоактивных препаратов
Медицинский радиологический научный центр PAMH, Обнинск
Цель исследования. Увеличить накопление борсодержащего соединения в опухоли путем применения вазоактивных средств на основе изучения влияния сосудорасширяющего (дибазол) и сосудосуживающего (мезатон) препаратов на распределение в меланоме В16 и окружающих ее здоровых тканях мышей меркаптододекабората натрия (131I-BSH).
Материал и методы. В исследованиях использовали мышей-самцов линии Сз7ВУб массой 20-22 г с имплантированной под кожу бедра меланомой В16, меченный у-излучающим изотопом 131I мер-каптододекаборат натрия — Na2B!2HnSH (131I-BSH). Дибазол вводили внутрибрюшинно (0,5 мл) в концентрации 12,5 мг/кг массы животного через 10 мин после введения 131I-BSH, мезатон в концентрации 2 мг/кг в том же объеме — через 30 мин. Радиоактивность биологического материала измеряли в разные сроки после введения соединения с помощью колодезного сцинтилляционного счетчика.
Результаты. Изучение влияния дибазола и мезатона на распределение в меланоме В16 и окружающих тканях мышей 131I-BSH показало, что введение этих соединений не приводит к существенному изменению накопления меченого соединения в исследуемых тканях. При применении мезатона следует отметить тенденцию к увеличению по сравнению с контролем накопления 131I-BSH через 9 ч после введения как в опухоли, так и в окружающих ее тканях. При использовании дибазола в качестве модифицирующего агента отмечено увеличение соотношения между накоплением 131I-BSH в опухоли и окружающих тканях (кожа, мышца) через 9 ч после введения 131I-BSH и опухоль/кровь через 18 ч. Данное обстоятельство свидетельствует
о целесообразности применения дибазола для повышения градиента накопления борсодержащего соединения опухоль/окружающие ткани при проведении нейтронозахватной терапии.
Выводы. Изучение влияния на накопление в опухоли и окружающих тканях 131I-BSH 2 сердечно-сосудистых препаратов, оказывающих сосудорасширяющий (дибазол) и сосудосуживающий (меза-тон) эффект, показало, что действие дибазола на увеличение градиента опухоль/окружающая ткань более выражено по сравнению с мезатоном. Полученные результаты позволяют считать перспективными исследования по использованию дибазола для решения одной из важных задач нейтронозахватной терапии — управление накоплением борсодержащего препарата в опухолевой и окружающих ее тканях.
E. C. Коваленко
Клиническое применение электрического сопротивления ткани как оценочного признака эффективности электрохимического лизиса злокачественных опухолей желудочно-кишечного тракта
ПНИЛ «Улътразвуковыге исследования и малоинвазивныге технологии» Смоленской медицинской академии
Цель исследования. Изучить характер изменения электрического сопротивления опухолевой ткани во время ЭХЛ как возможного признака оценки эффективности лизиса.
Материал и методы. Было проведено 34 сеанса ЭХЛ 11 макропрепаратов опухолей желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), удаленных во время радикального оперативного пособия: рак прямой кишки — 1, рак желудка — 7, рак сигмовидной кишки — 1, кардиоэзофагеальный рак — 1 (гистологическая структура: недифференцированный рак — 2, низкодифференцированный рак — 4, умереннодифференцированный рак — 3, высокодифференцированный рак — 1, коллоидный рак — 1). Для ЭХЛ был использован аппарат ECU 300 фирмы SOER-
ING. Факторные признаки: сила тока (50, 75, 90 мА), время воздействия (20, 40 мин), расстояние между электродами (10, 15 мм). После проведения ЭХЛ визуально и гистологически оценивались три зоны: деструкции вокруг катода и анода, неизмененной ткани между электродами. Во время проведения ЭХЛ измеряли выходное напряжение прибора с интервалом 10 мин и последующим расчетом электрического сопротивления ткани на участке между электродами.
Результаты. В процессе ЭХЛ с увеличением времени экспозиции отмечается увеличение диаметра суммарной зоны деструкции вокруг электродов (от 0 до 10-25 мм) и уменьшения диаметра зоны неизмененной ткани (от 15 до 0-6 мм). Рост диаметра суммарной зоны деструкции сопровождается уменьшением сопротивления ткани на участке между электродами. Исходное сопротивление опухолевой ткани в зависимости от расстояния между электродами и гистологической структуры опухоли колеблется в пределах 74-393 Ом; во время ЭХЛ происходит снижение значений сопротивления до 32-386 Ом. Временная точка перекрещивания зон деструкции вокруг катода и анода сопровождается повышением электрического сопротивления на 4-134 Ом в течение 10 мин экспозиции от точки наименьшего значения сопротивления.
Выводы. 1. Динамика изменения электрического сопротивления ткани между электродами во время ЭХЛ может быть использована как показатель эффективности ЭХЛ злокачественных опухолей ЖКТ и/или метастатического поражения паренхиматозных органов.
2. Необходима проверка полученных данных в эксперименте на животных с оценкой отсроченных и отдаленных результатов.
E. Ю. Колдаева1, E. Ю. Григорьева1, М. Г. Найденов1, Ю. В. Стукалов1, В. A. Ольшевская2, A. В. Зайцев2, Рами Aw62
Биораспределение борированного гема — носителя бора при нейтронозахватной терапии (НЗТ)
1 ГУ РОНЦ им. H. Н. Блохина PAMH, Москва
2 Институт элементоорганических соединений им. Hсмеянова PAH, Москва
Условием успешного проведения нейтронозахватной терапии на 10В является преимущественное накопление носителя 10В бора в опухолевых клетках в достаточном количестве (приблизительно 5-14 мкг 10В на 1 г опухоли для нейтронного потока 2 кэВ в зависимости от отношения опухоль/кровь и локализации бора в клетке). Большое значение имеет также градиент концентраций 10В между опухолью и здоровыми тканями. Подразумевается, что этот градиент не должен быть больше 1. С этой точки зрения мы оценили предложенный к исследованию борсодержащий препарат, представляющий собой борированный гем (1), содержащий 43 % бора и имеющий биологические предпосылки для накопления в опухоли.
Материал и методы. Биораспределение (1) изучали на модели крысиной саркомы М1, подкожно привитой крысам-самцам линии Wistar в срок 3 и 24 ч после введения 16,8 мг 10В на 1 кг массы тела. Соединение (1) вводили внутрибрюшинно в 2 мл 20% ДМСО на физиологическом растворе. Через 3 и 24 ч животных декапитировали, предварительно забрав кровь из подключичной артерии. Для определения бора брали опухоль и прилежащие к ней ткани — кожу, мышцы. Дополнительно анализировали кровь и ткани органов выведения — печень, почки. Органы промывали в физиологическом растворе, осушали фильтровальной бумагой, взвешивали и замораживали при температуре -70 °С. Содержание бора определяли методом нейтронорадиационного анализа в тепловом пучке реактора «ИР-8» ФГУ РНЦ «Курчатовский институт». Количество бора выражали в мкг/г сырой ткани.
Результаты и выводы. 10В в значительных количествах накапливался в опухоли, а также в крови и во всех исследуемых органах уже через 3 ч после введения соединения (1). Через сутки содержание 10В несколько снижалось и лишь в почках оставалось постоянным. Полученные результаты подтвердили данные Fairchild, что порфирины накапливаются в паренхиматозных органах в большей степени, чем в опухоли. Тем не менее следует отметить, что уровень 10В, определяемый в опухоли, 19,6 и 13,1 мкг/г ткани через 3 и 24 ч соответственно отвечает необходимым условиям как количественно, так и по временному параметру для проведения облучения. Это делает (1) перспективным для дальнейшего изучения с целью адаптации его
к использованию при НЗТ. В частности, возможно введение бориро-ванного гема при облучении поверхностно расположенных опухолей.
Е. Ю. Колдаева1, Е. Ю. Григорьева1, А. С. Масько1,
В. А. Ольшевская2, А. В. Зайцев2, Рами Аюб2 Общая токсичность карборан-производных порфиринового ряда — препаратов для нейтронозахватной терапии (НЗТ)
1 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва
2 Институт элементоорганических соединений им. Несмеянова РАН, Москва
Введение. Использование НЗТ в онкологической клинике зависит в первую очередь от создания туморотропных 10В-содержащих препаратов, обеспечивающих оптимальную концентрацию и микрораспределение 10В в клетках злокачественных опухолей, оставаясь в них в течение необходимого для облучения времени. При этом соединение не должно быть токсично: ЛД50 — не ниже 25 мг/кг массы животного, МПД — не ниже 10 мг/кг массы животного.
Цель исследования. Изучить токсикологические характеристики двух карборановых комплексов порфиринового ряда: борирован-ного гема (1) и о-карборановой аминокислоты (2), содержащих 43 и 16 % 10В соответственно.
Материал и методы. Исследование проводили на здоровых мы-шах-самцах C57Bl/6 массой 20-22 г. Соединения вводили внутрибрюшинно в 0,2 мл ДМСО (1) и физиологического раствора (2). Испытывали дозы бора (мг) на 1 кг массы тела в интервале 15-175 мг/кг. Наблюдение за животными осуществляли в течение месяца. Павших мышей вскрывали, оценивали выраженные изменения кожных покровов и внутренних органов. Выживших животных взвешивали, оценивали общее состояние и поведение. Определяли значения максимально переносимой дозы (МПД), абсолютно смертельной дозы (ЛД100) и по методу Кербера рассчитывали среднесмертельную дозу (ЛД50).
Результаты и выводы. Соединения (1) и (2) при введении в суб-летальных дозах не вызывали видимых нарушений в состоянии и поведении животных. Были определены МПД, равные 100 и31,2 мг бора на 1 кг массы тела для (1) и (2) соответственно. Введение летальных доз вызывало в течение первых 30 мин после введения заторможенное состояние, а в случае (1) и атаксию. Летальные дозы приводили к смерти в первые 2 ч после введения препаратов с развитием судорог в случае (1). При вскрытии не обнаруживали визуализированных изменений внутренних органов. У выживших животных не отмечали потери массы тела. На основании картины поведения и состояния мышей можно говорить о нейротоксичности соединений (1) и (2). Рассчитанные значения ЛД50 составляли 137,5 мг бора на 1 кг массы тела для соединения (1) и 62,4 мг/кг для соединения (2).
Таким образом, оба соединения могут быть использованы для нейтронозахватной терапии опухолей с учетом существующей токсичности.
Е. Ю. Конторщикова1, М. А. Крыжанова2,
К. Н. Конторщикова1, В. В. Новиков2 3 Воздействие озонотерапии на сывороточное содержание растворимых дифференцировочных антигенов при онкогинекологических заболеваниях
1 Нижегородская государственная медицинская академия
2 Нижегородский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. И. Н. Блохиной
3 Нижегородский государственный университет им. Н. И. Лобачевского
Цель исследования. Исследовать сывороточный уровень растворимых антигенов CD38 (sCD38), CD50 (sICAM-3), CD95 (sFas) у больных онкогинекологическими заболеваниями при озонотерапии.
Материал и методы. В работе использовали образцы сыворотки крови 60 онкогинекологических больных (рак тела или шейки матки, рак яичников), которым в послеоперационном периоде наряду с общепринятым лечением проводили озонотерапию в виде внутривенного капельного введения озонированного физиологического раствора. В качестве группы сравнения использовали образцы сыворотки крови 40 больных, получавших стандартную терапию. Сывороточное содержание антигенов sCD38, sICAM-3, sFas определяли с помощью моноклональных антител серии ИКО разработанными
авторами иммуноферментными методами. Контролем служили образцы сыворотки крови здоровых женщин-волонтеров, сравнимых по возрасту с больными.
Результаты. Сывороточный уровень sFas-антигена у больных он-когинекологическими заболеваниями в предоперационном периоде был выше нормы в 3-4 раза и при проведении стандартной терапии имел тенденцию к снижению, но не достигал нормы к моменту выписки из стационара (11-12-е послеоперационные сутки). Включение в курс лечебных мероприятий озонотерапии приводило в эти же сроки к нормализации сывороточного уровня sFas-антигена. Сходным образом менялся сывороточный уровень растворимого антигена CD38. Повышенная в 2-3 раза его концентрация нормализовалась как при стандартном комплексе лечебных мероприятий, так и при его дополнении озонотерапией. Однако озонотерапия ускоряла этот процесс. Сывороточное содержание антигена sICAM-3 сохранялось у больных в пределах нормы как в предоперационный период, так и при выполнении всего спектра лечебных мероприятий.
Выводы. Озонотерапия приводит к ускоренной нормализации сывороточного содержания растворимых форм антигенов CD38 и Fas у больных онкогинекологическими заболеваниями. Представленные результаты согласуются с полученными ранее данными
0 положительном воздействии озонотерапии на клиническое течение послеоперационного периода.
С. Н. Корякин, С. Е. Ульяненко, В. А. Ядровская,
Я. В. Кривошеев
Влияние инфракрасного излучения на туморотропность меркаптододекабората натрия, меченного радиоактивным подом
Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск
Цель исследования. Изучить влияние инфракрасного излучения на распределение в опухоли и окружающих ее нормальных тканях меркаптододекабората натрия (131I-BSH) с целью повышения накопления препарата в опухоли и увеличения эффективности нейтронозахватной терапии (НЗТ).
Материал и методы. В работе были использованы мыши-самцы линии C57BI/6 с имплантированной под кожу бедра меланомой В16. В качестве борсодержащего соединения использовали 131I-BSH. Воздействие непрерывного потока инфракрасного (ИК) излучения на зону опухоли осуществляли с помощью светодиодной матрицы. Максимальная спектральная мощность излучения приходилась на длину волны 0,89 мкм при полуширине полосы 0,03 мкм. Интегральная по спектру мощность излучения составляла 4,10±0,15 мВт. Радиоактивность 131I-BSH в опухоли и окружающих тканях (кровь, кожа, мышца) регистрировали в разные сроки после введения соединения с помощью колодезного сцинтилляционного счетчика.
Результаты. Изучено несколько режимов воздействия ИК-све-том: до и после введения меченого соединения. При 10-минутном воздействии на зону опухоли ИК-излучения непосредственно перед введением 131I-BSH отмечено небольшое увеличение содержания соединения в опухоли и окружающих тканях во всем диапазоне исследования. Существенного увеличения накопления 131I-BSH в опухоли удалось достичь при воздействии ИК-излучения через 1 ч после введения соединения. Так, воздействие ИК-излучения на зону опухоли привело к повышению накопления 131I-BSH в опухоли, крови и коже через 6 ч после введения более чем в 3 раза по сравнению с накоплением без воздействия ИК-излучения.
Выводы. Из двух изученных схем воздействия инфракрасного света значимое увеличение накопления соединения в опухоли удалось достичь при воздействии ИК-излучения на зону опухоли через
1 ч после введения соединения. Полученные данные дают основание отнести инфракрасное излучение к модификаторам туморотроп-ных свойств меркаптододекабората натрия.
Н. Ю. Кульбачевская, Л. М. Михайлова, Е. Л. Членова, О. И. Коняева, Н. П. Ермакова, Е. В. Обухов
Влияние ультразвука на токсическое и побочное
действие терафтала
ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва
Цель исследования. Изучение влияния терапевтического ультразвука на токсическое и побочное действие терафтала у грызунов.
-о-
Материал и методы. Исследования проведены на 120 неинбред-ных крысах-самцах, массой 250-280 г. В экспериментах по острой токсичности терафтал (ТФ) вводили внутривенно однократно в интервале доз 20, 25, 30, 35 и 40 мг/кг. В экспериментах по субхрони-ческой токсичности ТФ применяли 3-кратно внутривенно ежедневно в разовой дозе 5 и 10 мг/кг (суммарная доза 15 и 30 мг/кг), соответствующих ^ МПД и МПД при многократном введении. Через 15-20 мин после введения препарата крысы подвергались воздействию ультразвука (УЗ) УСДТ-установки в терапевтическом фиксированном режиме под водой с двух полей: 1-е — 0,88 МГц мощностью 1 Вт/ см2; 2-е — 2,7 МГц мощностью 2 Вт/ см2. Время воздействия во всех исследованиях — 10 мин. Оценку влияния УЗ при совместном применении с ТФ на органы и ткани проводили после многократного воздействия.
Результаты. В исследованиях по острой токсичности установлено, что УЗ оказывает влияние на токсичность ТФ, ускоряя реализацию токсических эффектов препарата (гибель в первые минуты и часы) без изменения расчетных токсических доз и клинической картины интоксикации. При совместном многократном применении ТФ в суммарной дозе 30 мг/кг с УЗ токсические эффекты не выявлены. В то же время один ТФ в той же дозе при многократном внутривенном применении вызывает снижение количества эритроцитов и уровня гемоглобина в периферической крови крыс (в среднем на 20-30 %), увеличивает активность ферментов печени (АЛТ — в 3 раза, АСТ — в 2 раза), а также вызывает умеренное увеличение количества мочевины. ТФ при многократном внутривенном применении в суммарной дозе 15 мг/кг при совместном применении с УЗ и один ТФ не вызывают функциональных изменений в органах и тканях животных.
Выводы. Таким образом УЗ снижает риск возникновения функциональных повреждений органов и тканей животных при применении ТФ: предотвращает развитие гематологической токсичности, снижает гепато- и нефротоксичность.
Исследование поддержано Правительством Москвы.
В. Г. Лихванцева, О. Ю. Мерзлякова Транспупиллярная терапия отграниченных гемангиом хориоидеи как альтернатива брахитерапии
ГУ НИИ глазных болезней РАМН, Москва
Введение. Гемангиома хориоидеи (ГХ) — редкая внутриглазная опухоль. Ее доля среди всех внутриглазных новообразований едва достигает 0,76 %. Несмотря на молодой возраст пациентов (медиана 35,2 лет) и отсутствие угрозы для их жизни, фатальные исходы для зрительных функций и глаза как косметического органа в отсутствие лечения наблюдаются довольно часто. Биологические особенности поведения ГХ — юкстапапиллярная локализация с охватом более 50 % диска зрительного нерва, и/или присутствие высокой экссудативной отслойки сетчатки, и/или большая протяженность ее основания — порой не позволяют прибегнуть к традиционной бра-хитерапии, в связи с чем поиск новых методов лечения ГХ чрезвычайно актуален.
Цель исследования. Изучить возможности транспупиллярной термотерапии (ТТТ) в лечении ГХ.
Материал и методы. Наблюдали 5 пациентов с отграниченными гемангиомами хориоидеи (ГХ). Высота опухолей варьировала от 2,5 до 5,5 мм, площадь основания — от 3 до 20 мм. В 4 случаях ГХ располагалась юкстапапиллярно, охватывая более 50 % окружности диска зрительного нерва, что служило противопоказанием для применения брахитерапии. В 1 случае ГХ была в центральном отделе глазного дна, но диаметр ее основания составлял 20 мм, что также превышало возможности брахитерапии. На 1-м этапе всем пациентам проводили отграничительную лазеркоагуляцию сетчатки с целью профилактики отслойки после ТТТ. Последнюю проводили спустя 2 нед. после формирования прочного хориоретинального рубца вокруг опухоли на диодном лазере с длиной волны 810 нм производства IRIDEX (США). Мощность лазерного воздействия варьировала от 250 до 1150 мВт и зависела от высоты опухоли и близости к центральным отделам сетчатки и диску зрительного нерва. Экспозиция всегда составляла 60 с. Диаметр светового пятна в фокальной плоскости колебался от 600 до 3000 мкм, коли-
чество сеансов облучения — от 1 до 3. Срок наблюдения составил 15-19 мес.
Результаты. У всех 5 пациентов была достигнута полная регрессия опухоли с формированием плоского хориоретинального рубца. В 1 случае после ТТТ развилась высокая экссудативная отслойка сетчатки, которая прилегла самостоятельно в течение 1 мес.
Выводы. ТТТ может быть не только методом выбора и/или альтернативой в лечении отграниченных ГХ, но и применяться в тех случаях, где брахитерапия непригодна.
В. И. Соловьев, А. В. Борсуков, С. Н. Щаева Возможности электрохимического лизиса в малоинвазивном лечении очаговых доброкачественных заболеваний молочной железы
Областной онкологический клинический диспансер, Смоленск ПНИЛ «Ультразвуковые исследования и малоинвазивные технологии», Смоленск
Цель исследования. Провести оценку клинической эффективности электрохимического лизиса (ЭХЛ) в лечении локализованных форм мастопатии.
Задачи. Оценить результаты ЭХЛ при воздействии на локализованное образование и здоровую ткань молочной железы вокруг очага в различных режимах лизиса, разработать алгоритм выбора индивидуального режима ЭХЛ.
Материал и методы. Проведены сеансы ЭХЛ доброкачественных очаговых заболеваний молочной железы на 50 послеоперационных препаратах, из них 36 — фиброаденомы и 14 — узловая форма фиброзно-кистозной мастопатии (ФКМ). Применялись моно- и биполярные электроды диаметром 1,5-2,5 мм на аппарате ECU-300 (фирмы Soring, Германия). Количество сеансов лизиса 1-8 на один курс, количество курсов 1-4.
Результаты. Проведена патоморфологическая оценка результатов. За 1 сеанс асептический некроз достигал 30 мм в диаметре, для опухолей большего размера применялось 4-6 монополярных электродов с их позиционированием во всех отделах очага. Полный ответ на лечение (46,5 %) после 1 курса (1-3 сеанса) наблюдался у доброкачественных опухолей (фиброаденом) диаметром 25-35 мм. По периферии очага у 98 % препаратов фиброаденом гистологически выявлены специфические поражения клеток электротоком в виде глубокой дистрофии. У опухолей диаметром 40-55 мм выявлен частичный ответ (34,5 %), бульшую часть составили узловые формы ФКМ. Предположительно в основу алгоритма выбора индивидуального режима ЭХЛ будут входить следующие характеристики: размер опухоли, морфологическая структура (соотношение эпителиального и соединительнотканного компонентов, степень выраженности фиброза).
Выводы. Установлен эффективный режим ЭХЛ для лечения фиброаденом молочной железы до 25 мм в диаметре: время воздействия 40 мин при силе тока 90 мА. Целесообразно включение методик ЭХЛ для лечения локализованных форм мастопатии в программу хирургической помощи больным с доброкачественными опухолями молочной железы.
Е. В. Хорошева1, И. С. Голубева1, Г. К. Герасимова1, А. Л. Николаев2
Изучение цитотоксического эффекта комбинации ультразвукового воздействия с терафталом
1 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва
2 МГУ им. М. В. Ломоносова, Москва
Введение. Ранее было показано, что ультразвуковое (УЗ) воздействие на опухоли животных с 2 полей разной частоты (2,64 и 0,7 МГц) приводит к замедлению роста опухоли, а в сочетании с введением животным терафтала (ТФ) противоопухолевый эффект значительно возрастает (Н. В. Андронова, Е. М. Трещалина). При этом выявлено значительное повреждение не только опухолевой ткани, но и сосудистого русла опухоли.
Поскольку противоопухолевый эффект может быть следствием повреждения сосудов, питающих опухоль, представляло интерес оценить прямое цитотоксическое действие на опухолевые клетки in vitro комбинации ТФ+УЗ при УЗ-воздействии с 1 и 2 полей.
■ ■
39
Цель исследования. Оценка прямого цитотоксического действия на опухолевые клетки разных режимов УЗ-воздействия и в сочетании с препаратом ТФ.
Материал и методы. ТФ (окта-4,5-карбоксифталоцианин кобальта II) синтезирован в ФГУП ГНЦ «НИОПИК». УЗ-воздей-ствие на клетки проводили на ультразвуковой установке, специально разработанной для исследований in vitro. Суспензию клеток асцитного рака Эрлиха (106 кл./мл) в среде RPMI-1640 с 10 % фетальной сыворотки помещали в 20 мл флаконы и инкубировали 2 ч при температуре 37 °С в присутствии ТФ (10 7М, 10 6М, 10 5М) или без ТФ (контроль). Затем клетки отмывали от препарата и помещали в свежую питательную среду. УЗ-воздействие осуществляли в течение 3 мин через дно флакона, помещенного в воду (37 °С) как проводящую среду. Режимы УЗ-воздействия: режим 1 — с одного поля при частоте 2,64 или 0,7 МГц разной мощности; режим 2 — с двух полей с такими же характеристиками. Затем клетки инкубировали в СО2 термостате при 37 °С в течение 48 ч, после чего оценивали их жизнеспособность с помощью МТТ-теста.
Результаты. Установлено, что УЗ-воздействие с одного поля частотой 2,64 МГц и мощностью 1,3 Вт/см2 не влияет на жизнеспособность опухолевых клеток. При увеличении мощности в диапазоне 1,7—3,3 Вт/см2 наблюдается гибель 80 % клеток. УЗ-воздействие с 1 поля при частоте 0,7 МГц и мощности в диапазоне 0,9-2,3 Вт/см2 не изменяет жизнеспособность клеток. Воздействие на клетки УЗ с 2 полей (1-е поле — 2,64 МГц, 1,3 Вт/см2, 2-е поле — 0,7 МГц, 0,9-2,3 Вт/см2), каждое из которых не обладает прямым цитотоксическим действием, также не влияло на жизнеспособность клеток. Если клетки перед УЗ-воздействием инкубировали в течение 2 ч в среде с разными концентрациями ТФ, то число жизнеспособных клеток снижалось в прямой зависимости от концентрации ТФ: на 40 % при 10 7М ТФ, на 60 % при 10 6М и на 80 % при 10 5М. Без УЗ-воздействия ТФ в исследованном диапазоне концентраций не влиял на жизнеспособность клеток.
Выводы. Таким образом, ТФ является сильным соносенсибилизатором, значительно усиливающим прямое повреждающее действие УЗ на клетки.
Работа выполнена в рамках НТП «Разработка и внедрение в медицинскую практику новых методов и средств диагностики и лечения злокачественных и других заболевании».
Е. Л. Членова, Л. М. Михайлова, Н. Ю. Кулъбачевская, И. Б. Меркулова, О. И. Коняева, Н. П. Ермакова,
Т. В. Абрамова
Влияние ультразвука на токсичность карбоплатина
ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва
Цель исследования. Изучение влияния ультразвука УСДТ-установ-ки, предназначенной для сонодинамической терапии онкологических больных, на токсичность противоопухолевого препарата карбоплатина.
Материал и методы. Исследования проведены на 160 неинбред-ных крысах-самцах массой 250-300 г. Карбоплатин (РИагша-сіа&ЦріоЬп) применяли внутривенно однократно и многократно (3 раза) ежедневно в диапазоне доз 30-120 мг/кг. Суммарные дозы при многократном введении препарата соответствовали МИД и */4 МИД при однократном применении карбоплатина. Через 15-20 мин после введения препарата крысы подвергались воздействию ультразвука (УЗ) в терапевтическом фиксированном режиме под водой (в ванне) с двух полей: 1-е — 0,88 МГц мощностью 1 Вт/см2; 2-е — 2,7 МГц мощностью 2 Вт/см2. Температура воды 34,5-35,0 °С. Время воздействия во всех исследованиях 10 мин. Иосле многократного воздействия проводили функциональную и гистологическую оценку влияния карбоплатина в комбинации с УЗ на органы и ткани животных.
Результаты. Установлено, что УЗ не изменяет переносимости животными карбоплатина, а именно: не увеличивает количество павших животных, не влияет на величину токсических доз карбоплати-на, не изменяет сроков гибели и картину интоксикации у животных. УЗ-воздействие на животных, получавших многократно карбоплатин в МИД, не усиливает его гематологической токсичности (лейко-и тромбоцитопении) и функциональных изменений в почках (клетки крови и белок в моче). Однако УЗ усиливает у животных морфологические проявления нефро- и гепатотоксического действия карбопла-тина. УЗ-воздействие на животных, получавших многократно кар-боплатин в дозе 1/4 МИД, не оказывает влияния на морфофункциональные изменения в органах и тканях крыс, вызванных препаратом.
Выводы. УЗ не увеличивает токсичности карбоплатина по критериям острой токсичности. УЗ усиливает морфологические изменения в печени и почках, не влияя на изменения функционального состояния систем и органов животных, вызванные препаратом. Зафиксированные морфофункциональные изменения после применения карбоплатина и его комбинации с УЗ носят обратимый и дозозависимый характер.
Исследование поддержано Правителъством Москвы.
-Q-
АРГЛАБИН
УДК 615.277.3.038«Арглабин»
С. М. Адекенов
Оригинальный препарат арглабин. Перспективы фармакологических исследований и применение в клинике
Институт фитохимии МОН РК, Караганда, Казахстан
Противоопухолевые препараты растительного происхождения находят широкое применение в комплексной химиотерапии при лечении гематобластозов и многих солидных опухолей, таких как рак легкого, молочной железы, саркома. Во флоре Казахстана насчитывается более 6 тыс. видов растений, из которых лишь 150 используются в медицине.
В Институте фитохимии проведено химическое исследование экстрактов 160 видов растений Казахстана с одновременным скринингом на биологическую активность. Перспективными для дальнейшего углубленного изучения оказались 52 вида, экстрактивные вещества которых проявили биологическую активность. Сравнительно выраженной противоопухолевой активностью среди них обладал экстракт наземной части эндемичного растения полыни гладкой (Artemisia glabella Kar. et Kir.) [12]. Химическое изучение полыни гладкой показало содержание в его цветочных корзинах, листьях и бутонах сесквитерпеновых лактонов (арглабин (1), арголид (2) и дигидроарголид (3)) [1; 19], флавоноидов (цирсилинеол, кастицин,
лютеолин, бонанзин, триптофан, пектолинаригенин) [14], эфирного масла (1,8-цинеол, линалоол, терпинеол-4, а-терпинеол) [7], аминокислот (глутамин, аргинин, глутаминовая кистота, пролин, тирозин, триптофан, лейцин), углеводов (глюкоза, рамноза, дульцит), феноло-кислот (галловая, кофейная, салициловая, коричная) [9].
(1) (2) (3)
По результатам биоскрининга ряда сесквитерпеновых лактонов установлены выраженные противоопухолевые свойства арглабина (1), что обусловило выбор его в качестве источника для разработки нового лекарственного препарата [2]. На следующем этапе как для исследования зависимости структура — биологическая активность, так и для поиска новых биологически активных соединений нами получено 37 производных арглабина.
№1/том 5/2006 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
