CC BY
65
№ 6 - 2009 г. 14.00.00 медицинские науки
УДК 616-006.04:615.849.12]:615.032
ОСНОВНЫЕ ЭТАПЫ ТКАНЕВОЙ СЕЛЕКЦИИ И ПУТИ ВВЕДЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ БОР-НЕЙТРОНОЗАХВАТНОЙ ТЕРАПИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ
(ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР)
11 2 Ю.В. Пахомова , В.В. Каныгин , С.М. Давыдова
]ГОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет РОсздрава»
(г. Новосибирск)
2 •,
ГУ «НИИ физиологии СО РАМН» (г. Новосибирск)
В статье рассматриваются проблемы перерождения нормальных клеток в опухолевые, чувствительность клеток к физическим и химическим факторам, в том числе к лекарствам, а также определяется потенциальная мутагенность и канцерогенность этих факторов, т. е. их способность вызывать мутации и опухоли.
Ключевые слова: тканевые культуры, тканевая селекция, клеточная селекция
Пахомова Юлия Вячеславовна - доктор медицинских наук, профессор кафедры патологической физиологии и клинической патофизиологии ГОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава», телефон рабочий: (383) 225-39-78
Каныгин Владимир Владимирович - кандидат медицинских наук, ассистент кафедры нейрохирургии ГОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава», телефон рабочий: (383) 229-28-84
Давыдова Светлана Михайловна - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории нейрорегуляции ГУ «НИИ физиологии СО РАМН», контактный телефон: (383) 229-10-82
Культуры тканей применяются для решения как фундаментальных теоретических проблем, так практических задач в области медицины и биологии. Изучение биологического взаимодействия тепловых нейтронов с атомами бора 10В при бор-нейтронзахватной терапии (БНЗТ) на тканевых культурах имеет реальное преимущества по сравнению с исследованиями на животных и ставят клеточные культуры как экспериментальную систему в один ряд с культурами микроорганизмов [1].
Тканевые культуры позволяют исследовать такие важные для БНЗТ проблемы, как перерождение нормальных клеток в опухолевые, всесторонне изучать их свойства, чувствительность клеток к физическим и химическим факторам, в том числе к лекарствам, а также определять потенциальную мутагенность и канцерогенность этих факторов, т. е. их способность вызывать мутации и опухоли [17]. Разработка методов длительного культивирования тканей позволяет формировать банки клеточных линий с определёнными генетическими и биохимическими свойствами [19]. Тканевые культуры позволяют выращивать клетки, ткани, небольшие органы (или их части) животного и человека [5], вне организма на/в питательной среде in vitro. При этом культуральная среда in vitro должна создавать для клетки такие условия, в которых она находится in vivo, только тогда клетка сможет существовать, пролиферировать и дифференцироваться.
Необходимым условием для развития клеточных линий опухолевых клеток является постоянное увеличение количества клеток, что непосредственно связано с поддержанием условий, способствующих максимальной клеточной пролиферации. Большинство клеток млекопитающих могут расти только, будучи прикреплёнными к субстрату - к другим клеткам, коллагену, стеклу или пластику [19].
Тканевая селекция - одно из направлений клеточных технологий in vitro, в основе которой используют следующие приемы [11]:
- прямая (позитивная) селекция, при которой выживает лишь определенный искомый мутантный тип клеток;
- непрямая (негативная) селекция, основанная на избирательной гибели делящихся клеток дикого типа и выживания метаболически неактивных клеток, но требующая дополнительной идентификации у них мутационных изменений;
- тотальная селекция, при которой индивидуально тестируются все клеточные клоны;
- визуальная селекция и неселективный отбор, когда вариантная линия может быть идентифицирована среди всей популяции клеток визуально или при использовании биохимических методов (тонкослойная или жидкостная хроматография, радиоиммунный анализ, микроспектрофотометрия и др.).
Изучение биологического взаимодействия тепловых нейтронов с атомами бора 10B при БНЗТ показало, что клетки одной и той же ткани, выращиваемые в одном сосуде in vitro, могут значительно различаться между собой по хромосомным наборам (диплоидные, полиплоидные, анеуплоидные). Такая гетерогенность культивируемых тканевых культур обусловлена генетической, эпигенетической и модификационной изменчивостью, причинами которой являются [6]:
1) нарушение коррелятивных связей при выделении первичного экспланта;
2) действие компонентов среды;
3) влияние продуктов метаболизма, накапливающихся в среде;
4) гетерогенность исходного материала и селекция клеток определенного типа.
Хромосомная изменчивость клеток в тканевой культуре является результатом нарушений митоза, что приводит к образованию полиплоидных и анеуплоидных клеток. Клетки различного уровня плоидности различаются по скорости деления и роста, по устойчивости к неблагоприятным воздействиям, начинают конкурировать, и одни из них начинают преобладать. Такой процесс возрастающего доминирования в популяции клеток определенного типа называется клеточной селекцией [11].
Метод мутагенеза на уровне клеток имеет ряд преимуществ: экономится площадь (в одной чашке Петри можно культивировать 107-108 клеток); мутантные признаки на уровне отдельных клеток проявляются довольно быстро; возможно получение новых типов мутаций, в том числе и биохимического характера; экономится время и трудозатраты на получение нового желаемого признака. Общая схема получения мутантных форм путем селекции на клеточном уровне состоит из нескольких этапов (рис. 1):
Измененные при мутагенной обработке клетки могут быть выделены в условиях культивирования in vitro путем прямого и непрямого отборов, а также при тестировании отдельных клеточных колоний. Прямой отбор состоит в добавлении к питательным средам отдельных компонентов, к которым обычные, неизмененные клетки не устойчивы. Непрямой отбор (негативная селекция) заключается в создании условий культивирования, при которых рост неизмененных клеток либо задерживается, либо эти клетки погибают (например, культивирование при низких или высоких температурах на средах с недостатком отдельных компонентов и т.д.) [11].
Пути введения препаратов для БНЗТ. Многочисленные исследования показывают биораспределение препаратов бора 10B между опухолевой и здоровой тканями. Сегодня нет ни одного препарата 10B, который бы мог гарантировать, что в ходе БНЗТ здоровая ткань не будет затронута. Установлено, что опухолевые клетки проникали за границы здоровых тканей и распространялись в сером и белом веществе мозга у пациентов с глиомами, что подтверждено данными при оперативном лечении [9].
В настоящее время главной проблемой БНЗТ является отсутствие высокотропных к опухоли борсодержащих соединений. Однако до сих пор не известны препараты бора, которые бы не затрагивали здоровые клетки [9]. Наибольшую популярность в ходе проведения БНЗТ при опухолях головного мозга получили препараты с низким содержанием бора: сульфидрил натрия (Na2B12H11SH, BSH) и L-p-
дигидроксиборфенилаланин (BPA), безопасность которых in vitro доказана в экспериментах. Применяемые на практике соединения (BSH и BPA) далеки от идеальных, однако это пока единственные препараты, в определенной мере удовлетворяющие требованиям БНЗТ. Для проведения успешных клинических испытаний БНЗТ должны быть обеспечены условия, способствующие накоплению препарата бора 10B в ткани опухоли в терапевтической концентрации, низкому уровню накопления препарата бора 10B в здоровых тканях, и прицельное размещение источника нейтронного пучка на участке опухоли. Однако наблюдалась высокая концентрация этих препаратов бора в здоровых тканях. Другим препаратом выбора для БНЗТ является карборанилпорфин [12].
Чужеродные для организма химические вещества, не являющиеся естественными метаболитами и не входящие в естественный биотический круговорот, называются ксенобиотиками. К ксенобиотикам можно отнести препараты бора 10B, применяемые при БНЗТ, поэтому многие известные факты, касающиеся метаболизма ксенобиотиков, можно экстраполировать применительно к биологическому действию препаратов бора 10B. Под влиянием ксенобиотиков в организме изменяется скорость протекания биохимических реакций. Ксенобиотики действуют на специфические рецепторы, ферменты, мембраны клеток или прямо взаимодействовать с веществами клеток. Кроме того, ксенобиотики конкурируют с естественными регуляторами (медиаторами) за места связывания в специфических рецепторах (антогонизм). Блокада рецептора, вызванная конкурентным антагонистом, может быть устранена большими дозами вещества-агониста или естественного медиатора. Выбор пути ксенобиотиков в медицине и биологии определяется многими факторами - химическими свойствами действующего вещества, степенью тяжести заболевания, расположением органа или системы, куда должно быть доставлено вещество. Системная элиминация - удаление ксенобиотика после его попадания в системный кровоток. Несинтетическая биотрансформации - реакция, в результате которой идет перестройка молекул субстрата. Метаболиты ксенобиотиков образуются в результате окисления или, реже, восстановления более полярные (а, значит, более гидрофильные) и менее активные метаболиты. Происходит это под влиянием монооксигеназной системы, основными компонентами которой являются цитохромы Р-450 и Р-В5, а также НАДФ. Однако, под влиянием этой системы из ряда ксенобиотиков могут образовываться высоко реакционно-способные вещества, в том числе эпоксиды и азотсодержащие оксиды, которые при слабости обезвреживающих их систем (эпоксидгидраз, глутатионпероксидаз) способны взаимодействовать со структурными и ферментными белками и повреждать их. Количественно элиминацию ксенобиотика можно оценить и с помощью коэффициента элиминации. Он отражает ту часть (в %) лекарственного вещества, на которую происходит уменьшение его концентрации в организме в единицу времени (чаще за сутки).
При увеличении дозы бора 10B при БНЗТ до определенного предела желаемый эффект возрастает, но при этом могут возникать нежелательные эффекты. Препараты бора 10B при БНЗТ имеют не одну, а несколько кривых отношения «доза-эффект» для его различных сторон действия. Отношение доз лекарства, при которых вызывается нежелательный или желаемый эффект, используют для характеристики границы безопасности или терапевтического индекса препаратов бора 10B. Терапевтический индекс препаратов бора 10B при БНЗТ можно рассчитывать по соотношению их концентраций в плазме крови, вызывающих нежелательные (побочные) эффекты, и концентраций, оказывающих терапевтическое действие, что более точно может характеризовать соотношение эффективности и риска применения данного ксенобиотика.
Распределение препарата бора 10B - борфенилаланина - в органах и тканях собаки с остеосаркомой костей таза при БНЗТ показало, что концентрация накопленного бора
10B, введенного внутривенно в регионарный кровоток, в опухолевой ткани в три раза превысила концентрацию в нормальных тканях. Поэтому, если для облучения нормальной кости взяли толерантную дозу 12 Гр-экв., чтобы не нарушать способность кости к перестройке, то опухоль облучали в дозе 50 Гр-экв., т. е. дозой, губительной для опухолевых клеток. Авторами была обоснована необходимость подведения толерантных доз радиации применительно к нормальной ткани и сделан вывод о терапевтической эффективности использования БНЗТ.
В экспериментальной модели опухоли защечного мешка хомяков также был использован препарат бора 10B - борфенилаланин, вводимый интратуморально. Авторами проведено исследование по биораспределению бора в опухоли и здоровых тканях. Исследования показали, что БНЗТ вызывает долгосрочный достоверный блокирующий эффект при развитии опухоли без радиотоксического повреждения здоровых тканей и приводит к развитию радитолерентности. После БНЗТ ткани способны утрачивать гистологические признаки ранее диагностированной опухоли, что доказало эффективность препарата бора 10B - борфенилаланина [8, 10, 18].
Другие авторы на мышах с привитой меланомой В-16 и крысах с имплантированной саркомой М-1 в качестве борсодержащих соединений использовали меркаптододекарбонат натрия (Na2B12H11SH, BSH) и родандодекарбонат натрия (Na2B12H11SCH, BCSH), меченные 131I и вводимые внутрибюшинно. Для изучения биораспределения 131I-BSH и 131I-BCSH по органам и тканям мышей с меланомой В-16 производили внутрибрюшинное введение соединения. Введенная радиоактивность и количество бора на одно животное составляли 0,3 МБк и 20 мкг соответственно [14].
Кроме того, исследование проводили на здоровых мышах-самцах С57Bl/6 массой 20-22 г. Для токсикологического исследования препарат бора 10B - роданододекаборат натрия - вводили внутрибрюшинно в 0,2 мл физиологического раствора. Вводимые дозы роданододекабората натрия варьировали от 47 до 306 мг 10В/1 кг массы тела. Для изучения биораспределения водный раствор, содержащий 10B из расчета 150 мг /1 кг массы тела, внутрибрюшинно вводили животным на 11 -й день после трансплантации опухолевых клеток. Животных декапитировали через 1; 3; 6; 12; 24 и 48 часов после введения. Забирали опухоль, кожу, мышцы, почки, печень, легкие, сердце. Содержание препарата бора 10B - роданододекаборат натрия - определяли методом
нейтронорадиационного анализа.
В результате проведенного эксперимента выяснилось, что после введении сублетальных доз не наблюдали видимых отклонений в состоянии и поведении животных. При введении летальных доз смерть наступала не ранее, чем через 24 часов. Визуализированных изменений внутренних органов не обнаруживали. Выжившие животные не имели признаков хронического отравления. LD50 составляла 236,25 мг 10B /
1 кг массы тела. МПД была равна 135 мг 10B/1 кг массы тела. Максимум концентрации препарата 10B - роданододекаборат натрия в опухоли достигался через 1 час после введения и был равен 47,4 мкг/1 г ткани. Оптимальный градиент содержания бора 10B между опухолью и прилежащими тканями достигался к 24 часам после введения: в опухолиопределяли 15,9 мкг бора 10B на 1 г ткани, в коже, мышцах и крови - в 1,7; 5,5; 3,4 раза меньше. Таким образом, 10B препарата роданододекаборат натрия в сравнении с используемым в Японии, США и Европе BSH (10В-меркаптододекаборатом натрия) менее токсичен, а по степени накопления в опухоли в 3 раза превосходит BSH [4].
В радиотерапии важным критерием при планировании лучевого воздействия является относительная биологическая эффективность. При БНЗТ относительная
биологическая эффективность продуктов реакции 10B (n,a) и 7Li находится в пределах от
2 до 6. Рядом исследовательских групп показана различная биологическая эффективность реакции 10B (n,a,y) и 7Li для борсодержащих соединений, для которых концентрация бора в опухоли на момент проведения БНЗТ была одинаковой. В связи с этим при расчете поглощенной дозы при БНЗТ вместо относительной биологической эффективности используют более корректное понятие «биологическая эффективность соединения».
При этом последняя будет зависеть от геометрического расположения бора относительно мишени. На коэффициент биологической эффективности соединения могут влиять способ введения соединения, характер накопления бора в ткани и клетке, доза за фракцию, а также размер клеточного ядра. Поэтому необходимо, чтобы экспериментальные условия определения значения биологической эффективности соединения были как можно ближе к клинической схеме проведения БНЗТ.
Биораспределение борсодержащих соединений BSH и BPA оценивали на модельных опухолях. В ходе исследования было установлено, что для BPA и BSH биологическая эффективность соединения составляет 3,8 и 2 для опухолей головного мозга, 1,3 и 0,3-0,5 для головного мозга, 2,5 и 0,8 для кожи соответственно. Оценка коэффициента биологической эффективности соединения представляет значительные трудности, так как требует изучения как внутритканевого, так и внутриклеточного распределения бора, которое носит индивидуальный характер. Распределение 131I-BSH в целостном организме изучали с помощью гамма-камеры. Мышам с меланомой В-16 внутрибрюшинно вводили меченое соединение радиоактивностью около 2,2 МБк на 1 животное. В качестве агента, влияющего на накопление борсодержащего соединения в опухоли и окружающих тканях, использовали введение глюкозы, нагрев горячим воздухом зоны опухоли и локальное воздействие на опухоль инфракрасно излучения. Сравнение данных о распределении 131I-BCSH и 131I-BSH у мышей с меланомой В-16 показало, что 131I-BCSH превосходит 131I-BSH не только по абсолютному накоплению бора в экспериментальной меланоме, но также и по отношению содержания препарата в опухоли и окружающих тканях [14].
Помимо бора 10B, при НЗТ активно применяется также гадолиний (ГНЗТ), который имеет более высокое тепловое нейтронное поперечное сечение захвата (в 66 раз больше, чем у бора 10B) [7]. Обе методики аналогичны и основаны на принципе захвата и накопления в тканях опухоли нейтронов гадолиния (153Gd и 157Gd) [16] и бора 10B [15]. В обоих случаях возрастает терапевтическая эффективность тепловых или эпитепловых нейтронных доз [13]. Механизмы действия БНЗТ и ГНЗТ на опухоль различны. Так, при БНЗТ опухолевые клетки погибают под воздействием a-частиц, которые возникают во время реакции нейтронного захвата (длина их пробега соизмерима с диаметром опухолевой клетки), а при ГНЗТ опухоль испытывает воздействие жесткого у-излучения и эмиссии электронов с разной энергией [2]. При применении БНЗТ клетки опухолевой ткани могут быть эффективно разрушены, но в тот же момент создается угроза гибели нормальных клеток окружающей опухоль ткани, вследствие накопления в них бора 10B, поэтому изучение биологических эффектов действия нейтронов бора 10B при БНЗТ на клетки млекопитающих и человека продолжается сегодня во многих странах мира [3].
Таким образом, культуры различных тканей могут с успехом применяться для изучения биологического взаимодействия тепловых нейтронов с атомами бора 10B при БНЗТ, что открывает реальные преимущества по сравнению с исследованиями на животных.
Список литературы
1. Анискина А. И. Влияние аминокислот на клеточную пролиферацию и апоптоз в органотипической культуре тканей молодых и старых крыс / А. И. Анискина [и др.] // Успехи геронтологии. - 2006. - № 19. - С. 55-59.
2. Арнопольская A. M. Результаты лечения опухолевых поражений у собак посредством нейтронзахватной терапии / А. М. Арнопольская [и др.] // Рос. ветеринарный журн. - 2007. - № 3. - С. 23-27.
3. Григорьева Е. Ю. Нейтронозахватная терапия мышиной меланомы В16 на новых носителях / Е. Ю. Григорьева [и др.] // Рос. биотерапевт. журн. - 2007. - Т. 6, № 1. -С. 82.
4. Острая токсичность и биораспределение роданододекабората натрия -препарата для нейтронозахватной терапии // Рос. биотерапевт. журн. - 2007. - Т. 6, № 1. -С. 46.
5. Фрешни Р. Культура животных клеток / Р. Фрешни // Методы. - М. : Мир, 1989. - 318 с.
6. Charlesworth B. The effect of life-history and mode of inheritance on neutral genetic variability / В. Charlesworth // Genetical Research. - 2001. - Vol. 77, N 2. - Р. 153-166.
7. Fujimoto T. Accumulation of MRI Contrast Agents in Malignant Fibrous Histiocytoma for Gadolinium Neutron Capture Therapy / Т. Fujimoto [et al.] // A new option against cance : 13th International Congress on Neutron Capture Therapy. - Florence, 2008. - Р. 261-264.
8. Heber E. M. Effect of Different BNCT protocols on DNA Synthesis in Precancerous and Normal Tissues in an Experimental Model of Oral Cancer / Е. М. Heber [et al.] // From the Past to the Future : 12th International Congress on Neutron Capture Therapy. - Kagawa, 2006. -Р. 131-135.
9. Hsieh C. H. Biological vibrational spectroscopy: From a cellular to a sub-cellular level / С. Н. Hsieh [et al.] // Dissertation Abstracts International. - 2003. - Vol. 63, N 1. - Р. 0226.
10. Hughes A. M. Boron Neutron Capture Therapy (BNCT) Inhibits Tumor Development from Field-Cancerized Tissue: An Experimental Study that Supports a New Application of BNCT / А. М. Hughes [et al.] // A new option against cance : 13th International Congress on Neutron Capture Therapy. - Florence, 2008. - Р. 315-318.
11. Jaber B. L. Impact of dialyzer membrane selection on cellular responses in acute renal failure: A crossover study / B. L. Jaber [et al.] // Kidney International. - 2000. - Vol. 57, N 5. - Р. 2107-2116.
12. Kawabata S. Evaluation of Carboranylporphyrins as Boron Delivery Agents for Neutron Capture Therapy / S. Kawabata [et al.] // From the Past to the Future : 12th International Congress on Neutron Capture Therapy. - Kagawa, 2006. - Р. 123-127.
13. Kinashi Y. Locus in CHO cells against thermal neutron radiation / Y. Kinashi [et al.] // Neutron capture therapy of epidermal growth factor (+) gliomas using boronated cetuximab (IMC-C225) as a delivery agent : Topics in neutron Capture therapy : Proceedings of the Eleventh World Congress on Neutron Capture Therapy. - 2004. - Vol. 61, N 5. - P. 899-903.
14. Koryakin S. Possibilllities of the use of BSH labeled with radioactive iodine for planning of BNCT / S. Koryakin [et al.] // In : Research and Development in Neurol Сapture Therapy. - Essen 2002. - P. 897-902.
15. Masunaga S. The usefulness of 2-nitroimidazole-sodium borocaptate-10B conjugates as 10B-carriers in boron neutron capture therapy / S. Masunaga [et al.] // Neutron capture therapy of epidermal growth factor (+) gliomas using boronated cetuximab (IMC-C225) as a delivery agent : Topics in neutron Capture therapy : Proceedings of the Eleventh World Congress on Neutron Capture Therapy. - 2004. - Vol. 61, N 5. - P. 953-959.
16. Miyata S. Biodistribution and Imaging studies on F98 rat glioma by convection enhanced delivery of transferrin targeting PEG liposomes encapsulating both BSH and iodine
contrast agent / S. Miyata [et al.] // A new option against cance : 13th International Congress on Neutron Capture Therapy. - Florence, 2008. - Р. 303-306.
17. Stiborova M. Identification of a genotoxic mechanism for 2-nitroanisole carcinogenicity and of its carcinogenic potential for humans / М. Stiborova [et al.] // Carcinogenesis. - 2004. - Vol. 25, N 5. - Р. 833.
18. Trivillin V. A. Radiobiology of BNCT mediated by GB-10 and GB-10 + BPA in experimental oral cancer / V. A. Trivillin [et al.] // Neutron capture therapy of epidermal growth factor (+) gliomas using boronated cetuximab (IMC-C225) as a delivery agent : Topics in neutron Capture therapy : Proceedings of the Eleventh World Congress on Neutron Capture Therapy. - 2004. - Vol. 61, N 5. - P. 939-947.
19. Welniak L. A. Cellular associations in co-cultures of murine pro-B cells and bone marrow stromal cells: Regulation of cellular adhesion and migration / L. A. Welniak // Dissertation Abstracts International. - 1998. - Vol. 58, N 11. - Р. 5753.
TISSUE SELECTION MAJOR STAGES AND MALIGNANT TUMORS BOR NEUTRON INVASIVE MEDICINE WAYS OF INTRODUCTION (Literature review)
11 2 U.V. Pakhomova , V.V. Kanygin , S.M.Davydova
!GOU VPO «Novosibirsk State Medical University Roszdrava»(Novosibirsk)
2GU «NII of physiology SO RAMS» (Novosibirsk)
This article views the problems of normal cell modification into malignant ones, cell sensitivity to physical and chemical factors and to drugs. These factors ability to cause mutations and tumors is also determined.
Keywords: tissue cultures, tissue selection, cell selection
About authors:
U.V. Pakhomova - doctor of medical sciences of pathological physiology and clinical pathophysiology GOU VPO «Novosibirsk State Medical University Roszdrava»(Novosibirsk) ,tel: (383)225-39-78
V.V.Kanygin - medical sciences candidate neurosurgery department assistant GOU VPO «Novosibirsk State Medical University Roszdrava», tel: (383)229-28-84
S.M.Davydova - candidate of biological sciences, neuro- regulation laboratory scientist GU «NII of physiology SO RAMS»,tel: (383)229-10-82
List of the Literature:
1. A.I.Aniskina Aminoacid influence on cellular proliferation and apoptosis in organo-typical culture of young and old rats. // Gerontology success - 2006.
2. A.M.Arnopolskaya Neutro - invasive therapy tumor treatment results in dogs. Russian veterinary journal - 2007.
3. E.U.Grigorieva Neutro- invasive therapy of mica melanoma in new species of infection. Russian Biology for therapeutics journal . - 2007.
4. Acute toxicity and bio distribution of sodium carbon for neutron invasive therapy . Russian Biology for therapeutics journal . - 2007.
5. R.Freshni Animal cell culture, Methods - 1989.
6. Charlesworth B. The effect of life-history and mode of inheritance on neutral genetic variability / В. Charlesworth // Genetical Research. - 2001. - Vol. 77, N 2. - Р. 153-166.
7. Fujimoto T. Accumulation of MRI Contrast Agents in Malignant Fibrous Histiocytoma for Gadolinium Neutron Capture Therapy / Т. Fujimoto [et al.] // A new option against cance : 13 th International Congress on Neutron Capture Therapy. - Florence, 2008. - Р. 261-264.
8. Heber E. M. Effect of Different BNCT protocols on DNA Synthesis in Precancerous and Normal Tissues in an Experimental Model of Oral Cancer / Е. М. Heber [et al.] // From the Past to the Future : 12th International Congress on Neutron Capture Therapy. -Kagawa, 2006. - Р. 131-135.
9. Hsieh C. H. Biological vibrational spectroscopy: From a cellular to a sub-cellular level / С. Н. Hsieh [et al.] // Dissertation Abstracts International. - 2003. - Vol. 63, N 1. - Р. 022б.
10. Hughes A. M. Boron Neutron Capture Therapy (BNCT) Inhibits Tumor Development from Field-Cancerized Tissue: An Experimental Study that Supports a New Application of BNCT / А. М. Hughes [et al.] // A new option against cance : 13th International Congress on Neutron Capture Therapy. - Florence, 2008. - Р. 315-318.
11. Jaber B. L. Impact of dialyzer membrane selection on cellular responses in acute renal failure: A crossover study / B. L. Jaber [et al.] // Kidney International. - 2000. - Vol. 57, N 5. - Р. 2107-2116.
12. Kawabata S. Evaluation of Carboranylporphyrins as Boron Delivery Agents for Neutron Capture Therapy / S. Kawabata [et al.] // From the Past to the Future : 12th International Congress on Neutron Capture Therapy. - Kagawa, 2006. - Р. 123-127.
13. Kinashi Y. Locus in CHO cells against thermal neutron radiation / Y. Kinashi [et al.] // Neutron capture therapy of epidermal growth factor (+) gliomas using boronated cetuximab (IMC-C225) as a delivery agent : Topics in neutron Capture therapy : Proceedings of the Eleventh World Congress on Neutron Capture Therapy. - 2004. -Vol. 61, N 5. - P. 899-903.
14. Koryakin S. Possibilities of the use of BSH labeled with radioactive iodine for planning of BNCT / S. Koryakin [et al.] // In : Research and Development in Neurol Сapture Therapy. - Essen 2002. - P. 897-902.
15. Masunaga S. The usefulness of 2-nitroimidazole-sodium borocaptate-10B conjugates as 10B-carriers in boron neutron capture therapy / S. Masunaga [et al.] // Neutron capture therapy of epidermal growth factor (+) gliomas using boronated cetuximab (IMC-C225) as a delivery agent : Topics in neutron Capture therapy : Proceedings of the Eleventh World Congress on Neutron Capture Therapy. - 2004. - Vol. 61, N 5. - P. 953-959.
16. Miyata S. Biodistribution and Imaging studies on F98 rat glioma by convection enhanced delivery of transferrin targeting PEG liposomes encapsulating both BSH and iodine contrast agent / S. Miyata [et al.] // A new option against cance : 13th International Congress on Neutron Capture Therapy. - Florence, 2008. - Р. 303-306.
17. Stiborova M. Identification of a genotoxic mechanism for 2-nitroanisole carcinogenicity and of its carcinogenic potential for humans / М. Stiborova [et al.] // Carcinogenesis. -2004. - Vol. 25, N 5. - Р. 833.
18. Trivillin V. A. Radiobiology of BNCT mediated by GB-10 and GB-10 + BPA in experimental oral cancer / V. A. Trivillin [et al.] // Neutron capture therapy of epidermal growth factor (+) gliomas using boronated cetuximab (IMC-C225) as a delivery agent : Topics in neutron Capture therapy : Proceedings of the Eleventh World Congress on Neutron Capture Therapy. - 2004. - Vol. 61, N 5. - P. 939-947.
19. Welniak L. A. Cellular associations in co-cultures of murine pro-B cells and bone marrow stromal cells: Regulation of cellular adhesion and migration / L. A. Welniak // Dissertation Abstracts International. - 1998. - Vol. 58, N 11. - Р. 5753.
