Новая мышиная модель для испытаний терапевтических вакцин против ВПЧ 16 и ВПЧ-ассоциированных форм рака Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Результаты

При времени экспозиции исследуемых образцов в течении 24 ч для всех концентраций LaF3 наблюдали высокие показатели выживаемости клеток (около 80%). В случае экспозиции в течении 48 ч выживаемость клеток колебалась от 60 до 30% при дозах от 20 до 150 мкг/мл, указывая на дозозависимый характер воздействия в пределах этих доз. При концентрациях в диапазоне от 150 до 2000 мкг/мл показатель выживаемости клеток составлял 30-35%, что говорит об отсутствии дозозависимого эффекта в пределах указанных концентраций.

Выводы

Результаты серии in vitro экспериментов по исследованию цитотоксичности наночастиц LaF3 показали, что данные наночастицы не проявляют выраженный цитотоксический эффект на клетки глиобластомы человека U-87 при времени воздействии 24 ч. При времени воздействии 48 ч наночастицы LaF3 при концентрациях в диапазоне от 150 до 2000 мкг/мл способны подавлять рост опухолевых клеток U87.

Список литературы

1. Glioma / M . Weller, W. Wick, K. Aldape, et al . // Nature reviews Disease primers . 2015 . Vol . 1. № . 1. P 1-18 . 2 . LaF3: Tb3+- Bengal Rose nanocomplexes for X-ray activated ROS generation / P. O . Maksimchuk, K. O . Hubenko, I . I . Be-

spalova, et al . // Journal of Molecular Liquids . 2021. Vol . 330 . P. 115653 .

ПЕТРОВСКИЕ ЧТЕНИЯ (ФУНДАМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ):

ШКОЛА МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ

Новая мышиная модель для испытаний терапевтических вакцин против ВПЧ 16 и ВПЧ-ассоциированных форм рака

Авторы:

(1) Авдошина Дарья Валерьевна, avdoshina_dv@chumakovs.su, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Москва

(2) Баюрова Екатерина Олеговна, bayurova_eo@chumakovs.su, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва

(3) Житкевич Алла Сергеевна, varyaw96@gmail.com, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Москва

(4) Костюшева Анастасия Павловна, kostyusheva_a_p@staff.sechenov.ru, Институт медицинской паразитологии, тропических и трансмиссивных заболеваний им. Е.И. Марциновского, Москва

(5) Костюшев Дмитрий Сергеевич, kostyushev_d_s@staff.sechenov.ru, Институт медицинской паразитологии, тропических и трансмиссивных заболеваний им. Е.И. Марциновского, Москва

(6) Городничева Татьяна Валерьевна, tatiana.gorod@evrogen.ru, ЗАО «Евроген», Москва

(7) Глухов Александр Иванович, glukhov_a_i@staff.sechenov.ru, ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова», Москва

(8) Тухватулин Амир Ильдарович, amir_tuhvatulin@yahoo.com, ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва

(9) Гордейчук Илья Владимирович, gordeychuk_iv@chumakovs.su, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Первый Московский Государственный Медицинский Университет им. И.М. Сеченова, Москва

(10) Беликова Мария Георгиевна, isaguliants@hotmail.com, ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов им. Патриса Лумум-бы», Москва

Ключевые слова

вирус папилломы человека, ВПЧ-ассоциированный канцерогенез

Актуальность

Для разработки и доклинических испытаний терапевтических вакцин против вирусов папилломы человека (ВПЧ) высокого канцерогенного риска требуются надежные и легкодоступные модели мелких животных. Мышей нельзя заразить ВПЧ, но мышиные клетки, включая опухолевые, можно заставить экспрессировать онко-белки ВПЧ. Возникает вопрос, адекватны ли эти клетки в качестве модели ВПЧ-ассоциированных форм рака и в какой степени они воспроизводят ВПЧ-экспрессирующие опухолевые клетки при естественной инфекции.

Цель

Создать клетки аденокарциномы мыши, стабильно экспрессирующие онкобелки E6/E7 ВПЧ16, изучить влияние экспрессии Е6/Е7 на их свойства in vitro и in vivo, сравнив с родительскими клетками и с опухолевыми клетками человека, инфицированными ВПЧ16.

Материалы и методы

Субклоны клеток 4T1luc2, экспрессирующих Е6 и Е7 ВПЧ16 (4T1luc2_E6E7), получили путем лен-тивирусной трансдукции. Уровни экспрессии мРНК оценивали ПЦР-РВ. Активность теломеразы определяли с помощью метода TRAP. Геномную стабильность оценивали подсчетом очагов y-H2AX. Анализ клеточного цикла проводили методом проточной цитометрии. Субклоны эктопически имплантировали мышам BALB/c; рост опухолей контролировали по сигналу биолюминесценции и морфометрически. Метастатическую активность оценивали по сигналу биолюминесценции от органов ex vivo и подтверждали гистологически.

Результаты

Cубклоны 4T1luc2_E6E7 демонстрировали низкие уровни экспрессии мРНК Е6 и Е7. Экспрессия E6/ E7 изменяла клеточные цикл, сдвигала клетки 4T1luc2 в сторону мезенхимального фенотипа, индуцировала повреждение ДНК. Клетки демонстрировали высокую активность теломеразы и повышенный уровень экспрессии мРНК mTert. Также изменялась экспрессия факторов транскрипции HIF-1a, Twist, Nrf2. При имплантации сингенным мышам субклоны 4T1luc2_E6E7 образовывали низкодифференцированные аденокарциномы. Оценка органов ex vivo показала преобладающую миграцию опухолевых клеток в легкие. Онкогенная и метастатическая активность коррелировали с задержкой прохождения клетками G0/G1 чекпойнта. В целом отличия in vitro свойств субклонов 4T1luc2_E6E7 не повышали ни туморогенного, ни метастатического потенциалов клеток в сравнении с исходными 4T1luc2-клетками.

Выводы

В целом полученные субклоны аденокарциномы мыши, экспрессирующие Е6/Е7 ВПЧ16, воспроизводят ряд характерных особенностей ВПЧ-ассоциированного канцерогенеза и могут быть использованы для доклинических испытаний терапевтических вакцин против ВПЧ16 и ассоциированных форм рака. Экспрессия онкобелков Е6/Е7 не меняет туморогенный и метастатический потенциалы опухолевых клеток мыши. Это может быть связано с отсутствием в клетках 4T1luc2 белка р53 (клетки 4T1luc2 являются p53null), что подтверждает ведущую роль Е6-р53 взаимодействия в механизме ВПЧ-ассоциированного канцерогенеза.

Список литературы: -

Спектр транслокаций генов тирозинкиназ в колоректальных карциномах с микросателитной нестабильностью

Авторы:

(1) Мулкиджан Римма Сергеевна, mulkidzhan17@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург

(2) Саитова Евгения Станиславовна, zhenya.saitowa2017@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург

(3) Тюрин Владислав Ильич, tyurinvladislav@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург