CC BY
0PIK3CA при PROS. Для этой задачи требуются более чувствительные методики (такие как цифровая капельная ПЦР) или NGS, который охватывает больший спектр повреждений.
Работа поддержана грантом РНФ № 21-75-30015.
Список литературы
1. Kuentz P et al . Molecular diagnosis of PIK3CA-related overgrowth spectrum (PROS) in 162 patients and recommendations
for genetic testing //Genetics in medicine . 2017 . V. 19 . № . 9 . P. 989-997 . 2 . Sagoyan G . B . , Kletskaya I . S ., Imyanitov E . N ., Mareeva Yu . M . , Zhukov N .V., Khagurov R A. , Suleymanova A . M . A spectrum of overgrowth syndromes associated with the PIK3CA mutation . Literature review // Russian Journal of Pediatric Hematology and Oncology. 2022;9(1):29-44. (In Russ . )
Экспрессия обратной транскриптазы ВИЧ-1 приводит к изменению метаболизма и фенотипических характеристик эпителиальных клеток, инфицированных вирусом папилломы человека типа 16
Авторы:
(1) Житкевич Алла Сергеевна, zhitkevich_as@chumakovs.su, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Москва
(2) Баюрова Екатерина Олеговна, bayurova_eo@chumakovs.su, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва,
(3) Авдошина Дарья Валерьевна, avdoshina_dv@chumakovs.su, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Москва
(4) Городничева Татьяна Валерьевна, tatiana.gorod@evrogen.ru, ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва
(5) Иванов Александр Владимирович, aivanov@yandex.ru, ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
(6) Гордейчук Илья Владимирович, gordeychuk_iv@chumakovs.su, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Институт трансляционной медицины и биотехнологии ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва
(7) Исагулянц Мария Георгиевна, issagouliantis@gmail.com, ФГАНУ «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», Москва
Ключевые слова
ВИЧ-1, обратная транскриптаза, клетки рака шейки матки, ВПЧ16, аэробный гликолиз
Актуальность
Люди, живущие с вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ-1), имеют повышенный риск развития злокачественных новообразований с поражением эпителиальных клеток даже при успешной антиретровирусной терапии. Это предполагает прямое канцерогенное действие белков ВИЧ-1. Показан прямой туморогенный эффект белков gp120, Tat, Rev, Nef и обратной транскриптазы (RT), отчасти связанный с индукцией ими окислительного стресса (ОС). ВИЧ-1 связывают также с коинфекциями онкогенными вирусами, в частности вирусом папилломы человека (ВПЧ). Можно предположить аддитивный эффект, приводящий к повышению агрессивности злокачественных заболеваний.
Цель
Оценить влияние стабильной экспрессии RT на свойства эпителиальных злокачественных клеток человека Ca Ski, инфицированных ВПЧ16.
Материалы и методы
Клетки Ca Ski трансдуцировали лентивирусными частицами, кодирующими RT ВИЧ-1 субтипа А под контролем промотора гена фосфоглицераткиназы (PGK). Продукцию RT оценивали иммуноблоттингом. Продукцию активных форм кислорода (АФК) регистрировали с помощью диацетата 2',7'-дихлордигидрофлуорес-цеина и дигидроэтидия. Уровни мРНК генов RT_A, E6/E6*, E7, NRF2, NQO1, CGCL, A-TUBULIN, Y-TUBULIN, N-CADHERIN и VIMENTIN, E- CADHERIN, TWIST, SNAI1, SNAI2l и PGK1 определяли с помощью ПЦР-РВ на приборе RotorGene6000 (Qiagen). Гликолиз и митохондриальное дыхание оценивали по технологии Seahorse. Анализ заживления ран проводили на приборе Cytation 5 (BioTek).
Результаты
В ходе культивирования Ca Ski-RT происходило увеличение уровня синтеза RT, вероятно, за счет усиления активности PGK-промоторa. Во всех субклонах Ca Ski-RT была повышена экспрессия Е7. На поздних пассажах наблюдали повышение экспрессии мРНК Е6 с преобладанием изоформы E6*I, ассоциированной с ОС. Экспрессия RT в Ca Ski не вызывала усиления продукции АФК и снижала уровни экспрессии генов Nrf2, GCLС и NQO1, регулирующих окислительно-восстановительный баланс клетки. В целом лентивирусная трансдукция приводила к снижению показателей миграции и колонигенной активности клеток, восстанавливающихся в субклонах с высокими уровнями мРНК RT. Во всех Ca Ski-RT наблюдали повышенную экспрессию маркеров эпителиально-мезенхимального перехода, в частности N-CADHERIN и VIMENTIN, при этом не снижалась экспрессия E-CADHERIN, характеризующего эпителиальный фенотип. Это свидетельствовало о приобретении субклонами гибридного фенотипа, имеющего решающее значение для прогрессирования злокачественного новообразования. Продукция RT снижала митохондриальное дыхание и усиливала аэробный гликолиз. Это согласовывалось со снижением экспрессии Y-TUBULIN и повышением экспрессии A-TUBULIN.
Выводы
Экспрессия RT ВИЧ-1 изменяет метаболитические и миграционные характеристики злокачественных клеток, что может объяснить вызываемое ВИЧ-1 усиление ВПЧ-ассоциированного онкогенеза.
Список литературы
1. Petkov, S ., Podschwadt, P.;,Valuev-Elliston, V et al . HIV-1 Reverse Transcriptase Promotes Tumor Growth and Metastasis Formation
via ROS-Dependent Upregulation of Twist . Oxidative Medicine and Cellular Longevity 2019, 2019, 1-28. DOI: 10.1155/2019/6016278. 2 . Isaguliants, M ., Bayurova, E . , Avdoshina, D ., Kondrashova, A ., Chiodi, F. , Palefsky, J . Oncogenic Effects of HIV-1 Proteins,
Mechanisms Behind // Cancers 2021, 13, 305 . DOI: 10 .3390/cancers13020305 .
Разработка эффективного скринингового метода обнаружения ROS1-RET-перестроек: анализ экспрессии «точек разрывов»
Авторы:
(1) Преображенская Елена Васильевна, chekmarevaev@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(2) Загребин Фёдор Альбертович, zagrebinf@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(3) Митюшкина Наталья Владимировна, nmmail@inbox.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(4) Романько Александр Андреевич, romanko.aleksandr.a@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(5) Анускина Александра Алексеевна, asokolova98@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(6) Мулкиджан Римма Сергеевна, mulkidzhan3@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(7) Саитова Евгения Станиславовна, zhenya.saitowa2017@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
(8) Имянитов Евгений Наумович, evgeny@imyanitov.spb.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Ключевые слова
ROS1, RET, транслокации, рак легкого
