CC BY
58
Экспериментальная медицина
IVh
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
УДК 576.3:615.33
НИТРОЗИЛЬНЫЕ КОМПЛЕКСЫ ЦИТОХРОМА С И НАТРИЯ АСКОРБАТА КАК КОМПОНЕНТЫ РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
В.М. Славкина1, Д.А. Пантелеев1, А.К. Мартусевич2, Н.Б. Мельникова1
1ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия»,
2ФГБУ «Нижегородский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии»
Мартусевич Андрей Кимович - e-mail: [email protected]
Методами УФ-спектроскопии и ВЭЖ хроматографии изучено образование нитрозильных комплексов цитохрома С и лекарственных вешеств в среде биогенных кислот и натрия аскорбата. Разработаны составы гелей, растворов и сорбентов для лечения ран. Действие гелей изучено в эксперименте на крысах.
Ключевые слова: нитрозильные комплексы железа, раны, лечение.
The formation of complexes of cytochrome c and nitroso- or nitro- content medicine was studied in biogenic acid medium by UV - spectroscopy and HL chromatography. Compositions of gels, solutions and sorbents for wound treatment were developed. The effect of the wounds treatment was shown in experiments by rats.
Key words: nitrozyl iron complexes, wound, healing.
Нитрозильные комплексы железа с серосодержащими лигандами являются донорами монооксида азота (N0) - важнейшего регулятора физиологических процессов, в том числе улучшения микроциркуляции крови, агрегации тромбоцитов, цитотоксического действие макрофагов и др. [1-3]. Поиск новых нитрозильных комплексов открывает возможности для разработки современных стратегий в лечении раневых процессов [2, 4, 5].
Целью исследования являлось получение нитрозильных комплексов нитрозо(нитро)соединений из группы лекарственных веществ (ЛВ) и цитохрома С (Сyt С), а также разработка на их основе ранозаживляющих фармацевтических композиций.
В качестве Л В были использованы метронидазол, 5-нитро-фурал (5^02-Ри), 5-нитрохинолин, натрия нитрит, натрия нитропруссид, натрия аскорбат (№-Абс) и цитохром С (Мг 5200 Да). Основные исследования, проведенные с ЛВ, представлены ниже.
Цитохром С относится к гемовым металлопротеинам и проявляет антиоксидантное, антигипоксантное, репаратив-ное и регенеративное действия за счет содержания Fe2+/ Fe3+ и остатков цистеина в пептидной цепи.
Материалы и методы
УФ-спектры получены на УФ-спектрофотометре «SPECORD S 100» («Analytik jena», Германия). Потенциометрические и кондуктометрические измерения проводили на иономере «И-130» (Россия) и на кондуктометре «Dist 3» («Hanna instruments», Португалия). ВЭЖХ анализ проводили на жидкостном хроматографе «LC-10Avp» (Shimadzu, Япония).
Репаративные свойства изучены на 20 половозрелых белых крысах (самцы, масса тела 220-250 г) линии Wistar на
РИС.
УФ-спектр 1 *10-5 М цитохрома С в присутствии натрия нитрита и натрия аскорбата в среде 1 *10 2 М раствора фосфорной кислоты (1), янтарной кислоты (2) и в этих же реакционных смесях в отсутствии натрия нитрита (3).
собственной модели комбинированного ожога (Перетягин С.П. с соавт., патент РФ № 2408081 «Способ моделирования комбинированной ожоговой травмы») [6].
Результаты и их обсуждение
В качестве модели нитрозильных комплексов цитохрома С и 5^02Ти выступала водная реакционная смесь 5^02Ти с цистеином, №-Абс и железа сульфатом (II). В УФ-спектрах реакционных смесей наблюдались изменения положения и интенсивности полос, относящихся к С=О, N=0, C=N группам (■Л* и п®^* переходы), отмечался гипохромный сдвиг полос от 260 до 243 нм и от 375 до 369 нм, а также изменялись соотношения интенсивностей поглощения А260(С=О) к Д375^=О) от 0,86 до 1,30. Образующийся комплекс способен со временем распадаться до N0 (Сш=10-30 нм).
В реакционной смеси №N0^ Na-Asс в среде янтарной, фосфорной, винной, щавелевой и лимонной кислот нитро-зильные комплексы Сyt С имели новые полосы в области 350+30 нм (рис.). Наиболее сильные изменения характерны для комплексов в среде фосфорной кислоты.
Влияние кислотности среды и природы ЛВ как лигандов на структуру нитрозильных комплексов 5^02Ти с С^ С было изучено введением трис-(оксиметил)-аминометана и №^с. Показано, что эти компоненты изменяют валентное и координационное состояние С^ С: \тах смещается от 410 (Рв3+) до 415 нм (Ре24), а А415 = 0,7 до А 415 = 1,18, появляются более интенсивно полосы а и р цитохрома С, существенное гиперхромное изменение оптической плотности при \=415 нм 7-полосы цитохрома С.
На основе проведенных исследований предложены составы сорбентов, гелей и растворов для наружного лечения
Экспериментальная медицина
ожоговых ран. В эксперименте показана эффективность действия гелевых фармацевтических композиций на основании анализа течения раневого процесса, динамики микроциркуляции в околораневой зоне, метаболического статуса животных.
Выводы
Таким образом, нитрозильные комплексы цитохрома С и ЛВ с нитрозо- или нитрогруппами, образующиеся в водном растворе в присутствии натрия аскорбата, способны проявлять ранозаживляющее действие при лечении различными лекарственными формами (гели, сорбенты, растворы).
из
ЛИТЕРАТУРА
1. Ванин А.Ф. Оксид азота в биомедицинских исследованиях. Вестник Российской академии медицинских наук. 2000. № 4. С. 3-5.
2. Граник В.Г., Григорьев Н.Б. Оксид азота (NO). Новый путь к поиску лекарств. М.: Вузовская книга, 2004. 360 с.
3. Липатов К.В., Сопромадзе М.А., Шехтер А.Б. с соавт. Применение газового потока, содержащего оксид азота (NO-терапия) в комплексном лечении гнойных ран. Хирургия. 2002. № 2. С. 41-43.
4. Мартусевич А.К., Перетягин С.П. Молекулярная стереотипия в реализации эффекта некоторых лечебных физико-химических факторов: роль NO. Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского. 2012. № 2. Ч. 3. С. 205-210.
5. Shekhter A.B., Serezhenkov V.A., Rudenko T.G. et al. Beneficial effect of gaseous nitric oxide on the healing of skin wounds. Nitric oxide. 2005. Vol. 12. P. 210-219.
6. Воробьев А.В., Перетягин С.П., Размахов А.М., Мартусевич А.К. с соавт. Способ моделирования комбинированной ожоговой травмы. Патент РФ на изобретение № 2408081 (от 27.12.2010 г.).
