CC BY
53
© Т.В.Абрамова, 2005
УДК 616.611-002-036.12:612.112.91
Т.В.Абрамова
НЕЙТРОФИЛЫ ПРИ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТЕ Т. У.ЛЬташоуа
NEUTROPHILS ^ GLOMERULONEPHRITIS
Отдел общей патологии и патофизиологии Научно-исследовательского института экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург, Россия
Ключевые слова: гломерулонефрит, нейтрофилы, рецепторы нейтрофилов, медиаторы воспаления. Key words: glomerulonephritis, neutrophils, neutrophil receptors, mediators of inflammation.
Хронический гломерулонефрит (ХГН) - заболевание, характеризующееся неуклонным прогресси-рованием; начавшись, процесс постепенно приводит к склерозированию почечной ткани [1]. Случаи выздоровления больных при этом заболевании казуистически редки. Кроме того, даже острый ГН у половины больных не проходит бесследно, и после периода кажущегося выздоровления, иногда многолетнего, может привести к функциональному нарушению почек и, соответственно, к уремии [1].
Причины, приводящие к возникновению гломе-рулонефрита, до настоящего времени остаются недостаточно изученными. В конце 50-х и начале 60-х годов XX века FJ Dixon (1961) предложил два возможных механизма развития гломерулонефри-та: 1) антительный и 2) иммунокомплексный. Для обоснования этих теорий FJ Dixon [2] использовал свои данные и данные, полученные другими авторами, в результате исследований нефротоксичес-кого нефрита (НТН) и изучения сывороточной болезни. При анализе с помощью световой микроскопии срезов почек, полученных у животных с вызванным НТН, в первый день наблюдений в почечной ткани выявлялась инфильтрация полимор-фноядерными лейкоцитами, которая впоследствии сменялась лимфоидной. Эти данные трактовались авторами как показатели развития воспалительного процесса, протекающего в результате отложений иммунных комплексов (ИК) и активации системы комплемента по классическому или альтернативному пути. Лимфоидная инфильтрация объяснялась притоком В-лимфоцитов, которые дифференцировались в плазмоциты и начинали синтезировать антитела к гломерулярной базальной мембране (ГБМ) in situ, переводя процесс поражения почек в аутоиммунную стадию [3].
В результате проведенных исследований гло-мерулонефрит был отнесен к разряду аутоиммун-
ных болезней. Полиморфноядерные лейкоциты стали рассматриваться, как важнейшая клеточная система, участвующая в повреждении почечной ткани при иммунокомплексной или аутоиммунной патологиях, которая развивается в результате адгезии нейтрофилов к поверхности, несущей эти комплексы, и экзоцитоза нейтрофильных гранул [4].
Несмотря на достижения современной биологической и медицинской науки, представления о механизме формирования ХГН в настоящее время не претерпели серьезных изменений. Сформировались представления о том, что первичными иммунными механизмами при развитии гломеру-лонефрита являются или локальное (in situ) взаимодействие антител с антигенами внутри клубочков, или связывание антител с растворимыми антигенами в циркуляции и последующим отложением иммунных комплексов внутри клубочков. Клетки иммунной системы также участвуют в процессе первичного поражения клубочков. Иммунные комплексы повреждают ткань почек, активируя многочисленные взаимодействующие между собой системы медиаторов воспаления: гуморальные (система комплемента, коагуляции, кининов, вазоактивных аминов, метаболитов ара-хидоновой кислоты) и клеточные (нейтрофилы, тромбоциты, моноциты, макрофаги, лимфоциты). По современным представлениям, среди клеточных медиаторов иммунного повреждения основная роль принадлежит нейтрофилам и тромбоцитам. Необходимо подчеркнуть, что основные сведения по механизму развития иммунокомплексного нефрита были получены при изучении экспериментальных моделей сывороточной болезни [5].
Патогенез хронического гломерулонефрита до настоящего времени окончательно не расшифрован. Б.И.Шулутко предлагает рассматривать гло-мерулонефрит как генетически обусловленное
заболевание. Автор также предполагает, что ХГН человека является полигенным заболеванием [6]. Кроме того, этот же автор предлагает рассматривать гломерулонефрит, как инициальное заболевание сосудистой сети почек [7]. Н.А. Мухин указывает на то, что ХГН представляет собой проявление индивидуальной реакции на тот или иной фактор и «...поэтому, неудивительна известная ситуация, когда одна и та же причина может вызвать разные клинико-морфологические варианты нефрита, и наоборот - один и тот же клинико-морфоло-гический вариант нефрита может быть связан с разными этиологическими факторами» [8].
Важная роль нейтрофильных гранулоцитов в патофизиологических процессах, протекающих при развитии и прогрессировании хронического гломерулонефрита, не подвергается сомнению [9]. Перемещение нейтрофильных гранулоцитов из периферической крови в ткань почки является важным фактором развития многих почечных заболеваний [10]. К сожалению, большинство исследований, подтверждающих активное участие НГ в патогенезе поражения почечной ткани, выполнено на экспериментальных моделях нефрита, динамика и механизмы развития которых значительно отличаются от развития первичных ХГН у человека.
В многочисленных исследованиях, выполненных на экспериментальных моделях гломерулонефрита, установлено, что лейкоциты, инфильтрирующие почечный клубочек, являются главными эффекторами, обуславливающими гломерулярное повреждение при пролиферативном гломерулонефрите. Хорошо описанной экспериментальной моделью нейтрофил-зависимого иммунного поражения является гетеро-логическая фаза нефротоксического сывороточного нефрита (анти-ГБМ ГН). В этой модели ГН вызывается путем введения гетерологических антител против ГБМ. Гломерулярные повреждения, обуслов-леные аккумуляцией нейтрофилов в клубочке, развиваются преимущественно в результате дегрануляции нейтрофилов, высвобождения их про-теолитических ферментов и свободных кислородных радикалов [11].
Роль медиаторов воспаления в модуляции функций нейтрофильных гранулоцитов при гломерулонефрите. Начальным этапом развития гломерулонефрита является поражение почечной ткани в результате отложения ИК на ГБМ. Инфильтрация почечных клубочков нейтрофилами выявляется также на ранних стадиях обострения большинства форм ГН. Отложение ИК внутри клубочковых капилляров вызывает местный синтез хемотаксических веществ (лейкотриены, интерлейкин-8 (ИЛ-8)), которые в совокупности с компонентами компле-
мента вызывают приток полиморфноядерных и мо-нонуклеарных лейкоцитов в почечную ткань [12]. Медиаторы, синтезируемые в поврежденной почечной ткани, обуславливают привлечение в очаг иммунной реакции НГ и участвуют в регуляции их функций. Так, инъекция интерлейкина-1 (ИЛ-1) или фактора некроза опухоли-а (ФНОа) крысам с анти-ГБМ-нефритом значительно усиливает инфильтрацию клубочков нейтрофилами и протеинурию [13]. Интерферон-у, возможно, не влияет на приток нейт-рофилов в почечную ткань, так как при индукции анти-ГБМ-гломерулонефрита у нокаутных по гену интерферон-у мышей число инфильтрирующих почечную ткань нейтрофильных гранулоцитов не отличалось от такового у мышей дикого типа [14].
С другой стороны, липоксины при экспериментальном гломерулонефрите уменьшают нейтрофиль-ную инфильтрацию почечной ткани и, соответственно, снижают степень ее повреждения [15], так как они являются эндогенно продуцируемыми экозаноидами с антивоспалительными эффектами [16]. Их биосинтез был продемонстрирован при многих воспалительных заболеваниях, включая и гломерулонефрит [17-19]. Липоксин А4 и липоксин В4 подавляют лейкотриен В4-индуцированный хемотаксис нейтрофильных гранулоцитов и их адгезию на эндотелиальных клетках, поддерживаемую 0011/0018 интегринами [20].
Количество внутриклубочковых нейтрофилов лейкоцитарной инфильтрации зависит от концентрации ФНОа, который индуцирует респираторный взрыв нейтрофильных гранулоцитов. Адгезия нейт-рофилов к эндотелиальной клетке, вызванная присутствием ФНОа, происходит благодаря экспрессии рецепторов 0Б18. Активация нейтрофилов ФНОа происходит через Бс-рецепторы, эксп-рессируемые на нейтрофильных гранулоцитах [21].
Существенную роль играют отложения ИЛ-8 в почечной ткани, так как известно, что ИЛ-8 привлекает в почечную ткань и активирует нейтро-фильные лейкоциты, которые участвуют в ее повреждении [22]. Более того, в литературе имеются данные, что одним из ключевых факторов, способным вызывать миграцию нейтрофильных гранулоцитов в почечную ткань при ^А-нефропа-тии, является ИЛ-8, продуцируемый моноцитами. Установлено, что нейтрофильная инфильтрация присутствует в ткани почки у больных с ^А-нефро-патией при наличии там отложений ИЛ-8 [23]. В почечной ткани при ^А-нефропатии выявлены инфильтрирующие ее моноциты, которые продуцируют ИЛ-8 и высвобождают его в повышенном количестве даже при отсутствии клинического обострения [24; 25; 26]. Кроме того, уровень ИЛ-8 в
сыворотке крови у больных с IgA-нефропатией даже в период ремиссии значительно выше, чем у здоровых людей [27]. У 39,5 % пациентов с IgA-нефропатией T.Wada и соавт. [28] обнаружили в моче ИЛ-8. У больных непролиферативными формами гломерулонефрита ИЛ-8 в моче не выявляется. Концентрация ИЛ-8 в сыворотке крови коррелирует с уровнем лейкоцитарной инфильтрации в клубочке, повышается во время обострения заболевания и снижается при наступлении ремиссии или при применении иммуносупрессивной терапии [28].
ИЛ-4, напротив, подавляет приток нейтрофилов в ткань почки и соответственно ограничивает повреждение гломерулы. Этот факт был выявлен при исследовании течения экспериментального гломе-рулонефрита у мышей, нокаутных по гену ИЛ-4 (ИЛ-4 -/-), и у мышей дикого типа (ИЛ-4 +/+). В почках мышей, нокаутных по гену ИЛ-4 (ИЛ-4 -/-), после индукции НТН число инфильтрирующих нейтрофи-лов было больше, чем у мышей дикого типа (ИЛ-4 +/+). При лечении мышей, нокаутных по гену ИЛ-4, рекомбинантным мышиным ИЛ-4, количество ней-трофилов в почечной ткани снижалось до уровня, выявленного у мышей дикого типа. Авторы установили, что при индукции НТН у мышей, дефицитных по продукции ИЛ-4, экспрессия мРНК межклеточных молекул адгезии 1 (ICAM-1, intercellular adhesion molecule 1) в клетках сосудистого эндотелия почек значительно выше, чем у мышей дикого типа с вызванным НТН. При лечении мышей ИЛ-4 -/- рекомбинантным мышиным ИЛ-4 выявлено снижение уровня экспрессии мРНК ICAM-1 до значений, имеющихся у мышей дикого типа с НТН. Соответственно, гистологические и функциональные изменения почек у мышей, дефицитных по продукции ИЛ-4, после индукции НТН были более выражены, чем у мышей дикого типа с НТН [29]. Возможно, эти факты связаны с тем, что ИЛ-4 подавляет продукцию нейтрофилами ИЛ-8 [30].
Макрофагальный воспалительный протеин-2 (MIP-2) вызывает приток НГ в гломерулу. Соответственно, введение поликлональной антисыворотки к MIP-2 снижает гломерулярный приток нейтрофилов в гетерологической фазе нефроток-сического нефрита у крыс [31; 32].
На модели экспериментального гломерулонеф-рита также показано, что фибриноген является хемоаттрактантом для совместной миграции ней-трофилов и тромбоцитов в почечную ткань [33].
В тканях почечных биоптатов, полученных от пациентов с различными формами пролифератив-ного ГН, выявлено повышение экспрессии грануло-цитарно-макрофагального колоние-стимулирующего
фактора (ГМ-КСФ). Авторы предполагают, что он может влиять на развитие повреждения почечной ткани [34].
При экспериментальном моделировании ГН подтверждена возможность патологического воздействия ГМ-КСФ в формировании повреждения почечной ткани. На модели нефротоксического нефрита, полученного у мышей путем введения гетерологичных бараньих антител против гломе-рулярной базальной мембраны, показано, что в первый час у мышей дикого типа развиваются эк-ссудативный пролиферативный ГН с большим количеством инфильтрирующих почечную ткань нейтрофилов и выраженной протеинурией. В то же время у мышей, дефицитных по продукции грану-лоцитарно-макрофагального колоние стимулирующего фактора (ГМ-КСФ -/-), или гранулоцитарного колоние стимулирующего фактора (Г-КСФ -/-) таких повреждений в гетерологическую фазу не наблюдалось, хотя отложения бараньих иммуноглобулинов в клубочках этих трех групп мышей статистически не различались. Этот эффект связывают со значительным снижением количества нейтрофилов в почечной ткани в первый час после индукции заболевания. Количество циркулирующих в периферической крови нейтрофилов было снижено только у мышей с дефицитом Г-КСФ. В аутологическую фазу отсутствие повреждения почечной ткани было выявлено только у мышей ГМ-КСФ -/-. Авторы считают, что ГМ-КСФ необходим для дифференцировки макрофагов, являющихся антигенпрезинтирующими клетками [35].
Описан клинический случай длительной терапии Г-КСФ больной с тяжелой врожденной нейтропени-ей. У пациентки развились макроскопическая гематурия, протеинурия и снижение почечной функции. Исследование биоптата почки выявило у больной мембранозно-пролиферативный гломерулонефрит I типа. При отмене терапии зафиксированы улучшения почечных функций. Авторы заключили, что заболевание у пациентки было вызвано применением Г-КСФ [36].
Медиаторы воспаления не только привлекают НГ в пораженную ткань, но также влияют на время жизни НГ в инфильтрируемой ткани. Известно, что ФНОа, ФНОр и ИЛ-10 убыстряют апоптоз НГ, а липополисахарид, лейкотриен В4, ИЛ-8 и ГМ-КСФ могут подавлять или замедлять апоптоз НГ [37].
Иммунные комплексы в почечной ткани являются сильными хемоаттрактантами для нейтро-фильных гранулоцитов. В составе ИК помимо антигена имеются иммуноглобулины различных классов и фракции комплемента. На эксперимен-
тальной модели ГН выявлено, что миграция НГ является, в основном, комплементзависимой, в отличие от перемещения мононуклеаров, не зависящих от комплемента. Известно, что снижение внутриклубочковой активации комплемента уменьшает приток нейтрофилов в почечную ткань, но не изменяет притока Т-лимфоцитов при экспериментальном ГН. На модели экспериментального гло-мерулонефрита установлено, что снижение нейтрофильной инфильтрации приводит к снижению протеинурии [38, 39].
При исследовании течения анти-ГБМ-нефрита у мышей дикого типа, у мышей с отсутствием С3-и у мышей с отсутствием С4-компонентов комплемента показано, что у дефектных мышей слабее развивается инфильтрация нейтрофилами почечной ткани и, соответственно, гораздо менее выражено поражение гломерулы. Наиболее благоприятно анти-ГБМ-нефрит протекает у мышей, дефицитных по СЗ-компоненту комплемента [40]. Результаты этой работы подтвердили, что при формировании нейтрофилгранулоцитарного инфильтрата в пораженном клубочке ключевую роль играет СЗ-компонент комплемента, менее активную роль может выполнять С4-компонент комплемента.
При изучении особенностей динамики развития анти-ГБМ-гломерулонефрита у мышей дефицитных, по Clq-компоненту комплемента, выявлено повышение предрасположенности этих мышей к гломерулярному воспалению. Авторы считают, что Clq-компонент комплемента может играть протек-тивную роль в защите почечной ткани от повреждения, вызванного нейтрофильными лейкоцитами при этой форме экспериментального гломерулонеф-рита [41].
Особое внимание в современной литературе уделяется формированию ИК в почечной ткани при IgA-нефропатии, в том числе измененным IgA. Возможно, образование отложений IgA в почечной ткани при IgA-нефропатии, связано не только с циркуляцией в кровеносном русле иммунных комплексов, содержащих IgA, но и с неиммунологической агрегацией измененных, о-гликозилированных в шарнирной части, молекул IgAl [42, 43]. В исследованиях in vitro показано, что у ферментативно гликозилированных IgAl значительно повышена адгезионная способность к белкам экстрацеллю-лярного матрикса, таким как фибронектин, лами-нин и коллаген IV типа [44, 45]. Эти данные сравнимы с результатами исследования процесса аккумуляции в почке крысы отложений IgAl, выделенного из сыворотки крови здоровых людей и затем подвергнутого ферментативному гликозили-рованию [46]. Мезангиальные и интрокапиллярные
депозиты были представлены в ткани почки крысы через 3 часа после введения в артерию крысы фракции измененного IgAl, но не нативного IgAl человека. Отложения о-гликозилированных IgAl в почечной ткани являются активным хемоаттрак-тантом для нейтрофилов. Наряду с депозитами преформированных иммуноглобулинов в почечной ткани наблюдалась обильная нейтрофильная инфильтрация [46].
Рецепторы нейтрофильных гранулоцитов при гломерулонефрите. Под влиянием определенных медиаторов воспаления значительно увеличивается способность эндотелия сосудов пропускать мигрирующие лейкоциты [47].
Лейкоцитарная инфильтрация при воспалении -стадийный процесс, разделяющийся для отдельной клетки на 3 этапа:
1. Краевое стояние лейкоцитов или маргинация, при которой эти клетки выходят из осевого кровотока и двигаются вдоль эндотелия (англ. rolling), затем прикрепляются к эндотелию и выстилают его изнутри (англ. pavementing).
2. Диапедез или проникновение лейкоцитов через стенку сосудов, которое занимает около 4 минут, начиная с момента остановки клетки у эндотелия. Все виды лейкоцитов способны к активному диапедезу. При этом полиморфонуклеарные лейкоциты и моноциты проникают через межэндо-телиальные щели амебоидным способом, выпуская псевдоподии. Этот процесс не сопровождается существенной экстравазацией жидкости, но требует от клетки больших энергозатрат. При преодолении базальной мембраны могут иметь значение лизо-сомальные коллагеназа и эластаза. Пассивному диапедезу вместе с лейкоцитами может подвергаться некоторое количество эритроцитов.
3. Движение лейкоцитов к центру воспалительного очага происходит в результате хемотаксиса и рассматривается как первая фаза фагоцитоза.
Основным механизмом миграции лейкоцитов являются комплементарные лиганд-рецепторные взаимодействия между лейкоцитом и сосудистой стенкой, причем появление рецепторов индуцируется медиаторами воспаления. До активации молекулы адгезии располагаються во внутриклеточных гранулах и не функционируют. Часть из них распознает свои лиганды только после того, как первичная альтерация и/или медиаторы воспаления вызовут в последних конформационные изменения. При воспалении ряд медиаторов (фрагменты комплемент С5а и Вь; лейкотриен В4; лейкотриен В4; фактор активации тромбоцитов; трансферрин; цитокины: ИЛ-l, ИЛ-8, у-интерферон, ФНОа и ФНОр; пептидные хемотаксические факторы: ма-
стоцитарные факторы хемотаксиса нейтрофилов, эозинофилов и базофилов, а также сами липополи-сахариды бактерий) вызывают высвобождение молекул адгезии и их лигандов из гранул, конфор-мационные изменения, благоприятствующие их комплементарным взаимодействиям и, позже, синтез молекул de novo. При этом часть медиаторов индуцирует повышение адгезивных свойств только у лейкоцитов (лейкотриен В4 - на нейтрофилах, факторы комплемента - на полиморфонуклеарах и моноцитах), часть действует только на эндотелий (ИЛ-1, эндотоксин бактерий), а большинство стимулирует адгезивность и лейкоцитов, и эндотелия (ФНОа и р). Большинство медиаторов-усилителей адгезивных свойств синтезируется лимфоцитами и макрофагами, но и сам эндотелий под влиянием ли-пополисахаридов бактерий, тромбина и ФНО способен вырабатывать, например, ИЛ-1 [47].
Селектины опосредуют самую раннию стадию маргинации лейкоцитов - обратимую адгезию. Важным шагом в реализации процесса активации нейтрофильных гранулоцитов в месте воспаления является его способность прикрепляться к поверхности эндотелия. Этот процесс осуществляется благодаря экспрессии на мембране эндотелиоци-тов специальных адгезионных молекул, таких как Е-селектины, посредством которых НГ и может закрепиться на эндотелиальном монослое, что и обеспечивает приток НГ в места воспаления [48]. Взаимодействие лейкоцитов с поверхностью эндотелия с участием селектинов приводит к тому, что лейкоциты покидают осевой кровоток, претерпевают краевое движение и краевое стояние. Так, при экспериментальном ГН у мышей возможно накопление нейтрофилов в почечной ткани независимо от комплемента, а только благодаря Р-селек-тину [49], который участвует в адгезии нейтрофильных гранулоцитов и тромбоцитов на эндотелии капилляров клубочков. Активную роль Р-селектина в инфильтрации гломерулы при экспериментальном гломерулонефрите подтверждают и другие авторы, которые наблюдали снижение ней-трофильной инфильтрации при использовании антител против Р-селектина [50; 51]. Тем не менее в литературе имеются данные об отсутствие эффекта синтетических блокаторов P-селектина и L-се-лектина на адгезию нейтрофилов к эндотелию почечного клубочка при анти-ГБМ-гломерулонеф-рите у крыс [52]. Кроме того, у мышей, нокаутных по гену P-селектина, развивается более агрессивный гломерулонефрит с повышением клубочковой аккумуляции нейтрофилов [18; 53]. Однако P-се-лектин нокаутные мыши демонстрируют более высокий уровень нейтрофилии и дефицит раство-
римой формы P-селектина, который, как было показано, приводит к подавлению прикрепления нейтрофилов [54].
K.N. Lai и соавт. (1994) обнаружили, что уровень Е-селектина в плазме крови у пациентов с IgA-нефропатией даже в состоянии ремиссии значительно выше, чем у здоровых людей [55]. Причем, чем выше уровень Е-селектина в плазме, тем более выражено поражение почечной ткани у этих больных. Уровень Е-селектина в плазме крови также коррелировал с выраженностью протеи-нурии у больных IgA-нефропатией [55]. Авторы предполагают, что высокий уровень Е-селектина в плазме крови является маркером степени интенсивности взаимодействия между активированными нейтрофилами и эндотелиоцитами при воспалительных процессах, что может привести к прогрессированию почечных поражений через высвобождение свободных кислородных радикалов нейтрофильными гранулоцитами [56].
Более длительный контакт и эмиграция лейкоцитов из сосудистого русла происходит благодаря сложному взаимодействию специфических молекул адгезии. При этом нейтрофилы плотно прилипают к эндотелию с помощью активированных интегринов. Интегрины - димерные трансмембранные белки, экспрессируемые лейкоцитами и другими клетками гемопоэтического ряда, фибробла-стами и клетками ряда внутренних органов. Эндотелий экспрессирует лишь некоторые интегрины.
Активированные лейкоциты, за счет имеющихся на их поверхности интегринов (р р CD11/ CD18, CD44), прикрепляются к молекулам межклеточной адгезии эндотелия ICAM-1, ICAM-2. Вследствие этого лейкоциты фиксируются на стенке сосудов и инициируют цепь процессов, приводящих к их уплощению и распластыванию, а в конечном итоге к эмиграции лейкоцитов в экстра-вазальное пространство [57].
При маргинации и диапедезе основными участниками процесса являются р2-интегрины LFA-1, р150 и CR3 (Mac-1) миелоидных и лимфоидных клеток. Они взаимодействуют с молекулами ICAM суперсемейства иммуноглобулинов, появляющимися на эндотелиоцитах под воздействием цитоки-нов. ICAM-1 играет важную роль в прикреплении нейтрофила к эндотелию сосуда [58]. Миграция нейтрофилов в клубочек облегчается благодаря экспрессии на эндотелиоцитах ICAMs [59]. Кроме того, предполагают, что роль ат-р2-интегрина и Р3-интегрина значительнее в миграции НГ в
а
11b
ткань, чем Р-селектина [60].
Mac-1 (amb2, CD11b/CD18, комплиментарный рецептор 3-го типа) представлен преимуществен-
но на гранулоцитах и моноцитах. Он связывается с межклеточной молекулой адгезии l (ICAM-l, intercellular adhesion molecule l), фрагментом комплемента С3 и C3bi, с гепарином и коагуляционны-ми факторами, фибриногеном и фактором X. С помощью этого рецептора опосредуются адгезионно-зависимые процессы, такие, как адгезия к эндотелию, фагоцитоз, супероксидная продукция, и другие активационные события [6l]. Mac-l также взаимодействует с FcyR, после соединения его с иммунным комплексом, стимулируя фагоцитоз и адгезию [62]. Важность участия Mac-l нейтро-фильных гранулоцитов при развитии поражения почечной ткани была доказана на модели острого гломерулонефрита у крыс с использованием функциональной блокады этого рецептора [63, 64].
В то же время, на модели НТН, вызванного у мышей (мыши дикого типа и мыши, дефицитные по экспрессии Fc-рецепторов), обнаружено, что приток нейтрофилов в почечную ткань обеспечивается благодаря активному участию экспресси-руемых Fc-рецепторов на мембране НГ. Более того, этот процесс опережает интегрин-зависимое поступление нейтрофильных гранулоцитов в ткань [65]. FcR-зависимый приток нейтрофилов в почечную ткань наблюдался раньше активации NF-kB и повышения экспрессии ФНО±. Усиление продукции H2O2 нейтрофилами, инфильтрирующими почечную ткань на данной модели НТН, также являлось FcR-зависимым. Авторы предполагают, что механизм FcR-зависимого респираторного взрыва, осуществляемого нейтрофильными грану-лоцитами, участвует в поддержании длительного течения НТН [65]. Эти данные подтверждены и при исследовании развития анти-ГБМ-гломеруло-нефрита у мышей, дефицитных по экспрессии Fcy-рецепторов (CD40-/-). У (CD40-/-) мышей отсутствовало повреждение почечной ткани, хотя нейтрофильно-гранулоцитарная инфильтрация ее была выявлена, как и у мышей дикого типа с анти-ГБМ-гломерулонефритом [66].
При экспериментальном гломерулонефрите, вызванном введением антител к гломерулярной базаль-ной мембране, приток нейтрофилов в клубочек является Fc-зависимым, так как (Fab)2 фрагменты этих антител не инициируют перемещение нейтро-филов в клубочек [ll]. На этой же модели экспериментального гломерулонефрита, вызванного у мутантных мышей с отсутствием на нейтрофилах Mac-l, показано, что количество нейтрофилов, инфильтрирующих клубочек в первый час после индукции заболевания, не отличается от такого же у мышей дикого типа [67]. То есть приток нейтрофи-лов в почечную ткань в течение первого часа после
инъекции гетерологических антител не является Мас-1-зависимым. Спустя час, у мышей дикого типа с индуцированным анти-ГБМ-гломерулонефритом количество нейтрофилов в почечной ткани было значительно выше, чем у мышей, дефицитных по Мас-1. В этой же работе обнаружено, что нейтрофильные гранулоциты, дефицитные по Мас-1 рецепторам, способны вызвать повреждения ткани гломерулы (оголение базальной мембраны капилляров клубочков), но не вызывают функциональные нарушения (про-теинурии). Авторы сделали вывод, что Мас-1 не является необходимым рецептором начального БсуЯ-зависимого прикрепления нейтрофильного гранулоцита к ИК, но он необходим для стабилизации взаимодействия нейтрофильных гранулоцитов с ИК [67]. Взаимодействие Мас-1 на НГ с фрагментом комплемента С3Ь на капиллярной стенке клубочка при анти-ГБМ-гломерулонефрите приводит к протеинурии [67]. Известно, что Бсу-рецепторы обладают гетерогенностью. На экспериментальной модели острого гломерулонефрита показано, что интенсивность продукции почечных медиаторов и притока нейтрофилов коррелируют с супрессией РсуКП и активацией БсуКШ на мезангиоцитах [68].
При IgA-нефропатии отмечается усиленная экспрессия Бса-рецепторов. Увеличение экспрессии Бса-рецепторов на НГ сочетается с усилением окислительного метаболизма в нейтрофилах периферической крови у больных с IgA-нефропатией [69]. Выявлена также положительная взаимосвязь интенсивности экспрессии Бса-рецепторов в почечной ткани и на нейтрофильных гранулоцитах при IgA-нефропатии. Почечные клубочки с высоким уровнем экспрессии Бса-рецепторов были положительны по содержанию ФНОа, ИЛ-1 и мРНК к ИЛ-6 [70].
Элиминация иммунных комплексов из почечной ткани нейтрофилъныши гранулоцитами. По современным представлениям, одной из основных мишений, на которую направлено действие нейт-рофильных гранулоцитов в поврежденной ткани, является иммунный комплекс, который нейтро-фильный гранулоцит «должен» удалить из ткани. При изучении утилизации иммунных комплексов при экспериментальном гломерулонефрите выяснено, что нейтрофилы способны поглощать только ИК, расположенные субэндотелиально, при этом нейтрофил находится в прямом контакте с эндоте-лиальной клеткой или субэндотелиальными комплексами. В утилизации субэпителиальных ИК активное участие принимают подоциты [71].
Известно, что ИК, содержащие измененный IgA, накапливаются в почечной ткани больных с ^А-нефропатией [46]. При исследовании отложений о-гликозилированного IgA1 человека в почеч-
ной ткани крыс обнаружено, что депозиты фагоцитируются нейтрофилами, инфильтрующими почечную ткань. После однократной инъекции в почечную артерию крысы ферментативно измененных ^А, почечная ткань через 24 часа полностью освобождается от отложений благодаря фагоцитарной активности нейтрофилов. Эти данные получены с помощью электронной микроскопии. Авторы считают, что гистологическая картина почечной ткани при ^А-нефропатии у человека отлична от таковой у экспериментальных животных из-за постоянного и длительного по времени отложения ^А при IgA-нефропатии [46]. При IgA-нефропатии обнаружено снижение фагоцитарной активности нейтрофилов, которая отрицательно коррелирует с изменениями уровня сывороточного ^ [72].
Многие авторы считают, что при ХГН у человека нейтрофилы характеризуются незавершенным фагоцитозом [73,74]. У больных с латентным течением ХГН вне обострения фагоцитарный индекс (ФИ) не отличается от ФИ здоровых лиц, а показатели фагоцитарного числа (ФЧ) снижены. У больных с ХГН в стадии обострения ФИ и ФЧ ниже, чем у здоровых людей и у больных вне обострения. У больных тяжелой формой нефрита выявлено отсутствие резерва фагоцитоза [75,76].
Положительная роль нейтрофилов, инфильтрирующих почечную ткань, связана не только с удалением из нее ИК. На экспериментальной модели Ап1>ТЫ-1.1 гломерулонефрита, вызванном у крыс, продемонстрировано, что снижение притока нейт-рофилов в ткань путем введения блокирующих мо-ноклональных антител против СВ11Ъ/СВ18 приводит к повышению отложений в клубочках факторов комплемента С3 и С6. Так как эта модель является комплемент зависимой, при сниженном притоке нейтрофилов наблюдается более высокий процент микроаневризмов в клубочках, поражения клеток клубочков и более высокая гематурия. Авторы считают, что при Ап11-ТЫ-1.1 гло-мерулонефрите нейтрофилы участвуют в репаративных процессах, протекающих в почечной ткани при данной форме экспериментального гло-мерулонефрита, путем инактивации компонентов комплемента энзимами, освобожденных из нейт-рофильных гранул [77].
Деструктивная роль нейтрофилъных грануло-цитов в почечной ткани при гломерулонефрите. Выполняя свою положительную роль в очищении почечной ткани от ИК, нейтрофильный гранулоцит одновременно повреждает анатомический каркас стенки сосуда, открывая доступ мононуклеарам в паравазальное пространство. Нейтрофил распола-
гает широким набором факторов, вызывающих альтерацию ткани, которую он инфильтрирует.
Одним из патологических механизмов поражения почечной ткани при гломерулонефрите является продукция нейтрофилами активных кислородных метаболитов [78-80] и высвобождение миелоперок-сидазы, которая катализирует эти реакции [81]. Продукты активного кислорода могут непосредственно повреждать эндотелий и мезангиальные клетки клубочков. Так, продукция свободнорадикального кислорода активированными нейтрофилами может подавлять активность гломерулярной АДФазы, вызывая ингибирование АДФаз-зависимых антитром-бических реакций, что может привести к быстрому образованию тромбов [82].
При исследовании продукции О2- и Н202 нейтрофилами у больных с IgA-нефропатией обнаружено, что кислородный метаболизм нейтрофильных гранулоцитов у них выше, чем у пациентов с другими формами ГН и здоровых доноров. Самый высокий окислительный метаболизм наблюдается у пациентов с серьезными гистологическими повреждениями ткани [83].
На повышенную способность нейтрофильных гранулоцитов больных ^А-нефропатией генерировать кислородные радикалы указывает и то, что продукция перекиси водорода нейтрофилами после стимуляции агрегированным ^в или зимозаном выше у больных IgA-нефропатией, чем у больных с другими формами первичного ХГН [27]. Нейтрофилы, выделенные из крови больных ^А-нефропатией и обработанные ^Т-формил-метионил-лейцил-фенилала-нином, также продуцируют гораздо большее количество кислородных метаболитов, что приводит к повышению синтеза эндотелина-1 мезангиоцитами и к гибели мезангиоцитов [84]. Эти данные подтверждены исследованием, в котором показано, что выраженность протеинурии коррелирует с уровнем продукции супероксида нейтрофилами у больных ^А-нефропатией. Нейтрофилы, выделенные из крови больных IgA-нефропатией после стимуляции агрегированными IgA или ^в, продуцируют гораздо больше активных продуктов кислорода, чем нейт-рофилы здоровых индивидуумов, подвергнутые такому же воздействию. У больных ^А-нефропа-тией интенсивность экспрессии БеаАЯ на мембране нейтрофилов коррелирует с активностью продукции супероксида нейтрофильными грануло-цитами, инициированной агрегированным IgA [70].
Возможный механизм высокой продукции кислородных метаболитов нейтрофилами больных ^А-нефропатией, по-видимому, объясняется тем, что агрегированные формы ^А, выделенные из сыворотки больных ^А-нефропатией, влияют на ак-
тивность сигнальной трансдукции нейтрофилов, как это было продемонстрировано путем измерения продукции инозитола трифосфата [85]. Этот процесс сопровождается мобилизацией внутриклеточного кальция и повышением продукции супероксида [86]. Таким образом, циркулирующие нейтрофильные гранулоциты при IgA-нефропатии находятся в активном состоянии, вызванном постоянной стимуляцией полимеризованным IgA [56].
Реализуя окислительный потенциал, нейтрофи-лы сами попадают под воздействие собственных высокоактивных кислородных радикалов. Так, при изучении состояния мембран нейтрофильных гра-нулоцитов при ХГН у человека многие авторы выявили нарушение фосфолипидной композиции и существенное повышение уровня холестерина, а также значительную активацию перекисного окисления липидов и нарушение антиоксидантной защиты [87-89].
Нейтрофильный гранулоцит обладает широким набором и неоксидативных механизмов поражения инфильтрируемой ткани, так как в нейтрофильных гранулах содержатся различные гидролитические ферменты и антимикробные полипептиды, которые могут вызывать повреждения стенки сосудов и других тканей. Например, катионные белки, выделяемые из лизосомальных гранул нейтрофилов, повышают проницаемость стенки сосудов in vivo и обладают, помимо бактерицидной активности, ци-тотоксической и эластолитической активностью [90]. Протеазы нейтрофилов, являясь медиаторами тканевой деструкции, могут разрушать важные компоненты экстрацеллюлярного матрикса (эластины, протеогликаны и гликопротеины) [91, 92]. Ферменты нейтрофильных гранул могут разрушать и различные ключевые протеины плазмы крови (иммуноглобулины, белки комплемента, факторы свертывания крови) [93, 94]. Активность протеаз регулируется большим количеством антипротеаз, содержащихся в плазме крови и интерстициальной жидкости [95]. В патогенезе повреждения почечной ткани участвуют и фосфолипазные продукты нейтрофилов [96, 97]. На нокаутных по гену эндо-телиальной нитрооксидазы (II) синтетазы мышах показано, что активированные нейтрофилы вызывают ингибицию эндотелиальной нитрооксидазы (II) синтетазы, что приводит к нарушению сосудистого тонуса и образованию тромбов [98].
Динамика нейтрофилъной инфильтрации при гломерулонефрите. Нейтрофильная инфильтрация почечной ткани особенно часто встречается у больных с быстропрогрессирубщим гломерулонефритом. При этой форме гломеруло-нефрита нейтрофильная эластаза, возможно, явля-
ется агентом, повреждающим гломерулы и пере-гломерулярное пространство [99]. P. Kincaid-Smith с соавт. (l989) выявили повышение моноцитарной и нейтрофильной инфильтрации в почечных биопсиях больных IgA-нефропатией, полученных во время эпизодов гематурии [l00].
Chen H.C. и соавт. (l992) предоставили данные о повышении количества полиморфноядерных лейкоцитов в клубочках всех обследованных пациентов с IgA-нефропатией, несмотря на то, что биопсия почек у них была выполнена во время ремиссии. Более того, инфильтрация почечной ткани нейтро-филами усиливалась с увеличением гистопатологи-ческих изменений ткани [27]. Подобные результаты были получены и другими авторами [l0l].
При вызванном экспериментальном гломеру-лонефрите нейтрофильная инфильтрация развивается через 4 часа после воздействия и сохраняется до 24 часов. Пятая часть НГ гибнет в клубочках в результате апоптоза и утилизируется внутриклу-бочковыми макрофагами, а остальные иммигрируют из них, как предполагают авторы, обратно в кровеносное русло. Кинетика нейтрофильных гра-нулоцитов была прослежена с помощью радиоактивной метки [l02, l03].
Быстрота, действенность и напряженность поступления в очаг воспаления нейтрофильных гра-нулоцитов и его очистки нейтрофильными гранулоцитами является важным компонентом эффективной защиты. Данные, полученные на моделях in vitro и при гистологических исследованиях, подтверждают, что тканевые повреждения, обусловленные нейтрофилами, ограничиваются путем их апоптоза и последующим фагоцитозом погибших в результате апоптоза нейтрофилов [l04]. Снижение активности макрофагов в процессе утилизации погибших клеток из инфильтрируемой ткани играет негативную роль в патогенезе хронического воспаления, в том числе и при гломерулонефрите [l05]. CD44 - адгезивный рецептор, который экспрессируется на нейтрофилах, лимфоцитах, мезангиоцитах и клетках тубулярно-го эпителия. При присоединении лиганда к CD44 возникает апоптоз только нейтрофилов, у других клеток соединение лиганда с CD44 не вызывает апоптоза. Авторы использовали антитела к CD44 (OX-50) для индукции апоптоза нейтрофилов, инфильтрирующих почечную ткань при анти-ГБМ-гломерулонефрите [l06]. Повреждение почечной ткани у крыс при экспериментальном гломеруло-нефрите резко уменьшается при применении OX-50, что влечет за собой снижение протеинурии. Причем, этот эффект возможен в первые сутки после индукции заболевания, когда имеет место
нейтрофильно-гранулоцитарная инфильтрация, но не на десятые, когда уже преобладает мононуклеар-ная инфильтрация почечной ткани [106].
Методы1 лечения гломерулонефрита, осно-ванныге на представлении об активном участии нейтрофилов в патогенезе данного заболевания. Одним из возможных способов снижения токсического действия свободных кислородных радикалов, продуцируемых нейтрофилами, является использование натуральных антиоксидантов, например витамина Е. Он препятствует перекисному окислению липидов и, соответственно, защищает от оксидантного повреждения многие органы, включая и почки [107]. Витамин Е эффективно снижает развитие гломерулосклероза на модели пи-ромицин-индуцированного нефрита у крыс [108]. Введение а-токоферола снижает тканевой оксида-тивный стресс и протеинурию у мышей с экспериментальной моделью IgA-нефропатии [109].
Образование тромбов и отложение фибрина в клубочках является важной частью патологического процесса при гломерулярном повреждении
[110]. Гломерулярные тромбы довольно часто обнаруживают при гломерулонефрите у человека
[111]. При нормальных условиях тромбы не образуются, так как эндотелиальные клетки защищены многими антитромботическими факторами, среди которых присутствует и тромбомодулин. Повреждение эндотелиальных клеток понижает их антитромботические свойства, что и приводит к образованию тромбов [112]. В почках тромбомо-дулин синтезируется в основном эндотелиальны-ми клетками, количество его повышено у пациентов с системной красной волчанкой или мембранозно-пролиферативным гломерулонефритом [113]. При использовании экспериментальной модели тромбо-тического гломерулонефрита у крыс проведено сравнение терапевтических эффектов рекомбинан-тного человеческого тромбомодулина (РЧ-ТМ) и гепарина, как антикоагулянтов [114]. Авторы выявили, что однократное введение тромбомодулина полностью подавляет образование тромбов в клу-бочковых капиллярах по сравнению с эффектом использования гепарина, кроме того, отсутствуют осложнения в виде массивных кровотечений, которые встречаются при введении гепарина. Одним из преимуществ РЧ-ТМ терапии является то, что вве-дениеРЧ-ТМ производят однократно. Введение РЧ-ТМ значительно снижает приток инфильтрирующих нейтрофилов в почку, тогда как гепарин такого влияния не оказывает. Авторами рассматриваются возможные антивоспалительные механизмы действия данного препарата [114].
При индукции экспериментального гломеруло-
нефрита у крыс (путем введения гетерологичных антител к гломерулярной базальной мембране) в первые три часа в инфильтрирующих клубочек ней-трофилах активируется р38 митоген-активирован-ный протеинкиназный путь (МАПК), который является провоспалительным сигнальным путем. Авторы предполагают, что эта активация инициируется интерлейкином-1 (ИЛ-1) и фактором некроза опухоли±А (ФНО±А). При использовании селективного ингибитора этого пути (№С31145), после индукции экспериментального гломерулонеф-рита у крыс снижались повреждения почечной ткани и сохранялась нормальная функция почек. Авторы предполагают, что блокада р38 МАПК пути в нейтрофилах может быть новой терапевтической стратегией при лечении острого воспаления почки [115].
Нейтрофильные и макрофагальные протеина-зы при экспериментальном анти-ГБМ-нефрите вызывают разрушение базальной мембраны клубочков. Было показано, что применение ингибиторов протеиназ снижает поражение гломеруляр-ной базальной мембраны в среднем в два раза [92]. Одним из таких ингибиторов является улиноста-тин, выделенный из мочи человека. Он не влияет на комплементарные реакции и отложение депозитов в ткани почки при воспроизведении экспериментальной модели гломерулонефрита у крыс, но приводит к уменьшению нейтрофильной и моноци-тарно-макрофагальной инфильтрации ткани почки, и как следствие - к уменьшению протеинурии и повреждения ткани [116].
Таким образом, многочисленные исследования изменений функционального состояния нейтрофиль-ных лейкоцитов подтверждают, что нейтрофильные лейкоциты активно участвуют в развитии и в прогрес-сировании гломерулонефритов, высвобождая комплекс различных агентов, которые при определенных условиях могут нарушать нормальную деятельность клеток и разрушать соединительную ткань.
Особое внимание отводят рассмотрению роли оксидативных механизмов поражения почечной ткани. В то же время в литературе имеются данные о неоксидативных механизмах поражения ткани почки, инфильтрованной нейтрофилами (в результате экзоцитоза гранул, содержащих гидролитические ферменты и антимикробные полипептиды).
Известны и механизмы, посредством которых нейтрофил попадает в почечную ткань. Так, на экспериментальных моделях гломерулонефрита, полученных на лабораторных животных, показана роль селектинов, интегринов и Бе-рецепторов в активации миграции нейтрофилов в почечную ткань
при развитии гломерулонефритов. Предполагается, что при развитии и прогрессировании различных пролиферативных форм хронического гломерулонефрита у человека механизмы миграции в почечную ткань нейтрофильных лейкоцитов аналогичны.
Определена роль различных медиаторов воспаления в привлечении нейтрофильных гранулоци-тов в почечную ткань и их активации, в частности ИЛ-l, ИЛ-8, ФНОа и ФНОр, липоксинов, лейкотри-енов, MIP-2, ГМ-КСФ, Г-КСФ.
В настоящее время предлагаются и разрабатываются новые терапевтические приемы, направленные на уменьшение повреждающего действия нейтрофилов на почечную ткань, основанные на современном понимании роли нейтрофильных грану-лоцитов в динамике развития повреждения почки при ГН.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Тареева ИЕ. Механизмы прогрессирования гломеру-лонефрита. Тер арх 1988; (6): 3-7
2. Dixon FJ, Feldman JD, Vazques JJ. Experimental glomerulonephritis. The pathogenesis of a laboratory model resembling the spectrum of human glomerulonephritis. J Exp Med 1961; 113(2):899-920
3. Альбини Б, Брентьенс ЯР, Андрее ДА. Иммунопатология почки. Медицина, М., 1982; 264
4. Theofilopoulos AN, Dixon FJ. The biology and detection of immune complexes. In: Advances in immunology. Ed. FJ Dixon, New York, 1979; 28: 89-220
5. Шилов ЕМ. Иммунопатология болезней почек. В: Тареева ИЕ, ред. Нефрология. Руководство для врачей. Медицина, М., 2000; 132-144
6. Шулутко БИ. Концепция гломерулонефрита как нозо-ологии. Нефрология 2002; 6(2): 102-108
7. Шулутко БИ. Нефропатии как сосудистая патология. Нефрология 2003; 7(4): 21-28
8. Мухин НА. Комментарии к разделам, написанным Е.М.Тареевым. В: Тареева ИЕ, ред. Нефрология. Руководство для врачей. Медицина, М., 2000; 205-210
9. Johnson R, Klebanoff SJ, Couser WG. Cellular mediators of immune injury: Neutrophils. In: Neilson EG, Couser WG. Immunologic Renal Diseases, Lippincott-Raven, Philadelphia, 1997; 547-560
10. Segerer S, Nelson PJ, Schlondorff D. Chemokines, chemokine receptors, and renal disease: From basic science to pathophysiologic and the therapeutic studies. J Am Soc Nephrology 2003; 14: 338-351
11. Schrijver G, Bogman JJT, Assmann KJM et al. Anti-GBN nephritis in the mouse: role of granulocytes in the heterologous phase. Kidney Int 1990; 38: 86-95
12. Noris M, Remuzzi G. New insights into circulating cell-endothelium interaction and their significance for glomerular pathophysiology. Am J Kidney Dis 1995; 26(3): 541-548
13. Isha N, Cashman SJ, Hay H et al. Modulation of antibody mediated glomerular injury in vivo by bacterial lipopolysaccharide, tumor necrosis factor and Il-1. J Immunol 1989; 142: 3080-3090
14. Ohse T, Ota T, Kieran N et al. Modulation of interferon-induced genes by lipoxin analogue in anti-glomerular basement membrane nephritis. J Am Soc Nephrol 2004; 15(4): 919-927
15. O'Meara YM, Brady HR. Lipoxins, leukocyte recruitment and the resolution phase of acute glomerulonephritis. Kidney Int [Suppl] 1997; 58: S56-61
16. McMahon B, Mitchel S, Braly HR, Godson C. Lipoxins:
Revelations in resolution. TiPS 2001; 22: 391-395
17. Papayianni A, Serhan CN, Philips ML et al. Transcellular biosynthesis of Lipoxin A4 during adhesion of platelets and neutrophils in experimental immune complex glomerulonephritis. Kidney Int 1994; 47: 1295-1302
18. Mayadas TN, Mendrick DL, Brady HR et al. Acute passive anti-glomerular basement membrane nephritis in P-selectin-deficient mice. Kidney Int 1996; 49: 1342-1349.
19. Munger KA, Montero A, Fukunago M et al. Transfection of rat kidney with human 15-lipoxygenase supresses inflammation and preserves function in experimental glomerulonephritis. Proc Natl Acad Sci USA 1999; 96: 1337513380
20. Papayianni A, Serhan CN, Brady HR. Lipoxin A4 and B4 inhibit leukotriene-stimulated interaction of human neutrophils and endothelial cells. J Immunol 1996; 156: 2264-2272.
21. Donovan KL, Coles GA, Williams JD. Tumor necrosis factor-6 augments the pro-inflammatory interaction between PMN and GBN via a CD18 dependent mechanism. Kidney Int 1995; 48: 698-704
22. Harada A, Sekido N, Akahoshi T et al. Essential involvement of interleukin-8 (Il-8) in acute inflammation. J Leukocyte Biol 1994; 56(5): 559-564
23. Peichl P, Ceska M, Broell H et al. Human neutrophil activating peptide/interleukin 8 acts as an autoantigen in rheumatoid arthritis. Annals Rheum Dis 1992; 51: 19-22
24. Yoshioka K, Takemura T, Murakami K et al. In situ expression of cytokine in IgA nephropathy. Kidney Int 1993; 44: 825-833
25. Li HL, Hancock WW, Hooke DH et al. Mononuclear cell activation and decreased renal function in IgA nephropathy with crescents. Kidney Int 1990; 37: 1552-1556
26. Matsumoto K. Effect of various cytokines, lipopolysaccharides, and soluble immune complexes on the release of interleukin-8 by monocytes from patients with IgA nephropathy (letter). Nephron 1995; 69: 352-353
27. Chen HC, Tomino Y, Yaguchi Y et al. Oxidative metabolism of polymorphonuclear leukocytes (PMN) in patients with IgA nephropathy. J Clin Lab Analysis 1992; 6 (1): 35-39
28. Wada T, Yokoyama H, Tomosugi N et al. Detection of urinary interleukin-8 in glomerular diseases. Kidney Int 1994; 46: 455-460
29. Saleem S, Dai Z, Coelho SN et al. IL-4 is endogenous inhibitor of neutrophil influx and subsequent pathology in acute antibody-mediated inflammation. J Immunol 1998; 160: 979984
30. Werteim WA, Kunkel SL, Standiford TJ et al. Regulation of neutrophil-derived IL-8: the role of prostaglandin E2, dexamethasone, and IL-4. J Immunol 1993; 151: 2166-2171
31. Feng L, Xia Y, Yoshimura T, Wilson CB. Modulation of neutrophil influx in glomerulonephritis in the rat with antimacrophage inflammatory protein-2 (MIP-2) antibody. J Clin Invest 1995; 95:1009-1017
32. Wu X, Dolecki GJ, Sherry B et al. Chemokines are expressed in a myeloid cell-dependent fashion and mediate distinct functions in immune complex glomerulonephritis in rat. J Immunol 1997; 158: 3917-3924
33. Wu X, Helfrich MH, Horton Ma et al. Fibrinogen mediates platelet-polymorphonuclear leukocyte cooperation during immune-complex glomerulonephritis in rat. J Clin Invest 1994; 94(3): 982-936
34. Matsuda M, Shikata K, Makino H et al. Glomerular expression of macrophage colony-stimulating factor and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in patients with various forms of glomerulonephritis. Lab Invest 1996; 75: 403-412
35. Kitching AR, Huang XR,. Turner AL et al.The requirement for granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and granulocyte colony-stimulating factor in leukocyte-mediated immune glomerular injuri. J Am Soc Nephrol 13: 350-358, 2002.
36. Magen D, Mandel H, Berant M et al. MPGN type I induced by granulocyte colony stimulating factor. Pediatr Nephrol 2002; 17(5): 370-372.
37. Klein JB, Rane MJ, Scherzer JA et al. Granulocyte-
macrrophage colony-stimulating factor delays neutrophil constitutive apoptosis through phosphoinositide 3-kinase and extracellular signal-regulated kinase pathways. J Immunol 2000; 164: 4286-4291
38. Huang XR, Holdsworth SR, Tipping PG. Th2 responses induce humorally mediated injury in experimental anti-glomerular basement membrane glomerulonephritis. J Am Soc Nephrol 1997; 8: 1101-1108
39. Asghar SS, Pasch MC. Therapeutic inhibition of the complement system. Front Biosci 2000; 1(5): E63-81
40. Sheerin NS, Springall T, Carrol Mc et al. Protection against anti-glomerular basement membrane (gbm)-mediated nephritis in C3- and C4- deficient mice. J Clin Exp Immunol 1997; 110(3): 403-409
41. Robson MG, Cook HT, Pusey CD et al. Antibody-mediated glomerulonephritis in mice: the role of endotoxin, complement and genetic background. Clin Exp Immunol 2003; 133(3): 326-333
42. Kokubo T, Hiki Y, Iwase H et al. Evidence for involvement of IgA1 hinge glycopeptide in IgA1-IgA1 interaction in IgA nephropathy. J Am Soc Nephrol 1997; 8: 915-919
43. Hiki Y, Kokubo T, Iwase H et al. Under-glycosylation of IgA1 hinge plays a certain role for its glomerular deposition in IgA nephropathy. J Am Soc Nephrol 1999; 10: 760-769
44. Kokubo T, Hiki Y, Iwase H et al. Protective role of IgA1 glycans against IgA1 self-aggregation and adhesion to extracellular matrix proteins. J Am Soc Nephrol 1998; 9: 20482054
45. Coppo R, Amore A, Gianoglio B et al. Serum IgA and macromolecular IgA reacting with mesangial matrix components. Contr Nephrol 1993;104: 162-171
46. Sano T, Hiki Y, Kokubo T, Iwase H et al. Enzymatically deglycosylated human IgA1 molecules accumulate and induce inflammatory cell reaction in rat glomeruli. Nephrol Dial Transplant 2002; 17: 50-56
47. Зайчик АШ, Чурилов ЛП. Основы общей патологии. ЭЛБИ-СПб, СПб, 1999; 297-302
48. Bevilacqua MP, Stengelin S, Gimbrone MA, Seed B. ELAM-1: An inducible receptor for neutrophils related to complement regulatory proteins and lectins. Science 1988; 243: 1160-1164
49. Tipping PG, Huang XR, Berndt MC, Holdsworth SR. A role of P-selectin in complement-independent neutrophil-mediated glomerular injury. Kidney Int 1994; 46: 79-88
50. Zachem CR, Alpers CE, Way W et al. A role for P-selectin in neutrophil and platelet infiltration in immune complex glomerulonephritis. J Am Soc Nephrol 1997; 8: 1838-1844
51. Ito I, Yuzawa Y, Mizuno M et al. Effects of a new synthetic selectin blocker in an acute rat thrombotic glomerulonephritis. Am J Kidney Dis 2001; 38: 265-273
52. De Vriese AS, Endlich K, Elger M et al. The role of selectins in glomerular leukocyte recruitment in rat anti-glomerular basement membrane glomerulonephritis. J Am Soc Nephrol 10: 2510-2517, 1999
53. Rosenkranz AR, Mendrick DL, Cotran RS, Mayadas TN. P-selectin deficiency exacerbates experimental glomerulonephritis: A protective role for endothelial P-selectin in inflammation. J Clin Invest 1999; 103: 649-659
54. Gamble JR, Skinner MP, Berndt MC, Vadas MA. Prevention of activated neutrophil adhesion to endothelium by soluble adhesion protein GMP140. Science 1990; 249: 414-417
55. Lai KN, Wong KC, Li PKT et al. Circulating leukocyte-endothelial adhesion molecules in IgA nephropathy. Nephron 1994; 68: 294-300
56. Lai KN. Future directions in the treatment of IgA nephropathy. Nephron 2002; 92(2): 263-270
57. Шубич МГ, Авдеева МГ, Вакуленко АД. Адгезивные межклеточные взаимодействия. Арх патологии 1997; 59(6): 3-9
58. Xu H, Gonzalo J, Pierre Y et al. Leukocytosis and resistance to septic shock in intercellular adhesion molecule 1-deficient mice. J Exp Med 1994; 180: 95-102
59. Canton D. Adhesion molecules in renal disease. Kidney Int 1995; 48: 1687-1698
60. Lefkowith JB. Leukocyte migration in immune complex
glomerulonephritis: role of adhesion receptors. Kidney Int 1997; 51: 1469-1475
61. Arnaout MA. Structure and function of the leukocyte adhesion molecules CD11/CD16. Blood. 1990; 75: 1037-1050
62. Zhou MJ, Todd III RF, van de Winkel GJ, Petty HR. Co-capping of the leukoadhesion molecules complement receptor type 3 and lymphocyte function-associated antigen-1 with Fcr receptor III on human neutrophils. J Immunol 1993; 150: 30303041
63. Wu X, Pippin J, Lefkowith JB. Attenuation of immunemediated glomerulonephritis with an anti-CD11b monoclonal antibody. Am J Physiol 1993; 264: F715-F721
64. Mulligan MS, Johnson KJ, Todd III RF et al. Requirements for leukocyte adhesion molecules in nephrotoxic nephritis. J Clin Invest 1993; 91: 577-587
65. Suzuki Y, Gomez-Guerrero C, Shirato I et al. Pre-existing glomerular immune complexes induce polymorphonuclear cell recruitment through an Fc receptor-dependent respiratory burst: potential role in the perpetuation of immune nephritis. J Immunol 2003; 170: 3243-3253
66. Wakayama H, Hasegawa Y, Kawabe T et al. Abolition of anti-glomerular basement membrane antibody-mediated glomerulonephritis in Fcr-deficient mice. Eur J Immunol 2000; 30(4): 1182-1190
67. Tang BT, Rosenkranz A, Assmann KJM et al. A role for Mac-1 (CDIIb/CD18) in immune complex-stimulated neutrophil function in vivo: Mac-1 deficiency abrogates sustained Fcr receptor-dependent neutrophil adhesion and complement-dependent proteinuria in acute glomerulonephritis. J Exp Med 1997; 186(11): 1853 -1863
68. Radeke HH, Janssen-Graalfs I, Sowa EN et al. Opposite regulation of type II and III receptors for immunoglobulin G in mouse glomerular mesangial cells and in the induction of anti-glomerular basement membrane (GBM) nephritis. J Biol Chem 2002; 277(30): 27535-27544
69. Kashem A, Endoh M, Nomoto Y et al. Fc6 R expression on polymorphonuclear leukocyte and superoxide generation in IgA nephropathy. Kidney Int 1994; 45: 868-875
70. Kashem A, Endoh M, Yano N et al. Glomerular Fc6R expression and disease activity in IgA nephropathy. Am J Kidney Dis 1997; 30: 389-396
71. Fujigaki Y, Nagase M, Kojima K et al. Glomerular handling of immune complex in the acute phase of active in situ immune complex glomerulonephritis employing cationized ferritin in rats. Ultrastructural localization immune complex, complements and inflammatory cells. Virchow's Archiv 1997; 431(1): 53-61
72. Ihm CG, Woo JT, Chang YW et al. Immunological abnormalities in patient with IgA nephropathy. J Korean Med Sci 1986; 1: 43-48
73. Мирошниченко НГ. Изменение фагоцитарного индекса у больных хроническим гломерулонефритом. Врачебное дело 1979; 9:36-38
74. Мирошниченко НГ, Полянцева ЛР, Козловская ЛВ. Фагоцитарная активность лейкоцитов крови у больных хроническим гломерулонефритом. Тер архив 1980; 4: 31-35
75. Ефремова НБ, Быкова ВА, Козловская ЛВ. Метод оценки резервной активности полиморфноядерных лейкоцитов (ПЯЛ) у больных хроническим гломерулонефритом. I съезд нефрологов России (тезисы докладов). Казань; 1994: 15.
76. Козловская ЛВ, Коррыева БЧ, Артемьева ВБ. Воспалительные механизмы активности нефрита. 5 Пленум союзной проблемной комиссии «нефрология», 14-16 мая 1990. Тезисы докладов. Фрунзе, 1990: 37
77. Westerhuis R, van Straaten SC, van Dixhoorn MGA et al. Distinctive roles of neutrophils and monocytes in Anti-Thi-1 nephritis. Am J Pathol 2000; 156(1): 303-310
78. Baund L, Fouqueray B, Philippe C, Ardaillou R. Reactive oxygen spicies as glomerular autacoids. J Am Soc Nephrol 1992; 2: 132-138
79. Shah SV. The role of reactive oxygen metabolites in glomerular disease. Ann Rev Physiol 1995; 57: 245-262
80. Yoshioka T, Ichikawa I. Glomerular dysfunction induced
by polymorphonuclear leukocyte-derived reactive oxygen species. Am J Physiol 1989; 257: F53-F59
81. Johnson RL, Guggenhein SJ, Klebanoff SJ et al. Morphologic correlates of glomerular oxidant injury induced by the myeloperoxidase-hydrogen peroxide - halide system of the neutrophil. Lab Invest 1988: 58: 294-301
82. Poelstra K, Hardonk MJ, Koudstaal J, Bakker WW. Intraglomerular platelet aggregation and experimental glomerulonephritis. Kidney Int 1990; 37(6): 1500-1508
83. Ventura MT, Gesualdo L, Capobianco V et al. Effects of in vitro nutrient supplementation on polymorphonuclear cell respiratory burst in primary IgA nephropathy. Clin Nephrology 1995; 43(1): 14-19
84. Chen HC, Guh JY, Chang JM, Lai YH. Differential effects of FMLP-activated neutrophils from patients with IgA nephropathy enhanced endothelin 1 production of glomerular mesangial cells. Nephron 2001; 89: 274-279
85. Lai KN, Leung JSK, Li PKT. Heat aggregated IgA prepared from patients with IgA nephropathy increases priming of human neutrophils to produce inositol triphosphate following FMLP stimulation in vitro. Nephron 1995; 69:1-8
86. Lai KN, Leung JSK. Heat aggregated IgA prepared from patients with IgA nephropathy increases calcium mobilization and superoxide production of human neutrophils in vitro. Nephron 1993; 64:129-135
87. Сейсембеков ТЗ, Айтпаев БК, Муравлева ЛЕ. Показатели свободно-радикального окисления и функционального состояния нейтрофилов при хронических заболеваниях почек и токсических нефропатиях. 5 Пленум союзной проблемной комиссии «нефрология». 14-16 мая 1990. Тезисы докладов. Фрунзе, 1990: 43
88. Жмуров ВА, Малишевский МВ, Гапон ЛИ, Мельников АН. Дестабилизация липидной фазы мембран нейтро-филов у больных гипертонической формой хронического гломерулонефрита. I съезд нефрологов России (тезисы докладов). Казань; 1994: 16
89. Малишевский МВ, Жмуров ВА, Гапон ЛИ и др. Нарушения функционально-метаболической активности поли-морфноядерных лейкоцитов у больных гипертонической формой хронического гломерулонефрита в зависимости от морфологической картины. Сборник Клиническая морфология в нефрологии. СПб 1994: 93-94
90. Кокряков ВН. Биология антибиотиков животного происхождения. Наука, СПб., 1999; 162.
91. Matzner Y, Bar NM, Yahalom J et al. Degradation of heparan sulfate in the subendothelial extracellular matrix by a readily released heparanase from human neutrophils: Possible role in invasion through basement membranes. J Clin Invest 1985; 76: 1306-1313
92. Hruby Z, Wendycz D, Kopec W et al. Mechanism of antinephritic effect of proteinase inhibitors in experimental anti-GBM glomerulopathy. Res Exp Med 2000; 199(5): 295-307
93. Janoff A. Neutrophil proteases in inflammation. Ann Rew Medicine 1972; 23: 177-190
94. Janoff A. Elastase in tissue injury. Ann Rew Medicine 1985; 36: 207-216
95. Travis J, Savesen GS. Human plasma proteinase inhibitors. Ann Rev Biochem 1983; 52: 655-709
96. McIntyre TM, Zimmerman GA, Prescott SM. Leukotrienes C4 and D4 stimulate human endothelial cells to synthesize platelet-activating factor and bind neutrophis. Proc Natl Acad Sci USA 1986; 83: 2204-2208
97. Yared A, Albrightson WC, Griswold D et al. Functional
significance of leukotriene B4 in normal and glomerulonephritic kidneys. J Am Soc Nephrol 1991; 2: 45-56
98. Heeringa P, van Goor H, Iton-lindstrom Y, Maeda N. Lack of endothelial nitric oxide synthase aggravates murine accelerated anti-glomerular basement membrane glomerulonephritis. Am J Pathol 2000; 156(3): 879-888
99. Oda T, Hotta O, Taguma Y et al. Involvement of neutrophil elastase in crescentic glomerulonephritis. J Human Pathology 1997; 28(6): 720-728
100. Kincaid-Smith P, Nicholls K, Birchall I. Polymorphs infiltrate glomeruli in mesangial IgA glomerulonephritis. Kidney Int 1989; 36(6): 1108 - 1111
101. Lai KN, Shute J, Lindley I et al. Neutrophil attractant protein-1/Interleukin 8 and its autoantibodies in IgA nephropathy. Clin Immunol Immunopathol 1996; 80: 47-54
102. Savill J, Smith J, Sarraf C et al. Glomerular mesangial cells and inflammatory macrophages ingest neutrrophils undergoing apoptosis. Kidney Int 1992; 42(4): 924-936
103. Hughes J, Johnson RJ, Mooney A et al. Neutrophil fate in experimental glomerular capillary injury in the rat. Emigration exceeds in situ clearance by apoptosis. Am J Pathol 1997; 150(1): 223-234
104. Savill J, Fadok VA. Corpse clearance defines the meaning of cell death. Nature 2000; 407: 784-787
105. Taylor PR, Carugati A, Fadok VA et al. A hierarchical role for classical pathway complement proteins in the clearance of apoptotic cells in vivo. J Exp Med 2000; 192: 3359-3366
106. Takazoe K, Tesch GH, Hill PA et al. CD44-mediated neutrophil apoptosis in the rat. Kidney Int 2000; 58(5): 19201930
107. Nath KA, Croatt AJ, Hostetter TN. Oxygen consumption and oxidant stress in surviving nephrons. Am J Physiol 1990; 258: F1354-F1362
108. Trachtman B, Schwob N. Administration of vitamin E attenuates chronic puromycin aminonucleoside nephropathy (abstract). J Am Soc Nephrol 1993; 4: 785
109. Ward KP, Kuemmerle NB, Krieg RJ et al. Indices of progression of IgA nephropathy are modulated by б-tocopherol in rats. Clin Exp Nephrol 2000; 4: 187-192
110. Carla Z, Remuzzi G. Coagulation and thrombosis in immunologic renal disease. Immunol Renal Dis 1996; 1: 489499
111. Pollak VE. Glomerular thrombosis predicts progression of glomerulonephritis: Can we prevent progression? Am J Kidney Dis 1995; 26: 535-540
112. Rosenberg RD, Aird WC. Vascular-bed-specific hemostasis and hypercoagulable states. N Engl J Med 1999; 340: 1555-1564
113. Mizutani M, Yuzawa Y, Maruyama I et al. Glomerular localization of trombomodulin in human glomerulonephritis. Lab Invest 1993; 69:193-202
114. Ikeguchi H, Maruyama S, Morita Y et al. Effects of human soluble thrombomodulin on experimental glomerulonephritis. Kidney Int 2002; 61: 490-501
115. Stambe C, Atkins RC, Tesch GH et al. Blockade of p38a MAPK ameliorates acute inflammotory renal injury in rat anti-GBM glomerulonephritis. J Am Soc Nephrology 2003; 14: 338-351
116. Koizumi R, Kanai H, Maezawa A et al. Therapeutic effects of ulinastatin on experimental crescentic glomerulonephritis in rats. Nephron 2000; 84(4): 347-352
Поступила в редакцию 17.10.2004 г.
