Научная статья на тему 'MUSE - МЕТОД СРОЧНОЙ EX-VIVO МИКРОСКОПИИ'

MUSE - МЕТОД СРОЧНОЙ EX-VIVO МИКРОСКОПИИ Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

CC BY
59
8
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ЦИФРОВАЯ ПАТОЛОГИЯ / ИМПЛАНТАЦИЯ / МИКРОСКОПИЯ С ВОЗБУЖДЕНИЕМ ПОВЕРХНОСТИ УЛЬТРАФИОЛЕТОМ / MUSE / EX VIVO МИКРОСКОПИЯ / ТРАНСЛЯЦИОННАЯ МЕДИЦИНА / БИОФОТОНИКА
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «MUSE - МЕТОД СРОЧНОЙ EX-VIVO МИКРОСКОПИИ»

100

МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ

потенциал по сравнению с ККМ, кроме того, их можно использовать аутологично [1,2].

К сожалению, до сих пор нет четкого понимания, какие факторы влияют на качество ПК. Нет и четких протоколов по транспортировке и обработке материала. Даже по поводу максимально допустимого времени от получения ПК до ее обработки нет единого мнения [3]. Так, сообщества NetCord и американская ассоциация банков крови (AABB) вообще не упоминают, в какой период кровь должна быть заморожена. FDA, FACT и US state of NY Dept. of Health устанавливают лимит в 48 часов. Для выработки стандартного протокола, позволяющего получить образцы максимального качества, требуется продолжать исследование этих вопросов.

Мы проанализировали 63 образца пуповинной крови, поступившей в коммерческий банк стволовых клеток «Транс-Технологии» (Санкт-Петербург) за 2021 и 2022 годы. Оценивали объем полученного образца, количество лейкоцитов и ГСК. Изучали наличие связи этих параметров с возрастом матери, полом и весом ребенка, сроком и типом родов (осложненные/неослож-ненные, естественные роды/кесарево сечение), а также времени от момента забора ПК до обработки образца.

Обнаружена сильная корреляция (r=0,802, p <0,001) между объемом полученной ПК и количеством лейкоцитов в 1 мкл банкированного образца и корреляция средней силы (rho=0,54, p <0,001) между объемом образца и количеством ГСК в 1 мкл образца. Не обнаружено связи между количеством лейкоцитов и ГСК в 1 мкл образца, возрастом матери и сроком родов. Также не выявлено статистически значимой связи этих параметров с наличием осложнений при родах, путем родоразреше-ния (ЕР ил КС) и полом ребенка. Корреляция количества лейкоцитов и ГСК с весом ребенка при рождении была статистически значимой, но слабой (rho = 0,291, р =

0.022.и rho = 0,291, р = 0,022, соответственно).

Все проанализированные образцы замораживались в течение 24 часов после забора ПК. В пределах этого временного отрезка корреляции между количеством лейкоцитов и ГСК в 1 мкл банкированного образца и временем, прошедшим от забора ПК до ее обработки не обнаружено (rho = 0,122, р = 0,343).

Литература:

1. Михайлова В.А. Инновации и технологии в биомедицине.

Сборник материалов. 2019. C. 141.

2. Ballen K., Gluckman E., Broxmeyer H.E. Blood. 2013. Vol. 122.

№ 4. P.491.

3. Strobel J., Brenner L., Zimmerman R. Clin. Lab. 2015. Vol. 61.

№ 10. P. 1453.

MUSE — МЕТОД СРОЧНОЙ EX-VIVO МИКРОСКОПИИ

А.М. Калиниченко, Г.М. Денисенко,

А.А. Земеров, А.Л. Файзуллин, П.С. Тимашев

Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова, Москва, Россия

e-mail: [email protected]

Ключевые слова: цифровая патология, имплантация, микроскопия с возбуждением поверхности ультрафиолетом, MUSE, ex vivo микроскопия, трансляционная медицина, биофотоника.

Традиционная гистология основана на физическом секционировании замороженных или фиксированных

формалином и залитых в парафин (FFPE) фрагментов ткани. Поскольку метод FFPE является весьма долгим и трудоемким, есть необходимость в более быстром и простом методе ex-vivo микроскопии. MUSE — метод микроскопии, который работает на принципе возбуждения поверхности ткани ультрафиолетом [1]. Отличительной особенностью метода является то, что он не нуждается в стандартной гистологической подготовке, поскольку УФ проникает на несколько микрометров, а спектр возбуждения флуоресцентного красителя лежит в видимом спектре. Такой подход позволяет получить изображение, сопоставимое по информативности со стандартными методами микроскопии [2].

Благодаря проделанной нами работе, был составлен протокол окраски и подобран набор флуоресцентных красителей (растворы Hoehcst и Нильского красного), которые позволяют в высоком качестве идентифицировать гистологические структуры ткани, не требуют специального оборудования, фиксации и занимают около 5 минут.

Поскольку результаты обладают высокой диагностической и прогностической значимостью, возможности традиционных патоморфологических исследований можно существенно расширить. Данный метод диагностики так же прим. м для оценки имплантируемых конструкций и срочной гистологической диагностики процесса регенерации тканей.

Литература:

1. Fereidouni F. et al. Nature Biomedical Engineering. 2017. № 12

(1). C. 957-966.

2. Qorbani A. et al.Journal of Cutaneous Pathology. 2018. № 7

(45). C. 498-503.

ДИНАМИКА ДЕГРАДАЦИИ РЕЦЕПТОРА ЭФР В МЕЗЕНХИМНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТКАХ ЧЕЛОВЕКА

Р.С. Каменцева1, М.В. Харченко1, Г.В. Габдрахманова2, М.А. Котов2, Е.С. Корнилова1, 3

1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия

2 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия

3 Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия

e-mail: [email protected]

Ключевые слова: рецептор эпидермального фактора роста, эндометриальные мезенхимные стромальные клетки, эндо-цитоз, деградация.

Считается, что пролиферация и дифференцировка мезенхимных стромальных клеток (МСК) находятся под контролем специфических для них сигнальных систем. Мы обнаружили, что МСК различного происхождения (из эндометрия, пульпы зуба, Вартонова студня и др.) экспрессируют рецептор эпидермального фактора роста (рЭФР) на высоком уровне, сравнимом с опухолевыми клетками эпителиального происхождения. При этом функционирование этой сигнальной системы в МСК практически не исследовано.

Рецептор ЭФР относится к семейству тирозин-ки-назных (ТК) рецепторов ErbB и имеет 7 лигандов [1]. Общепризнана его роль в регуляции пролиферации, диф-ференцировки и апоптоза соматических клеток, а также участие в эмбриогенезе. В соответствии с принятой

Гены & Клетки XVII, №3, 2022

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.