CC BY
20
При гистологическом исследовании по поверхностям твердой мозговой оболочки были обнаружены пласты соединительной ткани различной степени зрелости, содержащие массы разнокалиберных сосудов, местами инкрустированные отложением извести, отложения гемоси-дерина, безжелезистого пигмента, очаговые геморрагии, наложения свертков крови. В представленных фрагментах оболочки, пластах соединительной ткани инфильтрация с преобладанием лимфоидных и макрофагальных элементов.
Таким образом, смерть Л. наступила от сдавления головного мозга хронической субдуральной гематомой правой гемисферы со вторичной дислокацией головного мозга у ребенка с гипоксически-ишемическим поражением и атрофией вещества головного мозга.
Причиной образования гематомы мог быть разрыв мостиковых вен между твердой и паутинными оболочками вследствие атрофического процесса головного мозга и увеличением расстояния между оболочками.
ВЫВОДЫ
Данный случай интересен тем, что вследствие вегетативного состояния ребенка, атрофии головного мозга и значительного расширения ликворного пространства гематома длительно протекала без какой-либо общемозговой или очаговой неврологической симптоматики и не была диагностирована прижизненно.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЭФФИЦИЕНТОВ ТЕПЛОПЕРЕДАЧИ ТКАНЕЙ ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА НА ОСНОВАНИИ УРАВНЕНИЙ НЕСТАЦИОНАРНОЙ ТЕПЛОПРОВОДНОСТИ_
А. В. Чурсанова ', Л. А. Хинканин 2, Э. В. Туманов 1
1 Кафедра судебной медицины лечебного
факультета ФГБОУ ВО РНИМУ
им. Н. И. Пирогова Минздрава России
2 ФГБОУ ВО «ПГТУ», Йошкар-Ола
В докладе рассмотрены вопросы разработки подходов к натурному определению коэффициентов теплопередачи тканей организма. Ключевые слова: теплопередача, охлаждение тела, давность наступления смерти
Одной из несомненно важных задач теории и практики судебной медицины является определение давности наступления смерти. Вопрос моделирования посмертного остывания тела стоит наиболее остро. На данный момент можно выделить более десятка моделей охлаждения тела, среди которых наиболее популярной признана модель Брауна - Маршалла - Хенссге с многократным измерением ректальной температуры. Модель Хенссге - Куликова описывает процесс охлаждения трупа как охлаждение двуслойной пластины, вводя в расчет зависимость расчетных температур слоев как временную функцию. Стоит отметить, что эта модель тдт} = (тТа -тс)е~ъ + (гПо+ тс не учитывает внешние радиационные теплопоступления (от солнца или другие точечные) и изменение температуры окружающей среды.
Для разработки подходов к натурному определению коэффициентов теплопередачи тканей организма человека наиболее применимы полуэмпирические методы, основанные на решении уравнения нестационарной теплопроводности, с учетом особенностей физико-химических процессов, происходящих в тканях (трупное окоченение) Как правило, при натурном определении коэффициентов теплопередачи испытываемый образец размещается таким образом, чтобы в нем организовалось одномерное стационарное температурное поле. Для этого на двух
противоположных гранях образца создается разность температур, достаточная, чтобы возник минимально возможный для регистрации тепловой поток. После этого используется уравнение Ньютона - Фурье для стационарной теплопередачи: = аА{7; - Г). С применением этой схемы был разработан проект установки для натурного определения коэффициента теплопередачи тканей. При проектировании учитывались требования нормативно-правовой базы, а именно ГОСТ 7076-66 и ГОСТ 8.140-2009. Установка представляет собой термокамеру с климатической установкой, позволяющей создать перепад температур и влажностей, с фиксацией температур и тепловых потоков с помощью разработанной программно-аппаратной базы.
Было проведено численное моделирование в программном пакете А^У8 МиШрЬуз^ процессов теп-ломассопереноса в проектируемой установке с целью установления коэффициента теплотехнической неоднородности. По результатам численного эксперимента можно утверждать, что паразитные тепловые потоки (отклоняющиеся от продольной оси образца) составляют не более 1,2 % от искомого теплового потока по оси «теплая камера - холодная камера». Суммарные тепловые потоки при градиенте температур +8...+35° составили 103,2 Вт, что лежит в пределах регистрируемых приборной базой значений.
ВЫВОДЫ
Предлагаемая установка позволяет установить точные значения коэффициента теплопередачи тканей в нестационарной постановке. Высокая теплотехническая однородность (более 95 %) позволяет говорить о минимальном влиянии стенда на результаты натурных исследований.
МОРФОЛОГИЯ АУТОЛИЗА НЕРВНОЙ ТКАНИ И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА РЕЗУЛЬТАТЫ ВЫЯВЛЕНИЯ в-APP БЕЛКА ПРИ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЕ_
А. Н. Шай
ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России, Москва В докладе обсуждается вопрос о влиянии аутолиза на морфологические изменения в ткани головного мозга, а также о его воздействии на выявление ИГХ-исследованием в-APP белка при черепно-мозговой травме.
Ключевые слова: аутолиз, диффузное аксональное повреждение, в-АРР белок, иммуногистохимия Аутолиз (от греч. 'autos' - сам и 'lysis' - растворение, уничтожение) - процесс распада тканей и клеток организма, сохраняемых после его смерти в стерильных условиях вследствие действия ферментов, находящихся в этих тканях. Другими словами, аутолиз - это свойство биологических объектов разлагать гидролитическим путем собственные структуры под действием ферментов. Впервые явления аутолиза были описаны немецким ученым Э. Л. Сальковским (Salkowski), который наблюдал его на стерильно взятых и сохраняемых тканях печени, мышц и надпочечников.
Для различных органов быстрота течения аутолиза также не одинакова, что зависит от количества содержащихся в них ферментов. Так, например, в селезенке можно констатировать распад белков уже через 2 часа после смерти организма; в печени - через 4 часа, в мышечной и соединительной тканях - только через 5-6 часов. Ауто-литическим процессом является расплавление экссудатов при пневмониях под влиянием ферментов лейкоцитов, находящихся в этих экссудатах. Последний пример является одновременно также и примером гетеролиза, то есть
процесса распада тканей не под влиянием собственных, содержащихся в этой ткани ферментов, а под влиянием ферментов, поступивших извне. Явления аутолиза органов можно наблюдать также и тогда, когда, вследствие расстройства кровообращения, некоторые части органов недостаточно питаются. Поврежденные части постепенно распадаются и рассасываются, в то время как на неповрежденную часть ферменты не оказывают никакого действия. Это обстоятельство объясняется, вероятно, разницей реакций в поврежденной (обычно более кислой) и неповрежденной части органа. Таким образом, аутолиз может быть прижизненным и посмертным.
Для судебно-медицинских гистологов явления аутоли-за представляют собой проблему, так как затрудняют диагностику патологических процессов. Например, материал большинства органов с выраженными аутолитическими изменениями и гнилостно измененный заведомо не пригоден для иммуногистохимического исследования.
Аутолизу нервной ткани посвящено мало научных публикаций, некоторые из авторов описывают сходные ультраструктурные изменения нейронов ЦНС во время длительной гипоксии головного мозга.
Рассмотрим, какие изменения происходят в нейронах и нервных волокнах при аутолизе, выявляемые при микроскопии, а также какое влияние этот процесс оказывает на выявление ИГХ-исследованием в-АРР белка при черепно-мозговой травме.
Посмертные аутолитические изменения в нервной ткани изучены отечественными учеными. Микроскопически аутолиз выявляется в различных компонентах нервной ткани: нейронах, глиальных элементах и нервных волокнах. Нейроны различных отделов ЦНС подвергаются аутолизу с неодинаковой скоростью. Так, быстрее всего аутолизируются нейроны ретикулярной формации, моторного ядра тройничного нерва, зубчатого ядра мозжечка, ретикулярного ядра зрительного бугра. В то же время пирамидные клетки коры и нейроны полосатого тела относительно более устойчивы.
Аутолиз элементов глии, в частности астроцитов, развивается позже и выражается в набухании цитоплазмы и фрагментации отростков. Посмертно из астроци-тов могут развиваться «амебоидные» клетки, которые при окраске по Альцгеймеру отличаются от образованных прижизненно отсутствием фуксинофильных гранул в цитоплазме. Отмечают побледнение окраски, набухание и округление тел астроцитов, помутнение и гомогенизацию их цитоплазмы и ядра, исчезновение отростков. Появляется «криброзность» мозговой ткани в виде оптически пустых пространств между ее форменными элементами. Под световым микроскопом первые проявления аутолиза в мозговой ткани могут быть обнаружены примерно через 10-12 ч. Олигодендроглиоциты наиболее устойчивы к аутолизу. В них обнаруживают вначале побледнение окраски ядра, а затем его гиперхромность и сморщенность. Еще медленнее протекает аутолиз нервных волокон. В волокнах спинного мозга кошки, по данным исследователей, первые изменения в виде очагового набухания или суживания миелиновых оболочек появляются через 36 часов после смерти. Далее миелин при специальных методах окрашивается слабее, глыбки его лежат свободно.
Заслуживает интерес исследование группы зарубежных ученых, цель которого заключалась в выявлении влияния аутолиза на иммуногистохимическое обнаружение нейронспецифической энолазы (№Б), предшественника бета-амилоидного белка (бета-АРР) и убиквитина в мозговой ткани. Эксперимент проводился на 6 умерших испытуемых без механического повреждения ЦНС и 6 па-
циентах с черепно-мозговой травмой, которые пережили травму от 6 часов до 3 дней. У всех умерших испытуемых вскрытие было проведено в течение 24 часов после смерти. Для иммуногистохимического исследования ткани были изъяты из стандартных участков мозга. Первые кусочки были погружены в 10 % формалин по истечению 24 часов после наступления смерти. Остальные кусочки ткани мозга подвергали аутолизу при комнатной температуре и постепенно погружали в формалин через 24-часовые интервалы, самый длинный посмертный интервал составлял 168 часов, то есть 7 дней. Для визуализации связанного первичного антитела была выбрана система биотин-стрептавидин, меченая щелочной фосфатазой. В группе из 6 пациентов, которые умерли после черепно-мозговой травмы в 4 случаях, были обнаружены аксональные повреждения в виде отека аксонов и образования аксональ-ных шаров. В поврежденных аксонах была положительная реакция со всеми исследуемыми антителами, благодаря чему можно было даже после 168-часового посмертного интервала дифференцировать поврежденные и не поврежденные аксоны.
В группе из 6 испытуемых без механического повреждения ЦНС в 5 случаях обнаружен аксональный отек, однако при этом не было положительной реакции с анти-№Б- или с анти-бета-АРР антителами.
После 24-часового посмертного интервала в этой группе в 3 случаях была обнаружена положительная реакция в аксонах к убиквинтину, но уже после посмертного интервала, превышающего 2 дня, аксоны были убиквитин-положительными во всех 6 случаях.
ВЫВОДЫ
Полученные результаты не противоречат данным наших ученых: ткань мозга бедна ферментами лизосом, поэтому в сравнении с другими органами она достаточно долго противостоит аутолизу и гниению, следовательно, иммуногистохимическое исследование ткани головного мозга остается актуальным в течение продолжительного времени после смерти.
ТРУДНОСТИ ИНТЕРПРЕТАЦИИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ в-АРР БЕЛКА ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЫ_
А. Н. Шай
ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России, Москва В докладе рассматривается вопрос оценки ИГХ-ре-акции на в-АРР белок при черепно-мозговой травме и других причинах смерти, не связанных с ЧМТ. Приводятся результаты ИГХ исследования. Ключевые слова: диффузное аксональное повреждение, в-АРР белок, иммуногистохимическая реакция
Повреждение аксонов головного мозга при черепно-мозговой травме более точно и в ранние сроки диагностируется иммуногистохимическим методом с помощью выявления белка в-амилоидного предшественника (в-АРР) даже при отсутствии или минимальной выраженности макроскопических признаков ЧМТ. Однако обнаружена положительная реакция на в-АРР белок при других патологических состояниях, не связанных с черепно-мозговой травмой, - при отравлении угарным газом, гипогликемии, сердечной смерти, при эпилепсии. Выделены три в-АРР положительных модели аксональных повреждений: первая - диффузная мультифокальная модель, наиболее характерна для травматических поражений нейронов, представлена аксональным набуханием и луковицами,
