CC BY
9
ми результатами были отнесены к смешанному типу утопления без четкого установления между асфиктиче-ским и рефлекторным типом.
ВЫВОДЫ
Из полученных данных следует, что в 65,3 % случаев утопления в воде на территории Оренбургской области в период с 2016 по 2018 год с положительными результатами микрологического исследования на диатомовый планктон при судебно-гистологическом исследовании легких патоморфологическая картина чаще соответствует аспирационному типу утопления в воде. При отрицательных результатах микрологического исследования (34,7 % случаев) морфологическая картина соответствует асфиктическому или рефлекторному типу утопления в воде.
■ ИЗМЕНЕНИЕ БИОФИЗИЧЕСКИХ СВОЙСТВ
ЖИРОВОЙ ТКАНИ В ПОСМЕРТНОМ ПЕРИОДЕ_
М. М. Носов
Кафедра судебной медицины лечебного факультета ФГБОУ ВО РНИМУ им. Н. И. Пирогова Минздрава России, Москва Доклад посвящен возможности использования биофизических показателей жировой ткани в посмертном периоде для их применения в судебно-медицинской практике.
Ключевые слова: давность наступления смерти, электропроводность биологических тканей, импеданс, жировая ткань
Использование показателей поляризации, электропроводности и полного электрического сопротивления цепи переменному току (импеданс) нашло свое широкое применение в медицинской практике. Для биологических объектов эта величина имеет составной характер и напрямую зависит от проводимости жидких сред клеток и емкостных свойств биологических мембран. Процесс поляризации и электропроводности клеточных структур тканей организма напрямую зависит от их строения, состава и жизнеспособности.
При включении биологической ткани в электрическую систему с переменным током, в зависимости от частоты, изменяются показатели электропроводности. После наступления смерти разница показателей поляризации и проводимости становится более выраженной за счет роста проницаемости мембран клеточных структур для ионов, что создает переход от поляризации к электропроводности. В посмертном периоде состав и структура жировой ткани позволяют ей длительное время сохранять биофизические свойства, характерные для живого организма, что обуславливает плавные изменения показателей электропроводности и поляризации после наступления смерти.
В качестве объекта исследования была выбрана жировая ткань животного происхождения, из которой формировали выборку 20 образцов объемом 1 см3 и 2 см3. Образцы парно включали в цепь переменного тока параллельным и последовательным методом с погружением металлических игольчатых электродов и дальнейшей регистрацией показателей сопротивления цифровым мультиметром с интервалом в 24 часа в течение 5 суток. В образцах, подключенных параллельным методом эксперимент показал нарастающее снижение сопротивления от первоначальных параметров, что говорит о переходе от поляризации к электропроводности в жировой ткани в зависимости от длительности посмертного периода.
ВЫВОДЫ
Оценка биофизических свойств жировой ткани в посмертном периоде позволяет определить закономерности изменений показателей поляризации и электропроводности, что может быть использовано для определения давности наступления смерти, в том числе и в позднем посмертном периоде.
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПОПУЛЯЦИИ ТУЧНЫХ КЛЕТОК СКЕЛЕТНОЙ МУСКУЛАТУРЫ БЕЛЫХ КРЫС НА СЕДЬМОЙ ДЕНЬ ПОСЛЕ ОДНОКРАТНОЙ ГЛУБОКОЙ
ИММЕРСИОННОЙ ГИПОТЕРМИИ_
А. Ю. Долгатов, И. П. Бобров, А. В. Лепилов, Н. Г. Крючкова, З. Н. Гулдаева, О. В. Орлова, Е. Е. Алымова, М. Н. Соседова
Кафедра судебной медицины им. проф. В. Н. Крюкова и патологической анатомии с курсом ДПО ФГБОУ ВО АГМУ Барнаул Исследование посвящено изучению активности тучных клеток скелетной мускулатуры белых крыс при воздействии однократной глубокой иммерсионной гипотермии. Показано, что тучные клетки являются важным фактором при адаптации скелетной мышцы к воздействию холодового фактора. Ключевые слова: скелетная мускулатура, гипотермия, тучные клетки
Несмотря на многочисленные исследования, посвященные гибели людей на холоде, диагностика холодовой смерти и смертельной гипотермии продолжает оставаться актуальной проблемой. В настоящее время достаточно полно изучены многие аспекты воздействия холодово-го фактора на организм человека, а также разработаны диагностические и дифференциально-диагностические критерии смерти от гипотермии, однако целостное представление по вопросу адаптации организма к холоду в судебно-медицинской науке и практике к настоящему моменту отсутствует. По современным представлениям тучные клетки (ТК) являются ключевым звеном воздействия на метаболические процессы при адаптации к стрессу и гипоксии. В то же время исследованию значения ТК при гипотермии посвящены лишь единичные работы.
Целью исследования явилось изучение влияния гипотермии на морфофункциональную активность тучнокле-точной популяции скелетной мускулатуры крысы в эксперименте.
Исследование выполнено на 15 крысах линии Ш1з1аг. Гипотермию моделировали путем помещения животных, находящихся в индивидуальных клетках, в воду температурой 5 °С, при температуре окружающего воздуха 7 °С. Критерием прекращения воздействия служило достижение животными ректальной температуры 20-25 °С, что соответствовало глубокой степени гипотермии. Время экспозиции было индивидуальным и в среднем составляло (40 ± 5) мин. В ходе эксперимента животные были разделены на 2 группы. Животные 1 группы выводились из эксперимента сразу после прекращения охлаждения, животные 2 группы - через 7 суток после прекращения охлаждения. Также морфологические исследования проводились у интактных животных, которые служили группой контроля. Подсчет плотности распределения тучных клеток (ТК) проводили в 5 полях зрения при увеличении микроскопа х400. Высчитывали индекс дегрануляции ТК (ИДТК). Морфометрию ТК осуществляли в морфометрической программе ВидеоТест-Морфология 5.2. Статистическую
обработку материала проводили при помощи статистического пакета ЙаИзИса 6.0.
Результаты проведенного исследования показали, что у крыс группы контроля ТК имели округлую или вытянутую форму, количество их колебалось от 1 до 2, среднее число их составило (1,2 ± 0,2). Площадь ТК составила (94,0 ± 20,7) мкм2. Гранулы в цитоплазме ТК располагались компактно, дегрануляцию отмечали в небольшом количестве клетках. ИДТК составил 26,8 %. Также выявляли наличие единичных ТК в нервных стволах. При смерти, наступившей сразу после глубокой гипотермии (1 группа), ТК имели овальную или неправильную форму, количество их варьировало от 1 до 3 в поле зрения, среднее число ТК составило (1,8 ± 0,4). Площадь ТК составила (130,9 ± 16,9) мкм2. Число клеток, находившихся в состоянии дегрануляции, возрастало по сравнению с контрольной группой, ИДТК составил 30,7 %. Отмечали увеличение числа ТК в нервных стволах. На 7 сутки проведения эксперимента (2 группа исследования) ТК имели преимущественно неправильную форму, количество их колебалось от 2 до 12 в поле зрения, среднее число составило (4,6 ± 0,4), а площадь сечения - (167,1 ± 13,4) мкм2. Большинство клеток находилось в состоянии де-грануляции. ИДТК составил 83 %. Отмечали значительное число ТК в нервных стволах.
ВЫВОДЫ
Таким образом, гипотермия является мощным активатором активности ТК. Внутритканевые ТК могут являться важными факторами в процессе адаптации организма к гипотермии. В судебно-медицинской практике исследование морфофункциональной активности тучно-клеточной популяции может быть дополнительным дифференциально-диагностическим критерием при смерти от гипотермии.
■ ДИНАМИКА ЭКСПРЕССИИ в-АРР БЕЛКА ПРИ ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ В СЛУЧАЯХ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЫ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СРОКА ВЫЖИВАНИЯ_
А. Н. Шай
ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России, Москва В докладе рассматривается вопрос оценки иммуно-гистохимической реакции на @-АРР белок при аксо-нальном повреждении в динамике в различные сроки выживания после черепно-мозговой травмы. Ключевые слова: диффузное аксональное повреждение, в-АРР белок, черепно-мозговая травма, динамика, иммуногистохимическая реакция, ИГХ Одним из чувствительных и информативных методов диагностики аксонального повреждения, особенно при отсутствии или минимальной выраженности макроскопических признаков черепно-мозговой травмы (ЧМТ), является иммуногистохимический метод выявления белка в-амилоидного предшественника (в-АРР). Положительная реакция по этот протеин в структурах нейрона начинает проявляться уже через 35 минут после травмы и сохраняется длительное время, до 99 суток. В ряде научных исследований установлена определенная динамика экспрессии маркера. Так, обнаружено, что первые признаки начинают определяться в течение 3 часов выживания после травмы, далее количество положительно окрашенных нейронов увеличивается в течение 24 часов и достигает своеобразного «плато», которое сохраняется в течение 10-14 дней. После этого периода интенсивность окрашивания уменьшается и через 3-4 недели с трудом идентифицируется, хотя при исследовании при увеличе-
нии х400 часто обнаруживается гранулированное окрашивание в структуре аксона.
В нашей работе исследуемые случаи разделили на группы в соответствии со сроком выживания после травмы: первая группа - проявления экспрессии в единичных клетках - до 3 часов выживания после травмы, вторая группа - увеличение количества окрашенных клеток и увеличение интенсивности реакции - от 3 часов до суток, третья группа - максимальная экспрессия белка, выживаемость от 2 до 14 суток, четвертая группа - редукция накопленного в-АРР белка, выживаемость от 14 суток и более.
Интенсивность экспрессии маркера оценивали в баллах - от 0 до 3, а также количество окрашенных структур в поле зрения - 4 степени по нарастающей. Экспрессия в первой группе представлена слабой окраской преимущественно тел нейронов и незначительной экспрессией в отростках, реакция начинает переходить с тела нейрона на отростки, количество окрашенных структур в поле зрения до 25 %. Достоверно установлена связь интенсивности окраски с количеством окрашенных структур в поле зрения. Однако и в этой группе может отмечаться интенсивная окраска части клеток, но с преимущественным окрашиванием тел нейронов и начальными признаками экспрессии белка в отростках.
Вторая группа - суточной выживаемости - характеризуется полным окрашиванием аксонов и увеличением количества окрашенных структур в поле зрения.
В третьем периоде сохраняется положительная реакция, которая достигает максимума в течение первых суток. Чем больше срок выживания, тем более заметны начальные признаки деградации пигмента - начальная грануляция.
4-й период выживания - более 15 суток после ЧМТ -характеризуется периодом деградации в-АРР протеина, что демонстрирует уменьшение количества окрашенных структур, распад пигмента и нахождение его в виде гранул. В нашем исследовании положительная реакция на белок выявлялась до 64 суток выживания после травмы.
ВЫВОДЫ
Аксональное повреждение сопровождает любую черепно-мозговую травму. Наиболее оптимальным методом его диагностики является иммуногистохимическое обнаружение в-АРР протеина, который накапливается в структурах нейрона при аксональном повреждении и нарушении быстрого транспорта по аксону.
Обнаружение корреляции количества окрашенных структур, интенсивности ИГХ реакции и ее внутриклеточного распределения позволяет использовать ИГХ выявление экспрессии в-АРР белка как одного из важнейших факторов для определения сроков выживания после ЧМТ.
МОРФОМЕТРИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НУКЛЕОЛЯРНОГО АППАРАТА ГЕПАТОЦИТОВ КРЫС ВИСТАР ПОСЛЕ ОДНОКРАТНОЙ ГЛУБОКОЙ ИММЕРСИОННОЙ ГИПОТЕРМИИ
И. П. Бобров, А. В. Лепилов, А. Ю. Долгатов, Н. Г. Крючкова, З. Н. Гулдаева, О. В. Орлова, Е. Е. Алымова, М. Н. Соседова
Кафедра судебной медицины им. проф. В. Н. Крюкова и патологической анатомии с курсом ДПО ФГБОУ ВО АГМУ Барнаул Исследование посвящено изучению активности ядрышкового аппарата печени белых крыс после воздействия однократной глубокой иммерсионной
