Актуальт проблеми сучасно!" медицини
Таким чином, проведене дослщження на мо- Лггература
fleni OBapiOeKTOMOBaHHX самок бШИХ щур1в СВЩ- 1. Воскресенский О.Н. Ангиопротекторы / О.Н. Воскресенский, В.А.
ЧИТЬ, про Д0СТ0В1рНИЙ ВПЛИВ остеопорозу на „ Туманов-К.: Здоровье, 1982.-111 с.
г . _ г ...■'. 2. Методические указания по применению унифицированих кли-
стан реакцш перекисного оксилення ЛШЩШ та Ш- нических лабораторных методов исследования / Под. Ред.
ri6iT0py трипсину. KpiM ТОГО, ЗГЩНО отриманих ПР°Ф- вв- Меньшикова ИМ., 1973. -270 с.
пяиму чягтпгл/вяння пгтрпппягтминпгп МЯТРП1ЯПУ 3- Поворознюк В В. Системный остеопороз в развитии заболева-
даних застосування остеопластичного матер1алу ний пародонта / В.В.Поворознюк, И.П.Мазур, Г.Н. Вишняк [и др.
супроводжуеться тенденц1ею ДО корекцп' ПОЛ, ]//Вюник стоматологи.-1997. -№4.-С. 554-557.
АОС i достов1рною змжою показниш акттност1 4- в в^оГрознюк'и пСмазуГ/ГкеМ2аооз3-б404Лбесания пародонта ' тартратстабтьно! КИСЛ01 фосфатази, атакожза- 5 ПоЫбник з експериментально-клш1чних дослщжень в бюлогм та ГЭЛЬНОТ Пр0те0л1тичн0'|' ЭКТИВНОСП В П0р1внянн1 3 медицин! / [Л.В.Брекало, О.В.Бобович, Н О. Боброва та ¡н ] ; За
ред. 1.П. Кайдашева, В.М. Соколенко, О.В. Катрушова. - Полта-ДРУГОЮ групою. ва, 1996. - 271 с.
Розробка дано'! теми обумовлена теоретичною 6. Шульженко О.Ю. Експериментальне дослщження впливу синтетичного остеопластичного матер1алу Десмо-Ост на тканини живого оргашзму/ О.Ю. Шульженко, Ю.1. Силенко, В.М.Осауленко, ГИ, так ЯК ДО TenepimHbOrO часу зустрмаються Г.А.ерошенко//CBiT медицини та б1ологм, -2008. -№2ч.1.-С.
ускладнення при xipypri4HOMy л1куванн1 nauieHTiB 7 ,105"107т ^ , , ... ... . , ,
1 . . Г . 7. Karnng Т. Development of the principle of guided tissue regenera-
3 Р13НОЮ ЩШЬНЮТЮ КЮТКОВО! тканини. tion/T.Karring, K.Warrer//Scientific.- 1992.-V. 85,-P. 19-24.
8. Quinones C.R. Current status of guided periodontal tissue regeneration / C.R. Quinones, R.G. Cafesse // Periodontology 2000. - 1995. - P. 55-68.
i практичною необхщнютю ктыки пародонтоло-
Реферат
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ДЕФЕКТОВ КОСТНОЙ ТКАНИ У ЖИВОТНЫХ С
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ОСТЕОПРОЗОМ
Шульженко А.Ю., Силенко Ю.И., Чернявський С.А.
Ключевые слова: остеопороз, метаболические показатели, Десмо-ост
Проведенное исследование на модели остеопороза у овариоэктомированных самок белых крыс свидетельствует о достоверном влиянии остеопороза на состояние реакции перекисного окисления липидов и метаболических процессов. Хирургическое лечение дефектов костной ткани челюстей у животных с остеопорозом, приводит к более высоким значениям показателей перекисного окисления липидов и ингибитора трипсина. Это подтверждает необходимость коррекции метаболических показателей при хирургическом лечении дефектов костной ткани челюстей, особенно при развитии остеопороза.
Summary
EXPERIMENTAL BACKGROUND OF SURGICAL TREATMENT OF BONE DEFECTS IN ANIMALS WITH EXPERIMENTAL OSTEOPOROSIS
Shulzhenko O.Y., Silenko Y.I., Chernyavsky S.A. Key words: osteoporosis, metabolic indices, Desmo-ost
The researches carried out on the model of osteoporosis in ovariectomized female white rats have proved the reliable influence of osteoporosis on the state of lipid peroxidation and metabolic processes. The surgical treatment of bone defects leads to higher values of lipid peroxidation indices and trypsin inhibitor indices. It has confirmed the necessity in correction of metabolic indices under the surgical treatment of bone defects of jaws, especially in cases of osteoporosis development.
УДК: [611.843:616-002]:611.013.85-001.18-089.843
М0РФ0Л0ПЧНА ХАРАКТЕРИСТИКА СТРУКТУРНИХ ЕЛЕМЕНТ1В БОРОВОГО НЕРВА ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦМ КР10К0НСЕРВ0ВАН01 ПЛАЦЕНТИ НА ТЛ1 Г0СТР0Г0 ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО НЕВРИТА
Якушко О. С.
Вищий державний навчальний заклад Украши «Украшська медична стоматолопчна академия», м. Полтава
Метою нашого досл{дження було вивчення структурних елемент{в зорового нерва при гострому експерименталъному неврит1 на тл{ трансплантацп кргоконсервованог плаценти. Робота була проведена на 45 щурах, з яких 1-а група - контрольна, 2-ш грут вводили внутр{шъоочеревенно Х-карагтен, З-ш грут на фот асептичного запалення трансплантували крюконсервовану плаценту. У тварин 3-ог групи спостеркалисъ менш виражеш прояви запалъног реакци тканин зорового нерва та ратше в{дм{чалисъ явища регенераци.
Ключов1 слова: зоровий нерв, асептичний неврит, крюконсервована плацента, трансплантацт.
Розвиток кл1тинно'|' \ тканинноТ трансплантаци та пошуку нових лкарських засоб1в. На сього-спонукае до подальшого розвитку фармакологи дшшнш день медицина потребуе ефективних
* Робота е фрагментом НДР „Розробка нових крюбюлогмних технологШ, використання крюконсервованих ембрюнальних KnimuH, тканин людини та тварин в медицин!", № державно)'реестрацп 0199U000323.
liiC. I II ¡Ii' ВДНЗУ «Украгнсъка жедична стожатологЬчна акадежШ»
препаратов, що активно впливають на ктычну картину хвороби, ¡муномодулятор1в, стимулято-р1в регенераци [6]. Проведен! дослщження фе-тальних препарате вказують на Т'х бюстимулюю-чий, ¡мунокоригуючий, радюпротекторний, про-типухпинний, а також протизапальний ефект [2, 3, 9, 6]. 1стотне значения мае вивчення крюкон-сервованих тканинних препарате, у яких завдя-ки використанню низьких температур сконцент-рована значна ктькють бюлопчно активних ре-човин.
Як вщомо, нар1жним каменем сучасноТ' офтальмологи е запалення заднього вщдту ока, а саме атювки та зорового нерва, що призводять до значного зниження \ навпъ втрати зору. Важ-ливе м1сце у розв'язаш ц!с"Г проблеми поещае подальше дослщження протизапальноТ дм тканинних препарате, а саме плаценти, що дасть змогу розширити арсенал метод1в лкування да-ноТ' патологи та попередити ускладнення.
Мета дослщження. Вивчення структурних елеметчв зорового нерва при гострому експе-риментальному невртч на тл1 трансплантацп крюконсервованоТ' плаценти.
Матср1ал 1 методи досладження
Експериментальна робота була проведена на 45 статевозртих щурах-самцях лжи „Вютар". Матер1алом дослщження була ретробульбарна частина зорових нерв1в щур1в. Утримання тва-рин та мантуляци, яю з ними проводились, вщ-повщали законодавству УкраТ'ни та м1жнародним положениям. Тварини були подтеж на три групп: перша - контрольна (5 щур1в), другш (20 щу-р1в) було змодельоване гостре асептичне запалення шляхом введения внутр1шьоочеревенно Л-карапнену (5 мг в 1 мл ф1зюлопчного розчину) [7, 8, 11], третш грут (20 щур1в) на фож гострого асептичного запалення було одноразово пщшкн рно трансплантовано крюконсервовану плаценту (КП) розм1рами 0,5x0,5x0,5 см. Оперативж
На 2-у добу експерименту вщм1чались змши з боку судин гемом1кроциркуляторного русла (ГМЦР) у вигляд1 розширення артерюл, збть-шення д1аметру кашляр1в, венул, але менш ви-ражеж у пор1внянж з другою групою (табл. 2). Спостер1галось поступове зменшення д1аметру артерюл з 2-оТ по 7-у добу. Тх розм1ри на 7-у добу були 8,84±0,17 мкм, що статистично не Biflpi-
втручання виконували пщ кетамшовим наркозом з дотриманням правил асептики та антисептики. Евтаназш тварин проводили шляхом передозу-вання наркозу на 2, 3, 5 та 7 добу експерименту. Отриманий матер1ал фксували в 2,5% розчиж глютарового альдегщу на фосфатному буфер1 протягом доби при температур! +4°С, шеля вщ-мивання у чотирьох порщях 0,1 М фосфатного буфера протягом 2 годин обробляли згщно правил, прийнятих в електроннш м1кроскопи, та заключали в ЕПОН-812 [4]. HaniBTOHKi зр1зи отримували за допомогою ультрам1кротома УМТП-7, розмщували на предметному CKni та забарвлювали толущиновим сижм та пол1хром-ним барвником (барвник Маллор1 та розчин основного фуксину). Морфометричж дослщження проводили за допомогою евппового м1кроскопа „Carl Zeiss" та окуляр-м1крометра МОВ-1-15*. Mi-крофотографування здшенювали за допомогою м1кроскопа ф1рми "BIOREX" з адаптованим пакетом програм для фотографування. Статистичну обробку даних здшенювали за допомогою програм и Excel [2].
Результати дгкипдженни та "ix обговорення
При дослщженж зорових нерв1в тварин третьоТ групи ми спостер1гали явища прояву запальноТ реакци, але вона була менше виражена у nopiB-нянж з тваринами другоТ' групи. Ми помнили набряк сполучноТ' тканини оболонок зорового нерва, але меншо'Г ¡нтенсивностк Так, товщина м'яко'Г мозковоТ оболонки на 2-у добу дослщження збтьшилась у 1,2 рази у пор1внянн1 з контролем (р<0,05), що в 1,2 рази менше, жж у другш rpyni тварин (р<0,05), на 3-у добу - у 1,5 рази (р<0,01). В той час як в 2-ш rpyni тварин - у 1,9 рази (р<0,001) у пор1внянш з ¡нтактною групою (табл. 1). 5-7 доба характеризувалась поступо-вим зменшенням товщини м'яко'Г мозковоТ оболонки.
Таблиця 1.
Товщина м'якоТмозковоТ оболонки зорового нерва
знялись вщ контролю, проти 9,98±0,2 мкм у 2-ш експериментальнш rpyni (р<0,001). На 2-у добу noMiTHi застшж явища у венулах. Але Т'х д1аметр збтьшився в 1,4 рази проти 1,8 у друпй rpyni (р<0,001). Максимальний прояв розлад1в крово-o6iry в судинах ГМЦР м'якоТ оболонки зорового нерва вщм1чався у тварин 3-оТ групи на 2-у добу, а у тварин 2-оТ' групи - на 3-у добу.
№ п/п Термш експерименту Контроль, мкм При асептичному запаленш, мкм При асептичному запаленш+трансплантац1я КП, мкм
1 2 доба 11,89±1,08 17,19±1,29 ** 14,27±0,34 * *
2 3 доба 11,89±1,08 23,05±2,55 *** 17,33±1,16 ** *
3 5 доба 11,89±1,08 16,59±1,59 * 14,42±0,59 *
4 7 доба 11,89±1,08 15,86±1,53 * 14,39±0,61 *
npuMirriKa: *р<0,05, "р<0,01, "*р<0,001.
Актуальт проблеми сучасноТ медицини
Таблиця 2.
Динамка змш д/аметру ланок гемомжроциркуляторного русла м'якоТ мозковоТ оболонки зорового нерва при асептичному запаленш на тл/' трансплантаци крюконсервованоГ плаценти
№ п/п Термш експерименту Д1аметр, мкм
Артерюли Каптяри Венули
1 Контроль 8,23±0,45 4,63±0,27 11,06±0,93
2 2 доба 9,73±0,24 ** 5,81 ±0,2 *** 15,28±0,53 ***
3 3 доба 9,26±0,21 * 5,51 ±0,14 ** 14,45±0,51 ***
4 5 доба 9,2±0,11 * 5,33±0,14* 14,24±0,44 **
5 7 доба 8,84±0,17 5,21±0,09 * 13,17±0,41 *
Примтка: * р<0,05, **р<0,01, *"р<0,001.
Змши з боку судин ГМЦР призвели до виник-нення набряку сполучнотканинних прошарш у зоровому нервк Так, на 2-у добу експерименту товщина сполучнотканинних перетинок у 2-ш груш тварин становила 5,05±0,5 мкм, у З-ш груш 5,29±0,28 мкм проти 3,73±0,37 мкм у контрол1 (рис. 1). Свого максимального значения товщина сполучнотканинних перетинок у тварин з викли-каним асептичним запаленням досягла на 3-у
добу експерименту, а у тварин, яким на фош за-палення була трансплантована плацента, - на 2-у добу. Слщ вщзначити, що у щур1в 3-оТ групи на 7-у добу дослщження середне значения тов-щини перетинок було 4,02±0,14 мкм, що статис-тично не вщр1знялось вщ контролю. У щур1в 2-оТ групи - 4,89±0,41 мкм, що на 12% бтьше (р<0,05).
6 5 4 3 2 1 О
2 доба
I
3 доба 5 доба
□ 3 ИЗ+КП □ контроль
I
7 доба
Рис. 1. Динамка змШ товщини сполучнотканинних перетинок зорових нерв1в щур'ю 3 - сполучнотканинн/' перетинки при асептичному запаленш; 3+КП - сполучнотканинн/' перетинки при асептичному запаленш на фош трансплантаци крюконсервованоГ плаценти.
На 2-у добу експерименту нервов1 волокна у структур! зорового нерва щур1в 2-оТ групи стано-вили в д1аметр1 2,26±0,08 мкм, що на 14% бтьше у пор1внянш з контролем 1,98±0,07 мкм (р<0,01). В той час, як д1аметр нервових волокон тварин 3-о'|' групи був 2,18±0,11 мкм, але р1зниця з1 значениями показниш контролю статистично не достов1рна. Нервов1 волокна зорового нерва у щур1в 2-о'|' та 3-о'|' груп були округло'!' форми, вкрит1 незм1неною м1ел1новою оболонкою. У тварин з асептичним запаленням зорового нерва ми спостер1гали поступове збтьшення серед-нього д1аметра нервових волокон до 5-оТ доби експерименту. На 5-у добу Тх розм1р в серед-ньому становив 3,44±0,14 мкм (р<0,001), нервов1 волокна набрякл1, деяю з них неправильно'!' форми, м1елшова оболонка потоншена. В той же час при трансплантаци крюконсервованоТ плаценти нами було вщм1чено статистичне збть-
шення середнього д1аметру нервових волокон на 3-у добу, |'х розм1р був 2,25±0,1 мкм (р<0,05). Вони були округло'!' форми, вкрит1 незм1неною м1ел1новою оболонкою. Розм1ри нервових волокон на 5 та 7-у добу статистично не вщр1знялись вщ контролю.
У 2-ш груп1 тварин були помп"ы зм1ни серед кл1тин макроглП', що проявлялись у вигляд1 по-ступового зменшення розм1р1в ядра та ядерно-цитоплазматичного сп1ввщношення, починаючи з 2-о'|' доби. На 5-у добу показники максимально вщр1знялись вщ контролю. Ядра клп"ин макроглП' були неправильно'!' форми, зменшеш в об'ем1, зморщен1, темного кольору. У тварин 3-оТ групи ми також спостер1гали зменшення об'ему ядер та ядерно- цитоплазматичного сшввщношення, причому бтьш виражене протягом 2-оТ та 3-о'|' д1б у пор1внянн1 з попередньою групою. Але вже на 5-у добу вщм1чалось поступове вщновлення
liiC. l II ¡Ii' ВДНЗУ «Украгнсъка медична сгпомагпологгчна акадежШ»
структур кл1тин макрогли. Ядра астроцит1в були овальноТ форми з1 евппою нукпеоплазмою, дис-персним хроматином, чпжо вираженою ядерною оболонкою. Цитоплазма кл1тин евппа. Ядра олн годендроцит1в збшьшеш, темы, округлоТ форми, в карюплазм1 зустр1чались др1бы глибки хроматину, розаяы дисперсно, ядерна оболонка чпжо виражена. Цитоплазма кл1тин евппа.
Висновки
1. Максимальний прояв розлад1в кровооб1гу в судинах ГМЦР м'яко'Г оболонки зорового нерва вщм1чався у тварин 3-оТ групи на 2-у добу, а у тварин 2-о'|' групи - на 3-у добу. У щур1в 3-оТ групи на 7-у добу експерименту д1аметр артерюл становив 8,84±0,17 мкм та статистично не вщрн знявся вщ контролю, проти 9,98±0,2 мкм у 2-ш експериментальнш груш (р<0,001).
2. Товщина м'яко'Г мозковоТ оболонки у тварин експериментальних груп досягла максимального значения на 3-у добу експерименту \ становила у щур1в 3-о'|' групи - 17,33±1,16 мкм, що в 1,3 рази менше шжу групи тварин з асептичним запа-ленням (р<0,05).
3. Товщина сполучнотканинних перетинок зорового нерва у щур1в 3-оТ групи на 7-у добу становила 4,02±0,14 мкм, що статистично не вщр1з-нялось вщ контролю. У щур1в 2-о'|' групи в цей час-4,89±0,41 мкм, що на 12% бтьше (р<0,05).
4. Максимальне значения показник д1аметра нервових волокон у тварин 3-оТ експеримента-льно'Г групи досяг на 3-у добу дослщження \ становив 2,25±0,1 мкм, в той час як у тварин 2-оТ групи - на 5-у добу (3,44±0,14 мкм). Розм1ри нервових волокон зорового нерва щур1в 3-оТ групи на 5 та 7-у добу статистично не вщр1знялись вщ контролю.
5. Найвиразшпл змши у кл1тинах макрогли тварин 2-о'|' групи спостер1гались на 5-у добу експерименту, в той час як у тварин 3-оТ групи в цей
перюд вщммалось поступове вщновлення стру-ктурних компоненте.
Перспективи подальших дослпджснь у даному напрямку
Потребуе подальшого дослщження вплив трансплантацП' крюконсервовано'Г плаценти на морфофункцюнальний стан тканин зорового нерва у вщдалеы термши асептичному запаленнк Проведена робота вщкривае перспективи засто-сування фетальних тканин в офтальмолопчнш практицк
.Штература
1. KniMeHKO M.О. Вплив крюекстракту xopioHa на кл1тинж реакцм вогнища запалення / М. О. KniMeHKO, Н. П. Субота, В. А. Ппъко [та ¡н. ] // Ф1зюл. журн. - 1999. - Т. 45, № 6. - С. 75-80.
2. Гольцев A.M. Застосування крюконсервованих продукте eMÖpi-офетоплацентарного комплексу як коректор1в ауто1мунних за-хворювань на модел1 експериментального алерпйного енцефа-лом1ел1ту / А. М. Гольцев, Н. М. Бабенко, Л. В. Останкова [та ¡н. ] // Трансплантолопя. - 2003. - Т. 4, № 1. - С. 207-209.
3. 1ваницька О. С. Лкування перифер1йних уражень лицевого нерва продуктами ембрюфетоплацентарного комплексу : дис. ... кандидата мед. наук : 14.01.22 / О.С.1ваницька // Полтава, 2006. -224 с.
Карупу В. Я. Электронная микроскопия / В. Я. Карупу. К. : Вища школа, 1984.-208 с.
Лапач С. Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel / С.Н.Лапач, А.В.Чубенко, П.Н.Бабич.- К. : Морион, 2000. - 320 с. Васильев Н.В. О возможных механизмах метода терапевтического использования фетальных клеток и тканей / Н.В. Васильев, Т.И. Коляда, Ю.Л. Волянский [и др.] // Трансплантация фетальных тканей и клеток человека : сб. науч. ст. / научн. ред. Г. Т. Сухих, А. Н. Ерина. - М., 1996. - С. 28-30.
Патологическая физиология / под ред. А. Д. Адо, В. В. Новицкого. - Томск : Изд-во Том. ун-та, 1994. - 468 с. KniMeHKO M.О. Пор1вняльна характеристика протизапальноТ дм екстракпв хорюна та плаценти / М. О. Кл1менко, H. П. Субота, В. А. Ппъко [та ¡н. ] // Ф1зюл. журн. - 2000. - Т. 46, № 1. - С. 32-36. Суббота H. П. Биологические свойства криоэкстрактов эмбриональных тканей / H. П. Суббота, П. П. Пашинский, Е. Д. Розанова // Проблемы криобиологии. - 1998. - № 3. - С. 35-42. LLIeniTbKO B.I. Структурно-функцюнальш показники крюконсер-вованоТ плаценти i вплив ÏÏ трансплантацм на морфофункцюна-льний стан ряду внутр1шшх оргашв: дис. ... доктора мед. наук : 14.01.35 / B.I.LUeniTbKO // Харюв, 2004. - 326 с. Morris С. J. Carrageenan-induced paw edema in the rat and mouse / C. J. Morris // Methods in molecular biology. - 2003. - V.225. -P.115-121.
4.
5.
10.
11.
Реферат
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТРУКТУРНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ ЗРИТЕЛЬНОГО НЕРВА ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦИИ КРИОКОНСЕРВИРОВАННОЙ ПЛАЦЕНТЫ НА ФОНЕ ОСТРОГО ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО НЕВРИТА Якушко Е.С.
Ключевые слова: зрительный нерв, асептический неврит, криоконсервированная плацента, трансплантация.
Целью нашего исследования было изучение структурных элементов зрительного нерва при остром экспериментальном неврите на фоне трансплантации криоконсервированной плаценты. Работа была проведена на 45 крысах, из которых 1-я группа - контрольная, 2-ой группе вводили внутрибрюшинно Л-карагинен, 3-ой группе на фоне асептического воспаления трансплантировали криоконсервирован-ную плаценту. У животных 3-ой группы наблюдались менее выраженные проявления воспалительной реакции тканей зрительного нерва и раньше отмечались явления регенерации.
Summary
MORPHOLOGICAL CHARACTERISTICS OF OPTIC NERVE STRUCTURAL ELEMENTS UNDER THE TRANSPLANTATION OF CRYOPRESERVED PLACENTA AGAINST THE BACKGROUND OF ACUTE EXPERIMENTAL NEURITIS Yakushko O.S.
Key words: optic nerve, aseptic neuritis, cryopreserved placenta, transplantation.
The research was aimed to study the structural elements of optic nerve under acute experimental neuritis against the background of transplantation of cryopreserved placenta. 45 rats used for the experiment were divided into the following groups: 1st group is a control, 2nd group included animals which were injected in-traperitoneally Л-саггадеепап, and the 3rd group were transplanted cryopreserved placenta against the background of aseptic inflammation. The animals of the 3rd group showed less expressed manifestations of inflammation in tissues of optic nerve and the signs of regeneration were marked earlier.