CC BY
0(8) Имянитов Евгений Наумович, evgeny@imyanitov.spb.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Ключевые слова
рак молочной железы, мутации, ген PIK3CA, алпелисиб
Актуальность
До 40% случаев эстроген-положительного, HER2-отрицательного рака молочной железы (РМЖ) содержит мутации в гене PIK3CA [1]. В качестве второй линии терапии таких опухолей может применяться комбинация селективного ингибитора PI3K алпелисиба и антагониста эстрогеновых рецепторов фулвестранта [2]. Сведения о частоте, спектре и клинических ассоциациях мутаций PIK3CA имеют важное значение для определения оптимального алгоритма молекулярно-генетического исследования.
Цель
Целью данной работы был анализ частоты и спектра мутаций PIK3CA у российских больных с РЭ+/ HER2-РМЖ, а также их ассоциаций с клинико-морфологическими характеристиками.
Материалы и методы
В данное исследование вошло 1213 пациенток с ЭР+/HER2-РМЖ. После микродиссекции материала и выделения ДНК осуществлялся анализ 7, 9 и 20 экзонов, содержащих «горячие точки» мутагенеза. Образцы с отклонениями в кривых плавления ПЦР-продуктов по результатам HRM-анализа исследовались на наличие пяти частых мутаций (p.H1047R, p.E545K, p.E542K, p.H1047L, p.C420R) при помощи аллель-специфической ПЦР, при пограничных результатах которой проводилась цифровая капельная ПЦР. При отсутствии частых мутаций осуществлялось секвенирование по Сэнгеру. Информация о клинико-морфологических характеристиках опухоли предоставлялась лечащими врачами пациентов.
Результаты
Мутации в гене PIK3CA были обнаружены в 376 (31%) образцов из 1213, что несколько ниже мировых данных. Например, по данным cBioPortal, частота мутаций PIK3CA при РМЖ составляет 37% (1888/5129). Наибольшую долю из найденных составили три частые мутации: p.H1047R (184/376, 49%), p.E545K (81/376, 22%), p.E542K (59/376, 16%). Еще несколько мутаций встретились больше 1 раза. Двойные мутации встретились в 5/376 (1%) случаев, что на порядок меньше ожидаемых 10-15%. Среди изученных характеристик опухоли только статус рецепторов прогестерона (РП) имел статистически значимую ассоциацию с наличием мутации PIK3CA: мутации присутствовали в 306/916 (33%) РП-положительных случаях по сравнению с 70/294 (24%) РП-отрицательными случаями РМЖ (p=0,002). Некоторые различия были обнаружены в частоте мутаций у пациентов из разных регионов России: так, образцы с Северного Кавказа оказались обеднены мутациями PIK3CA (8/51, 16%) по сравнению с другими регионами (354/1118, 32%, p=0,019).
Выводы
Наши результаты подчеркивают необходимость исследования полной последовательности гена для выявления более редких и множественных мутаций, а также свидетельствуют о возможных межэтнических отличиях в частоте мутаций PIK3CA.
Работа поддержана грантом РНФ 21-75-30015.
Список литературы
1. Martinez-Saez O . et al . Frequency and spectrum of PIK3CA somatic mutations in breast cancer. Breast Cancer Res . 2020
May 13;22(1):45. DOI: 10 ,1186/s13058-020-01284-9 . 2 . Тюляндин С . А . и др . Практические рекомендации по лечению рака молочной железы // Злокачественные опухоли:
Практические рекомендации RUSSCO. 2022 . № 3s2 (12) . C. 155-197 .
Морфологический анализ новообразований миелоидной ткани, ассоциированных с мутациями гена DNMT3A
Авторы:
(1) Виноградов Александр Владимирович, spqr0@ya.ru, ГАУЗ СО «Свердловская областная клиническая больница № 1», Екатеринбург
(2) Сазонов Сергей Владимирович, prof-ssazonov@yandex.ru, ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий», ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, Екатеринбург
Ключевые слова
ген DNMT3A, злокачественные новообразования миелоидной ткани, возраст
Актуальность
В результате молекулярно-генетических исследований клеток миелоидной ткани здоровых людей зрелого и пожилого возраста установлено, что в данных клетках происходит аккумуляция криптических генных мутаций, обусловливающих развитие клонального гемопоэза и повышенный риск развития злокачественных новообразований крови. Одним из наиболее часто мутирующих является ген DNMT3A, белковый продукт которого участвует в эпигенетической модификации CpG-островков ядерной ДНК [1, 2].
Цель
Выполнить морфологический анализ новообразований миелоидной ткани, ассоциированных с мутациями в гене DNMT3A.
Материалы и методы
Обследованы 60 взрослых больных с миелоидными новообразованиями, проходивших лечение в Свердловском областном гематологическом центре (Екатеринбург) в 2012-2022 гг. Средний возраст пациентов составил 50,5±3,9 года. Морфологическую диагностику, гено- и иммунофенотипирование проводили с учетом рекомендаций ВОЗ для миелоидных опухолей и FAB-классификации острых миелоидных лейкозов (ОМЛ) [1, 3]. Детекцию мутаций в гене DNMT3A проводили методом прямого секвенирования на генетических анализаторах ABI Prism 310 и 3130 Genetic Analyzer в мононуклеарах периферической крови и костного мозга [4]. Статистическую обработку данных проводили с использованием t-критерия Стьюдента и критерия хи-квадрат.
Результаты
В исследуемой группе больных определялись следующие морфологические варианты миелоидных опухолей: ОМЛ с минимальной дифференцировкой (М0 по FAB) — 2, ОМЛ без созревания (М1) — 5, ОМЛ с созреванием (М2) — 21, острый промиелоцитарный лейкоз (М3) — 4, острый миеломонобластный лейкоз (М4) — 15, острый монобластный лейкоз (М5) — 2, острый эритромиелоз (М6) — 2, острый мегакрио-бластный лейкоз (М7) — 1, плазмоцитоидная бластная дендритно-клеточная опухоль — 2, хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ) — 3, острый гибридный лейкоз — 1, ОМЛ в исходе эссенциальной тромбоцитемии (ЭТ) — 1, ОМЛ в исходе хронического миелопролиферативного заболевания — 1, бластный криз хронического миелолейкоза — 1. Мутации гена DNMT3A обнаружены в 8 пробах (13,3%), из них 4 — ОМЛ М4, 2 — ОМЛ М2, 1 — ХММЛ, 1 — ОМЛ в исходе ЭТ. При этом частота мутаций в группе ОМЛ М4 составила 26,7%, тогда как в остальных подгруппах — 8,8% (критерий хи-квадрат 3,077; р=0,08). Средний возраст больных с мутантным DNMT3A равнялся 57,0±10,5 года, что выше, чем по выборке в среднем, однако различия не были статистически достоверными.
Выводы
Таким образом, мутации гена DNMT3A определялись при миелоидных новообразованиях в 13,3% случаев, при этом их частота при морфологическом подтипе ОМЛ М4 имела статистически выраженную тенденцию к увеличению относительно других морфологических подтипов.
Список литературы
1. Fabre M . A ., de Almeida J . G ., Fiorillo E . et al . The longitudinal dynamics and natural history of clonal haematopoiesis . Nature .
2022 . Vol . 606(7913) . P 335-342.
2 . Khoury J . D . , Solary E . , Abla O . et al . , The 5th edition of the World Health Organization Classification of Haematolymphoid
Tumours: Myeloid and Histiocytic/ / Dendritic Neoplasms . Leukemia. 2022 . Vol . 36(7) . P. 1703-1719.
3 . Виноградов А . В . , Резайкин А . В ., Сазонов С . В . и др . Молекулярно-генетический анализ мутаций в генах ASXL1,
FLT3, KIT, NPM1, NRAS, TP53 и WT1 у больных острыми миелоидными лейкозами зрелого возраста // Медицинский
вестник Северного Кавказа . 2020 . Т 15(1) . С . 32-36 .
4 . Виноградов А . В ., Резайкин А . В ., Сергеев А . Г Детекция точечных мутаций в гене DNMT3A при острых миелоидных
лейкозах методом прямого автоматического секвенирования // Бюллетень сибирской медицины . 2015 . Т. 14(1) . С .
18-23 .
